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利用高效液相色谱法分离和测定棉花组织培养过程中4种内源激素 被引量：28
1
作者 郭敏敏 王清连 胡根海 《生物技术通讯》 CAS 2009年第2期213-216,共4页
目的:优化利用高效液相色谱法测定棉花组织培养过程中吲哚-3-乙酸(IAA)、玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)和脱落酸(ABA)等4种植物内源激素的条件,了解棉花胚性愈伤组织发生过程中4种内源激素及激素含量比例的规律性变化,以及添加不同外源激素... 目的:优化利用高效液相色谱法测定棉花组织培养过程中吲哚-3-乙酸(IAA)、玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)和脱落酸(ABA)等4种植物内源激素的条件,了解棉花胚性愈伤组织发生过程中4种内源激素及激素含量比例的规律性变化,以及添加不同外源激素对内源激素和愈伤组织的影响,为棉花组织培养由经验型变为理论型提供基础。方法:采用高效液相色谱法。结果:棉花胚性愈伤组织发生过程中4种内源激素及激素含量比例呈规律性变化:ZT、ABA、ABA/GA3、ABA/IAA呈现先上升后下降的趋势,GA3呈现先上升后下降再上升的趋势,ZT/IAA呈现明显的上升-下降-上升-下降的趋势;不同激素组合诱导下愈伤组织中内源激素含量及愈伤组织状态也有较大差别。结论:研究结果对指导组织培养过程中激素的调整和配比、制定适宜的培养计划有一定的指导意义;4种不同的内源激素都是愈伤组织生长的重要因子,各自适宜的浓度和恰当的比例调节着外植体的脱分化和再分化,各种激素协同作用促进细胞的生长和分化。 展开更多
关键词 陆地棉 外植体 非胚性愈伤组织 胚性愈伤组织 内源激素 外源激素 高效液相色谱法
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紫花苜蓿愈伤组织及体细胞胚的细胞学观察 被引量：20
2
作者 刘振虎 卢欣石 葛军 《草业科学》 CAS CSCD 2005年第2期37-40,共4页
以紫花苜蓿Medicago sativa 的下胚轴为材料,诱导愈伤组织和体细胞胚的发生。在此过程中采用石蜡切片法观察愈伤组织和体细胞胚的内部结构,结果表明,胚性愈伤和非胚性愈伤在形态和细胞学上均有很大差别,体细胞胚的发生经历了多细胞原胚... 以紫花苜蓿Medicago sativa 的下胚轴为材料,诱导愈伤组织和体细胞胚的发生。在此过程中采用石蜡切片法观察愈伤组织和体细胞胚的内部结构,结果表明,胚性愈伤和非胚性愈伤在形态和细胞学上均有很大差别,体细胞胚的发生经历了多细胞原胚、球形胚、心形胚、子叶胚、鱼雷胚等多个阶段。观察发现,在胚性愈伤的内部和表面都有体细胞胚发生。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 胚性愈伤 非胚性愈伤 体细胞胚
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香樟胚性与非胚性愈伤组织间的差异研究 被引量：10
3
作者 荆茹月 霍坤 李志辉 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期70-78,共9页
【目的】通过组织细胞学观察、扫描电镜观察、生理生化指标测定三种方法为香樟胚性和非胚性愈伤组织的区分提供了可靠的判断依据,建立起愈伤组织的胚性发生能力与生化代谢间的关系,以此为基础可以提高香樟体胚诱导率、优化体胚发生体系... 【目的】通过组织细胞学观察、扫描电镜观察、生理生化指标测定三种方法为香樟胚性和非胚性愈伤组织的区分提供了可靠的判断依据,建立起愈伤组织的胚性发生能力与生化代谢间的关系,以此为基础可以提高香樟体胚诱导率、优化体胚发生体系。【方法】以长沙7月初采摘的香樟Cinnamomum camphora L.的未成熟合子胚为材料,诱导出四种不同类型的愈伤组织,对其进行组织细胞学观察以及生理生化测定。【结果】研究结果表明:胚性愈伤组织多为白色,表面散布淡黄色颗粒,细胞壁厚质浓、细胞体积较小,排列紧密,在电镜下表面细胞成团分布,大小近似,细胞核大核仁明显,细胞器丰富。而非胚性愈伤组织多为灰色、白色或深黄色,细胞壁薄,内含物少,空泡化明显,细胞多数衰老、破碎,在电镜下非胚性愈伤表面细胞不饱满大部分死亡破裂,且表面存在附着物,内部几乎没有细胞器。且胚性愈伤组织的适应性、抗逆性强于非胚性愈伤组织。对于胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织发生的位置来说,非胚性愈伤组织先发生在两片子叶的中间向外部扩增。胚性愈伤组织的发生位置有三种:一种是发生在胚根端,第二种发生在已形成的愈伤组织的外侧,第三种褐化的愈伤组织边缘。【结论】四类愈伤组织中有三类为非胚性愈伤组织,一类为胚性愈伤组织。 展开更多
关键词 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 组织细胞学 可溶性蛋白含量 可溶性糖含量 淀粉含量 抗氧化物酶活性
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日本五针松针叶胚性愈伤诱导及愈伤组织细胞学特性观察 被引量：8
4
作者 王雪丽 李萍萍 +2 位作者 吴坤阳 石琨 郑彩霞 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期422-428,共7页
为建立日本五针松再生体系,本文以其幼嫩针叶为材料,在DCR基本培养基上分别诱导愈伤组织和胚性愈伤组织,探索其最佳植物生长调节物质配比,并在诱导过程中对愈伤组织进行细胞学特性观察。结果表明,使用添加5 mg·L^(-1) 2,4-D和1 mg&... 为建立日本五针松再生体系,本文以其幼嫩针叶为材料,在DCR基本培养基上分别诱导愈伤组织和胚性愈伤组织,探索其最佳植物生长调节物质配比,并在诱导过程中对愈伤组织进行细胞学特性观察。结果表明,使用添加5 mg·L^(-1) 2,4-D和1 mg·L^(-1) 6-BA的培养基,愈伤组织的诱导率高达96.7%。胚性愈伤诱导培养基中添加0.6 mg·L^(-1) TDZ、1.0 mg·L^(-1)复硝酚钠、1.0 mg·L^(-1) 6-BA和0.2 mg·L^(-1) IBA,可诱导细胞分化,获得胚性愈伤,诱导率可达53.3%,而且其褐化率低,生长较快。非胚性愈伤的细胞呈圆形和细长形两种,不形成细胞团;胚性愈伤的细胞结合紧密,形成了胚性细胞团,其主要由胚性细胞和胚柄细胞两种类型的细胞组成。研究结果为日本五针松再生体系建立奠定了重要的基础。 展开更多
关键词 日本五针松 非胚性愈伤 胚性愈伤 形态学与细胞学特性
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板栗非胚性愈伤组织DsRed基因瞬时转化方法建立和优化 被引量：4
5
作者 李志 邢宇 +3 位作者 房克凤 曹庆芹 秦岭 张卿 《北京农学院学报》 2019年第3期109-112,共4页
【目的】为建立并优化板栗非胚性愈伤组织瞬时转化技术体系。【方法】以‘燕山红栗’幼胚根尖诱导的非胚性愈伤组织为材料,参照美洲栗胚性愈伤组织转化方法,转化DsRed红色荧光蛋白基因,建立板栗非胚性愈伤组织瞬时转化技术体系。针对影... 【目的】为建立并优化板栗非胚性愈伤组织瞬时转化技术体系。【方法】以‘燕山红栗’幼胚根尖诱导的非胚性愈伤组织为材料,参照美洲栗胚性愈伤组织转化方法,转化DsRed红色荧光蛋白基因,建立板栗非胚性愈伤组织瞬时转化技术体系。针对影响转化率的重要因子,设计菌液浓度、超声处理时间、共培养时间、干燥时间四因素五水平正交试验优化该方法。【结果】成功诱导板栗非胚性愈伤组织并观察到红色荧光,表明成功建立并优化了板栗非胚性愈伤组织瞬时转化方法:菌液浓度OD600=1.50,超声处理时间90s,共培养时间1h,干燥时间3d。【结论】该方法对于在细胞水平上研究糖类和淀粉代谢的分子机理具有重要意义。 展开更多
关键词 '燕山红栗’ 非胚性愈伤组织 瞬时转化 正交试验 方法优化
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高粱体胚发生的组织细胞学观察 被引量：3
6
作者 季艳丽 陈发菊 +1 位作者 邓为 张德春 《生物资源》 CAS 2019年第4期371-375,共5页
以Sb33高粱非胚性、胚性愈伤组织和体胚为材料,用传统石蜡切片法对各组织材料进行组织化学染色,对高粱胚性与非胚性愈伤组织以及体胚进行组织细胞学观察。结果表明:高粱非胚性愈伤组织无淀粉粒积累,高粱胚性愈伤组织淀粉粒积累较多,而... 以Sb33高粱非胚性、胚性愈伤组织和体胚为材料,用传统石蜡切片法对各组织材料进行组织化学染色,对高粱胚性与非胚性愈伤组织以及体胚进行组织细胞学观察。结果表明:高粱非胚性愈伤组织无淀粉粒积累,高粱胚性愈伤组织淀粉粒积累较多,而与胚性愈伤组织相比,高粱体胚淀粉粒积累更多,这说明淀粉粒的积累与高粱体细胞的胚胎发生密切相关。此外,高粱可通过鱼雷胚基部产生球形胚的方式实现体胚的增殖,高粱离体再生途径以体细胞胚发生为主,并同时存在少量器官发生途径。在高粱体细胞胚胎发生中,外起源和内起源同时存在。本研究为高粱体细胞胚胎发生提供细胞学理论基础。 展开更多
关键词 高粱 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 体胚 组织细胞学观察
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高粱不同类型胚性和非胚性愈伤组织的生理生化差异 被引量：1
7
作者 季艳丽 程云伟 +2 位作者 陈发菊 张德春 周超 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1613-1618,共6页
植物体细胞胚胎发生过程中伴随着复杂的生理生化变化,为进一步揭示胚性愈伤组织的再生潜力,该研究以高粱Sb19未成熟胚诱导产生的两种胚性愈伤组织和一种非胚性愈伤组织为材料,通过测定各愈伤组织中可溶性蛋白、游离脯氨酸和可溶性糖的含... 植物体细胞胚胎发生过程中伴随着复杂的生理生化变化,为进一步揭示胚性愈伤组织的再生潜力,该研究以高粱Sb19未成熟胚诱导产生的两种胚性愈伤组织和一种非胚性愈伤组织为材料,通过测定各愈伤组织中可溶性蛋白、游离脯氨酸和可溶性糖的含量,采用方差分析法对高粱体细胞胚胎发生过程中不同类型愈伤组织的生理生化指标进行了差异比较研究。结果表明:(1)高粱两种胚性愈伤组织中可溶性蛋白、游离脯氨酸和可溶性糖的含量均显著高于非胚性愈伤组织,表明胚性愈伤组织中的代谢活性高于非胚性愈伤组织,能够为体细胞胚胎发生提供更多的物质能量基础。(2)两种类型胚性愈伤组织之间生理生化差异显著,其中,Ⅱ型胚性愈伤组织中可溶性蛋白和游离脯氨酸含量均显著高于I型胚性愈伤组织,相反,Ⅱ型胚性愈伤组织中可溶性糖含量显著低于I型胚性愈伤组织,这种生理生化差异在一定程度上影响了后期的分化。该研究结果为愈伤组织的胚胎发生能力与生化代谢的关系提供理论依据。 展开更多
关键词 高粱 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 可溶性蛋白 游离脯氨酸 可溶性糖
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陆地棉体胚发育过程中特异蛋白质的表达
8
作者 郭敏敏 王清连 胡根海 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第1期9-11,共3页
对陆地棉愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生过程中的可溶性蛋白质含量变化及利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对特异蛋白质进行了研究。结果表明,各个时期的可溶性蛋白质含量是不同的,在愈伤组织形成初期较低,随着愈伤组织的生长及胚状体的形... 对陆地棉愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生过程中的可溶性蛋白质含量变化及利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对特异蛋白质进行了研究。结果表明,各个时期的可溶性蛋白质含量是不同的,在愈伤组织形成初期较低,随着愈伤组织的生长及胚状体的形成,可溶性蛋白质含量逐渐上升,在经过两次继代时达最大值,以后又逐渐降低;外植体、非胚性愈伤组织、胚性愈伤组织阶段各有其特异表达的蛋白质,并且不同品种之间外植体所表达的蛋白质也有所不同,与其再生能力可能有重要关系。 展开更多
关键词 陆地棉 外植体 非胚性愈伤组织 胚性愈伤组织 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 特异性蛋白质
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龙眼不同愈伤组织培养方法的探讨及细胞观察 被引量：1
9
作者 赖瑞联 林玉玲 赖钟雄 《龙岩学院学报》 2014年第2期70-75,共6页
试验中以龙眼"红核子"品种胚性愈伤组织LC2细胞系为材料,研究不同条件对龙眼胚性愈伤组织生长的影响以及龙眼非胚性愈伤组织培养体系的建立,并通过显微镜观察比较龙眼胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的形态学差异。试验结果表明... 试验中以龙眼"红核子"品种胚性愈伤组织LC2细胞系为材料,研究不同条件对龙眼胚性愈伤组织生长的影响以及龙眼非胚性愈伤组织培养体系的建立,并通过显微镜观察比较龙眼胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的形态学差异。试验结果表明,高9cm、直径6cm、瓶口内径5cm的玻璃培养瓶在接种量约为30mg/瓶时龙眼胚性愈伤组织生长最好;龙眼非胚性愈伤组织以MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+活性炭0.5 mg/L培养效果最好;细胞观察表明,龙眼胚性愈伤组织较非胚性愈伤组织细胞更规则,有更多的内含物。 展开更多
关键词 龙眼 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 形态学差异
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