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Hif-1α在斑马鱼吞噬细胞迁移及发育中的生物学功能
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作者 汪豪 罗舸洋 +4 位作者 魏泽昊 司马重圆 晏博 张舒林 余晓丽 《武汉轻工大学学报》 CAS 2024年第2期50-55,共6页
探究斑马鱼低氧诱导因子-1α(Hif-1α)基因在中性粒细胞和巨噬细胞的发育和迁移中所起的作用。将斑马鱼分为野生对照组和Hif-1α基因突变组。使用CRISPR/Cas9技术对斑马鱼的Hif-1α基因进行突变。随后,通过苏丹黑B染色法观察了野生对照... 探究斑马鱼低氧诱导因子-1α(Hif-1α)基因在中性粒细胞和巨噬细胞的发育和迁移中所起的作用。将斑马鱼分为野生对照组和Hif-1α基因突变组。使用CRISPR/Cas9技术对斑马鱼的Hif-1α基因进行突变。随后,通过苏丹黑B染色法观察了野生对照组和Hif-1α基因突变组中性粒细胞的染色情况,以及通过中性红染色法观察了巨噬细胞的染色情况并对结果进行了统计分析。结果显示成功构建缺失8个碱基的斑马鱼Hif-1α基因突变体,且Hif-1α基因突变的斑马鱼幼鱼发育3 d后,中性粒细胞迁移到急性损伤部位的数量显著减少,突变型斑马鱼后脑室中的小胶质巨噬细胞数量比野生型显著增多。综上,本研究成功构建了斑马鱼Hif-1α基因纯合突变体,同时表明Hif-1α基因具有抑制中性粒细胞向炎症区域迁移的作用,并促进脑室巨噬细胞的生长发育,为后续研究急性损伤模型提供基础。 展开更多
关键词 Hif-1α基因纯合突变体 斑马鱼幼鱼 中性粒细胞迁移 巨噬细胞发育
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白附子凝集素的促炎作用及与居留细胞等的相关性研究 被引量:3
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作者 刘先琼 吴皓 +1 位作者 郁红礼 郗有丽 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期1011-1015,共5页
目的:研究白附子凝集素(TGA)诱导大鼠腹腔中性粒细胞迁移与居留细胞、巨噬细胞、肥大细胞的关系。方法:分别采用腹腔内居留细胞灌洗模型,巯基乙酸盐(Tg)刺激大鼠腹腔内巨噬细胞增殖模型,N-甲基-对甲氧基苯乙胺和甲醛的缩合物(48/80)致... 目的:研究白附子凝集素(TGA)诱导大鼠腹腔中性粒细胞迁移与居留细胞、巨噬细胞、肥大细胞的关系。方法:分别采用腹腔内居留细胞灌洗模型,巯基乙酸盐(Tg)刺激大鼠腹腔内巨噬细胞增殖模型,N-甲基-对甲氧基苯乙胺和甲醛的缩合物(48/80)致大鼠腹腔内肥大细胞调亡模型,考察TGA诱导中性粒细胞迁移与居留细胞、巨噬细胞及肥大细胞的关系。结果:与正常大鼠比较,采用灌洗法减少了居留细胞的大鼠,TGA诱导中性粒细胞迁移无显著性差异,作用与经典的能直接诱导中性粒细胞的趋化剂甲酰甲硫氨酰亮氨酰苯丙氨酸(fMLP)一致;而采用Tg刺激大鼠腹腔巨噬细胞增殖的大鼠,48/80致大鼠腹腔肥大细胞凋亡的大鼠,TGA诱导中性粒细胞迁移均具有显著性差异(P<0.01)。结论:TGA诱导大鼠中性粒细胞迁移不依赖于居留细胞,但居留细胞中的巨噬细胞能协同TGA诱导大鼠中性粒细胞迁移,肥大细胞能拮抗TGA诱导的大鼠中性粒细胞迁移。 展开更多
关键词 白附子凝集素 中性粒细胞迁移 居留细胞 巨噬细胞 肥大细胞
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脓毒症中性粒细胞功能障碍的研究进展 被引量:3
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作者 费苗苗 王嘉锋 邓小明 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2019年第5期509-512,I0009,共5页
脓毒症是宿主对感染反应失调所引起的严重器官功能障碍,中性粒细胞是免疫应答的重要细胞,在脓毒症中起重要作用.文章对脓毒症时中性粒细胞功能障碍及机制进行概述(一方面脓毒症时中性粒细胞向感染部位迁移能力受损,不能有效清除感染;另... 脓毒症是宿主对感染反应失调所引起的严重器官功能障碍,中性粒细胞是免疫应答的重要细胞,在脓毒症中起重要作用.文章对脓毒症时中性粒细胞功能障碍及机制进行概述(一方面脓毒症时中性粒细胞向感染部位迁移能力受损,不能有效清除感染;另一方面,中性粒细胞大量聚集可能导致组织损伤和器官功能障碍),分析总结中性粒细胞在脓毒症中的作用.中性粒细胞在脓毒症的发生、发展中起着重要作用,其具体机制还需要更深入的研究和探索,以充分发挥其应有的医学价值. 展开更多
关键词 脓毒症 中性粒细胞 器官功能障碍
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Roles of TGF-β Signaling Pathway in Endoplasmic Reticulum Stress in Endothelial Cells Stimulated with Cigarette Smoke Extract 被引量:1
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作者 黄宏 丁秋丽 +1 位作者 朱慧芬 杨道锋 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2017年第5期699-704,共6页
To investigate the role of signaling pathway in the effect of endoplasmic reticulum stress(ER stress) in endothelial cells stimulated with cigarette smoke extract(CSE). Human umbilical vein endothelial cells(HUV... To investigate the role of signaling pathway in the effect of endoplasmic reticulum stress(ER stress) in endothelial cells stimulated with cigarette smoke extract(CSE). Human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) were cultured and divided into 3 groups: CSE-stimulated group, CSE-stimulated with 4-PBA group, and negative control group. HUVECs were cultured and stimulated with CSE at concentrations of 5%, 10% and 20%, respectively, mR NA of CXCL-8 and GRP78 was detected by real-time PCR. ELISA was performed to test the expression of CXCL-8 protein, and neutrophils migration was detected by Transwell board test. The NF-κB, ERK, p38 MAPK and transforming growth factor beta(TGF-β) were detected by flow cytometry. The mRNA of CXCL-8 and GRP78 increased in CSE-stimulated HUVECs(P〈0.05). Furthermore, it was concentration-dependent. 4-PBA significantly reduced the expression of CXCL-8 protein(P〈0.05) and neutrophil migration(P〈0.05). The TGF-β, rather than the NF-κB, ERK and P38 MAPK pathway might be involved in ER stress stimulated by CSE. CSE induced neutrophils migration by increasing the expression of CXCL-8 in endothelial cells. ER stress might play a role in the effect of neutrophils migration stimulated with CSE, and TGF-β pathway may contribute to the ER stress in HUVECs. 展开更多
关键词 endoplasmic reticulum stress cigarette smoke extract endothelial cells neutrophil migration signaling pathway
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中性粒细胞在基底上迁移过程中曳尾形成的理论模型 被引量:1
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作者 张晓宁 胡文慧 +2 位作者 高文博 章燕 龙勉 《Acta Mechanica Sinica》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第6期166-178,共13页
中性粒细胞通过头部前伸和尾部收缩可以在内皮细胞或细胞外基质上快速迁移.这些细胞在迁移的过程中会遗留下大量富含整合素的膜结构,但目前尚不清楚曳尾的形成与细胞迁移之间的定量关系以及在这一过程中起关键作用的调控因素.本文将多... 中性粒细胞通过头部前伸和尾部收缩可以在内皮细胞或细胞外基质上快速迁移.这些细胞在迁移的过程中会遗留下大量富含整合素的膜结构,但目前尚不清楚曳尾的形成与细胞迁移之间的定量关系以及在这一过程中起关键作用的调控因素.本文将多层级力学-化学耦合模型与细胞迁移的马达-离合器模型相结合,对中性粒细胞在基质上的趋化迁移进行了数值模拟.结果表明,随着PAK1和其下游信号分子Rac和RhoA的极化分布,细胞膜上的整合素倾向于在细胞前后两端产生极化积聚,当Arp2/3和myosin分别在细胞的头尾极化时,细胞会在整合素的作用下增大迁移速度并提高曳尾的数量.这些关于整合素极化以及曳尾形成的预测与典型的实验结果一致.参数分析进一步表明,虽然细胞迁移速度与基底硬度和“马达”空载速度呈现双相依赖关系,但是曳尾形成的数量随着基底硬度、整合素-配体分子键的结合率、“马达”空载速度、“马达”空载拉力和“离合器”数量的增加而单调增加,随着趋化因子浓度和整合素-配体分子键的解离率的增加而减少.上述工作为阐明中性粒细胞迁移的力学-化学-生物学耦合过程和探究调节中性粒细胞迁移过程中影响曳尾形成的关键因素提供了一种解释. 展开更多
关键词 中性粒细胞 细胞迁移 曳尾 迁移过程 细胞外基质 迁移速度 内皮细胞 趋化因子
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AZD5069通过抑制中性粒细胞迁移治疗类风湿关节炎的机制研究 被引量:2
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作者 韩新爱 何娟 +2 位作者 宋睿 张晓明 接红宇 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第13期2406-2410,共5页
目的:探讨CXCR2拮抗剂AZD5069能否通过抑制中性粒细胞迁移治疗类风湿关节炎(RA)。方法:将45只雄性DBA/1J小鼠随机分为对照组(n=15)、模型组(n=15)、AZD5069组(n=15);除对照组外,其余两组均给予牛Ⅱ型胶原蛋白+弗氏佐剂建立胶原诱导型关... 目的:探讨CXCR2拮抗剂AZD5069能否通过抑制中性粒细胞迁移治疗类风湿关节炎(RA)。方法:将45只雄性DBA/1J小鼠随机分为对照组(n=15)、模型组(n=15)、AZD5069组(n=15);除对照组外,其余两组均给予牛Ⅱ型胶原蛋白+弗氏佐剂建立胶原诱导型关节炎(CIA)模型。观察记录小鼠关节炎评分。二次免疫后第二天给与药物治疗,治疗3周后处死小鼠检测关节病理、中性粒细胞浸润、外周血炎症因子等指标。结果:与对照组相比,模型组小鼠关节炎发病率明显升高(P<0.05);与模型组相比,AZD5069组小鼠关节炎发病率明显降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组小鼠关节炎评分明显升高(P<0.05);与模型相比,AZD5069组小鼠关节炎评分明显降低(P<0.05)。对照组小鼠踝关节间隙正常,滑膜无增生,无炎症细胞浸润,软骨面光滑无破坏;模型组小鼠踝关节间隙狭窄,滑膜增生明显,可见大量炎症细胞浸润,软骨侵蚀破坏;与模型组相比,AZD5069组小鼠踝关节间隙未见明显狭窄,滑膜未见明显增生,炎症细胞浸润明显减轻,软骨未见明显破坏。与对照组相比,模型组小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β的水平明显升高(P<0.05);与模型组相比,AZD5069组小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β的水平明显降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组小鼠踝关节中性粒细胞明显增多,可见大量中性粒细胞浸润;与模型组相比,AZD5069组小鼠踝关节中性粒细胞明显减少,中性粒细胞浸润情况明显减轻。结论:CXCR2拮抗剂AZD5069可通过抑制中性粒细胞迁移治疗类风湿关节炎,为开发新型治疗RA药物提供理论基础。 展开更多
关键词 AZD5069 小鼠 类风湿关节炎 中性粒细胞迁移
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预防性应用PA—MSHA对严重脓毒症中性粒细胞移行的影响 被引量:2
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作者 曹礼荣 秦怡 +2 位作者 梁凤 李良海 李新宇 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期215-218,共4页
目的通过观察铜绿假单胞菌一甘露糖敏感血凝素(PA—MSHA)对严重脓毒症大鼠中性粒细胞体外移行的影响,探讨严重脓毒症发病机制及PA—MSHA对严重脓毒症的作用。方法大鼠随机分为对照组(C组)、严重脓毒症组(Ss组)、PA—MSHA预处理组... 目的通过观察铜绿假单胞菌一甘露糖敏感血凝素(PA—MSHA)对严重脓毒症大鼠中性粒细胞体外移行的影响,探讨严重脓毒症发病机制及PA—MSHA对严重脓毒症的作用。方法大鼠随机分为对照组(C组)、严重脓毒症组(Ss组)、PA—MSHA预处理组(PA组)和PA—MSHA预处理严重脓毒症组(PA—SS组)。严重脓毒症动物模型通过人粪便悬液腹腔注射制作。PA—MSHA预处理方案为连续7d0.3mLPA—MSHA皮下注射。观察大鼠一般情况,48h生存情况,大体解剖观察,中性粒细胞体外趋化数,细胞因子IL-6、iNOS、IL-10水平。结果PA—ss组在一般情况、48h生存情况、大体解剖观察上均优于sS组,细胞因子水平也较sS组下降。sS组及PA—ss组与c组和PA组比较,中性粒细胞体外趋化数量显著下降(P〈0.01)。C组与PA组、SS组与PA—SS组中性粒细胞体外趋化细胞数比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论严重脓毒症时中性粒细胞体外移行能力发生严重障碍,连续7d0.3mLPA—MSHA预处理无法改善严重脓毒症中性粒细胞体外移行能力,但可通过下调炎症因子水平,减缓严重脓毒症病情恶化,延长生存时间,为临床救治争取宝贵时间。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌一甘露糖敏感血凝素(PA—MSHA) 严重脓毒症 中性粒细胞移行 白细胞介素-6 INOS 白细胞介素-10
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内质网应激对中性粒细胞趋化作用的影响 被引量:1
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作者 丁秋丽 黄宏 《国际呼吸杂志》 2016年第12期936-940,共5页
目的:探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导脐静脉内皮细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)对中性粒细胞趋化作用的影响。方法实验分4组:正常对照组、CSE刺激组、ERS抑制剂组和阴性对照组。培养人... 目的:探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导脐静脉内皮细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)对中性粒细胞趋化作用的影响。方法实验分4组:正常对照组、CSE刺激组、ERS抑制剂组和阴性对照组。培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVECs),给予不同浓度的 CSE 刺激24 h,Real time-PCR 法检测糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、趋化因子8(CXCL-8)、细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)、E-selectin mRNA 的表达水平;用 ERS 抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyrate,4-PBA)干预,ELISA法检测各组 HUVECs 的 CXCL-8蛋白表达水平,Transwell趋化实验检测各组培养上清对正常人外周血中性粒细胞的趋化作用。结果 CSE 增强 GRP78及CXCL-8、ICAM-1、E-selectin mRNA的表达,并在一定范围内具有浓度依赖性;ERS 抑制剂4-PBA减少CXCL-8的分泌(q=8.370,P〈0.05),并减弱中性粒细胞的趋化作用(q=4.808,P〈0.05)。结论 CSE诱导 HUVECs ERS,并上调 CXCL-8、ICAM-1、E-selectin的基因转录;4-PBA 减弱中性粒细胞的趋化作用,可能与减少CXCL-8分泌作用有关。 展开更多
关键词 内质网应激 香烟烟雾提取物 内皮细胞 中性粒细胞趋化作用
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MKP-1/ERK通路参与雌二醇减轻中性粒细胞迁移的机制研究
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作者 金乾衡 徐磊 +2 位作者 金光哲 巨积辉 侯瑞兴 《中华手外科杂志》 CSCD 北大核心 2023年第3期271-275,共5页
目的研究雌二醇对f-MLP诱导的体外中性粒细胞活化的影响,并探讨这种作用与ERK通路及其上游蛋白MKP-1的关系.方法将HL-60诱导分化成类中性粒细胞(dHL-60).用MTT实验检测不同浓度梯度的E2、f-MLP、PD98059或混合液对dHL-60的影响.通过Tran... 目的研究雌二醇对f-MLP诱导的体外中性粒细胞活化的影响,并探讨这种作用与ERK通路及其上游蛋白MKP-1的关系.方法将HL-60诱导分化成类中性粒细胞(dHL-60).用MTT实验检测不同浓度梯度的E2、f-MLP、PD98059或混合液对dHL-60的影响.通过Transwell实验和超氧化物检测E2、PD98059对f-MLP诱导的dHL-60迁移和超氧化的抑制作用.Western blot检测ERK、p-ERK、MKP-1的表达水平.结果E2、f-MLP、PD98059单独或联合使用对dHL-60细胞的存活率没有影响.f-MLP能显著诱导中性粒细胞迁移和过度氧化.生理、药理学剂量的E2和PD98059可以有效抑制f-MLP的这种作用.Western blot检测结果显示f-MLP诱导ERK磷酸化,而E2和PD98059有效抑制f-MLP的这种作用.另外,雌二醇能有效地增加MKP-1的表达.结论雌二醇可能通过增加MKP-1蛋白降低ERK磷酸化,从而抑制f-MLP诱导的体外中性粒细胞迁移及超氧化. 展开更多
关键词 雌二醇 超氧化物类 中性粒细胞迁移 MKP-1/ERK 类风湿性关节炎
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PA—MSHA对脓毒症大鼠中性粒细胞移行影响的研究 被引量:1
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作者 秦怡 李新宇 +5 位作者 李良海 王晓燕 王桂祯 周新 任屹 张雷 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期676-679,I0001,共5页
目的通过观察铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝素(PA—MSHA)对脓毒症大鼠模型中性粒细胞移行的影响,探讨脓毒症的发病机制及PA—MSHA在脓毒症防治中的作用。方法将实验大鼠随机分为6组,即假手术组(c组)、脓毒症7h组(s7组)、脓毒症15... 目的通过观察铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝素(PA—MSHA)对脓毒症大鼠模型中性粒细胞移行的影响,探讨脓毒症的发病机制及PA—MSHA在脓毒症防治中的作用。方法将实验大鼠随机分为6组,即假手术组(c组)、脓毒症7h组(s7组)、脓毒症15h组(S15组)、PA—MSHA预处理组(PA组)、PA—MSHA预处理脓毒症7h组(PA—s7组)和PA—MSHA预处理脓毒症15h组(PA—S15组)。腹腔注射人粪便悬液制作多微生物腹腔感染脓毒症模型。假手术组腹腔注射等量生理盐水,预处理组在造模前连续7d给予0.3mLPA—MSHA皮下注射。观察大鼠一般情况及72h生存率;采用percoll非连续密度离心法分离外周中性粒细胞,应用transwell小室法测定各组大鼠中性粒细胞体外移行数量。结果s7组及S15组大鼠一般情况较PA—s7组及PA—S15组严重。与s组比较,PA—S组72h累积生存率明显增加(P〈0.01)。s7组、S15组中性粒细胞体外移行数明显低于C组(P〈0.01),且S15组中性粒细胞数目明显低于s7组(P〈0.叭)。与s7组比较,PA—s7组中性粒细胞移行数量明显升高(P〈0.01)。结论脓毒症时,中性粒细胞体外移行作用受到抑制,随着病情进展,中性粒细胞体外移行受抑制程度更加明显。PA—MSHA可能通过增强脓毒症早期中性粒细胞移行作用,提高生存率,对脓毒症具有一定的防治作用。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝素(PA—MSHA) 脓毒症 中性粒细胞移行
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