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湖泊中军团菌的巢式PCR-MPN检测法
1
作者
王娜
刘庆
+2 位作者
邢鹏
余多慰
吴庆龙
《环境科学与技术》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期107-110,共4页
为了直接检测环境水体中军团菌的存在,文章将巢式PCR与倍比稀释法相结合(巢式PCR-MPN法),采用两对引物扩增环境样品基因组DNA。将检测到含有军团菌的样品DNA模板进行十倍梯度稀释,由最低检测的稀释度,计算出样品中军团菌的细胞数,同时...
为了直接检测环境水体中军团菌的存在,文章将巢式PCR与倍比稀释法相结合(巢式PCR-MPN法),采用两对引物扩增环境样品基因组DNA。将检测到含有军团菌的样品DNA模板进行十倍梯度稀释,由最低检测的稀释度,计算出样品中军团菌的细胞数,同时确定方法检测的灵敏度。并用克隆建库、构建系统树的方法来验证该文研究方法的特异性。研究结果表明,巢式PCR第二步后获得的序列均为军团菌序列,该方法军团菌DNA的检出限可以低至2.74 fg/μL。该研究建立的水体军团菌检测方法具有简便快捷、特异性好、灵敏度高的特点。
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关键词
军团菌
巢式
pcr
-
mpn
法
湖泊
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职称材料
题名
湖泊中军团菌的巢式PCR-MPN检测法
1
作者
王娜
刘庆
邢鹏
余多慰
吴庆龙
机构
南京师范大学生命科学学院
中国科学院南京地理与湖泊研究所湖泊与环境国家重点实验室
出处
《环境科学与技术》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期107-110,共4页
基金
国家重点基础研究发展规划(973)项目(2008CB418104)
中国科学院方向性项目(KZCX1-YW-14-1
+1 种基金
KZCX2-YW-JC302)
江苏省人才攀登计划项目(BK2009024)
文摘
为了直接检测环境水体中军团菌的存在,文章将巢式PCR与倍比稀释法相结合(巢式PCR-MPN法),采用两对引物扩增环境样品基因组DNA。将检测到含有军团菌的样品DNA模板进行十倍梯度稀释,由最低检测的稀释度,计算出样品中军团菌的细胞数,同时确定方法检测的灵敏度。并用克隆建库、构建系统树的方法来验证该文研究方法的特异性。研究结果表明,巢式PCR第二步后获得的序列均为军团菌序列,该方法军团菌DNA的检出限可以低至2.74 fg/μL。该研究建立的水体军团菌检测方法具有简便快捷、特异性好、灵敏度高的特点。
关键词
军团菌
巢式
pcr
-
mpn
法
湖泊
Keywords
Legionella
spp
nest
-
pcr
-
mpn
method
freshwater
分类号
X830.2 [环境科学与工程—环境工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
湖泊中军团菌的巢式PCR-MPN检测法
王娜
刘庆
邢鹏
余多慰
吴庆龙
《环境科学与技术》
CAS
CSCD
北大核心
2011
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