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Ca^(2+)和Mg^(2+)对野生型和变异型牙龈卟啉单胞菌FtsZs的GTPase活性的影响
1
作者 张玉凤 于维先 +1 位作者 毕文翔 于德珍 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期803-805,共3页
目的:探讨Ca2+和Mg2+对野生型和变异型牙龈卟啉单胞菌FtsZs的GTPase活性的影响。方法:将质粒pEZ1(野生型PgFtsZ,Wt PgFtsZ)、pYW1(PgFtsZ的C末端缺失73个氨基酸残基的变异型,ZΔC01)和pYW2(PgFtsZ的N末端缺失43个氨基酸残基的变异型,ZΔ... 目的:探讨Ca2+和Mg2+对野生型和变异型牙龈卟啉单胞菌FtsZs的GTPase活性的影响。方法:将质粒pEZ1(野生型PgFtsZ,Wt PgFtsZ)、pYW1(PgFtsZ的C末端缺失73个氨基酸残基的变异型,ZΔC01)和pYW2(PgFtsZ的N末端缺失43个氨基酸残基的变异型,ZΔN01)导入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中表达,分离和纯化这些目的蛋白。应用Malachite green检测法检测10mmol.L-1的Ca2+、Mg2+对Wt PgFtsZ、ZΔC01和ZΔN01的GTPase活性的作用。结果:在没有10mmol.L-1Ca2+或Mg2+的条件下,Wt PgFtsZ、ZΔC01和ZΔN01的GTPase值分别为8.25±0.22、7.43±0.23和8.00±0.18;在10mmol.L-1Mg2+存在的条件下,Wt PgFtsZ、ZΔC01和ZΔN01的GTPase值分别为8.30±0.15、7.51±0.22和7.85±0.17,同没有离子存在的条件下相比GTPase活性差异均无显著性(P>0.05);在10mmol.L-1Ca2+存在的条件下,Wt PgFtsZ、ZΔC01和ZΔN01的GTPase值分别为5.84±0.20、5.25±0.18和5.73±0.13,同没有离子存在的条件下比较GTPase活性均有明显降低(P<0.01)。结论:10mmol.L-1的Mg2+对Wt PgFtsZ、ZΔC01和ZΔN01的GTPase活性无影响,10mmol.L-1的Ca2+则对GTPase具有抑制作用。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 野生型和变异型牙龈卟啉单胞菌FtsZs GTPase的活性
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野生型及点变异型牙龈卟啉单胞菌FtsZs体外聚合的特性 被引量：2
2
作者 于维先 胡小春 毕文翔 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2004年第5期454-456,共3页
目的 :探讨野生型及点变异型牙龈卟啉单胞菌FtsZs体外聚合的特性。方法 :将质粒 pEZ1(携带野生型PgFtsZ基因的质粒 )、pYW 7(ZA32 0H ,携带野生型PgFtsZ第 32 0位的丙氨酸由组氨酸取代的点变异型PgFtsZ基因的质粒 )和 pYW 8(ZA32 0R ,... 目的 :探讨野生型及点变异型牙龈卟啉单胞菌FtsZs体外聚合的特性。方法 :将质粒 pEZ1(携带野生型PgFtsZ基因的质粒 )、pYW 7(ZA32 0H ,携带野生型PgFtsZ第 32 0位的丙氨酸由组氨酸取代的点变异型PgFtsZ基因的质粒 )和 pYW 8(ZA32 0R ,携带野生型PgFtsZ第 32 0位的丙氨酸由精氨酸取代的点变异型PgFtsZ基因的质粒 )导入EscherichiacoliBL2 1(DE3)pLysS中 ,通过IPTG诱导表达目的蛋白质 ,6mol/L尿素变性及HiTrapSP层析柱纯化目的蛋白质 ,最后通过沉淀法检测FtsZ体外聚合的特性。结果 :仅 10mmol/LMgCl2 就能诱导野生型PgFtsZ、ZA32 0H和ZA32 0R的体外聚合 ,而与添加的GTP无关。结论 :野生型PgFtsZ体外聚合完全不同与E .coliFtsZ绝对依赖于GTP的特性 ,ZA32 0H和ZA32 0R体外聚合特性与野生型PgFtsZ相同 ,表明PgFtsZ的第 32 0位的丙氨酸与其体外聚合功能无关。 展开更多
关键词 体外 变异型 野生型 牙龈卟啉单胞菌 携带 质粒 基因 IPTG 诱导表达 蛋白质
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