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枣和酸枣基因组大小测定 被引量：25
1
作者 吴丽萍 唐岩 +2 位作者 李颖岳 尹丹妮 庞晓明 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期77-83,共7页
本研究旨在找出最适合枣和酸枣的流式细胞术流程,进而测定它们的基因组大小。结果显示,在所对比的5种裂解液中,WPB最适合枣属植物细胞裂解。以毛果杨为内标,通过比较待测样品和内参G0/G1期峰,计算得出6种枣属植物基因组大小。各枣品种... 本研究旨在找出最适合枣和酸枣的流式细胞术流程,进而测定它们的基因组大小。结果显示,在所对比的5种裂解液中,WPB最适合枣属植物细胞裂解。以毛果杨为内标,通过比较待测样品和内参G0/G1期峰,计算得出6种枣属植物基因组大小。各枣品种的基因组大小有一定差异,平均基因组大小约为418.56Mb,其中:‘冬枣’的基因组大小为(393.60±4.72)Mb,即C-值为(0.40±0.01)pg;‘鲁枣2号’的基因组大小为(428.00±3.61)Mb,即C-值为(0.44±0.00)pg;‘金丝小枣’的基因组大小为(424.00±5.81)Mb,即C-值为(0.44±0.01)pg;‘孔府酥脆枣’的基因组大小为(429.60±5.03)Mb,即C-值为(0.44±0.01)pg;‘无核小枣’的基因组大小为(413.60±7.07)Mb,即C-值为(0.42±0.01)pg;酸枣的基因组大小为(441.60±4.29)Mb,即C-值为(0.45±0.01)pg。优化的枣属植物流式细胞术流程,为枣属植物的倍性鉴定奠定了基础。 展开更多
关键词 流式细胞术 基因组大小 细胞裂解液 毛果杨 枣
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栎属植物流式细胞术实验体系的建立与优化 被引量：6
2
作者 魏高明 方炎明 《南京林业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期167-172,共6页
为建立适于栎属植物的流式细胞核实验体系,分别利用Tris-MgCl2、Galbraith＇s、Marie＇s和Otto＇s细胞核分离缓冲液对麻栎、栓皮栎、白栎和短柄枹栎制备细胞核悬浮液。检验发现：Tris-MgCl2、Galbraith＇s缓冲液所制备样品未能检测出DNA... 为建立适于栎属植物的流式细胞核实验体系,分别利用Tris-MgCl2、Galbraith＇s、Marie＇s和Otto＇s细胞核分离缓冲液对麻栎、栓皮栎、白栎和短柄枹栎制备细胞核悬浮液。检验发现：Tris-MgCl2、Galbraith＇s缓冲液所制备样品未能检测出DNA峰,Otto＇s缓冲液制备的样品中,除白栎外其他3个样品的测试结果均较差,Marie＇s缓冲液所制备的4个样品测试DNA峰的变异系数（CV）均大于10%。采用正交设计方法对经典Marie＇s缓冲液中的β-巯基乙醇和Tween 20组分进行了优化,发现麻栎、栓皮栎、白栎和短柄枹栎的最适β-巯基乙醇浓度和Tween 20体积比分别为45 mmol/L和2.5%、15 mmol/L和2.0%、60 mmol/L和1.0%及30 mmol/L和1.0%。运用改进后的最适Marie＇s缓冲液进行流式细胞核测定,4种样品的变异系数均显著下降（在3.52%-4.81%之间）,表明改进后的Marie＇s缓冲液对4种栎属植物的测试结果准确可信。 展开更多
关键词 栎属植物 成熟叶片 流式细胞术 细胞核分离缓冲液
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适合流式细胞仪分析的小麦细胞核提取方法比较 被引量：7
3
作者 孙永星 李素花 +1 位作者 魏小丽 韩榕 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期88-91,共4页
为制备供流式细胞仪分析的高纯度小麦细胞核悬液,以冬小麦"临优2018"为材料,分别采用酶解法和直接剪切法对其幼苗的细胞核进行提取,对所得到的细胞核在形态结构和数量等方面进行了分析和比较,根据其优缺点优化出最适合流式细... 为制备供流式细胞仪分析的高纯度小麦细胞核悬液,以冬小麦"临优2018"为材料,分别采用酶解法和直接剪切法对其幼苗的细胞核进行提取,对所得到的细胞核在形态结构和数量等方面进行了分析和比较,根据其优缺点优化出最适合流式细胞仪分析的小麦幼苗细胞核的提取方法。结果显示:在直接剪切法所用的3种细胞核提取缓冲液中,MgSO4缓冲液的提取效果最好,细胞核形态及内部结构完整,且得到的细胞核量多;OttoⅠ对细胞核的提取效果显著,但是在加入OttoⅡ后细胞核破裂明显;Tris.MgCl2缓冲液提取的细胞核数量较少;酶解法制备的细胞核悬浮液中杂质较多,且需时较长。结果表明采用MgSO4提取缓冲液的直接剪切法是适合流式细胞仪对小麦幼苗DNA含量的分析。 展开更多
关键词 小麦 流式细胞术 细胞核分离缓冲液 酶解法
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流式细胞仪检测高等植物细胞核DNA含量的方法 被引量：57
4
作者 汪艳 肖媛 +3 位作者 刘伟 李婷婷 胡锐 乔志仙 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期126-131,共6页
相对于动物和微生物而言,流式细胞术在植物科学上的应用会因植物组织与细胞(如细胞壁、中央液泡、特殊细胞器等)的特殊结构以及次生代谢产物等特殊成分,造成样品在前期处理、染色及测试等方面的困难,甚至导致检测失败或结果不准确。笔... 相对于动物和微生物而言,流式细胞术在植物科学上的应用会因植物组织与细胞(如细胞壁、中央液泡、特殊细胞器等)的特殊结构以及次生代谢产物等特殊成分,造成样品在前期处理、染色及测试等方面的困难,甚至导致检测失败或结果不准确。笔者在长期运用流式细胞仪测试工作中,积累了大量的植物样本检测经验,并参考国内外相关文献,总结出从植物取材、样品制备到植物细胞核DNA流式检测的方法和技巧,可为植物科学研究者及从事流式细胞检测的技术人员提供实验参考。 展开更多
关键词 流式细胞术 高等植物 细胞核DNA含量 DNA解离液
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