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低剂量多杀菌素继代处理对小菜蛾nAChR基因表达的影响 被引量：3
1
作者 尹显慧 吴青君 +6 位作者 张友军 龙友华 吴小毛 李荣玉 李明 赵赞伟 王英 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1182-1188,共7页
【目的】探索多杀菌素对小菜蛾Plutella xylostella长期胁迫下的亚致死效应。【方法】采用低剂量(LC25)多杀菌素进行继代处理,应用叶片浸渍饲喂法分别测定不同处理世代小菜蛾种群Sub对多杀菌素的敏感性水平,并运用实时定量PCR法进一步... 【目的】探索多杀菌素对小菜蛾Plutella xylostella长期胁迫下的亚致死效应。【方法】采用低剂量(LC25)多杀菌素进行继代处理,应用叶片浸渍饲喂法分别测定不同处理世代小菜蛾种群Sub对多杀菌素的敏感性水平,并运用实时定量PCR法进一步检测低剂量多杀菌素处理后小菜蛾4龄幼虫烟碱型乙酰胆碱受体(n AChR)α亚基基因表达量变化。【结果】随着处理世代的增加,小菜蛾对多杀菌素的敏感性下降,至第10代(Sub10)其抗性倍数为2.70倍;同时对小菜蛾n AChRα亚基基因表达呈现一定的抑制作用,Sub10中n AChRα亚基基因的相对表达量较敏感种群SS下降了32.04%,且差异显著;而抗性种群RR(抗性倍数17.85)n AChRα亚基基因的相对表达量仅为SS的0.37倍。【结论】小菜蛾对多杀菌素敏感性可能与n AChRα亚基基因的表达量有关。本研究可为探究多杀菌素长期低剂量处理对小菜蛾抗药性发展的潜在影响提供一定依据。 展开更多
关键词 小菜蛾 多杀菌素 抗药性 烟碱型乙酰胆碱受体 基因表达
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我国棉花主产区棉蚜对吡虫啉的抗性监测及抗性机理 被引量：56
2
作者 崔丽 张靖 +3 位作者 齐浩亮 王芹芹 陆宴辉 芮昌辉 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1246-1253,共8页
【目的】由于生长周期短、繁殖率高,棉蚜Aphis gossypii容易对杀虫剂产生抗药性。本研究旨在明确我国棉花主产区棉蚜对吡虫啉的抗性水平及抗性机理。【方法】采用浸叶法测定了北京海淀,河北廊坊和邯郸,山东德州,河南许昌,以及新疆奎屯... 【目的】由于生长周期短、繁殖率高,棉蚜Aphis gossypii容易对杀虫剂产生抗药性。本研究旨在明确我国棉花主产区棉蚜对吡虫啉的抗性水平及抗性机理。【方法】采用浸叶法测定了北京海淀,河北廊坊和邯郸,山东德州,河南许昌,以及新疆奎屯和阿克苏地区棉蚜对吡虫啉的抗性水平;测定了不同种群棉蚜3种解毒酶(多功能氧化酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶)及乙酰胆碱酯酶的活性;并对靶标基因烟碱型乙酰胆碱受体(n AChR)β1亚基基因进行了突变检测。【结果】北京海淀、河南许昌和河北邯郸的棉蚜对吡虫啉敏感;河北廊坊、新疆阿克苏、山东德州及新疆奎屯地区的棉蚜对吡虫啉的抗性倍数(resistance ratio,RR)分别为22.6,26.3,53.5和61.1倍,为中等水平抗性。酶活力对比研究发现,阿克苏和奎屯地区的棉蚜多功能氧化酶的比活力分别是敏感种群(北京种群)的1.7和1.8倍,羧酸酯酶的比活力分别是敏感种群的1.6和1.7倍,谷胱甘肽S-转移酶的比活力均是敏感种群的1.5倍,但是乙酰胆碱酯酶比活力在棉蚜种群间差异不显著。靶标基因突变检测表明,河北廊坊、新疆阿克苏、山东德州及新疆奎屯棉蚜种群n AChRβ1亚基均存在与吡虫啉抗性相关的精氨酸到苏氨酸(R81T)突变。【结论】结果提示,多功能氧化酶、羧酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活力升高以及n AChRβ1亚基R81T突变与棉蚜对吡虫啉的抗性形成相关。 展开更多
关键词 棉蚜 吡虫啉 抗性 酶活力 烟碱型乙酰胆碱受体β1亚基
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激活星形胶质细胞α7乙酰胆碱能受体抑制β-淀粉样蛋白的聚集 被引量：6
3
作者 孔欣 禹文峰 官志忠 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第13期3112-3115,共4页
目的研究在星形胶质细胞内加入尼古丁后能否激活细胞内α7尼古丁乙酰胆碱能受体（n AChR）以及激活的α7n AChR对β-淀粉样蛋白（Aβ）的降解作用。方法分离新生乳鼠大脑皮质培养原代星形胶质细胞并纯化、传代,使用细胞免疫荧光法鉴定... 目的研究在星形胶质细胞内加入尼古丁后能否激活细胞内α7尼古丁乙酰胆碱能受体（n AChR）以及激活的α7n AChR对β-淀粉样蛋白（Aβ）的降解作用。方法分离新生乳鼠大脑皮质培养原代星形胶质细胞并纯化、传代,使用细胞免疫荧光法鉴定细胞的纯度。凝胶银染方法鉴定寡聚体聚集情况。试验分为正常对照组、激动剂组、拮抗剂组以及Aβ组激动剂＋Aβ组、拮抗剂＋Aβ组,用蛋白印迹法检测α7n AChR蛋白表达情况以及激活细胞内受体后对Aβ的降解作用。结果经过传代培养细胞得以纯化。体外制备好的Aβ1~42除了含少量的未聚集的单体（4 k D）外,主要以二聚体、三聚体、九聚体等不同聚集形式的寡聚体存在。尼古丁组与对照组相比α7n AChR表达明显升高（P〈0.01）,尼古丁组与拮抗剂组相比α7n AChR表达升高（P〈0.05）;收集的蛋白与上清液,尼古丁组与Aβ组相比Aβ的表达均明显降低（P〈0.01）,激动剂＋Aβ组与拮抗剂＋Aβ组相比Aβ的表达均明显降低（P〈0.01）。结论尼古丁可以激活星形胶质细胞内的α7n AChR,激活的α7n AChR对Aβ具有明显的降解作用,能够为预防和治疗阿尔茨海默氏病（AD）提供一个可能的方向。 展开更多
关键词 尼古丁 星形胶质细胞 α7乙酰胆碱能受体 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 寡聚体
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激活小胶质细胞α_7-nAChR减少Aβ蛋白所致的神经元毒性的研究 被引量：2
4
作者 雷露雯 李伟煊 +2 位作者 冯智敏 邓冲 陈翔 《药学研究》 CAS 2015年第8期435-438,共4页
目的研究激活小胶质细胞上的α7-烟碱型乙酰胆碱受体对减少由于β-淀粉样蛋白1-42沉积所致的慢性炎性反应对神经元毒性作用。方法取孕18 d的胎鼠大脑皮质做原代神经元的培养,选用微管相关蛋白-2与神经元特异性烯醇化酶作为神经元特异性... 目的研究激活小胶质细胞上的α7-烟碱型乙酰胆碱受体对减少由于β-淀粉样蛋白1-42沉积所致的慢性炎性反应对神经元毒性作用。方法取孕18 d的胎鼠大脑皮质做原代神经元的培养,选用微管相关蛋白-2与神经元特异性烯醇化酶作为神经元特异性标志物,用免疫细胞化学技术对神经元进行鉴定。培养10 d的神经元与小胶质细胞共同培养于带有膜插件的培养皿中。试验分空白对照组、β-淀粉样蛋白组、共培养组、烟碱预处理组,各组添加β-淀粉样蛋白1-42共培养96 h后,用流式细胞仪及免疫荧光法检测神经元的凋亡率。结果体外培养10 d的神经元,用免疫荧光及DAB显色鉴定神经元均能显色,细胞纯度达到了94.49%。激活组与未激活组相比神经元的凋亡率明显下降(P<0.05)。结论激活小胶质细胞上的α7-烟碱型乙酰胆碱受体能减少β-淀粉样蛋白介导的神经元凋亡,对神经元产生保护作用。 展开更多
关键词 α7-烟碱型乙酰胆碱受体 神经元 免疫细胞化学 细胞凋亡
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喉返神经再生中乙酰胆碱受体免疫电镜观察 被引量：5
5
作者 郑宏良 周水淼 +6 位作者 颜永碧 李兆基 张速勤 陶应国 周蓉珏 陆月良 周雍 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 2000年第2期120-122,I009,共4页
目的　了解喉返神经再生时N 乙酰胆碱受体 (N Acetylcholinereceptor,N AchR)的分布及含量改变。方法　采用透射免疫电镜结合图像分析技术观察喉返神经再生过程中神经肌肉接头(neuromuscularjunction ,NMJ)及其N AchR的超微结构。结果... 目的　了解喉返神经再生时N 乙酰胆碱受体 (N Acetylcholinereceptor,N AchR)的分布及含量改变。方法　采用透射免疫电镜结合图像分析技术观察喉返神经再生过程中神经肌肉接头(neuromuscularjunction ,NMJ)及其N AchR的超微结构。结果　术后 3周突触前膜结构基本消失而后膜结构尚完整 ,N AchR含量较健侧增多 ,为健侧 1 2 8倍。术后 6周再生神经长入NMJ,但与突触后膜接触面积小 ,N AchR含量处于最低状态 ,为健侧 0 47倍。术后 12周NMJ结构较前成熟 ,N AchR含量增加为健侧 0 72倍。术后 18和 2 4周神经末梢与突触后膜接触良好 ,N AchR继续增多并趋稳定 ,分别为健侧 0 83和 0 81倍。结论　提示周围神经再生时N AchR含量与再生神经恢复程度有关。 展开更多
关键词 声带麻痹 乙酰胆碱受体 喉返神经再生 n-achr
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N-乙酰胆碱受体动力学研究
6
作者 张守兰 林福生 +1 位作者 余琳 刘敏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 1999年第4期286-291,共6页
目的 开展N-乙酰胆碱受体(N-AChR)的动力学研究.方法 (1)选择a-BuTX作为主要工具药,进行^(125)I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验,用Scatfit程序拟合。125I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR结合的解离动力学实验,当结合达到饱合后,... 目的 开展N-乙酰胆碱受体(N-AChR)的动力学研究.方法 (1)选择a-BuTX作为主要工具药,进行^(125)I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验,用Scatfit程序拟合。125I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR结合的解离动力学实验,当结合达到饱合后,向两个反应体系分别加入1000倍以上的a-BuTX或烟碱.不同时间取样、分离后,γ-计数仪计数。(2) 13日龄的鸡胚骨骼肌N-AChR及20日龄的鸡视叶的N-AChR与^(125)-I-a-BuTX饱和结合实验,用Scaifit程序拟合。另外以烟碱对125I-a-BuTX与电鳐电器官、鸡视叶、鸡胚骨骼肌N-AChR结合的竞争实验,用Logit程序计算IC_(50)值。结果(1)1251-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验得到一条双曲线的Scatchard图,符合一配基两受体结合模型,求得高、低两个结合位点和两个B_(max)(最大结合值),两个体系的解离动力学均为二次解离曲线,分别求得两个解离常数和两个半衰期.(2)两种实验结果,均符合一配基一受体结合模型,分别求得一个结合位点和一个B_(max).烟碱对^(125)-I-a-BuTX电鳐电器官的N-AChR结合的竞争作用IG_(50)值分别为3.86×10^(-5)和1.65×10^(-6)mol.对鸡视叶的N-AChR竞争作用.IC_(50)值为6.02×10^(-7)mol,对骨骼肌竞争作用IG_(50)值为4.60×10^(-6)。结论 (1) 展开更多
关键词 动力学 n-乙酰胆碱受体 α-银环蛇毒(α-BuTX) 饱和结合实验 毒蕈碱
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用我国海域电鳐电器官提取的N_2AchR粗提物建立大鼠EAMG模型 被引量：3
7
作者 韩涛 周勇 +1 位作者 王旭丹 葛东宇 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2003年第3期163-163,共1页
关键词 EAMG模型 n2achr 电鳐电器官
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