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9种鱼类非放射性DNA指纹图谱 被引量:30
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作者 王进科 夏德全 《中国水产科学》 CAS CSCD 2000年第2期14-17,共4页
用DIG标记Jeffreys人源小卫星 33.6和 33.15为探针 ,与青鱼、草鱼、鲢、鳙、鲤、团头鲂、鳜鱼、尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼基因组DNA进行Southern杂交 ,获得多态性丰富的个体特异性DNA指纹图谱 ,建立了 9种鱼类的非放射性DNA指纹图谱。用... 用DIG标记Jeffreys人源小卫星 33.6和 33.15为探针 ,与青鱼、草鱼、鲢、鳙、鲤、团头鲂、鳜鱼、尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼基因组DNA进行Southern杂交 ,获得多态性丰富的个体特异性DNA指纹图谱 ,建立了 9种鱼类的非放射性DNA指纹图谱。用DIG标记小卫星探针制作鱼类DNA指纹图谱安全可靠 ,克服了用放射性元素标记探针制作鱼类DNA指纹图谱的限制和不足 ,拓宽了鱼类DNA指纹图谱的应用范围。 9种鱼类的非放射性DNA指纹图谱研究也表明不同的DNA指纹探针在不同的鱼类上揭示的遗传信息不同 ,对鱼类的DNA指纹图谱研究应选择数个适宜的限制酶 展开更多
关键词 鱼类 非放射性 DNA指纹图谱 遗传育种
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DISTRIBUTION OF VEGF mRNA IN BREAST CANCER WITH NONRADIOACTIVE IN SITU HYBRIDIZATION AT ELECTRON MICROSCOPIC LEVELS
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作者 王医术 李玉林 +3 位作者 王心蕊 李一雷 吴珊 张丽红 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2002年第4期270-273,共4页
Object: To localize the mRNA coding for VEGF at Ultrastractural level in human breast cancer by using digoxigenin-labeled cDNA probes. Methods: Nonradioactive in situ hybridization at electron microscopic level was em... Object: To localize the mRNA coding for VEGF at Ultrastractural level in human breast cancer by using digoxigenin-labeled cDNA probes. Methods: Nonradioactive in situ hybridization at electron microscopic level was employed to detected VEGF mRNA in breast cancer. Result: Cancer cells and endothelial cell of angiogensis show dark color in experiment sections. No dark color can be found in control sections. Positive hybridization signals showed dark dot and were located in various compartments of the breast cancer cell and endothelial cell in experiment section. No labeling was observed in control sections. In experiment sections, the staining appeared concentrated in cytoplasm and nucleus of the breast cancer cell and endothelial cell. Conclusion: Nonradioactive in situ hybridization at electron microscopic level is efficient for direct observation of the target site mRNA of VEGF in the cytoplasm and nucleus. 展开更多
关键词 nonradioactive in situ hybridization Electron microscopy VEGF mRNA Breast cancer
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Localization of An Exogenous GH Gene on Chromosomes of Transgenic Pig by in situ Hybridizaiton
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作者 陈清轩 何新 +2 位作者 刘桂生 魏庆信 陈永福 《Developmental and Reproductive Biology》 1997年第1期51-56,共6页
The nonradioactive in situ hybridization with anti digoxigenin goldand silver enhancement method was used to locate the exogenous gene on cheomosomes of transgenic pigs. After development, the gold silver particle... The nonradioactive in situ hybridization with anti digoxigenin goldand silver enhancement method was used to locate the exogenous gene on cheomosomes of transgenic pigs. After development, the gold silver particles could be easily detected via a light microscope. The experimental results demonstrated that the exogenous gene in the transgenic pig was integrated on chromosomes randomly. 展开更多
关键词 GENE location nonradioactive LABELING TRANSGENIC PIGS
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一种快速微量的非放射性核糖体失活蛋白活性检测方法
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作者 赵琦 崔维科 +1 位作者 徐莺 陈放 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期168-172,共5页
建立了一种非放射性的利用兔网织红细胞裂解液(Rabbit Reticulocyte Lysate)无细胞翻译系统和荧光素酶检测系统(Luciferase Assay System)的核糖体失活蛋白检测方法,快速检测了两种方法提取的麻疯树核糖体失活蛋白(RIPs)Curcin的无细胞... 建立了一种非放射性的利用兔网织红细胞裂解液(Rabbit Reticulocyte Lysate)无细胞翻译系统和荧光素酶检测系统(Luciferase Assay System)的核糖体失活蛋白检测方法,快速检测了两种方法提取的麻疯树核糖体失活蛋白(RIPs)Curcin的无细胞蛋白质翻译抑制活性,测得离子交换层析法纯化Curcin的IC50=0.045±0.009 nmol/L,分子筛层析纯化Curcin的IC50=0.217±0.026 nmol/L;该方法避免了放射性同位素的使用,使检测过程简便、快速、安全、准确.同时还对试验条件,包括反应时间、温度,缓冲液pH值、盐浓度等进行了摸索和优化. 展开更多
关键词 核糖体失活蛋白 非放射性 荧光素酶 兔网织红细胞裂解液
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应用Digoxigenin标记的cDNA探针检测香蕉束顶病毒 被引量:6
5
作者 孟清 曹先维 张彤 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第3期367-371,共5页
用非放射性的Digoxigenin标记的11-dUTP取代32P标记的dATP或dCTP,标记克隆的BBTVcDNA-10.5kbcDNA,制备成探针.通过核酸斑点杂交对粗提取的BBTV,BBTV-DNA,感染BBT... 用非放射性的Digoxigenin标记的11-dUTP取代32P标记的dATP或dCTP,标记克隆的BBTVcDNA-10.5kbcDNA,制备成探针.通过核酸斑点杂交对粗提取的BBTV,BBTV-DNA,感染BBTV的香蕉植物的拟茎,球茎处的组织,新生叶片以及成熟后的叶片进行了检测.结果表明:BBTVcDNA-1cDNA探针特异性强,不与CMV—RNA、无毒香蕉组培苗提取的核酸发生杂交反应;仅与粗提BBTV、BBTV-DNA、BBTV侵染的香蕉组织的核酸提取物发生杂交反应.此探针灵敏度高,可检出含有BBTVcDNA-10.5kb的质粒DNA的最小量为10pg;测定感病香蕉植株的拟茎汁液的最高稀释度可达1∶128,相当于0.4mg病蕉组织中的病毒含量.测定同一病株不同部位的结果表明,BBTV在植物体内的分布不均匀,拟茎处组织中病毒含量最高,球茎处的组织以及新生叶片中的病毒含量次之。 展开更多
关键词 香蕉束顶病毒 CDNA探针 非放射性检测 病毒
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用非同位素原位杂交组化在光镜和电镜水平观察前阿黑皮素mRNA在垂体的分布 被引量:12
6
作者 向正华 刘淑琴 +3 位作者 孟璘 王代学 钱国桢 蔡文琴 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 1994年第2期135-140,共6页
用地高辛标记反意前阿黑皮素(pro-opiomelanocortin,POMC)cRNA探针原位杂交组化在光镜和电镜水平观察了POMC mRNA在大鼠垂体的分布,并比较了碱性磷酸酶(AKP)显色系统和辣根过氧化酶(HRP)显色系统在光镜水平上的敏感性.结果:POMC mRNA广... 用地高辛标记反意前阿黑皮素(pro-opiomelanocortin,POMC)cRNA探针原位杂交组化在光镜和电镜水平观察了POMC mRNA在大鼠垂体的分布,并比较了碱性磷酸酶(AKP)显色系统和辣根过氧化酶(HRP)显色系统在光镜水平上的敏感性.结果:POMC mRNA广泛地分布于垂体的中间叶和前叶.中间叶全部细胞均为POMC mRNA阳性.前叶中除前叶的腹侧缘和前叶与中间叶交界处阳性细胞较少外,都有较多的POMC mRNA阳性细胞分布.AKP显色系统比HRP显色系统敏感.在电镜水平,POMC mRNA主要分布于粗面内质网,少数分泌颗粒可能呈阳性反应,胞核未见阳性反应沉淀.文内还就阳性分泌颗粒在调节细胞合成功能方面可能起的作用进行了讨论. 展开更多
关键词 垂体 前阿黑皮素 MRNA
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I型马立克氏病病毒特异性核酸探针试剂盒的制备和应用 被引量:3
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作者 吉荣 崔治中 +5 位作者 丁家波 秦爱建 刘岳龙 金文杰 张志 姜世金 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期263-266,共4页
应用非放射性的地高辛标记法来标记I型马立克氏病病毒特异性DNA ,通过优化核酸探针标记、检测的步骤 ,建立了马立克氏病的诊断试剂盒。该探针在 1∶12 5 0的工作浓度下 ,能检出 1~ 2pg/μl的马立克病病毒基因组DNA ,探针与其它病毒DNA... 应用非放射性的地高辛标记法来标记I型马立克氏病病毒特异性DNA ,通过优化核酸探针标记、检测的步骤 ,建立了马立克氏病的诊断试剂盒。该探针在 1∶12 5 0的工作浓度下 ,能检出 1~ 2pg/μl的马立克病病毒基因组DNA ,探针与其它病毒DNA不发生反应 ,具有较好的特异性 ,该试剂盒稳定性较好 ,可重复使用 ,初步具备了诊断试剂盒的基本要求。 展开更多
关键词 马立克氏病 非放射性核酸探针 诊断试剂盒 点杂交
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光谱法研究牛磺酸与人血清白蛋白相互作用 被引量:2
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作者 玉叶 廖娟 +1 位作者 文彬 邓鑫 《量子电子学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期827-835,共9页
采用荧光光谱法和紫外吸收光谱法,研究了牛磺酸对人血清白蛋白(HSA)微环境和构象的影响,结果发现不同温度下牛磺酸与HSA通过静态猝灭机制发生有规律地猝灭,速率常数均>2.0×10^(10)L·M^(-1)·s^(-1),结合常数随温度升... 采用荧光光谱法和紫外吸收光谱法,研究了牛磺酸对人血清白蛋白(HSA)微环境和构象的影响,结果发现不同温度下牛磺酸与HSA通过静态猝灭机制发生有规律地猝灭,速率常数均>2.0×10^(10)L·M^(-1)·s^(-1),结合常数随温度升高而升高,结合位点数接近0.5;热力学参数焓变<0,熵变>0,自由能变化<0表明结合过程是自发进行,主要作用力是静电引力;根据Forster非辐射能量转移理论估算出牛磺酸与HSA结合距离为2.645,存在非放射能量转移。结果表明牛磺酸影响HSA微环境,使HSA空间构象发生变化,牛磺酸保护肝细胞,改善门静脉结构和功能可能与此作用机制有关。 展开更多
关键词 光谱学 静态猝灭 荧光光谱 牛磺酸 非放射能量转移
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离体细胞的非放射性原位杂交 被引量:5
9
作者 单惠敏 黄曼影 +2 位作者 王悦 周远征 许荣 《基础医学与临床》 CSCD 1995年第5期73-76,共4页
离体细胞的非放射性原位杂交单惠敏,黄曼影,王悦,周远征,许荣 (中国医学科学院基础医学研究所,北京100005)早在1969年,人们就开始把分子杂交技术应用到组织切片和细胞标本上 ̄[1~3]。现在,虽然在探针标记上大... 离体细胞的非放射性原位杂交单惠敏,黄曼影,王悦,周远征,许荣 (中国医学科学院基础医学研究所,北京100005)早在1969年,人们就开始把分子杂交技术应用到组织切片和细胞标本上 ̄[1~3]。现在,虽然在探针标记上大致可把原位杂交分为同位素标记和非同... 展开更多
关键词 离体细胞 细胞培养 原位杂交 细胞杂交
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浆液密度流量压力自动测量系统 被引量:3
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作者 江秀汉 张凤霞 +1 位作者 薄保中 崔琪林 《西安石油学院学报》 1997年第4期40-43,共4页
采用无放射性的直接式科氏力传感器、计算机和无线通讯技术,实现固井水泥浆和钻井泥浆密度、流量和压力在线高精度地自动测量,克服了以往人工称量、放射性密度计、涡轮流量计、电磁流量计、超声波流量计等测量方法的缺陷,解决了油田几... 采用无放射性的直接式科氏力传感器、计算机和无线通讯技术,实现固井水泥浆和钻井泥浆密度、流量和压力在线高精度地自动测量,克服了以往人工称量、放射性密度计、涡轮流量计、电磁流量计、超声波流量计等测量方法的缺陷,解决了油田几十年来固井水泥浆密度流量参数测量的难题。系统已在辽河、大港和塔里木油田成功地应用。 展开更多
关键词 钻井液 密度 流量 压力 固井 测量 油田
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用非放射性标记MYO探针进行DNA指纹分析 被引量:3
11
作者 邹浪萍 申滨 +4 位作者 褚嘉佑 申志明 李长久 龚文明 杨松 《法医学杂志》 CAS CSCD 1994年第3期100-103,F003,共5页
用非放射性标记MYO探针进行人的DNA指纹分析,获得了清晰易读的DNA指纹图,并用该方法调查了云南省的78名无关个体,经统计学分析,计算出无关个体的相关几率是3.4×10-10,高于32P标记的Myo探针。研究结... 用非放射性标记MYO探针进行人的DNA指纹分析,获得了清晰易读的DNA指纹图,并用该方法调查了云南省的78名无关个体,经统计学分析,计算出无关个体的相关几率是3.4×10-10,高于32P标记的Myo探针。研究结果表明该方法是一种简便、快速、灵敏、可靠、经济的DNA指纹图检测技术,可在法医鉴定及其它领域里得到更广泛的应用。 展开更多
关键词 DNA指纹分析 非放射性标记 MYO 探针 DNA指纹图 经统计学分析 ^32P标记 方法调查 检测技术 法医鉴定 云南省 MYO 个体
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用非放射性原位杂交技术定位家猪PGD和HSL基因 被引量:1
12
作者 蔡更元 熊远著 +2 位作者 邓昌彦 蒋思文 吴桢方 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期369-372,共4页
用地高辛为标记物,以随机引物法标记猪PGDcDNA和HSLcDNA探针,经与半微量全血培养法制备的染色体进行原位杂交后,将猪PGD和HSL基因分别定位在猪6号染色体6q25和6cen-6q21区域。
关键词 原位杂交 PGD基因 HSL基因 基因定位
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山羊外源基因转移技术 被引量:1
13
作者 穆宗尧 李国忠 +8 位作者 王杏龙 杜福良 成国祥 孙长美 成勇 王捍东 郭礼和 何全品 张懋弧 《江苏农学院学报》 CSCD 1993年第1期41-46,共6页
对24头供体山羊进行超数排卵处理,16头超排有效。在第1次配种后48h左右取卵,共收集到卵155个。回收率79.08%(155/16)。平均每头供体排卵12.25个(196/16)。在Normarski干涉相差显微镜下观察65个单细胞受精卵及29个2~4细胞期胚胎的原核... 对24头供体山羊进行超数排卵处理,16头超排有效。在第1次配种后48h左右取卵,共收集到卵155个。回收率79.08%(155/16)。平均每头供体排卵12.25个(196/16)。在Normarski干涉相差显微镜下观察65个单细胞受精卵及29个2~4细胞期胚胎的原核及细胞核,并分别注射人生长激素基因(p^(SMGHI)/BamHI),其中91枚移植到经同期发情处理的14头受体中。结果7头妊娠,共产活羔11头,死胎1头。经用Digoxigcnin标记核酸探针对转移基因羊检测,4头整合了外源基因。整合频率为33.33%(4/12)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)对仍存活的2头未整合、2头整合羊检测是否表达外源基因,全为阴性。 展开更多
关键词 基因转移 超数排卵 胚胎移植 山羊
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无放射源核子料位计的研究 被引量:2
14
作者 赵爱明 王暄 +2 位作者 任滨 石金龙 陈阳 《核电子学与探测技术》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期211-216,共6页
针对当前无放射源核子料位计在料位检测时存在的一系列问题,对无放射源核子料位计原理进行了深入的探讨和研究。根据其对γ射线的衰减规律和吸收原理建立了一个简化模型,在对模型深入分析的基础上,提出了一个简便的理论计算方法,通过理... 针对当前无放射源核子料位计在料位检测时存在的一系列问题,对无放射源核子料位计原理进行了深入的探讨和研究。根据其对γ射线的衰减规律和吸收原理建立了一个简化模型,在对模型深入分析的基础上,提出了一个简便的理论计算方法,通过理论计算和推导给出了物料的高度、探测器面积等同γ射线强度的函数关系;根据给出的模型和得出的函数关系设计并制作了一个无放射源核子料位计,用该料位计做了多次的验证试验,验证了模型和函数关系的正确性。 展开更多
关键词 无放射源 核子料位计 辐射强度 Γ射线
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地高辛配基标记DNA探针检测HLAⅡ类基因技术的建立 被引量:2
15
作者 余进 张锐发 +2 位作者 李明 万军梅 李伯南 《广州医学院学报》 1995年第2期10-16,共7页
本文报道了采用序列特异性寡核苷酸探针杂交(SSOPH)检测HLAⅡ类基因(DRB、DQB)多态性的方法。实验包括少量全血提取模板DNA、PCR基因扩增基因多态性区域片断、尼龙膜点样、特异性寡核苷酸探针合成及地高辛配基(DIG-11-ddUTP)标记、探针... 本文报道了采用序列特异性寡核苷酸探针杂交(SSOPH)检测HLAⅡ类基因(DRB、DQB)多态性的方法。实验包括少量全血提取模板DNA、PCR基因扩增基因多态性区域片断、尼龙膜点样、特异性寡核苷酸探针合成及地高辛配基(DIG-11-ddUTP)标记、探针杂交;条件洗涤、化学发光显影等一系列步骤。该实验方法具有用血量少、结果精确稳定、操作简便安全、不污染环境等优点。作者对模板DNA的提取、杂交缓冲液制备、标记探针的使用剂量以及条件洗涤等多个环节作了改良,使实验方法和结果进一步优化。 展开更多
关键词 HLA-DR DQ基因序列特异性寡核苷酸探针杂交 非同位素DNA探针标记
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应用非放射性标记探针测定小肠结肠炎耶氏菌新亚型耐热肠毒素 被引量:2
16
作者 袁佩娜 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1994年第2期124-128,共5页
由致病性小肠结肠炎耶氏菌产生的耐热肠毒素(Y-ST)至少有三个亚型(Y-STa,Y-STb,Y-STc),但以Y-STa型多见。我们构建了0.25kb的Y-STaDNA克隆片段,经用辣根过氧化酶标记后,具特异性。19... 由致病性小肠结肠炎耶氏菌产生的耐热肠毒素(Y-ST)至少有三个亚型(Y-STa,Y-STb,Y-STc),但以Y-STa型多见。我们构建了0.25kb的Y-STaDNA克隆片段,经用辣根过氧化酶标记后,具特异性。19株我国分离的致病性小肠结肠炎耶氏菌由乳鼠试验结果显示均可产生Y-ST。但用此酶标记Y-STaDNA探针测定,仅13株呈杂交反应,表明携带Y-STa基因;其余6株均为阴性反应,免疫学试验显示1株产生Y-STb,另外5株产Y-STc。产生耐热肠毒素的大肠杆菌及非01霍乱弧菌等也不与此探针杂交。 展开更多
关键词 小肠结肠炎 耶尔辛杆菌 DNA 探针
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β地中海贫血的产前诊断和一种新的TATA盒突变 被引量:1
17
作者 张基增 蔡仕萍 +3 位作者 黄道华 王仲祥 廖丰平 简悦威 《第一军医大学学报》 CSCD 1989年第3期179-184,共6页
应用聚合酶链式反应体外DNA放大和同位素或非同位素标记的探针在我国南方进行了β地中海贫血的产前诊断。对29例高风险胎儿的产前诊断显示,7例为β地中海贫血的纯合子。对206条染色体的基因分析表明,占总数95%以上的4种突变是:β41-42(... 应用聚合酶链式反应体外DNA放大和同位素或非同位素标记的探针在我国南方进行了β地中海贫血的产前诊断。对29例高风险胎儿的产前诊断显示,7例为β地中海贫血的纯合子。对206条染色体的基因分析表明,占总数95%以上的4种突变是:β41-42(-4bp),IVS-2-654(C→T),β17(A→T)和β-28(A→G).在产前诊断过程中,我们应用PCR后直接DNA测序技术发现一种以前未描述过的突变:β-30(T→C). 展开更多
关键词 地中海贫地 产前诊断 TATA盒突变
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核电机组非放射性污废水排水系统设置及处理工艺设计 被引量:1
18
作者 王琳弘 《工业用水与废水》 CAS 2016年第1期70-72,共3页
CPR1000核电机组在运行过程中将会产生不同类型的非放射性污废水。介绍了CPR1000核电厂内非放射性污废水的来源、水质特征类型,以及排水系统的设置和非放射性污废水处理方法。建议生活污水采用CASS或MBR处理工艺;非放射性含油废水采用... CPR1000核电机组在运行过程中将会产生不同类型的非放射性污废水。介绍了CPR1000核电厂内非放射性污废水的来源、水质特征类型,以及排水系统的设置和非放射性污废水处理方法。建议生活污水采用CASS或MBR处理工艺;非放射性含油废水采用萃取法或吸附法的处理工艺。 展开更多
关键词 CPR1000核电机组 非放射性污废水 排水系统 废水处理
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地高辛素探针原位杂交用于肝病及肝癌的分子原理研究
19
作者 侯金林 梁炽森 +3 位作者 郭亚兵 周荣 杨守昌 骆抗先 《临床消化病杂志》 1992年第2期74-77,97,共5页
建立了敏感性高、特异性强的地高辛素探针原位杂交技术,并用于肝病和肝癌分子病理学的研究。我们发现慢性乙型肝炎与肝轻微病变52例中43例,肝硬化6例中5例,12例肝癌中10例癌周组织,8例癌组织内可检测出HBV DNA。上述结果揭示了慢性HBV... 建立了敏感性高、特异性强的地高辛素探针原位杂交技术,并用于肝病和肝癌分子病理学的研究。我们发现慢性乙型肝炎与肝轻微病变52例中43例,肝硬化6例中5例,12例肝癌中10例癌周组织,8例癌组织内可检测出HBV DNA。上述结果揭示了慢性HBV感染与肝癌的分子病理联系。结果还发现原位杂交与转移杂交或PCR检测的结果有较好的一致性。地高辛素探针原位杂交技术可广泛用于消化系疾病分子病理研究。 展开更多
关键词 原位杂交 非同位素探针 肝癌 乙型肝炎病毒DNA
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用DIG标记的寡核苷酸基因探针杂交技术进行人轮状病毒VP7G血清型鉴定
20
作者 马宏 涂光理 +4 位作者 茹维萍 崔长法 王歆宇 王建阳 夏胜利 《河南医学研究》 CAS 1998年第4期291-295,共5页
目的:建立用地高辛(Digoxigenin,DIG)标记的寡核苷酸基因探针鉴定A群轮状病毒VP7G血清型的分子杂交技术,并应用该技术研究河南A群轮状病毒的G血清型分布。方法:根据轮状病毒编码糖蛋白VP7的基因核苷酸序... 目的:建立用地高辛(Digoxigenin,DIG)标记的寡核苷酸基因探针鉴定A群轮状病毒VP7G血清型的分子杂交技术,并应用该技术研究河南A群轮状病毒的G血清型分布。方法:根据轮状病毒编码糖蛋白VP7的基因核苷酸序列,选择该基因高保守区序列中与VP7G血清型高度相关的核苷酸片段,人工合成,并用DIG标记。在优选的杂交条件下进行杂交:结果:①G1、G2、G3和G4四种G血清型特异性寡核苷酸探针只与同血清型的轮状病毒参考毒株杂交,无交叉杂交现象。灵敏度和特异性达到放射性同位素32P标记的水平。②188份经PAGE确定的轮状病毒阳性标本中,79份(42.0%)、35份(18.6%)、15份(7.9%)分别与G1、G2或G3型探针杂交;未检出G4型;56份(29.8%)未能分型;3份分型特殊。 展开更多
关键词 轮状病毒 寡核苷酸探针 非同位素标记
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