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微生物酶催化腈水解反应的研究进展 被引量:19
1
作者 娄文勇 宗敏华 刘森林 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期76-81,共6页
腈的酶法水解不仅反应条件温和 ,而且高效性、高选择性 ,在光学活性羧酸及其衍生物的合成中具有巨大的应用潜力。综述了催化腈水解的酶类、反应类型、反应特性、影响反应的因素及其在工业上的应用前景。
关键词 腈水解 腈水解酶 腈水合酶 微生物酶
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腈水解酶的来源、结构、作用机制及其应用 被引量:22
2
作者 徐建妙 郑裕国 沈寅初 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期141-146,共6页
综合报道了腈水解酶的来源、结构、作用机制及其工业应用。
关键词 腈水解酶 结构 作用机制 应用
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腈转化酶在精细化学品生产中的应用 被引量:20
3
作者 郑裕国 薛亚平 +2 位作者 柳志强 郑仁朝 沈寅初 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1795-1807,共13页
腈化合物是一类重要的用于合成多种精细化学品的化合物,它们容易制备,并且可以合成多种化合物。传统化学水解方法将腈化合物转化为相应的羧酸或酰胺通常需要高温、强酸、强碱等相对苛刻的条件,腈转化酶(腈水解酶、腈水合酶和酰胺酶)由... 腈化合物是一类重要的用于合成多种精细化学品的化合物,它们容易制备,并且可以合成多种化合物。传统化学水解方法将腈化合物转化为相应的羧酸或酰胺通常需要高温、强酸、强碱等相对苛刻的条件,腈转化酶(腈水解酶、腈水合酶和酰胺酶)由于其生物催化过程具有高效、高选择性、条件温和等特点,在精细化学品的合成中越来越受到人们的关注。许多腈转化酶已经被开发出来并用于精细化学品的生产。以下介绍了腈转化酶在医药及中间体、农药及中间体、食品与饲料添加剂等精细化学品生产中的应用。随着研究的不断深入,将会有更多的腈转化酶被开发出来并用于精细化学品的生产。 展开更多
关键词 腈水合酶 腈水解酶 酰胺酶 腈转化酶 生物催化 精细化学品
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Biocatalytic synthesis of (R)-(-)-mandelic acid from racemic mandelonitrile by a newly isolated nitrilase-producer Alcaligenes sp. ECU0401 被引量:12
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作者 Yu Cai He Jian He Xu +2 位作者 Yi Xu Li Ming Ouyang Jiang Pan 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2007年第6期677-680,共4页
By using acetonitrile as the sole nitrogen source, a microbial strain with high nitrilase activity, named as Alcaligenes sp. ECU0401, was newly isolated from soil, which could enantioselectively transform racemic mand... By using acetonitrile as the sole nitrogen source, a microbial strain with high nitrilase activity, named as Alcaligenes sp. ECU0401, was newly isolated from soil, which could enantioselectively transform racemic mandelonitrile into (R)-(?)-mandelic acid, with an enantiomeric excess of >99.9%. 展开更多
关键词 Mandelonitrile nitrilase (R)-()-Mandelic acid SCREENING Alcaligenes sp. ECU0401
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透明颤菌血红蛋白基因vgb和腈水解酶基因bxn在毕赤酵母中的表达研究 被引量:9
5
作者 王清路 张锐 +2 位作者 倪万潮 陈毓荃 郭三堆 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期730-735,共6页
为获得高效表达外源蛋白的Pichiapastoris菌株而设计了重组质粒pPIC9K_vgbbxn ,其中透明颤菌血红蛋白基因vgb胞内表达以提高菌体的发酵密度 ,腈水解酶基因bxn分泌表达。转化GS115菌株后 ,通过PCR、SDS_PAGE检测证实两基因已经整合进酵... 为获得高效表达外源蛋白的Pichiapastoris菌株而设计了重组质粒pPIC9K_vgbbxn ,其中透明颤菌血红蛋白基因vgb胞内表达以提高菌体的发酵密度 ,腈水解酶基因bxn分泌表达。转化GS115菌株后 ,通过PCR、SDS_PAGE检测证实两基因已经整合进酵母基因组且能高效表达 ,以及用准确的蛋白活性测定方法成功地检测到二者所表达的产物均具有正常的活性。摇瓶发酵实验证明 。 展开更多
关键词 毕赤酵母 分泌型表达载体 腈水解酶 透明颤菌血红蛋白
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α-羟基乙酸合成与分析方法综述 被引量:12
6
作者 胡基埂 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期496-500,共5页
α-羟基乙酸是一种重要的大宗精细化工中间体,广泛应用于黏合剂、金属清洗、生物降解材料、染色、纺织,而且是个人护理产品的重要组成成分。化学法生产羟基乙酸存在原料消耗大、产品收率低、环境污染严重等缺点;生物法合成羟基乙酸条件... α-羟基乙酸是一种重要的大宗精细化工中间体,广泛应用于黏合剂、金属清洗、生物降解材料、染色、纺织,而且是个人护理产品的重要组成成分。化学法生产羟基乙酸存在原料消耗大、产品收率低、环境污染严重等缺点;生物法合成羟基乙酸条件温和、底物转化率高,为绿色合成羟基乙酸提供强有力的技术支持。文章比较了各种羟基乙酸定性及定量分析方法,综述了羟基乙酸分离方法,特别是溶剂萃取和协同萃取效应。最后,分析了羟基乙酸的开发前景。 展开更多
关键词 羟基乙酸 腈水解酶 定量分析 协同萃取
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腈水解酶在医药中间体生物催化研究中的最新进展 被引量:9
7
作者 龚劲松 李恒 +2 位作者 陆震鸣 史劲松 许正宏 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第4期448-458,共11页
腈水解酶是生物催化领域中的一种重要催化剂,可用于羧酸的生物合成,反应过程具有条件温和、催化效率高、选择性突出、工艺绿色环保等特点,在医药中间体的制备中具有重要应用,符合原子经济性和绿色化学的发展方向。相关酶种的挖掘及改造... 腈水解酶是生物催化领域中的一种重要催化剂,可用于羧酸的生物合成,反应过程具有条件温和、催化效率高、选择性突出、工艺绿色环保等特点,在医药中间体的制备中具有重要应用,符合原子经济性和绿色化学的发展方向。相关酶种的挖掘及改造已逐步成为新的研究热点,许多腈水解酶催化剂已被开发应用于医药中间体的合成。随着现代分子生物学技术的进步以及生物催化进入第三次发展浪潮,利用基因工程手段构建的基因工程菌或纯化酶作为催化剂已变得较为普遍,提高催化剂的催化潜力、改善其催化特性以最大程度的体现腈水解酶合成反应的独特优势,将为腈水解酶应用于更多医药中间体的合成奠定基础。本文综述了用于医药中间体合成的腈水解酶的应用与发展现状,并探讨了该领域研究所面临的前所未有的机遇与挑战。 展开更多
关键词 腈水解酶 医药中间体 生物催化 有机酸
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土壤中腈水解酶产生菌的快速筛选 被引量:7
8
作者 周冬杰 欧阳立明 +2 位作者 许建和 周鹏鹏 潘江 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期545-548,共4页
为了从土壤中快速筛选具有腈水解能力的微生物,建立了以苯酚-次氯酸盐比色法(又名Berthelot比色法)检测96孔板反应产物中氨离子浓度为基础的腈水解酶酶活快速分析方法。用该法从土壤样本中筛选获得了9个酶活力较高的菌株。用HPLC方法定... 为了从土壤中快速筛选具有腈水解能力的微生物,建立了以苯酚-次氯酸盐比色法(又名Berthelot比色法)检测96孔板反应产物中氨离子浓度为基础的腈水解酶酶活快速分析方法。用该法从土壤样本中筛选获得了9个酶活力较高的菌株。用HPLC方法定量检测9个菌株对对羟基苯甲腈的转化率,证明苯酚-次氯酸盐比色法微孔板分光光度计的测定结果与HPLC结果对应良好,转化率最高为49.9%。经16s rDNA鉴定,菌株分别属于金黄杆菌属、芽胞杆菌属、葡萄球菌属、寡养单胞菌属等。 展开更多
关键词 腈水解酶 苯酚-次氯酸盐比色法(Berthelot比色法) 微孔板 筛选
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腈纶抗静电整理传统方法与酶处理方法之比较 被引量:8
9
作者 王宁 陆大年 《合成纤维》 CAS 北大核心 2002年第5期13-15,共3页
生物酶由于具有高度的专一性和高效率的催化能力 ,并且无环境污染 ,因此在纺织品的生物加工中得到了广泛应用。本文比较了抗静电腈纶传统的物理化学改性方法和酶改性方法 ,并侧重介绍了氰基酶的作用机理、特点、改性方法等。
关键词 腈纶 抗静电整理 传统方法 酶处理方法 氰基水解酶 氰基水合酶
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氰基水解酶在有机合成中的应用 被引量:7
10
作者 吴中柳 李祖义 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期25-32,共8页
腈化物是有机合成中的重要中间体 ,因为其中的氰基可以通过多种方法引入 ,又能进一步转化成其它官能团。用氰基水解酶实现氰基降解不仅反应条件温和 ,少污染、易处理 ,更重要的是能实现一般化学转化所不能实现的优良的化学、区域及立体... 腈化物是有机合成中的重要中间体 ,因为其中的氰基可以通过多种方法引入 ,又能进一步转化成其它官能团。用氰基水解酶实现氰基降解不仅反应条件温和 ,少污染、易处理 ,更重要的是能实现一般化学转化所不能实现的优良的化学、区域及立体选择性。不管是从学术角度还是工程角度来看 。 展开更多
关键词 氰基水解酶 酰胺酶 有机合成 氰基降解 应用
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Evidence That the Auxin Signaling Pathway Interacts with Plant Stress Response 被引量:7
11
作者 包方 李家洋 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第5期532-536,共5页
Auxin influences a variety of developmental and physiological processes. Early reports, suggested that auxin might affect plant stress response. We have identified a number of auxin responsive genes in Arabidopsis tha... Auxin influences a variety of developmental and physiological processes. Early reports, suggested that auxin might affect plant stress response. We have identified a number of auxin responsive genes in Arabidopsis thaliana (L.) Heynh. by using cDNA an-ay and found that stress responsive genes, such as,Arabidopsis homolog of MEK kinase 1 (ATMEKK1), ReL/SpoT homolog 3 ( At-RSH3), Catalase 1 ( Cat1) and Ferritin 1 (Fer1), were down-regulated by auxin, indicating that auxin regulates ale expression of stress responsive genes. We also demonstrated that nitrilase genes, nitrilase I ( NIT]) and nitrilase 2 (NIT2) involving in indole-3-acetic acid (IAA) biosynthesis, were induced by salinity stress, suggesting that the level of IAA might increase in response to salinity stress. To dissect the signal pathway involved in the interaction, two auxin insensitive mutants, auxin resistant 2 (axr2) and auxin resistant 1-3 (axrl-3) were used. Stress responsive genes were induced by salt stress in wild type and axr2, but not in axr1-3. The result suggests that die interaction between auxin and stress responses may be linked in the ubiquitin pathway. 展开更多
关键词 AUXIN stress-responsive genes auxin insensitive mutants nitrilase Arabidopsis thaliana
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草甘膦化学合成工艺及其中间体的生物法合成技术展望 被引量:6
12
作者 林志坚 郑仁朝 +2 位作者 楼亿圆 郑裕国 沈寅初 《农药》 CAS 北大核心 2009年第8期547-551,共5页
草甘膦是世界上应用广、产量大的除草剂。介绍了草甘膦的特性和市场,综述了国内外草甘膦的生产工艺,展望了今后我国草甘膦生产的发展方向和前景。创新性地提出了用微生物腈水解酶催化法制备草甘膦中间体亚氨基二乙酸的可行性。
关键词 草甘膦 亚氨基二乙酸法 甘氨酸-亚磷酸二烷基酯法 亚氨基二乙腈 腈水解酶
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水稻稻瘟病菌胁迫应答cDNA片段的表达及定位 被引量:6
13
作者 饶志明 董海涛 +4 位作者 庄杰云 柴荣耀 樊叶杨 李德葆 郑康乐 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期105-108,共4页
以抗稻瘟病品系 G2 0 5为材料 ,应用 c DNA微阵列分别获得了一个受稻瘟病菌诱导的含 NBS- L RR的 c DNA克隆 (暂命名为 RIM1,rice induced by Magnaporthe grisea)和一个受稻瘟病菌抑制的编码腈水解酶 (Nitrilase)的 c DNA克隆(暂命名为... 以抗稻瘟病品系 G2 0 5为材料 ,应用 c DNA微阵列分别获得了一个受稻瘟病菌诱导的含 NBS- L RR的 c DNA克隆 (暂命名为 RIM1,rice induced by Magnaporthe grisea)和一个受稻瘟病菌抑制的编码腈水解酶 (Nitrilase)的 c DNA克隆(暂命名为 N IT) ,并通过 Northern得到证实。RFLP分析将 RIM1和 N IT分别定位于水稻第 2和第 3染色体上 ,它们均位于控制水稻稻瘟病部分抗性 展开更多
关键词 水稻 CDNA微阵列 腈水解酶 基因定位 稻瘟病
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水稻腈水解酶家族的生物信息学分析 被引量:5
14
作者 王爱荣 刘向国 +1 位作者 赵旭 鲁国东 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第23期52-57,共6页
为了更好地了解水稻腈水解酶家族的功能,采用生物信息学的方法对水稻中的腈水解酶进行了一系列分析,结果发现水稻中共有8个编码腈水解酶的基因,虽然基因结构很不相同,但其所编码的腈水解酶都具有典型的碳氮水解酶结构域和保守的Glu-Lys-... 为了更好地了解水稻腈水解酶家族的功能,采用生物信息学的方法对水稻中的腈水解酶进行了一系列分析,结果发现水稻中共有8个编码腈水解酶的基因,虽然基因结构很不相同,但其所编码的腈水解酶都具有典型的碳氮水解酶结构域和保守的Glu-Lys-Cys催化三联体。通过EST搜索发现这些基因在水稻不同组织和不同胁迫条件下的表达情况存在较大的差异。此外,对水稻和拟南芥腈水解酶进行系统进化分析发现其分别处于5个不同的分支,表明它们的分化早于单子叶植物和双子叶植物的分化。研究结果为进一步研究该类蛋白的分子和生物学功能奠定了良好基础。 展开更多
关键词 水稻 腈水解酶 基因家族 系统发育分析 结构和功能
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腈水解酶立体选择性改造及其合成布瓦西坦
15
作者 吴哲明 张碧云 郑仁朝 《化工学报》 EI CSCD 北大核心 2024年第7期2633-2643,共11页
布瓦西坦是新一代抗癫痫药物,具有广阔的市场前景。利用腈水解酶立体选择性催化3-氰基己腈合成关键手性中间体(R)-3-氰基己酸,进一步经加氢、环化、手性拆分等合成布瓦西坦路线,具有原子经济性高等优势,然而目前挖掘的腈水解酶存在立体... 布瓦西坦是新一代抗癫痫药物,具有广阔的市场前景。利用腈水解酶立体选择性催化3-氰基己腈合成关键手性中间体(R)-3-氰基己酸,进一步经加氢、环化、手性拆分等合成布瓦西坦路线,具有原子经济性高等优势,然而目前挖掘的腈水解酶存在立体选择性差等缺陷。以腈水解酶PgNIT为研究对象,通过对其催化口袋和亚基界面改造获得了立体选择性大幅提高的突变体F164W/I202R,产物光学纯度由野生型的86%提升至97%,E值由17提高至111。分子动力学模拟研究表明,F164位点的改造减小了(R)-3-氰基己腈深入催化口袋内部的空间位阻,而“A”界面I202位点的改造增加了亚基之间缔合的距离和催化口袋区域的原子动态协同性,从而显著提升了腈水解酶的立体选择性。 展开更多
关键词 腈水解酶 立体选择性 分子改造 分子模拟 生物催化 分子生物学
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源于Alcaligenes faecalis腈水解酶基因的生物信息学分析
16
作者 鞠宗勉 李文潇 +2 位作者 徐涛 王储炎 张新红 《萍乡学院学报》 2024年第3期72-77,共6页
课题组为探究源于Alcaligenes faecalis腈水解酶突变型Mut3基因的结构与功能,以前期研究为基础,具体分析了腈水解酶的生物信息学,包括理化性质、蛋白二级结构、三级结构、蛋白的保守结构域、跨膜区、信号肽、亲水性和疏水性等。腈水解... 课题组为探究源于Alcaligenes faecalis腈水解酶突变型Mut3基因的结构与功能,以前期研究为基础,具体分析了腈水解酶的生物信息学,包括理化性质、蛋白二级结构、三级结构、蛋白的保守结构域、跨膜区、信号肽、亲水性和疏水性等。腈水解酶的生物信息学分析为其进一步分子改造提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 腈水解酶 生物信息学 (R)-扁桃酸 (R S)-扁桃腈
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腈纶织物的氰基水解酶/硼酸锌阻燃整理 被引量:6
17
作者 刘艳春 何珠仪 +1 位作者 白刚 钱红飞 《纺织学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第3期110-113,共4页
为提高腈纶织物的阻燃性能,采用氰基水解酶对腈纶织物进行预处理,再用硼酸锌对腈纶织物进行阻燃整理。通过X射线光电子能谱(XPS)、热重分析(TG)、Zeta电位测试、增重率测试及限氧指数(LOI值)分析,研究了氰基水解酶/硼酸锌整理后腈纶织... 为提高腈纶织物的阻燃性能,采用氰基水解酶对腈纶织物进行预处理,再用硼酸锌对腈纶织物进行阻燃整理。通过X射线光电子能谱(XPS)、热重分析(TG)、Zeta电位测试、增重率测试及限氧指数(LOI值)分析,研究了氰基水解酶/硼酸锌整理后腈纶织物性能的变化。结果表明:酶处理在腈纶织物的纤维表面引入羧基,能促进硼酸锌在腈纶上的吸附与结合,从而进一步提高腈纶织物的阻燃性能。与单独阻燃剂整理的腈纶织物相比,酶预处理后再阻燃整理的织物其增重率提高了4.9%,极限氧指数提高了10.3%,腈纶织物的极限氧指数能达到27.8%。 展开更多
关键词 腈纶 阻燃整理 氰基水解酶 硼酸锌
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选择性腈水解酶在生物催化中的应用 被引量:5
18
作者 徐赛珍 郑裕国 《浙江化工》 CAS 2009年第5期13-18,共6页
腈水解酶作为生物催化剂水解腈类化合物,具有高效性、高选择性、反应条件温和、环境污染小、成本低等优点。本文综述了腈水解酶的化学、区域及立体选择性在生物合成中的广泛应用。
关键词 腈水解酶 化学选择性 区域选择性 立体选择性 生物催化
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Increased β-Cyanoalanine Nitrilase Activity Improves Cyanide Tolerance and Assimilation in Arabidopsis 被引量:3
19
作者 Brendan O'Leary GaU M. Preston Lee J. Sweetlove 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期231-243,共13页
Plants naturally produce cyanide (CN) which is maintained at low levels in their cells by a process of rapid assimilation. However, high concentrations of environmental CN associated with activities such as industri... Plants naturally produce cyanide (CN) which is maintained at low levels in their cells by a process of rapid assimilation. However, high concentrations of environmental CN associated with activities such as industrial pollution are toxic to plants. There is thus an interest in increasing the CN detoxification capacity of plants as a potential route to phytoremediation. Here, Arabidopsis seedlings overexpressing the Pseudomonas fluorescens β-cyanoalanine nitrilase pinA were compared with wild-type and a β-cyanoalanine nitrilase knockout line (△Atnit4) for growth in the presence of exogenous CN. After incubation with CN, +PfpinA seedlings had increased root length, increased fresh weight, and decreased leaf bleaching compared with wild-type, indicating increased CN tolerance. The increased tolerance was achieved without an increase in β-cyanoalanine synthase activity, the other enzyme in the cyanide assimilation pathway, suggesting that nitrilase activity is the limiting factor for cyanide detoxification. Labeling experiments with [^13C] KCN demonstrated that the altered CN tolerance could be explained by differences in flux from CN to Asn caused by altered β-cyanoalanine nitrilase activity. Metabolite profiling after CN treatment provided new insight into downstream metabolism, revealing onward metabolism of Asn by the photorespiratory nitrogen cycle and accumulation of aromatic amino acids. 展开更多
关键词 CYANIDE β-cyanoalanine cyanide detoxification asparagine metabolism nitrilase
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腈水解酶产生菌游离细胞催化特性的初步研究 被引量:4
20
作者 罗积杏 薛建萍 沈寅初 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期13-17,共5页
从自然源筛选到的一株腈水解酶产生菌乳酪短杆菌(Brevibacterium casei),能够高选择性地将腈转化为羧酸,初步研究了该菌株所产的腈水解酶在游离细胞形态下的催化特性,包括热稳定性、pH稳定性、金属离子和添加剂的作用、溶剂耐受性... 从自然源筛选到的一株腈水解酶产生菌乳酪短杆菌(Brevibacterium casei),能够高选择性地将腈转化为羧酸,初步研究了该菌株所产的腈水解酶在游离细胞形态下的催化特性,包括热稳定性、pH稳定性、金属离子和添加剂的作用、溶剂耐受性及底物特异性等。结果表明:酶在45℃和pH6.8条件下表现出最高催化活性,在20℃和pH6.5~8.5下酶活稳定,Mg^2+和Mn^2+对酶活性有轻微的促进作用,但Fe^3+、Cu^2+、Al^3+和Sn^2+强烈抑制酶,表面净陛剂OP、NP10及RS010有促进酶活作用,十二烷基磺酸钠却产生较强抑制作用,L-半胱氨酸能够减弱重金属离子对酶的抑制。该酶对芳香族腈、脂肪族腈、饱和腈与不饱和腈均能作用,并具有较好的对映体选择性。有机溶剂会使酶失活,但酶对甲醇具有一定的耐受性,在6%(V/V)浓度下,20h后酶的残留活性为98.8%。 展开更多
关键词 腈水解酶 微生物 游离细胞 催化特性
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