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甘薯NPR1基因半定量RT-PCR检测方法的建立
被引量：
8
1
作者
陈观水
潘大仁
+3 位作者
周以飞
林生
高丽华
杨志伟
《福建农林大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第1期56-59,共4页
为进一步研究甘薯病原微生物的侵染对甘薯病程相关非表达子1基因(NPR1)表达的影响,以甘薯肌动蛋白(β-ac-tin)基因为内参照基因,提取甘薯叶片总RNA,反转录为cDNA,同批异管对该2个基因进行PCR扩增.通过对循环数的优化和对体系重复性、准...
为进一步研究甘薯病原微生物的侵染对甘薯病程相关非表达子1基因(NPR1)表达的影响,以甘薯肌动蛋白(β-ac-tin)基因为内参照基因,提取甘薯叶片总RNA,反转录为cDNA,同批异管对该2个基因进行PCR扩增.通过对循环数的优化和对体系重复性、准确性的分析,建立了一个稳定、方便的半定量RT-PCR体系.
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关键词
甘薯
病程相关非表达子
1
(
npr
1
)
基因表达
半定量RT-PCR
下载PDF
职称材料
胡椒PnNPR1基因的克隆与表达分析
被引量：
3
2
作者
范睿
郝朝运
+2 位作者
胡丽松
伍宝朵
邬华松
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2016年第7期1318-1324,共7页
根据胡椒病程相关基因非表达子1(Nonexpressor of pathogenesis-related genes1,NPR1)基因的部分序列设计引物,运用RT-PCR方法获得其家族成员的1个全长c DNA,命名为Pn NPR1,长度1 712 bp,开放阅读框1 362 bp,编码454个氨基酸。预测Pn N...
根据胡椒病程相关基因非表达子1(Nonexpressor of pathogenesis-related genes1,NPR1)基因的部分序列设计引物,运用RT-PCR方法获得其家族成员的1个全长c DNA,命名为Pn NPR1,长度1 712 bp,开放阅读框1 362 bp,编码454个氨基酸。预测Pn NPR1分子量为141.56 ku,理论等电点为4.98。该基因含有BTB/POT结构域、ANK锚蛋白重复序列、DUF和NPR1-like C等4个结构域,具有植物NPR1所共有的保守结构域。系统进化分析表明,Pn NPR1与苜蓿的同源性最高。Real-time RT-PCR结果表明,Pn NPR1在胡椒叶片、根、茎和花中均表达,在叶中的表达量最高。辣椒疫霉菌诱导后,Pn NPR1基因的表达量在抗/感2种胡椒中均出现先增加后减少的现象,并且在抗病种质中表达量较高。研究结果为Pn NPR1的功能研究提供了理论依据。
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关键词
胡椒
病程相关基因非表达子
1
克隆与表达
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职称材料
NPR1多肽抗体的制备和应用
被引量：
6
3
作者
陈卓
刘家驹
+6 位作者
毕亮
李向阳
胡德禹
于丹丹
王贞超
杨松
宋宝安
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期145-150,共6页
根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好...
根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和LC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达88%、目的多肽分子量为1.92234 kD。采用碳化二亚胺法将多肽与KLH进行偶联获得免疫原Pep-KLH,并将其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体,采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清和多克隆抗体可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别烟草叶片特异性条带,其相对分子量为65 kD,与预测分子量相符,表明利用该方法制备的NPR1多肽抗体具有较高特异性和灵敏度。
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关键词
非表达型病程相关蛋白
序列分析
多肽
合成
多克隆抗体
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职称材料
题名
甘薯NPR1基因半定量RT-PCR检测方法的建立
被引量：
8
1
作者
陈观水
潘大仁
周以飞
林生
高丽华
杨志伟
机构
福建农林大学生命科学学院
福建农林大学作物科学学院
出处
《福建农林大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第1期56-59,共4页
基金
福建省自然科学基金资助项目(2006J0059)
福建省教育厅重点项目(JA06011)
文摘
为进一步研究甘薯病原微生物的侵染对甘薯病程相关非表达子1基因(NPR1)表达的影响,以甘薯肌动蛋白(β-ac-tin)基因为内参照基因,提取甘薯叶片总RNA,反转录为cDNA,同批异管对该2个基因进行PCR扩增.通过对循环数的优化和对体系重复性、准确性的分析,建立了一个稳定、方便的半定量RT-PCR体系.
关键词
甘薯
病程相关非表达子
1
(
npr
1
)
基因表达
半定量RT-PCR
Keywords
sweet
potato
nonexpressor
of
pathogenesis
-
related
genes
1
（
npr
1）
gene
expression
semi-quantitative
RT-PCR
分类号
S531 [农业科学—作物学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
胡椒PnNPR1基因的克隆与表达分析
被引量：
3
2
作者
范睿
郝朝运
胡丽松
伍宝朵
邬华松
机构
中国热带农业科学院香料饮料研究所
农业部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室
海南省热带香辛饮料作物遗传改良与品质调控重点实验室
出处
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2016年第7期1318-1324,共7页
基金
海南省自然科学基金(No.314134)
中国热带农业科学院基本科研业务费(No.1630052015049)
文摘
根据胡椒病程相关基因非表达子1(Nonexpressor of pathogenesis-related genes1,NPR1)基因的部分序列设计引物,运用RT-PCR方法获得其家族成员的1个全长c DNA,命名为Pn NPR1,长度1 712 bp,开放阅读框1 362 bp,编码454个氨基酸。预测Pn NPR1分子量为141.56 ku,理论等电点为4.98。该基因含有BTB/POT结构域、ANK锚蛋白重复序列、DUF和NPR1-like C等4个结构域,具有植物NPR1所共有的保守结构域。系统进化分析表明,Pn NPR1与苜蓿的同源性最高。Real-time RT-PCR结果表明,Pn NPR1在胡椒叶片、根、茎和花中均表达,在叶中的表达量最高。辣椒疫霉菌诱导后,Pn NPR1基因的表达量在抗/感2种胡椒中均出现先增加后减少的现象,并且在抗病种质中表达量较高。研究结果为Pn NPR1的功能研究提供了理论依据。
关键词
胡椒
病程相关基因非表达子
1
克隆与表达
Keywords
Black
pepper
nonexpressor
of
pathogenesis
-
related
genes
1（
npr
1）
Cloning
and
expression
分类号
S573 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
NPR1多肽抗体的制备和应用
被引量：
6
3
作者
陈卓
刘家驹
毕亮
李向阳
胡德禹
于丹丹
王贞超
杨松
宋宝安
机构
贵州大学绿色农药与农业生物工程国家重点实验室培育基地
贵州大学绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期145-150,共6页
基金
贵州省教育厅自然科学研究项目重点项目[黔科教(2009)0132号]
贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目[黔省专合字(2009)104号]
+2 种基金
农业科技成果转化资金项目(2009GB2F200330)
科技人员服务企业行动项目(2009GJF20047)
贵州省科技厅农业攻关项目(黔科合NY字[2011]3052号)
文摘
根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和LC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达88%、目的多肽分子量为1.92234 kD。采用碳化二亚胺法将多肽与KLH进行偶联获得免疫原Pep-KLH,并将其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体,采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清和多克隆抗体可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别烟草叶片特异性条带,其相对分子量为65 kD,与预测分子量相符,表明利用该方法制备的NPR1多肽抗体具有较高特异性和灵敏度。
关键词
非表达型病程相关蛋白
序列分析
多肽
合成
多克隆抗体
Keywords
nonexpressor
of
pathogenesis
-
related
genes
1（
npr
1）
Sequence
analysis
Polypeptide
synthesizing
Polyclonal
antibody
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘薯NPR1基因半定量RT-PCR检测方法的建立
陈观水
潘大仁
周以飞
林生
高丽华
杨志伟
《福建农林大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007
8
下载PDF
职称材料
2
胡椒PnNPR1基因的克隆与表达分析
范睿
郝朝运
胡丽松
伍宝朵
邬华松
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2016
3
下载PDF
职称材料
3
NPR1多肽抗体的制备和应用
陈卓
刘家驹
毕亮
李向阳
胡德禹
于丹丹
王贞超
杨松
宋宝安
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
6
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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