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4种常见食源性病原菌多重PCR检测技术研究
1
作者
王珊
王雁伟
+1 位作者
高辉明
艾鹏飞
《河北工业科技》
CAS
2024年第2期133-140,共8页
为了解决常规方法检测食源性病原菌存在操作繁琐、周期长的问题,基于4种常见食源性病原菌特异基因序列扩增提出了一种快速、高效的多重PCR(multiplex polymerase chain reaction, MPCR)检测方法。根据单增李斯特菌iap基因、蜡样芽孢杆菌...
为了解决常规方法检测食源性病原菌存在操作繁琐、周期长的问题,基于4种常见食源性病原菌特异基因序列扩增提出了一种快速、高效的多重PCR(multiplex polymerase chain reaction, MPCR)检测方法。根据单增李斯特菌iap基因、蜡样芽孢杆菌gyrB基因、产志贺毒素大肠埃希氏菌stxⅠ基因、肠炎沙门氏菌invA基因的特异序列分别设计引物后建立MPCR反应体系,测试其特异性、敏感性和可行性,并与国标培养法进行比较。结果表明:MPCR扩增出4个目标基因的特异性条带大小依次为371、221、432、171 bp;在58℃的退火温度下,MPCR扩增表现出良好的特异性,无非特异性扩增,4种病原菌最低检出限达到102CFU/mL;MPCR方法和国标培养法对多种食源性病原菌感染的牛奶样品的检测结果完全一致,检测周期由原来的5~7 d缩减到8~9 h。所建立的MPCR技术作为一种快速、高效的检测方法,可为食品安全生产提供保障。
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关键词
食品检验学
多重
pcr
(
mpcr
)
单增李斯特菌
蜡样芽孢杆菌
产志贺毒素大肠埃希氏菌
肠炎沙门氏菌
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职称材料
食品中五种致病性弧菌MPCR-DHPLc检测方法的建立
被引量：
5
2
作者
邵碧英
王传得
+4 位作者
郑晶
黄晓蓉
曹际娟
陈彬
吴谦
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期500-504,共5页
采用试剂盒法提取5种致病性弧菌(霍乱弧菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和拟态弧菌)的基因组DNA。分别合成5对特异性引物,对PCR反应体系进行优化后,建立了5种致病性弧菌间的MPCR-DHPLC检测方法。二重PCR-DHPLC检测灵敏度可达到100...
采用试剂盒法提取5种致病性弧菌(霍乱弧菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和拟态弧菌)的基因组DNA。分别合成5对特异性引物,对PCR反应体系进行优化后,建立了5种致病性弧菌间的MPCR-DHPLC检测方法。二重PCR-DHPLC检测灵敏度可达到100CFU/ml。建立的MPCR-DHPLC方法在食品中弧菌的检测上具有很好的应用价值。
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关键词
弧菌
基因组DNA
多重
pcr
变性高效液相色谱
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职称材料
多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立
被引量：
9
3
作者
岳丰雄
崔尚金
+2 位作者
冉多良
戚亭
周盛华
《养猪》
2010年第3期41-44,共4页
本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-...
本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-1基因271bp片段、PRRSVMN基因美洲型434bp片段、PRVgB基因194bp片段。通过人为混合以上4种病毒进行特异性及敏感性试验,结果表明,该方法具有很好的特异性和敏感性。对猪瘟病毒、大肠杆菌和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性;该mPCR方法对PPV的最低检测量为8.64×10-3μg,PRV的最低检测量为2.36×10-3μg,PRRSV的最低检测量为3.68×10-3μg,PCV2的最低检测量为2.90×10-4μg。该方法的建立对临床上PCV2、PPV、PRV、PRRSV的鉴别诊断以及以上这4种病毒的流行病学调查具有十分重要的意义。
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关键词
多重
pcr
方法
猪圆环病毒2型
猪细小病毒
猪伪狂犬病病毒
猪繁殖与呼吸综合征病毒
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职称材料
题名
4种常见食源性病原菌多重PCR检测技术研究
1
作者
王珊
王雁伟
高辉明
艾鹏飞
机构
河北科技大学食品与生物学院
出处
《河北工业科技》
CAS
2024年第2期133-140,共8页
基金
河北省科技计划“奶业振兴重大技术创新专项”(19227137D)
河北省大中学生科技创新专项(22E50074D)。
文摘
为了解决常规方法检测食源性病原菌存在操作繁琐、周期长的问题,基于4种常见食源性病原菌特异基因序列扩增提出了一种快速、高效的多重PCR(multiplex polymerase chain reaction, MPCR)检测方法。根据单增李斯特菌iap基因、蜡样芽孢杆菌gyrB基因、产志贺毒素大肠埃希氏菌stxⅠ基因、肠炎沙门氏菌invA基因的特异序列分别设计引物后建立MPCR反应体系,测试其特异性、敏感性和可行性,并与国标培养法进行比较。结果表明:MPCR扩增出4个目标基因的特异性条带大小依次为371、221、432、171 bp;在58℃的退火温度下,MPCR扩增表现出良好的特异性,无非特异性扩增,4种病原菌最低检出限达到102CFU/mL;MPCR方法和国标培养法对多种食源性病原菌感染的牛奶样品的检测结果完全一致,检测周期由原来的5~7 d缩减到8~9 h。所建立的MPCR技术作为一种快速、高效的检测方法,可为食品安全生产提供保障。
关键词
食品检验学
多重
pcr
(
mpcr
)
单增李斯特菌
蜡样芽孢杆菌
产志贺毒素大肠埃希氏菌
肠炎沙门氏菌
Keywords
food
inspection
multiplex pcr
(
mpcr
)
Listeria
monocytogenes
Bacillus
cereus
Shiga
toxin-producing
Escherichia
coli
Salmonella
enteritidis
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
食品中五种致病性弧菌MPCR-DHPLc检测方法的建立
被引量：
5
2
作者
邵碧英
王传得
郑晶
黄晓蓉
曹际娟
陈彬
吴谦
机构
福建出入境检验检疫局
福建农林大学动物科学院
辽宁出入境检验检疫局
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期500-504,共5页
基金
“十一五”国家科技支撑计划项目(2006BAK02A13-11)
文摘
采用试剂盒法提取5种致病性弧菌(霍乱弧菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和拟态弧菌)的基因组DNA。分别合成5对特异性引物,对PCR反应体系进行优化后,建立了5种致病性弧菌间的MPCR-DHPLC检测方法。二重PCR-DHPLC检测灵敏度可达到100CFU/ml。建立的MPCR-DHPLC方法在食品中弧菌的检测上具有很好的应用价值。
关键词
弧菌
基因组DNA
多重
pcr
变性高效液相色谱
Keywords
Vibrio
genome
DNA
multiplex pcr
（
mpcr
）
denaturalization
high
performance
liquid
chromatography（DHPLC）
分类号
Q93-332 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立
被引量：
9
3
作者
岳丰雄
崔尚金
冉多良
戚亭
周盛华
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室
新疆农业大学动物医学学院
出处
《养猪》
2010年第3期41-44,共4页
文摘
本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-1基因271bp片段、PRRSVMN基因美洲型434bp片段、PRVgB基因194bp片段。通过人为混合以上4种病毒进行特异性及敏感性试验,结果表明,该方法具有很好的特异性和敏感性。对猪瘟病毒、大肠杆菌和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性;该mPCR方法对PPV的最低检测量为8.64×10-3μg,PRV的最低检测量为2.36×10-3μg,PRRSV的最低检测量为3.68×10-3μg,PCV2的最低检测量为2.90×10-4μg。该方法的建立对临床上PCV2、PPV、PRV、PRRSV的鉴别诊断以及以上这4种病毒的流行病学调查具有十分重要的意义。
关键词
多重
pcr
方法
猪圆环病毒2型
猪细小病毒
猪伪狂犬病病毒
猪繁殖与呼吸综合征病毒
Keywords
multiplex pcr
（
mpcr
）：
porcine
circovirus
type
Ⅱ（PCV2）：
porcine
parvovirus
（PPV）；
porcine
pseudorabies
virus
（PRV）：
porcine
reproductive
and
respiratory
syndrome
virus（PRRSV）
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
4种常见食源性病原菌多重PCR检测技术研究
王珊
王雁伟
高辉明
艾鹏飞
《河北工业科技》
CAS
2024
0
下载PDF
职称材料
2
食品中五种致病性弧菌MPCR-DHPLc检测方法的建立
邵碧英
王传得
郑晶
黄晓蓉
曹际娟
陈彬
吴谦
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
下载PDF
职称材料
3
多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立
岳丰雄
崔尚金
冉多良
戚亭
周盛华
《养猪》
2010
9
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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