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舌癌脑转移细胞系Tb的建立及形态和生长特性 被引量：12
1
作者 吴军正 陈建元 +2 位作者 李峰 李焰 张洪 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期452-453,共2页
目的：建立舌癌远隔脏器转移细胞系。方法：采用癌细胞尾静脉注射法、细胞培养法从裸鼠体内获取人舌癌Tca8113细胞的远隔脏器转移灶细胞系，用染色体显示、细胞形态及细胞致瘤性观察证明其性质，用细胞计数法，流式细胞仪检测细胞增殖... 目的：建立舌癌远隔脏器转移细胞系。方法：采用癌细胞尾静脉注射法、细胞培养法从裸鼠体内获取人舌癌Tca8113细胞的远隔脏器转移灶细胞系，用染色体显示、细胞形态及细胞致瘤性观察证明其性质，用细胞计数法，流式细胞仪检测细胞增殖速度。结果：20只受试探鼠中1只神经症状明显，取脑组织行细胞培养获得细胞系，传代150次以上，维持培养3年，生长稳定，倍增时间为20．1h，S期细胞占29．0％，染色体众数为66，保持人类染色体形态，细胞形态与Tca8113相似，所致棵鼠皮下肿瘤为典型鳞状上皮癌，将该细胞系命名为Tb。结论：Tb细胞系是八舌癌Tca8113细胞在裸鼠体内的脑转移细胞系。 展开更多
关键词 舌癌 肿瘤转移 脑转移瘤 细胞系Tb
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肺癌细胞系XWLC-05的建立及其生物学特性研究 被引量：11
2
作者 闫凤彩 王秦秦 +3 位作者 阮永华 马丽菊 贾建桃 金克炜 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期21-25,共5页
背景与目的:云南省宣威地区是我国肺癌高发地区之一,女性肺癌死亡率居全国首位,本研究旨在建立云南宣威女性肺腺癌细胞系,为肺癌高发区的防治研究提供理想的体外实验模型。方法:以手术切除的肺癌组织标本进行原代培养,通过光镜观察、电... 背景与目的:云南省宣威地区是我国肺癌高发地区之一,女性肺癌死亡率居全国首位,本研究旨在建立云南宣威女性肺腺癌细胞系,为肺癌高发区的防治研究提供理想的体外实验模型。方法:以手术切除的肺癌组织标本进行原代培养,通过光镜观察、电镜观察、绘制生长曲线、计算倍增时间、双层软琼脂培养、流式细胞仪、染色体及其显带分析、肿瘤标志物检测、异体移植实验及免疫组化检测等对其生物学特性进行分析鉴定,建立细胞系。结果:体外培养细胞生长稳定,细胞形态学、增殖动力学及浸润性生长结果表明该细胞系符合恶性细胞特征,染色体数目分布在55～69之间,众数为60～63;小鼠接种成瘤率为100%,瘤细胞形态与原患者的病理切片相似,命名为XWLC-05(XuanweiLungCancer-05)。结论:该细胞系符合建系标准,是一株新建的人肺腺癌细胞系。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 细胞系 细胞培养 G显带 免疫组化 异种移植
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蛋白激酶C在鼻咽癌细胞生长中的作用 被引量：13
3
作者 陈南岳 鲍波 赵明伦 《广东医学院学报》 1995年第2期93-96,共4页
通过耗竭蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ），用ＰＫＣ抑制剂和激活剂等方法，观察ＰＫＣ在鼻咽癌细胞系ＣＮＥ－２Ｚ生长中的作用。发现：随ＴＰＡ浓度增大，细胞ＰＫＣ含量降低，生长指数也逐渐减少；作用于ＰＫＣ蛋白催化区的ＰＫＣ抑制剂Ｓｔａ... 通过耗竭蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ），用ＰＫＣ抑制剂和激活剂等方法，观察ＰＫＣ在鼻咽癌细胞系ＣＮＥ－２Ｚ生长中的作用。发现：随ＴＰＡ浓度增大，细胞ＰＫＣ含量降低，生长指数也逐渐减少；作用于ＰＫＣ蛋白催化区的ＰＫＣ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）与作用于调节区的抑制剂Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ）均抑制ＣＮＥ－２Ｚ细胞的生长，最低有效浓度分别为２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ与１０－５ｍｏｌ／Ｌ，随浓度增大而作用增强；ＰＫＣ刺激剂ＯＡＧ（０．１～１００μｇ／ｍｌ）单独作用时对ＣＮＥ－２Ｚ的生长无明显影响，但４μｇ／ｍｌ可基本阻断ＳＴ或ＳＳ最低有效浓度的抑制效应。提示：ＰＫＣ在鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ生长中起重要作用，阻断ＰＫＣ的作用将为鼻咽癌的防治提供新的途径。 展开更多
关键词 蛋白激酶C 鼻咽肿瘤 细胞株 病因 病理
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肿瘤转移抑制基因kai1对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响 被引量：6
4
作者 宋晖 辛晓燕 +2 位作者 肖锋 王德堂 郭会玲 《现代妇产科进展》 CSCD 2003年第5期348-350,共3页
目的 :探讨肿瘤转移抑制基因kai1对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响。方法 :脂质体介导kai1cDNA转染高转移性人卵巢癌细胞系HO 891 0PM ,免疫细胞化学S P法检测转染前后细胞内kai1蛋白的表达。用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法、平板克隆... 目的 :探讨肿瘤转移抑制基因kai1对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响。方法 :脂质体介导kai1cDNA转染高转移性人卵巢癌细胞系HO 891 0PM ,免疫细胞化学S P法检测转染前后细胞内kai1蛋白的表达。用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法、平板克隆形成实验观察kai1基因对细胞增殖能力的影响 ,经细胞粘附实验、体外侵袭力实验比较转染前后细胞侵袭能力的变化。结果 :转染kai1cDNA后HO 891 0PM细胞内可检测到kai1蛋白的稳定表达 ,细胞增殖能力较前无明显变化 ,侵袭能力明显下降。结论 :外源性肿瘤转移抑制基因kai1可通过脂质体有效转染高转移性人卵巢癌细胞系HO 891 0PM ,降低其侵袭能力 。 展开更多
关键词 基因 KAIL 卵巢肿瘤 肿瘤转移 细胞系
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PI3K/Akt信号转导通路与卵巢癌顺铂耐药相关性的研究 被引量：11
5
作者 张栋 孔德璇 +1 位作者 和珍珍 瞿全新 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第4期361-363,共3页
目的:研究卵巢癌顺铂(DDP)耐药与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路的关系。方法:根据LY294002作用浓度将SKOV3和SKOV3/DDP细胞分别分为5μmol/L+DDP、10μmol/L+DDP、20μmol/L+DDP、40μmol/L+DDP、DDP组及对照组。... 目的:研究卵巢癌顺铂(DDP)耐药与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路的关系。方法:根据LY294002作用浓度将SKOV3和SKOV3/DDP细胞分别分为5μmol/L+DDP、10μmol/L+DDP、20μmol/L+DDP、40μmol/L+DDP、DDP组及对照组。MTT法检测40μmol/L LY294002对SKOV3和SKOV3/DDP细胞DDP敏感性的影响;Western blot法检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞各实验组PI3K、Akt表达水平。结果:SKOV3和SKOV3/DDP细胞经LY29400240μmol/L作用后,对DDP敏感性分别增加了67.36%、76.56%。LY294002可降低SKOV3和SKOV3/DDP细胞中PI3K和Akt表达。SKOV3细胞对照组PI3K和Akt蛋白相对浓度值均低于SKOV3/DDP细胞对照组(t分别为26.005和23.477,均P<0.05)。结论:PI3K/Akt信号通路异常与卵巢癌DDP耐药有关,抑制PI3K/Akt信号通路能增强卵巢癌DDP敏感性。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 癌 顺铂 抗药性 肿瘤 细胞系 肿瘤 1-磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶类
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骨骼肌源性抑瘤物的体外初步研究 被引量：8
6
作者 罗成华 蒋彦永 +1 位作者 刘永学 李向红 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期17-20,共4页
目的　观察骨骼肌细胞条件培养液 (MCM)体外对肿瘤细胞增殖的影响 ,并初步分析骨骼肌源性抑瘤物的理化特性及抑瘤机理。　方法　用噻唑蓝分析法 (MTT法 )分析新生大鼠MCM对不同肿瘤细胞系的体外抑瘤作用。用超滤分离、热灭活处理、胰酶... 目的　观察骨骼肌细胞条件培养液 (MCM)体外对肿瘤细胞增殖的影响 ,并初步分析骨骼肌源性抑瘤物的理化特性及抑瘤机理。　方法　用噻唑蓝分析法 (MTT法 )分析新生大鼠MCM对不同肿瘤细胞系的体外抑瘤作用。用超滤分离、热灭活处理、胰酶消化、凋亡分析及形态学观察分析骨骼肌源性抑瘤物的理化特性及抑瘤机理。　结果　MCM与哺乳动物源性肿瘤细胞 (小鼠骨髓瘤SP2 / 0及Wistar大鼠癌肉瘤Walker2 5 6 )、人源性白血病细胞 (人慢性粒细胞白血病K5 6 2及人急性淋巴细胞白血病HL6 0 )、实体瘤细胞 (人结肠腺癌细胞LS 174 T及人前列腺癌细胞PC3 M) ,以及不同转移潜能肺癌细胞 (人肺癌低转移株PLA80 1 C及人肺癌高转移株PLA80 1 D)共同培养后 ,肿瘤细胞的增殖显著下降 (P <0 0 1～ 0 0 5 ) ,且肿瘤细胞增殖呈不同程度MCM浓度依赖性。MCM与正常细胞 (兔关节骺板细胞RGP 2 )共同培养后 ,细胞增殖无下降。同一来源肺癌细胞 ,在MCM稀释至原液的 6 2 5 %时 ,仍见高转移株增殖显著受抑 (P <0 0 1～ 0 0 5 ) ,而在MCM稀释至原液的 2 5 %时 ,低转移株增殖即无显著受抑。MCM的抑瘤活性存在于分子量 10 0 0 0以下超滤组分 ,热灭活后活性消失 ,胰蛋白酶消化后活性仍存在。MCM不引起K5 6 2细胞凋亡 ,而导致肿瘤细胞膜变? 展开更多
关键词 骨骼肌转移瘤 肿瘤转移 肿瘤细胞株 细胞凋亡
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人卵巢癌细胞系具有不同转移潜能亚系的分离及体内和体外鉴定 被引量：8
7
作者 陈洁 刘鸣 汤春生 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期350-352,共3页
目的:克隆具有不同转移潜能的癌细胞亚系,并对其侵袭转移能力进行体内外鉴定。方法:应用有限稀释法对卵巢癌细胞系SKOV3进行单细胞克隆,共分离出14个克隆亚系,根据细胞电泳率,流式细胞仪检测所得细胞周期,筛选出3个电泳率差异较大的克... 目的:克隆具有不同转移潜能的癌细胞亚系,并对其侵袭转移能力进行体内外鉴定。方法:应用有限稀释法对卵巢癌细胞系SKOV3进行单细胞克隆,共分离出14个克隆亚系,根据细胞电泳率,流式细胞仪检测所得细胞周期,筛选出3个电泳率差异较大的克隆亚系(S1、S6和S14)。并应用体内外试验检测各亚系的生物学特性及其侵袭转移能力。结果:S1为高转移亚系,体外生长快,侵袭人工基底膜细胞数及软琼脂集落形成数显著多于其他二者,裸鼠体内100%成瘤,70%转移;而S14为不转移亚系,体外生长慢,侵袭人工基底膜细胞数及软琼脂集落形成数显著少于其他二者,裸鼠体内仅20%成瘤,无1例发生转移。结论:该系统为来自同一肿瘤母系,遗传背景完全相同,却具有不同转移潜能的异质性克隆,为肿瘤转移机制的研究和克隆肿瘤转移相关基因提供了良好模型。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 肿瘤浸润 细胞系
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人原发性胆囊癌细胞系SGC-996的建立 被引量：8
8
作者 杨耀琴 陶惠红 杨虎川 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2003年第6期457-459,共3页
目的 建立原发性胆囊癌细胞系,对其生物学特性进行初步观察。方法 从1例女性胆囊乳头状腺癌组织取材,分离癌细胞进行体外细胞培养、传代,进行生物学特性观察。结果 该细胞系为典型的上皮型多边形细胞,在含10%新生小牛血清的RPMI1640培... 目的 建立原发性胆囊癌细胞系,对其生物学特性进行初步观察。方法 从1例女性胆囊乳头状腺癌组织取材,分离癌细胞进行体外细胞培养、传代,进行生物学特性观察。结果 该细胞系为典型的上皮型多边形细胞,在含10%新生小牛血清的RPMI1640培养液中生长稳定,增殖旺盛,有重叠生长现象。群体倍增时间约为48 h,分裂指数较高,染色体数目为亚三倍体。无胸腺裸鼠皮下异体接种全部致瘤。电镜观察细胞表面微绒毛丰富,细胞间偶见桥粒等细胞连接。未见病毒颗粒、支原体及细茵。结论 该细胞符合一般体外培养细胞系标准,定名为SGC-996,可作为人胆囊癌研究的模型。 展开更多
关键词 胆囊肿瘤 细胞系 细胞培养 人
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人鼻咽癌耐药细胞株的建立及其与LRP的关系 被引量：8
9
作者 刘津 唐安洲 +3 位作者 何光耀 高艺玲 康敏 景艳 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第16期938-942,共5页
目的:建立人鼻咽癌多药耐药细胞株TW03/DDP并研究其与肺耐药相关蛋白(LRP)的关系。方法:以顺铂(DDP)为诱导药物,诱导人鼻咽癌细胞TW03,建立鼻咽癌多药耐药细胞株TW03/DDP;MTT法检测药物敏感性,流式细胞术检测细胞周期的改变,并绘制细胞... 目的:建立人鼻咽癌多药耐药细胞株TW03/DDP并研究其与肺耐药相关蛋白(LRP)的关系。方法:以顺铂(DDP)为诱导药物,诱导人鼻咽癌细胞TW03,建立鼻咽癌多药耐药细胞株TW03/DDP;MTT法检测药物敏感性,流式细胞术检测细胞周期的改变,并绘制细胞生长曲线、测定倍增时间,观察细胞形态学变化;通过免疫细胞化学法、免疫印迹法、RT-PCR检测LRP的表达结果:TW03/DDP对顺铂、5-氟尿嘧啶、阿霉素、阿糖胞苷、长春新碱等药物的耐药指数分别是40.85、5.65、26.68、1.60与28.19,其半数抑制浓度与TW03比较差异有统计学意义(P<0.05);耐药细胞株的细胞倍增时间相对于其亲本细胞略有延长,其G_0/G_1期明显减少而G_2/M期则相对增加;免疫细胞化学、免疫印迹法、RT-PCR检测显示LRP及其mRNA在TW03/DDP中的表达明显高于TW03,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:本研究建立了人鼻咽癌多药耐药细胞株TW03/DDP,其LRP在蛋白水平及imRNA水平的表达高于亲本细胞,表明LRP的表达上调与其耐药机制有密切关系。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 细胞系 多药耐药相关蛋白
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子宫内膜癌顺铂耐药细胞株的建立和鉴定及耐药机制研究 被引量：7
10
作者 徐启英 陈勇华 +3 位作者 赵丽君 李小平 王建六 魏丽惠 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期533-537,共5页
目的建立子宫内膜癌顺铂耐药细胞株ISH／DDP，鉴定其生物学特性，并探讨其顺铂耐药的机制。方法采用顺铂浓度逐步递增联合大剂量顺铂冲击方法，在体外连续诱导、培养子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞，建立子宫内膜癌顺铂耐药细胞株ISH／DD... 目的建立子宫内膜癌顺铂耐药细胞株ISH／DDP，鉴定其生物学特性，并探讨其顺铂耐药的机制。方法采用顺铂浓度逐步递增联合大剂量顺铂冲击方法，在体外连续诱导、培养子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞，建立子宫内膜癌顺铂耐药细胞株ISH／DDP。非放射性细胞增殖法（MTS法）测定ISH／DDP细胞对顺铂的耐药指数；绘制细胞生长曲线，计算细胞群体倍增时间；流式细胞术检测ISH／DDP细胞的细胞周期比例；免疫细胞化学法检测ISH／DDP细胞中耐药蛋白——乳腺癌耐药蛋白（BCRP）、P糖蛋白（P—gp）以及谷胱甘肽S转移酶π（GST-π）蛋白的表达水平，以综合积分表示。结果Ishikawa细胞在体外采用顺铂浓度逐步递增联合大剂量顺铂冲击方法连续诱导、培养，历时10个月，成功建立了子宫内膜癌顺铂耐药细胞株ISH／DDP，其耐药指数为3．77。Ishikawa细胞和ISH／DDP细胞的群体倍增时间分别为34．1h和40．4h，两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。与Ishikawa细胞相比，ISH／DDP细胞的S期细胞比例[分别为（44．2±6．1）％和（55．3±8．4）％]增加，G2／M期细胞比例[分别为（11．9±0．7）％和（5．7±2．4）％]减少，差异均有统计学意义（P〈0．05）；G0／G1期细胞比例[分别为（44．3±5．7）％和（39．0±10．7）％]减少，但差异无统计学意义（P〉0．05）。ISH／DDP细胞中BCRP蛋白的表达水平为（16．3±2．0）分，高于Ishikawa细胞的（13．4±1．5）分，差异有统计学意义（P〈0．05）；而Ishikawa和ISH／DDP细胞中P—gp蛋白的表达水平分别为（16．1±1．0）和（15．5±1．2）分，GST-π蛋白的表达水平分别为（14．9±1．1）和（15．2±1．9）分，分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论ISH／DDP细胞具有耐药表型及耐药细胞的生物学特性；其耐药机制可能与细胞中BCRP蛋白的过度表� 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 顺铂 抗药性 肿瘤 细胞系 肿瘤 肿瘤蛋白质类 ATP结 合匣式转运子
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EpCAM抗体偶联纳米磁珠阳性分离实体瘤外周血循环肿瘤细胞方法的建立 被引量：6
11
作者 任传利 韩崇旭 +5 位作者 王大新 汪步海 徐兴祥 章佳新 周林 吴志峰 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期218-223,共6页
目的建立EpCAM抗体偶联纳米磁珠阳性分离上皮来源的实体瘤外周血CTC的方法（简称“磁珠分离法”），探讨该方法分离CTC的灵敏度和应用意义。方法用7．5ml健康志愿者外周血裂解红细胞分别倍比稀释加入5、10、20、50、100个乳腺癌细胞系M... 目的建立EpCAM抗体偶联纳米磁珠阳性分离上皮来源的实体瘤外周血CTC的方法（简称“磁珠分离法”），探讨该方法分离CTC的灵敏度和应用意义。方法用7．5ml健康志愿者外周血裂解红细胞分别倍比稀释加入5、10、20、50、100个乳腺癌细胞系MCF7、食管癌细胞系KYSE70、胰腺癌细胞系BxPC-3及胃癌细胞系9811P，通过磁珠分离法富集癌细胞，荧光显微镜下检测体外加入癌细胞的回收率。然后，用磁珠分离法富集未治疗的30例食管癌（Ⅰ期＋Ⅱ期6例、Ⅲ期＋Ⅳ期24例）、35例乳腺癌（Ⅰ期＋Ⅱ期15例、Ⅲ期＋Ⅳ期20例）、30例胰腺癌（Ⅰ期＋Ⅱ期5例、Ⅲ期＋Ⅳ期25例）、33例胃癌患者（Ⅰ期＋Ⅱ期13例、Ⅲ期＋Ⅳ期20例）和30例慢性胃炎及30名健康志愿者的CTC，同时结合ⅠF和HE染色鉴定各组的CTC。另外，用FISH分别检测分析食管癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌患者200个CTC中8号和20号染色体拷贝数水平。结果用4，6-二眯-2苯吲哚（DAPⅠ）染色食管癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌等4种癌细胞系并加入健康志愿者7．5ml外周血的组内试验中，荧光显微镜下计数4种癌细胞的组内的平均回收率分别为87％、87％、86％和88％；5种稀释梯度的细胞数在4种癌细胞系的组问的平均回收率分别是88％、85％、87％、88％和87％。在10^7的外周血白细胞中能富集到1个癌细胞。采用磁珠分离法从食管癌、乳腺癌、胰腺癌及胃癌患者中检出≥2个CTC的阳性率分别为50％（15／30）、63％（22／35）、70％（21／30）及61％（20／33），健康志愿者和炎症患者均未检出CTC。食管癌、乳腺癌、胰腺癌组分别与健康对照组和炎症组比较，经精确概率法分析，差异均有统计学意义（P值均为0．000）。80％的食道癌、75％的乳腺癌、65％的胰腺癌和59％的胃癌患者CTC中均发生8号和20号染色体非整倍体改变。结论建立� 展开更多
关键词 抗原 肿瘤 细胞黏附分子 纳米粒子 肿瘤循环细胞 细胞系 肿瘤
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CIP2A在肝细胞癌中的表达及其临床意义 被引量：7
12
作者 游经宏 周凯 +4 位作者 黄品助 邱际亮 李斌奎 洪健 元云飞 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期248-252,共5页
目的检测CIP2AmRNA在肝细胞癌中的表达，探讨其与临床病理因素和预后的关系。方法用半定量RT-PCR检测4株人肝癌细胞系、1株永生化肝细胞系以及120例肝细胞癌组织、癌旁肝组织和20例正常无肝硬化肝组织中CIP2AmRNA的表达，并结合肝癌临... 目的检测CIP2AmRNA在肝细胞癌中的表达，探讨其与临床病理因素和预后的关系。方法用半定量RT-PCR检测4株人肝癌细胞系、1株永生化肝细胞系以及120例肝细胞癌组织、癌旁肝组织和20例正常无肝硬化肝组织中CIP2AmRNA的表达，并结合肝癌临床病理因素及预后进行分析。结果CIP2AmRNA在人肝癌细胞系Hep—G2、MHCC-97H、SMMC-7721、BEL-7402中均表达，而在永生化肝细胞系L-02中无表达。CIP2AmRNA在肝癌组织中的阳性率（78．3％）明显高于癌旁肝组织（28．3％）和正常无肝硬化肝组织（5．0％）（P〈0．01）。肝癌组织CIP2AmRNA的表达与肿瘤大小、病理分级和TNM分期相关（P〈0．05）。肝癌组织中CIP2AmRNA阳性组和阴性组5年总生存率分别为44．5％和65．1％，5年无瘤生存率分别为30．1％和53．7％，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论CIP2AmRNA在肝癌细胞系及肝癌组织中高表达，可能在肝癌发生发展中发挥重要作用，可以作为预后预测的一个重要参考指标。 展开更多
关键词 肝细胞癌 肝癌细胞系 CIP2A RT—PCR
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氯丙嗪对体外培养人宫颈癌Hela细胞株的生长抑制作用 被引量：7
13
作者 孙丽君 张梅 郑英 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第2期344-345,共2页
目的:探讨氯丙嗪对人宫颈癌Hela细胞株的体外抑制作用。方法:采用MTT测定法,观察不同浓度氯 丙嗪(0μmol/L,3.0μmol/L,6.0μmol/L,12.5μmol/L,25.0μmol/L,50.0μmol/L,100.0μmol/L)作用后体外培养 的人宫颈癌Hela细胞的细胞增... 目的:探讨氯丙嗪对人宫颈癌Hela细胞株的体外抑制作用。方法:采用MTT测定法,观察不同浓度氯 丙嗪(0μmol/L,3.0μmol/L,6.0μmol/L,12.5μmol/L,25.0μmol/L,50.0μmol/L,100.0μmol/L)作用后体外培养 的人宫颈癌Hela细胞的细胞增殖抑制率,并于用药后不同时间点观察细胞形态学变化。结果:不同浓度的氯丙嗪 对Hela细胞生长均有抑制作用,随药物浓度的增加,抑制作用加强。氯丙嗪浓度为3.0μmol/L即呈现明显的生长 抑制作用,抑制率为7.91%;浓度为100.0μmol/L时抑制率最高,达59.39%。用药4h后镜下即可见部分细胞贴 壁性降低,肿胀呈球形,核膜溶解,不见核的轮廓;部分细胞裂解呈碎片状;用药8h后碎片明显增多。结论:氯丙嗪 对人宫颈癌Hela细胞株具有体外生长抑制作用。 展开更多
关键词 氯丙嗪 宫颈肿瘤 HELA细胞株
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前列腺癌转移细胞模型——LNCaP细胞模型 被引量：4
14
作者 张惠 周建光 黄翠芬 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2005年第6期576-579,共4页
前列腺癌是严重威胁欧美国家男性健康的恶性肿瘤。研究前列腺癌发生与发展的分子机制，尤其是从雄激素依赖性向雄激素非依赖性转化的分子机制对该病的诊断和治疗极为重要。前列腺癌转移LNCaP细胞模型包括LNCaP、C4、C4-2和C4-2B等一系... 前列腺癌是严重威胁欧美国家男性健康的恶性肿瘤。研究前列腺癌发生与发展的分子机制，尤其是从雄激素依赖性向雄激素非依赖性转化的分子机制对该病的诊断和治疗极为重要。前列腺癌转移LNCaP细胞模型包括LNCaP、C4、C4-2和C4-2B等一系列的遗传背景相同的细胞系，成功模拟前列腺癌细胞从雄激素依赖性发展到雄激素非依赖性，从不转移到转移各个阶段的基本生物行为学的特征，已成为当前应用最为广泛的前列腺癌细胞模型之一。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 细胞系 LNCaP细胞系 雄激素类 肿瘤转移
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顺铂对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体逆转胃癌多药耐药现象的增敏作用及机制 被引量：6
15
作者 朱邢超 张开光 +4 位作者 王巧民 陈思 苟雅雯 崔喻芳 李琴 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期404-411,共8页
目的：研究顺铂（DDP）对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）逆转人胃腺癌耐长春新碱（ VCR） SGC7901-VCR细胞多药耐药现象的增敏作用，以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测不同化疗药物处理组SGC7901和SGC7... 目的：研究顺铂（DDP）对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）逆转人胃腺癌耐长春新碱（ VCR） SGC7901-VCR细胞多药耐药现象的增敏作用，以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测不同化疗药物处理组SGC7901和SGC7901-VCR细胞的半数抑制浓度（ IC50）和细胞存活率。以不同浓度的DDP和TRAIL单独或联合处理SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR、荧光定量PCR和Western blot法检测不同处理组中多种基因的mRNA和蛋白表达。以c-myc-siRNA干扰、重组c-myc质粒转染SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR和Western blot法检测不同处理组SGC7901-VCR细胞中死亡受体（ DR）4、DR5、c-myc基因的mRNA和蛋白表达。结果与单用TRAIL组和空白对照组比较，联合DDP后，VCR、DDP、阿霉素和氟尿嘧啶对SGC7901-VCR细胞的IC50均明显降低（均P＜0．05）。 TRAIL联合DDP时，对SGC7901-VCR细胞中caspase-3的激活作用以及对DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路、耐药基因MDR1、MRP1的抑制程度明显高于TRAIL单独作用时（均P＜0．01）。以siRNA干扰沉默c-myc后，SGC7901-VCR细胞中c-myc、DR4和DR5的表达明显减低（均P＜0．01）；以重组 c-myc质粒转染高表达 c-myc后，SGC7901-VCR细胞中 c-myc、DR4和DR5的表达明显增加（均P＜0．01）。10 ng／ml TRAIL组、0．25μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组和0．5μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组c-myc蛋白的相对表达量分别为0．314±0．012、0．735±0．026和0．876±0．028，细胞色素C（cyt C）蛋白的相对表达量分别为0．339±0．036、0．593±0．020和0．735±0．031，差异有统计学意义（P＜0．05）；DR4、DR5、活性caspase-9和活性caspase-3蛋白的相对表达量也随着DDP 浓度的增加而增加。结论 SGC7901-VCR的多药耐药性与DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路的激活以及耐药基因MDR1和MRP1的高表达有关。与TRAIL 联合时，DDP能够通过增加c-myc的表达促进DR4和D 展开更多
关键词 胃肿瘤 顺铂 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 多药耐药相关蛋白质类 抗药性 肿瘤 细胞系
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5-氨基酮戊酸光动力疗法对宫颈癌细胞株凋亡的诱导作用 被引量：5
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作者 贺桂芳 卞美璐 +3 位作者 赵亚薇 向青 李红艳 肖诚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第9期897-904,共8页
背景与目的:5-氨基酮戊酸-光动力疗法(5-aminolevulinic acidmediated photodynamic therapy,ALA-PDT)是近年来兴起的一种肿瘤消融新技术,其作用于宫颈癌细胞的机制尚不清楚。本课题探讨ALA-PDT对宫颈癌细胞凋亡的影响及其相关机制。方... 背景与目的:5-氨基酮戊酸-光动力疗法(5-aminolevulinic acidmediated photodynamic therapy,ALA-PDT)是近年来兴起的一种肿瘤消融新技术,其作用于宫颈癌细胞的机制尚不清楚。本课题探讨ALA-PDT对宫颈癌细胞凋亡的影响及其相关机制。方法:用MTT法检测ALA-PDT对8种人宫颈癌细胞增殖的影响,并筛选出ALA-PDT对宫颈癌细胞增殖影响的最佳作用参数。采用Annexin V-FITC/PI双染法、Hoechst33342染色法和May-Grünwald-Farbstoff Giemsa染色法检测ALA-PDT对Me180细胞凋亡的影响。采用PI染色结合流式细胞术分析ALA-PDT对Me180细胞周期的影响。采用实时荧光定量RT-PCR法检测ALA-PDT对Me180细胞survivin等基因mRNA的影响,Western blot检测对Survivin蛋白表达的影响。结果:8种人宫颈癌细胞株中,Me180细胞株对ALA-PDT最敏感,与其它细胞株比较差异有统计学意义。ALA2mmol/L、10J/cm2激光剂量孵育3h为ALA-PDT体外杀伤Me180细胞较理想的实验条件,在该条件下ALA的IC50为7.28×10-4mmol/L。ALA-PDT可显著诱导Me180细胞凋亡,并可将细胞阻滞于G0/G1期。ALA-PDT可显著抑制Me180细胞survivin基因的mRNA和蛋白表达。结论:ALA-PDT在体外对人宫颈癌Me180细胞有明显的增殖抑制作用,能诱导Me180细胞发生凋亡,其机理可能与抑制survivin基因表达有关。 展开更多
关键词 5-氨基酮戊酸 光动力疗法 凋亡 宫颈肿瘤 宫颈癌细胞株
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长春新碱耐药结肠癌细胞株HCT-8／VCR的建立及其耐药机制的初步研究 被引量：5
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作者 李长龙 刘建文 +3 位作者 萨晓婴 邓皖利 许建华 范忠泽 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期31-34,共4页
目的:建立长春新碱(vincristine,VCR)耐药结肠癌细胞株,初步探讨该细胞株的多药耐药机制。方法:通过逐步增加药物浓度的方法建立VCR耐药结肠癌细胞株。细胞毒实验采用MTT法,细胞周期测定采用碘化丙啶荧光染色法,P-糖蛋白(P-gp)测定采用... 目的:建立长春新碱(vincristine,VCR)耐药结肠癌细胞株,初步探讨该细胞株的多药耐药机制。方法:通过逐步增加药物浓度的方法建立VCR耐药结肠癌细胞株。细胞毒实验采用MTT法,细胞周期测定采用碘化丙啶荧光染色法,P-糖蛋白(P-gp)测定采用FCM方法,细胞内VCR浓度测定采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法,多药耐药相关基因(MDR1、MRP1)的表达采用RT-PCR方法检测。结果:HCT-8/VCR的细胞倍增时间和细胞周期与敏感细胞株HCT-8相似。HCT-8/VCR对VCR的耐药倍数分别为19.7,对其他4种化疗药物也表现出不同的抗性。HCT-8/VCR细胞内VCR和DOX的累积量降低(P<0.01),且其细胞表面P-gp表达增加(P<0.01),MDR1 mRNA增加,但MRP1 mRNA没有变化。结论:建立了对VCR产生耐药的结肠癌细胞株HCT-8/VCR,其耐药机制可能为P-gp过量表达导致细胞外排活性增强,预期该细胞株可用于以P-gp为靶点的多药耐药逆转剂的研究。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 长春新碱 抗药性 肿瘤 细胞系 肿瘤
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人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型、细胞系建立及其生物学特性研究 被引量：4
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作者 葛海良 冯荻 +4 位作者 马安伦 张惠珍 王颖 袁明 蔡晓敏 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第3期134-138,共5页
目的　建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系。方法　将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下 ,成瘤后行鼠间传代 ,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系 ,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤... 目的　建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系。方法　将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下 ,成瘤后行鼠间传代 ,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系 ,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤和建系细胞进行一系列生物学特性检测。结果　历时 14个月传至 5代 ,皮下移植瘤存活率为 90 % ,持续 6个月 ,体外建系 (OVA 319)细胞生长稳定。镜下观察组织形态学和超微结构符合原肿瘤组织基本特征 ;染色体分布在 12～ 46条之间 ,多为异倍体 ,显示人类肿瘤异常染色体 ;流式细胞术和RT PCR技术分析原代、体内移植瘤和OVA 319细胞结果一致 ,表现为瘤细胞生长活跃、细胞周期分布相仿 ,MAGE 2基因在mRNA水平异常表达。结论　人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和OVA 展开更多
关键词 SCID小鼠 人卵巢癌 移植瘤模型 细胞系 瘤细胞 人类肿瘤 体外 建系 传代 生物学特性研究
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丁酸钠对人卵巢癌KK细胞和子宫内膜癌HHUA细胞生长的抑制作用 被引量：3
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作者 荣风年 胡新生 汤春生 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2002年第3期211-214,276,共5页
目的 :探讨丁酸钠 (NaB)对人卵巢癌KK细胞和子宫内膜癌HHUA细胞生长的影响和分子机制及其作为新型抗肿瘤药物的潜力。方法 :NaB作用于体外培养的人卵巢癌细胞系KK和人子宫内膜癌细胞系HHUA ,用HE染色及DNA荧光染色观察细胞形态学及染色... 目的 :探讨丁酸钠 (NaB)对人卵巢癌KK细胞和子宫内膜癌HHUA细胞生长的影响和分子机制及其作为新型抗肿瘤药物的潜力。方法 :NaB作用于体外培养的人卵巢癌细胞系KK和人子宫内膜癌细胞系HHUA ,用HE染色及DNA荧光染色观察细胞形态学及染色质改变 ,用流式细胞仪定量分析细胞周期分布及细胞凋亡 ,用2 %琼脂糖凝胶电泳检测DNAladder ,用Westernblot分析PARP、Fas、Bcl 2和Bax蛋白表达。结果 :NaB处理两种细胞 2 4小时后 ,低浓度 (≤ 2mol/L)出现细胞周期停止 ,G1期细胞百分率达 70 %以上 ;中浓度 (4mol/L和 10mol/L)出现典型凋亡细胞的形态学和染色质改变 ,高浓度 (>10mol/L)则引起细胞坏死。Westernblot分析显示NaB能上调HHUA细胞Fas蛋白表达 ,而Bcl 2和Bax蛋白表达水平不变。结论 :NaB通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡而抑制HHUA和KK细胞生长 ,浓度不同细胞的反应性也不同 ,低浓度诱导细胞周期G1期阻滞 ,中浓度诱导细胞凋亡 ,NaB对细胞生长的抑制作用具有药物浓度和时间依赖关系 ,其诱导HHUA细胞凋亡的机制可能与上调Fas蛋白表达有关。 展开更多
关键词 丁酸钠 卵巢癌 KK细胞 子宫内膜癌 HHUA细胞 抑制作用 妇科肿瘤 细胞周期阻滞 细胞凋亡
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NO对胃癌细胞系AGS增殖的影响 被引量：4
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作者 桑建荣 陈永昌 +1 位作者 邵根宝 黄晓佳 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第2期166-170,共5页
背景与目的:一氧化氮(nitric oxide,NO)参与机体内的多种生理和病理反应,它作为重要的生物介质在肿瘤发生、发展和死亡中的作用已成为肿瘤研究的热点。本实验通过研究NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)对胃癌细胞系AGS的作用,探... 背景与目的:一氧化氮(nitric oxide,NO)参与机体内的多种生理和病理反应,它作为重要的生物介质在肿瘤发生、发展和死亡中的作用已成为肿瘤研究的热点。本实验通过研究NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)对胃癌细胞系AGS的作用,探讨NO对胃癌细胞生长增殖的影响。方法:应用MTT法评价SNP对细胞生长的抑制,流式细胞术检测细胞周期的变化,RT-PCR检测增殖细胞核抗原(PCNA)和caspase-3的mRNA基因表达,Westernblot检测PCNA和caspase-3蛋白的表达。结果:SNP可剂量依赖性地抑制AGS细胞的生长,100、500、1000、1500、2000μmol/L SNP处理24h,细胞生长抑制率分别为(2.02±2.96)%、(10.82±2.21)%、(18.95±3.35)%、(26.88±2.54)%、(42.57±1.27)%;SNP可以使细胞周期发生变化,与对照组比较100、500、1000、1500、2000μmol/LSNP处理24h,S期细胞分别减少2.29%、7.8%、11.34%、20.49%、23.6%,G0/G1期细胞分别增加3.33%、9.3%、13.46%、21.37%、24.73%(P<0.05);随着SNP剂量增加和作用时间延长,PCNAmRNA和蛋白表达逐渐降低;caspase-3mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化。结论:NO能抑制AGS细胞的生长和增殖,诱导细胞的凋亡,其作用呈显著的浓度依赖性。 展开更多
关键词 胃肿瘤 一氧化氮 AGS细胞 增殖
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