丙型肝炎病毒HVR1抗血清体外阻断HCV的感染 被引量：13

1

作者 宋志强 郝飞 +2 位作者 王永刚 闵峰 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第2期171-174,共4页

目的 体外观察含HCV高变区1多抗原肽(MAP)及其抗血清对HCV感染有无阻断作用。 方法 将前期合成的MAP及其抗血清和HCV感染血清按不同比例充分混合并在37℃下孵育2h或4℃下孵育12h,再将此混合血清接种7721细胞,分别以逆转录-聚合酶链反应... 目的 体外观察含HCV高变区1多抗原肽(MAP)及其抗血清对HCV感染有无阻断作用。 方法 将前期合成的MAP及其抗血清和HCV感染血清按不同比例充分混合并在37℃下孵育2h或4℃下孵育12h,再将此混合血清接种7721细胞,分别以逆转录-聚合酶链反应、免疫组化、原位杂交检测细胞的感染情况。 结果 各比例混合的阻断血清组在孵育后细胞和培养上清中均可检出HCV RNA;免疫组化证实有表达HCV抗原的阳性细胞。 结论 前期合成的HCV包膜糖蛋白及其抗血清在体外不能明确阻断HCV感染/吸附肝细胞。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 细胞模型 多抗原肽 疫苗

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含两种不同肽段的血吸虫多抗原肽疫苗的合成与生物活性 被引量：4

2

作者 曹胜利 蔡孟深 石佑恩 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期751-754,共4页

目的：合成由曼氏血吸虫２８ Ｋｕ ＧＳＴ抗原肽段２６４３（Ｐ２６）、１４１１５３（Ｐ１４１）和日本血吸虫２６ Ｋｕ ＧＳＴ 抗原肽段１８７２０２（Ｊ１８７）中的两种不同肽段组成的血吸虫多抗原肽疫苗，通过活性试验考察... 目的：合成由曼氏血吸虫２８ Ｋｕ ＧＳＴ抗原肽段２６４３（Ｐ２６）、１４１１５３（Ｐ１４１）和日本血吸虫２６ Ｋｕ ＧＳＴ 抗原肽段１８７２０２（Ｊ１８７）中的两种不同肽段组成的血吸虫多抗原肽疫苗，通过活性试验考察其抗原性、免疫原性及对实验动物的保护性免疫效果。方法：用Ｂｏｃ 化学和Ｆｍｏｃ 化学相结合的策略合成含两种不同抗原肽的多抗原肽疫苗，产物经斑点酶联免疫吸附试验测定抗原性，在无免疫佐剂存在下接种小鼠，ＥＬＩＳＡ 试验检测血清抗体，并用日本血吸虫尾蚴攻击感染，６ 周后剖杀小鼠进行体内成虫和肝内虫卵计数。结果：合成多抗原肽能不同程度地与感染日本血吸虫的病人或病兔血清结合，并能诱导昆明小鼠产生对日本血吸虫天然抗原特异的抗体应答。接种（Ｐ２６）２（Ｊ１８７）２ＭＡＰ、（Ｐ２６）２（Ｐ１４１）２ＭＡＰ和（Ｐ２６）４（Ｐ１４１）４ＭＡＰ的昆明小鼠，与对照组比较成虫检获数分别减少４０－１ ％ ，６１－１ ％ 和３４－４％ ； 每克肝脏虫卵数分别减少４８－４％ ，６７－１ ％ 和４７－４％ 。结论：含两种不同抗原肽的合成血吸虫多抗原肽疫苗能够诱导昆明小鼠产生显著的抗日本血吸虫感染的保护性免疫力。 展开更多

关键词 血吸虫 合成 多肽疫苗 多抗原肽 肽段 生物活性

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含两种不同肽段的血吸虫多抗原肽疫苗的合成及其对BALB/c小鼠的免疫保护作用 被引量：1

3

作者 曹胜利 蔡孟深 石佑恩 《药学学报》 CSCD 北大核心 2000年第6期421-425,共5页

目的　设计合成由曼氏血吸虫 2 8KDaGST抗原肽段 2 6 43(P2 6) ,116 131(P116) ,141 15 3(P14 1)和日本血吸虫 2 6KDaGST抗原肽段 187 2 0 2 (J187)中的两种不同肽段组成的血吸虫混合多抗原肽疫苗 ,通过活性试验考察其抗原性、免疫原... 目的　设计合成由曼氏血吸虫 2 8KDaGST抗原肽段 2 6 43(P2 6) ,116 131(P116) ,141 15 3(P14 1)和日本血吸虫 2 6KDaGST抗原肽段 187 2 0 2 (J187)中的两种不同肽段组成的血吸虫混合多抗原肽疫苗 ,通过活性试验考察其抗原性、免疫原性及对BALB/c小鼠的保护性免疫效果。方法　用Boc化学和Fmoc化学相结合的策略合成含两种不同抗原肽的多抗原肽疫苗 ,产物经斑点酶联免疫吸附试验测定抗原性 ,在无免疫佐剂存在下接种小鼠 ,ELISA试验检测血清抗体 ,并用日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,6周后剖杀小鼠进行体内成虫和肝内虫卵计数。结果和结论　合成的混合多抗原肽能够与感染日本血吸虫的病人或病兔血清结合 ,并能诱导BALB/c小鼠产生对日本血吸虫天然抗原特异的抗体应答。且合成的混合多抗原肽疫苗能够诱导BALB/c小鼠产生显著的抗日本血吸虫感染的保护性免疫力 ,这种免疫力不仅降低成虫负荷数 ,还能显著减少肝组织内虫卵检获数 ,其中 (P116) 4(P2 6) 4 MAP的减虫率和减卵率均达 70 %以上 。 展开更多

关键词 血吸虫病 合成多肽苗 多抗原肽 免疫保护

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Fmoc固相直接法合成Aβ_(1-15)肽疫苗及其免疫活性 被引量：4

4

作者 杨学森 汪华侨 +5 位作者 袁群芳 谢瑶 姚志彬 叶小舟 吴继明 邹爱国 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期121-125,共5页

【目的】探讨实验室合成Aβ1-15肽疫苗的方法,并对其进行鉴定。【方法】选取Aβ42主要包含B细胞抗原决定簇的片段Aβ1-15,采用8分支多重抗原肽系统,以Fmoc固相直接法合成MAPAβ1-15;用MAPAβ1-15疫苗免疫接种C57BL/6小鼠,ELISA检测血清... 【目的】探讨实验室合成Aβ1-15肽疫苗的方法,并对其进行鉴定。【方法】选取Aβ42主要包含B细胞抗原决定簇的片段Aβ1-15,采用8分支多重抗原肽系统,以Fmoc固相直接法合成MAPAβ1-15;用MAPAβ1-15疫苗免疫接种C57BL/6小鼠,ELISA检测血清特异性抗Aβ抗体。【结果】用Fmoc法直接合成方法成功制备MAPAβ1-15疫苗,质谱检测其主要离子峰的相对分子质量为15458,与理论相对分子质量15451十分接近,但还有其它不同分子质量的离子峰存在。以合成的MAPAβ1-15免疫C57BL/6小鼠后,可产生高滴度的特异性抗Aβ42抗体,第3次接种后抗体平均滴度为1:467±196,第5次免疫接种后,平均滴度为1∶4367±1120。对照组的血清抗体检测基本无明显变化。【结论】Fmoc固相直接法可成功合成出MAPAβ1-15,合成出的MAPAβ1-15具有很好免疫活性。 展开更多

关键词 Fmoc固相多肽直接合成 多重抗原肽 Aβ1-15疫苗 阿尔茨海默病

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抗金葡菌肽聚糖模拟肽抗血清的被动保护作用

5

作者 陈益国 侯晓睿 +1 位作者 朱平 刘北一 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期661-667,共7页

目的探讨针对金葡菌肽聚糖(PGN)模拟序列抗血清的被动保护作用。方法应用在线软件(http://www.ddg-pharmfac.net/mhcpred/MHCPred)和T细胞表位分析软件DNAstar对模拟PGN表位的SP31(ATWSHHLSSAGL)进行分析,改造SP31序列后合成四分枝多价... 目的探讨针对金葡菌肽聚糖(PGN)模拟序列抗血清的被动保护作用。方法应用在线软件(http://www.ddg-pharmfac.net/mhcpred/MHCPred)和T细胞表位分析软件DNAstar对模拟PGN表位的SP31(ATWSHHLSSAGL)进行分析,改造SP31序列后合成四分枝多价抗原肽(multiple antigenic peptide,MAP)MAP-P31.1,以MAP-P31.1免疫小鼠和家兔,体外鉴定抗MAP-P31.1血清对MRSA/MSSA杀菌作用,体内观察饱和硫酸铵纯化免疫兔血清对金葡菌攻击动物的保护作用。结果将原始SP31序列改造为ATWSHHLSSAGLGGAS序列。2种抗MAP-P31.1血清均可结合PGN。用热灭活S.aureus再次加强免疫,抗血清的效价可有10倍以上升高(P<0.05)。抗MAP-P31.1血清在有补体或无补体作用下均有显著抑菌/杀菌作用(P<0.01),且显著优于抗金葡菌免疫的全菌血清及抗MAP-P31血清(P<0.001)。抗MAP-P31.1血清显著增强小鼠巨噬细胞对MRSA与MSSA的吞噬作用,过继转移后可保护小鼠抵御金葡菌致死性攻击(P<0.05),小鼠肾脏、脾脏中荷菌量显著降低(P<0.05)。结论模拟肽MAP-P31.1作为免疫原所诱导的抗血清具备了体外对MRSA的杀菌/抑制作用,但体内对MRSA的保护作用并不显著。 展开更多

关键词 肽聚糖 模拟肽 杀菌作用 金葡菌 多价抗原肽

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电压门控快钾通道蛋白Kv4.3的抗体制备及检测

6

作者 邓小云 刘宇 +5 位作者 蔡芳 潘乾 龙志高 夏昆 夏家辉 张灼华 《生命科学研究》 CAS CSCD 2005年第1期6-10,共5页

Kv4(voltagegatedK+channel4)是在哺乳动物心脏和脑组织中广泛表达的一类钾离子通道蛋白.它主要介导心肌细胞和神经细胞中的A-型(快速失活型)K+电流,是构成中枢神经系统和心肌细胞中的快速失活外向型电流的基础.Kv4.3是电压门控钾离子通... Kv4(voltagegatedK+channel4)是在哺乳动物心脏和脑组织中广泛表达的一类钾离子通道蛋白.它主要介导心肌细胞和神经细胞中的A-型(快速失活型)K+电流,是构成中枢神经系统和心肌细胞中的快速失活外向型电流的基础.Kv4.3是电压门控钾离子通道3种α亚基之一.通道中含有许多具有调节作用的辅助亚基,它们通过与Kv4.3互作实现对通道的调节.本研究根据人类氨基酸序列以MAPs法制备抗Kv4.3抗体.MAP由4条相同的17肽段连接成锥形结构分子.以MAP或MAP与佐剂免疫新西兰白兔,抽提了免疫前血清和免疫后血清,并对抗体的滴度进行评价.MAPs在白兔体内诱导出了效价比为1:1000的抗Kv4.3特异性抗体. 展开更多

关键词 Kv4.3 MAPS WESTERN BLOTTING 免疫沉淀

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MAP法制备抗人Connexin31抗体

7

作者 刘宇 谭志平 +6 位作者 蒋泰文 贺力强 胡艺俏 姚仲元 蔡芳 夏昆 夏家辉 《生命科学研究》 CAS CSCD 2005年第4期308-312,共5页

MAP(multipleantigenicpeptide)多肽法具有快速、简便、成本低廉的特点.用MAP法,直接在多肽合成仪上合成Connexin31羧基端一个多肽片段(250-266AA)的MAP肽,经超滤器纯化后,免疫新西兰雄兔后采血检测、并纯化.经Westernblotting、细胞免... MAP(multipleantigenicpeptide)多肽法具有快速、简便、成本低廉的特点.用MAP法,直接在多肽合成仪上合成Connexin31羧基端一个多肽片段(250-266AA)的MAP肽,经超滤器纯化后,免疫新西兰雄兔后采血检测、并纯化.经Westernblotting、细胞免疫荧光染色、免疫沉淀证实得到的抗体为抗间隙连接蛋白31的特异抗体. 展开更多

关键词 间隙连接蛋白31 MAP肽 免疫荧光 免疫印迹 免疫沉淀

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一种复合抗原多肽的反相色谱分离影响因素研究

8

作者 陈宜鸿 《军医进修学院学报》 CAS 2011年第11期1168-1170,共3页

目的探讨不同流动相体系、不同填料的分析柱、pH值以及柱温对复合抗原多肽分离的影响,优化反相色谱分离条件。方法色谱柱:ZorbaxSB C18 4.6×250mm 5u,Zorbax XDB C8 4.6×250mm 5u,Sephsil C4 4.6×100mm 5u。流动相B:乙腈... 目的探讨不同流动相体系、不同填料的分析柱、pH值以及柱温对复合抗原多肽分离的影响,优化反相色谱分离条件。方法色谱柱:ZorbaxSB C18 4.6×250mm 5u,Zorbax XDB C8 4.6×250mm 5u,Sephsil C4 4.6×100mm 5u。流动相B:乙腈;流速:1.0ml/min;检测波长:214nm;进样量:20μl。结果庚烷磺酸钠及流动相pH值影响显著;0.05mol/LKH2PO4,0.05mol/LTEA/0.1%庚烷磺酸钠(H3PO4调pH=2.5)体系最优。结论本法简便,分离效果好,适合该复合抗原多肽分离。 展开更多

关键词 复合抗原多肽 反相色谱 分离影响因素

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钩端螺旋体多抗原肽的构建及免疫性分析

9

作者 林旭瑷 隋玉娟 +1 位作者 毛亚飞 严杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1010-1013,共4页

目的构建问号钩端螺旋体（简称钩体）主要外膜蛋白OmpL1、LipL21和LipL32优势抗原表位的串联基因及其表达系统，了解该重组蛋白的免疫活性。方法采用噬菌体M13KE表面展示技术结合Western blot分析，鉴定了OmpL1、LipL21和LipL32的优势... 目的构建问号钩端螺旋体（简称钩体）主要外膜蛋白OmpL1、LipL21和LipL32优势抗原表位的串联基因及其表达系统，了解该重组蛋白的免疫活性。方法采用噬菌体M13KE表面展示技术结合Western blot分析，鉴定了OmpL1、LipL21和LipL32的优势抗原表位，人工合成优势抗原表位串联基因并构建其原核表达系统。SDS—PAGE检测重组蛋白的表达情况；Western blot及ELISA鉴定重组蛋白的免疫活性。结果该合成基因在原核表达系统中得到了有效表达，且表达产物主要以可溶性形式存在。Western blot和ELISA结果显示该重组蛋白能与兔抗钩体全菌抗体及不同血清群的钩体病人血清中的抗体产生免疫反应。结论本研究成功构建了钩体多表位串联基因及其表达系统，所表达目的蛋白具有良好的免疫活性，且对不同血清群型抗体之间均有免疫原活性。 展开更多

关键词 钩端螺旋体病 多抗原肽 表达 免疫活性

原文传递

不可分型流感嗜血杆菌OMP6优势T-B联合抗原表位及其免疫原性研究 被引量：4

10

作者 张颖颖 王荣山 +2 位作者 陈旭 金洪星 严杰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1053-1059,共7页

目的了解无荚膜不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)临床菌株P6外膜蛋白(OMP6)编码基因(omp6)分布及其序列保守性,筛选并鉴定OMP6序列中优势T和B细胞(T-B)联合抗原表位及其免疫原性。方法采用PCR扩增NTHi临床菌株全长omp6基因,T-A克隆后测序。... 目的了解无荚膜不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)临床菌株P6外膜蛋白(OMP6)编码基因(omp6)分布及其序列保守性,筛选并鉴定OMP6序列中优势T和B细胞(T-B)联合抗原表位及其免疫原性。方法采用PCR扩增NTHi临床菌株全长omp6基因,T-A克隆后测序。采用生物信息学软件分析OMP6序列保守性与膜定位并预测其T-B联合抗原表位。采用噬菌体展示联合免疫印迹法和ELISA分别检测重组噬菌体PIII蛋白(rPIII)展示的OMP6中T-B联合抗原表位肽免疫原性和免疫反应性。结果 35株NTHi临床菌株均能检出omp6基因,其核苷酸和氨基酸序列相似性分别为98.3%~100%和99.3%~100%。OMP6为外膜表面蛋白,具有OMP6-2-25、OMP6-61-86和OMP6-98-126三个预测T-B联合抗原表位。Western Blot和ELISA结果显示,OMP6-2-25能与NTHi抗血清产生较强的杂交条带,96.9%(59/62)、69.4%(43/62)和74.2%(46/62)NTHi感染患儿血清标本OMP6-2-25、OMP6-61-86和OMP6-98-126抗原表位肽抗体阳性。结论 OMP6是分布广泛且序列保守的NTHi跨膜蛋白,OMP6-2-25为OMP6优势T-B联合抗原表位,可作为NTHi多抗原肽疫苗的候选表位。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 P6外膜蛋白 优势抗原表位 免疫原性 多抗原肽疫苗

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CMV抗体免疫金快速检测试剂盒的开发与初步应用 被引量：1

11

作者 宋鹏 刘陶 +2 位作者 杨浩 韩锋产 陈五岭 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第20期1871-1873,共3页

目的:开发一种低成本、简单易用的基于免疫金渗滤法的试剂盒,以用于检测分析血清中的巨细胞病毒抗体.方法:将用人工合成的人巨细胞病毒(HCMV)抗原表位的线性肽和分支多抗原肽分别划线固定于硝酸素纤维膜上,制成免疫层析检测试纸条,血清... 目的:开发一种低成本、简单易用的基于免疫金渗滤法的试剂盒,以用于检测分析血清中的巨细胞病毒抗体.方法:将用人工合成的人巨细胞病毒(HCMV)抗原表位的线性肽和分支多抗原肽分别划线固定于硝酸素纤维膜上,制成免疫层析检测试纸条,血清中IgG与测试条上金标记物结合后沿硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗原结合形成肉眼可见的红色带条并用GICA和ELISA试剂盒对比检测120份血清标本中抗HCMV抗体.结果:分支多抗原肽制成的免疫层析检测试纸条的灵敏度为97.9%,特异度为87.5%,两法符合率为95.8%.结论:GICA检测血清中的抗HCMV抗体特异性强,灵敏度高,简便快速,有广泛应用价值. 展开更多

关键词 人巨细胞病毒 分支多抗原肽 胶体金 酶联免疫吸附测定

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基于幽门螺杆菌UreB优势抗原表位多抗原肽疫苗制备及其免疫保护作用 被引量：2

12

作者 王艳芳 王欢 +2 位作者 张慧 严杰 阮萍 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期268-275,共8页

目的构建串联式幽门螺杆菌UreB抗原优势表位UreB322和UreB527原核重组表达系统，制备UreB322和UreB527表位与多肽载体Poly—Asp．Lys的多抗原肽（MAP）疫苗并确定其免疫原性和免疫保护性。方法采用连接引物PCR构建含肠激酶（EK）位点的... 目的构建串联式幽门螺杆菌UreB抗原优势表位UreB322和UreB527原核重组表达系统，制备UreB322和UreB527表位与多肽载体Poly—Asp．Lys的多抗原肽（MAP）疫苗并确定其免疫原性和免疫保护性。方法采用连接引物PCR构建含肠激酶（EK）位点的串联式UreB322和UreB527表位基因及其原核表达系统。表达的目的重组融合蛋白8×[rEK-UreB322-EK-UreB527-EK]经EK水解后用SephadexG-25柱分离rUreB322-EK和rUreB527-EK片段。采用碳二亚胺法将rUreB322-EK、rUreB527-EK与Poly．Asp—Lys载体分子交联，制备出多抗原肽疫苗MAP—rUreB322／B527。采用ELISA和Westernblot分别检测各重组表位肽及MAP-rUreB322／527的抗原性和免疫反应性。采用幽门螺杆菌SS1株感染BALB／c小鼠模型检测MAP—rUreB322／527免疫保护效果。结果获得了8次重复串联的UreB322和UreB527编码基因及其原核表达系统，目的融合蛋白8x[rEK—UreB322-EK—rUreB527-EK]表达量可达细菌总蛋白的48％。肠激酶可将目的融合蛋白完全水解为rUreB322-EK和rUreB527-EK片段。rUreB322-EK和rUreB527-EK与Poly—Asp-Lys交联率高达92．5％。幽门螺杆菌全菌抗体及rUreB．IgG均能识别rUreB322．EK、rUreB527．EK和MAP．rUreB322／527并与之结合。MAP．rUreB322／527免疫小鼠血清抗体水平明显高于rUreB（P〈0．05）。50或100p,gMAP—rUreB322／527对幽门螺杆菌SS1株感染小鼠的保护率（83．3％和91．7％）明显高于等量rUreB（41．7％和50．0％）（P〈0．05）。结论本研究成功地构建了幽门螺杆菌UreB抗原优势表位UreB322和UreB527重复串联式编码基因及其原核表达系统，基于UreB优势抗原表位的多抗原肽疫苗MAP—rUreB322／527能显著提高免疫保护效果。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位基因 优势抗原表位 多抗原肽疫苗 免疫保护

原文传递

巨细胞病毒抗原分支肽的合成与鉴定 被引量：1

13

作者 杨赛 刘陶 +2 位作者 杨浩 韩锋产 陈五岭 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第20期1868-1870,共3页

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)抗原分支肽人工合成方法.方法:用固相合成方法分别合成HCMV抗原表位的线性多肽和分支多抗原肽,经HPLC进行纯化后质谱检验其分子质量,并用质控血清鉴定抗原活性.结果:合成的线性肽分子质量为793.87ku,八分支... 目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)抗原分支肽人工合成方法.方法:用固相合成方法分别合成HCMV抗原表位的线性多肽和分支多抗原肽,经HPLC进行纯化后质谱检验其分子质量,并用质控血清鉴定抗原活性.结果:合成的线性肽分子质量为793.87ku,八分支肽的分子质量为7127.77ku,均与其理论分子质量相符,分支肽经ELISA初步鉴定对质控血清具有较好的分辨效果.结论:HCMV抗原分支肽的人工合成大大简化了以往HCMV抗原的制备方法,且制备成本低,无潜在生物危害. 展开更多

关键词 固相合成 人巨细胞病毒 分支多抗原肽

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不可分型流感嗜血杆菌Hap黏附素T-B优势抗原表位及其免疫原性研究

14

作者 吴中秀 王荣山 +2 位作者 黄燕颖 金洪星 严杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期594-600,共7页

目的 了解无荚膜型流感嗜血杆菌（NTHi）临床菌株中Hap黏附素编码基因（hap）分布及其序列保守性,筛选并鉴定Hap蛋白优势T和B细胞（T-B）联合抗原表位及其免疫原性.方法采用生物信息学软件分析NTHi菌株hap基因序列保守性并预测其T-B联... 目的 了解无荚膜型流感嗜血杆菌（NTHi）临床菌株中Hap黏附素编码基因（hap）分布及其序列保守性,筛选并鉴定Hap蛋白优势T和B细胞（T-B）联合抗原表位及其免疫原性.方法采用生物信息学软件分析NTHi菌株hap基因序列保守性并预测其T-B联合抗原表位.采用PCR扩增NTHi临床菌株hap基因5′端156 bp和3′端855 bp片段（hap-5′-156和hap-3′-855）后测序.构建Hap蛋白N端52 aa和C端285 aa片段（Hap-N52和Hap-C285）7个T-B联合抗原表位肽噬菌体展示系统.采用Western blot和ELISA分别检测重组噬菌体PⅢ蛋白（rPⅢ）展示的T-B联合抗原表位肽抗原性和免疫反应性.结果 hap基因产物为NTHi膜表面蛋白.不同NTHi菌株hap基因5′端156 pb和3′端855 bp序列相对保守,中间区变异较大.56株NTHi临床菌株均能检出hap-5′-156和hap-3′-855片段,其核苷酸和氨基酸序列相似性为92.3％～100％.Hap-N52片段中Hap-N5-24以及Hap-C285片段中Hap-C4-27、Hap-C28-47、Hap-C114-129、Hap-C150-173、Hap-C200-227和Hap-C241-267为评分较高且变异较小的预测T-B联合抗原表位.Western blot和ELISA检测结果显示,rPⅢ展示的Hap-C4-27或Hap-C150-173表位肽能与NTHi抗血清产生较强的杂交条带且96.9％（63/65）和92.3％（60/65）NTHi感染患儿血清标本相应抗体阳性.结论 hap基因在NTHi临床菌株中分布广泛且5′端156 pb和3′端855 bp序列保守.Hap-C4-27和Hap-C150-173为Hap蛋白优势T-B联合抗原表位,可作为NTHi多抗原肽疫苗的候选表位. 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 Hap黏附素 优势抗原表位 免疫原性 多抗原肽疫苗

原文传递

利用丙型肝炎病毒核壳蛋白的分支状合成肽抗原提高血清学诊断的灵敏度

15

作者 王海林 金冬雁 +7 位作者 颜子颖 李景源 曹经媛 薛水星 李玉英 刘崇柏 白植生 侯云德 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1993年第4期6-8,共3页

关键词 丙型肝炎病毒 血清 合成 肽抗原

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255例食管恶性肿瘤的临床病理分析

16

作者 韩学德 张祥盛 《滨州医学院学报》 1994年第2期128-129,136,共3页

作者分析了２５５例食管恶性肿瘤的临床病理情况。发病年龄３０～８０岁，平均５４．５岁。男性１７３例，女性８２例。上段食管１５例（５．９％），中段１５７例（６１．５％），下段８５例（３１．３％）。鳞状细胞癌２４５例，其中... 作者分析了２５５例食管恶性肿瘤的临床病理情况。发病年龄３０～８０岁，平均５４．５岁。男性１７３例，女性８２例。上段食管１５例（５．９％），中段１５７例（６１．５％），下段８５例（３１．３％）。鳞状细胞癌２４５例，其中早期癌２例，中晚期癌２４３例，包括溃疡型１７２例，外生型５３例，浸润型３０例。组织学分级为Ⅰ级１３０例，Ⅱ级９２例，Ⅲ级２３例。伴发多灶性癌２８例（３９灶）。小细胞性癌５例，平滑肌肉瘤２例，癌肉瘤２例，恶性黑色素瘤１例。 展开更多

关键词 食管肿瘤 病理学

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多抗原肽在抗HCV血清学诊断中的应用

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作者 王海林 金冬雁 +3 位作者 颜子颖 周园 白植生 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期353-356,共4页

应用八分支的多抗原肽（Ｍｕｌｔｉｐｌｃａｎｔｉｇｅｎｉｃｐｅｐｔｉｄｅ，ＭＡＰ）树脂，通过固相肽合成技术，合成一系列源于ＨＣＶ核心蛋白和ＮＳ４蛋白的八分支多抗原肽。经ＥＬＩＳＡ检测表明，八分支多抗原肽具有较强的免疫反... 应用八分支的多抗原肽（Ｍｕｌｔｉｐｌｃａｎｔｉｇｅｎｉｃｐｅｐｔｉｄｅ，ＭＡＰ）树脂，通过固相肽合成技术，合成一系列源于ＨＣＶ核心蛋白和ＮＳ４蛋白的八分支多抗原肽。经ＥＬＩＳＡ检测表明，八分支多抗原肽具有较强的免疫反应性。与相应的单拷贝寡肽相比较，多抗原肽对弱阳性血清的检出率有所提高。中和ＥＬＩＳＡ试验也表明，多抗原肽与抗体的亲合力及包被效率均优于单拷贝寡肽。多抗原肽不仅可以提高检测的灵敏度和可靠性，而且可以降低抗原的包被浓度，故在抗ＨＣＶ血清学诊断中具有一定的应用优势。 展开更多

关键词 丙型肝炎 丙型肝炎病毒 多抗原肽 血清诊断

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基于可重复利用免疫磁珠的抗体检测方法的建立 被引量：7

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作者 郭慧芳 张文红 +3 位作者 温冬青 韩锋产 张虎明 阎小君 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期577-579,583,共4页

目的基于可重复利用的免疫磁珠,建立一种简捷快速的特异性抗体检测方法。方法设计人类巨细胞病毒(humancytomegaloviruses,HCMV)PP150蛋白的抗原表位,并合成8分枝多聚抗原肽PP150-8MAPs。将PP150-8MAPs以共价结合形式包被于DynabeadsM-4... 目的基于可重复利用的免疫磁珠,建立一种简捷快速的特异性抗体检测方法。方法设计人类巨细胞病毒(humancytomegaloviruses,HCMV)PP150蛋白的抗原表位,并合成8分枝多聚抗原肽PP150-8MAPs。将PP150-8MAPs以共价结合形式包被于DynabeadsM-450Tosylactivated磁珠表面,制备特异性免疫磁珠。用PP150-8MAPs免疫Balb/c小鼠制备抗此抗原表位的标准抗血清。应用免疫磁珠检测标准抗血清中的抗体,优化检测条件。在抗体检测反应结束后,洗脱抗体-二抗复合物,再生后的免疫磁珠重复用于标准抗血清样品的检测分析,并分析免疫磁珠可重复利用的次数。结果制备免疫磁珠时,PP150-8MAPs的最佳包被量为100μg/mL,包被效率为79%。用PP150-8MAPs免疫小鼠后,得到的抗血清滴度可达到112800。用免疫磁珠法检测小鼠标准抗血清,免疫磁珠可重复进行20次以上的检测分析。结论基于酶联免疫检测方法,包被抗原的免疫磁珠可重复应用于血清样品中特异性抗体的检测分析。此实验为建立一种新的可重复检测的高效清样品中特异性抗体的检测分析。此实验为建立一种新的可重复检测的高效免疫磁珠抗体分析方法奠定了基础,在基础研究与临床检测中具有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 抗原表位 多聚抗原肽 免疫磁珠

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多靶点抗原肽自体免疫细胞治疗原发性肝细胞癌的临床安全性 被引量：7

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作者 黄静 胡晓云 +3 位作者 陈晓薇 张明霞 陈逢生 郭亚兵 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期11-16,共6页

目的:评价多靶点抗原肽自体免疫细胞技术(multiple antigen stimulating cellular therapy,MASCT^(TM))治疗原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的临床安全性。方法:回顾性分析2012年1月至2014年12月南方医院肝病中心收治的接... 目的:评价多靶点抗原肽自体免疫细胞技术(multiple antigen stimulating cellular therapy,MASCT^(TM))治疗原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的临床安全性。方法:回顾性分析2012年1月至2014年12月南方医院肝病中心收治的接受MASCT^(TM)治疗且治疗前的末次治疗结束最少1个月以上、未接受其他免疫治疗的45例HCC患者的临床资料。第0天分离患者外周血单个核细胞,其中贴壁细胞诱导培养为成熟树突状细胞(muture dendritic cell,mDC),负载14种抗原肽,小部分mDC于第8天经患者腹股沟淋巴结周围区皮下注射;未贴壁细胞第7天与大部分mDC共培养诱导为杀伤性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL),对mDC及CTL进行质量控制检测,第26天经静脉回输患者体内,分析输注细胞后患者的不良反应和血常规、肝肾功能变化。结果:mDC中CD80^+细胞比例为(98.5±5)%、CD83^+细胞为(88.0±10)%、CD86^+细胞为(98.4±3)%、HLA-DR^+细胞为(98.8±2)%,mDC分泌高水平IL-12[(985±312)pg/ml]、低水平IL-10[(53±10)pg/ml]。CTL中CD3^+CD8^+细胞为(83.0±10)%、CD3^+CD56^+细胞为(24.0±5)%,CTL分泌高水平IFN-γ[(1 222±650)pg/ml]、低水平IL-10[(7±5)pg/ml]。MASCT^(TM)治疗后,绝大多数患者的精神、食欲、睡眠和体力较前好转,有2名(4.4%)患者在输注CTL细胞1 h后出现轻中度发热,未观察到其他严重明显不良反应。患者的血常规、肝肾功能均无明显异常变化。结论:MASCT^(TM)成功诱导培养典型mDC和CTL,行MASCT^(TM)治疗的HCC患者不良反应较少,临床应用安全性良好。 展开更多

关键词 肝细胞癌 多靶点抗原肽 免疫细胞治疗 安全性 临床试验

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肿瘤抗原MAGE-2多抗原肽疫苗的设计合成及免疫原性研究 被引量：3

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作者 耿淼 吴玉章 +3 位作者 管孝鞠 贾正才 周伟 邹丽云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第15期1330-1332,共3页

目的　采用多抗原肽 (multipleantigenpeptide ,MAP)设计方案 ,提高线性短肽的免疫原性。方法　对肿瘤抗原MAGE 2 2 2 0 2 2 8细胞毒性T细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)表位进行分子修饰 ,设计、合成四分支多抗原肽 (MAP4)。标准Fmo... 目的　采用多抗原肽 (multipleantigenpeptide ,MAP)设计方案 ,提高线性短肽的免疫原性。方法　对肿瘤抗原MAGE 2 2 2 0 2 2 8细胞毒性T细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)表位进行分子修饰 ,设计、合成四分支多抗原肽 (MAP4)。标准Fmoc合成方案进行合成 ,液相色谱 质谱联用 (LC MS)进行目的肽鉴定。以体外刺激人外周血单核细胞 (PBMC)诱导CTL效应及IFN γ分泌 ,标准 51 Cr释放实验与Elispot实验进行免疫原性的研究。结果　标经准 51 Cr释放实验验证 ,低浓度的MAP4可以诱导出有效的CTL效应 ,Elispot实验显示MAP4能够有效诱导的IFN γ分泌。结论　MAP的构建能够增强CTL效应和IFN γ的分泌 。 展开更多

关键词 肿瘤抗原MAGE-2 MAP 免疫原性

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