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多色双光子成像技术进展 被引量:6
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作者 崔权 陈忠云 +2 位作者 张智红 骆清铭 付玲 《激光与光电子学进展》 CSCD 北大核心 2017年第6期10-23,共14页
双光子荧光显微成像是一种非线性光学显微技术,具有高空间分辨率、高信噪比和固有的三维层析分辨能力等优点。传统的双光子荧光显微成像通常使用波长可调谐的100fs超短脉冲激光器作为激光光源。目前,人们对双光子荧光显微成像方法进行... 双光子荧光显微成像是一种非线性光学显微技术,具有高空间分辨率、高信噪比和固有的三维层析分辨能力等优点。传统的双光子荧光显微成像通常使用波长可调谐的100fs超短脉冲激光器作为激光光源。目前,人们对双光子荧光显微成像方法进行了深入研究,改进光源及探测方法是常用的手段。介绍和总结了多色双光子荧光显微成像技术的近期研究进展及其在生物医学中的应用。首先介绍了传统飞秒激光器及光学参量振荡器在多色成像中的应用,然后对光纤超连续谱在多色显微成像中的应用进行了分析,最后简要说明了增强自相位调制效应产生连续光谱以及选择性激发实现多色成像的工作。多色双光子成像技术不仅可以同时获取含有多种荧光团的待测样品的高对比度双光子荧光图像,而且具有系统结构简单、操作简便等优点,这使得其在生物医学和材料科学等领域具有广阔的应用前景,并且为生物医学诊断与研究提供了一种有效的工具和平台。 展开更多
关键词 显微 非线性显微成像 双光子荧光显微成像 多色成像 超连续谱
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黄斑囊样水肿患眼多波长炫彩成像影像特征和定量分析 被引量:3
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作者 何璐 陈长征 +3 位作者 易佐慧子 王晓玲 许阿敏 刘珏君 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期25-28,共4页
目的观察黄斑囊样水肿(CME)患眼多波长炫彩成像(MC)的影像特征,初步评估MC在CME诊断中的应用价值。方法描述性研究。2017年8月至2018年6月在武汉大学人民医院眼科检查确诊的CME患者37例42只眼纳入研究。其中,男性24例,女性13例;平均年龄... 目的观察黄斑囊样水肿(CME)患眼多波长炫彩成像(MC)的影像特征,初步评估MC在CME诊断中的应用价值。方法描述性研究。2017年8月至2018年6月在武汉大学人民医院眼科检查确诊的CME患者37例42只眼纳入研究。其中,男性24例,女性13例;平均年龄(48.51±10.29)岁。糖尿病视网膜病变14只眼,视网膜中央静脉阻塞14只眼,视网膜分支静脉阻塞8只眼,葡萄膜炎4只眼,Eales病2只眼。采用德国Zeiss公司Visucam 200免散瞳眼底照相机行眼底彩色照相(CFP)检查。采用德国Heidelberg公司Spectralis HRA2+OCT行MC、频域OCT(SD-OCT)、FFA检查。按MC标准方法,1次扫描同时获得基于488 nm的蓝光反射(BR)、515 nm的绿光反射(GR)、820 nm的红外光反射(IR)成像及标准MC和蓝绿加强(BG)等5个图像。参照SD-OCT图像,对CFP、MC图像进行评分。采用Friedman M检验和Wilcoxon符号秩和检验进行统计学处理。结果标准MC、BG像可见黄斑区片状蓝绿色隆起或花瓣状外观,周围环绕绿色隆起反射,边界清晰。BR像可见水肿区呈弱反射。GR像上可见黄斑区片状或囊样弱反射暗区,周围环绕稍强反射区。IR像可见黄斑区片状或囊样强反射,周围环绕弱反射暗区,边界清晰。CFP、标准MC、GB、IR、GR、BR像评分平均值分别为(1.20±0.94)、(3.05±0.99)、(2.90±1.04)、(2.55±1.27)、(2.00±0.94)、(0.51±0.85)分;不同成像间评分比较,差异有统计学意义(χ^2=151.61,P=0.000)。CFP评分显著低于标准MC(Z=-5.421)、BG(Z=-5.354)、IR(Z=-4.714)、GR(Z=-4.538)成像,高于BR成像(Z=-3.435),差异均有统计学意义(P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.001)。结论MC质量明显优于CFP,结合SD-OCT可作为辅助诊断CME的手段。 展开更多
关键词 黄斑水肿/诊断 体层摄影术 光学相干 荧光素血管造影术 多波长炫彩成像
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多色单分子定位显微技术研究进展(特邀)
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作者 赵悦晗 郝翔 《光子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第8期301-313,共13页
超分辨显微镜是探测分子尺度的亚细胞结构的有力工具,为生物学研究提供了新的途径。由于许多生物学问题都可以通过分析不同细胞结构间的相互作用进行研究,因此近年来发展了一系列多色超分辨显微技术。本文从生物样品制备和光学系统改进... 超分辨显微镜是探测分子尺度的亚细胞结构的有力工具,为生物学研究提供了新的途径。由于许多生物学问题都可以通过分析不同细胞结构间的相互作用进行研究,因此近年来发展了一系列多色超分辨显微技术。本文从生物样品制备和光学系统改进两个角度,对已有的多色单分子定位显微技术进行了总结,简要概括了每种技术的基本原理,分析了每种技术的优缺点及适用范围,重点归纳了近5年通过光学系统改进提升多色单分子定位显微技术性能的各类方法。最后,对快速发展的多色单分子定位显微技术领域进行了展望。 展开更多
关键词 单分子定位 超分辨成像 显微成像 荧光成像 多色成像
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眼底炫彩成像联合光相干断层扫描对视网膜动脉阻塞快速诊断及分类 被引量:1
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作者 梁燕华 李永雄 +3 位作者 黄国舜 区淑文 林婉明 黄秀清 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2021年第3期556-560,共5页
目的:探讨眼底炫彩成像(MCI)联合光相干断层扫描成像(OCT)在视网膜动脉阻塞(RAO)的快速诊断及分类中的应用。方法:对本院2018-02/2020-07诊断为RAO的患者19例19眼进行回顾性研究。所有患者在经过眼科检查后确诊为RAO,均为单眼发病,其中... 目的:探讨眼底炫彩成像(MCI)联合光相干断层扫描成像(OCT)在视网膜动脉阻塞(RAO)的快速诊断及分类中的应用。方法:对本院2018-02/2020-07诊断为RAO的患者19例19眼进行回顾性研究。所有患者在经过眼科检查后确诊为RAO,均为单眼发病,其中视网膜中央动脉阻塞(CRAO)13眼,视网膜分支动脉阻塞(BRAO)5眼,睫状视网膜动脉残留的CRAO 1眼。所有患者行最佳矫正视力、裂隙灯、OCT、MCI、FFA及视野检查及分析。结果:经裂隙灯检查,12眼(63%)出现瞳孔对光反射迟钝或消失,16眼(84%)可发现全部或部分后极部视网膜苍白水肿,10眼(53%)可发现视网膜动脉变细。行FFA检查的患者为10例(53%),其余9例未行检查,其中6例患有严重的系统性疾病,2例拒绝检查、1例有药物过敏史。所有患者经MCI及OCT检查可发现特征性眼底表现,OCT特征性改变为弥漫性内层视网膜反射增强与MCI图像绿色缺血区域形成严密的一对一关系。结论:联合MCI及OCT检查可快速确诊RAO,而且结合两者的图像特征可更精确辨认出视网膜缺血区域,有助于疾病分类及预后判断。 展开更多
关键词 视网膜动脉阻塞 眼底炫彩成像 光相干断层扫描成像 快速诊断/分类
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多波长炫彩成像与彩色眼底像对部分眼底病变的检出比较 被引量:1
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作者 何璐 王晓玲 +3 位作者 刘珏君 易佐慧子 许阿敏 陈长征 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2021年第1期113-118,共6页
目的:对比观察多波长炫彩成像(MC)和传统彩色眼底像(CFP)检查对部分眼底病变特征的检出情况。方法:回顾性分析临床确诊的眼底病患者194例208只眼。采集患眼CFP、荧光素眼底血管造影(FFA)、MC、光学相干断层扫描(OCT)图像。以FFA检查结... 目的:对比观察多波长炫彩成像(MC)和传统彩色眼底像(CFP)检查对部分眼底病变特征的检出情况。方法:回顾性分析临床确诊的眼底病患者194例208只眼。采集患眼CFP、荧光素眼底血管造影(FFA)、MC、光学相干断层扫描(OCT)图像。以FFA检查结果作为病变诊断标准,OCT作为诊断参考,对比观察MC和CFP对黄斑前膜(ERM)、黄斑裂孔(MH)、视网膜内出血(IRH)、视网膜下出血(SRH)、视网膜内积液(IRF)、视网膜下积液(SRF)、色素上皮脱离(PED)、玻璃膜疣、脉络膜新生血管(CNV)等9种常见眼底病变征象的检出情况。结果:MC对ERM(χ^(2)=12.941)、IRF(χ^(2)=29.615)、SRF(χ^(2)=16.681)、PED(χ^(2)=4.667)和CNV(χ^(2)=6.454)的检出眼数均高于CFP,差异有统计学意义(均为P<0.05);对MH(χ^(2)=1.032)、IRH(χ^(2)=1.011)、SRH(χ^(2)=1.018)和玻璃膜疣(χ^(2)=1.053)的检出眼数与CFP比较,差异无统计学意义(均为P>0.05)。GR显示浅、中层眼底病变最佳,对ERM(χ^(2)=7.333)、IRF(χ^(2)=15.763)和SRF(χ^(2)=12.102)的检出眼数均高于CFP,差异有统计学意义(均为P<0.05)。红外光反射(IR)显示视网膜外层及脉络膜层病变最佳,对PED(χ^(2)=4.667)的检出眼数高于CFP,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MC能够识别不同层次的眼底病变特征,提供的诊断信息较传统CFP更丰富,尤其是对ERM、IRF、SRF、PED和CNV的检出眼数高。 展开更多
关键词 眼底病 多波长炫彩成像 彩色眼底像 荧光素眼底血管造影 光相干断层扫描
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炫彩成像在中心性浆液性脉络膜视网膜病变检查中的临床应用探讨
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作者 胡红梅 严吕霞 +1 位作者 魏红霞 刘含军 《临床眼科杂志》 2021年第2期115-118,共4页
目的描述中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSC)在炫彩成像(MCI)上的临床特征,对比MC与常规眼底彩照两项检查发现CSC特征的有效性。方法选取2018年10月至2019年6月来我院就诊的CSC患者48例(48只眼)。每个患者常规接受眼底彩照(CFP)、荧光... 目的描述中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSC)在炫彩成像(MCI)上的临床特征,对比MC与常规眼底彩照两项检查发现CSC特征的有效性。方法选取2018年10月至2019年6月来我院就诊的CSC患者48例(48只眼)。每个患者常规接受眼底彩照(CFP)、荧光素眼底血管造影(FFA)、相关光层析成像术(OCT)以及MC检查。记录常规眼底彩照、标准炫彩成像以及无赤光、绿光、蓝光成像上的眼底特征,并加以统计分析。结果48例(48只眼)患者中,通过FFA和OCT发现视网膜下积液和视网膜色素上皮渗漏点48只眼,视网膜色素上皮受损31只眼。视网膜积液在MCI上的检出率为91.67%,IR为87.50%,GR为83.33%,显著高于在常规眼底彩照上的检出率(62.50%)(P<0.05).在荧光造影上发现的视网膜色素上皮渗漏点,在MCI上和IR上的检出率均为85.42%,显著高于眼底彩照上的检出率(27.08%)(P<0.05)。在荧光造影上所发现的视网膜色素上皮病损改变,在MCI上和IR上的检出率均分别为93.55%和90.32%,显著高于常规眼底彩照上的检出率(35.48%)。结论在诊断CSC的多模式成像的联合观察中,炫彩成像相比眼底彩照,能更有效识别渗漏点,更好地显示视网膜下积液的范围和边界。在炫彩成像图像上,尤其是IR上,更能有效识别视网膜色素上皮受损处的异常改变。因此,炫彩成像可以更好的观察眼底结构,在检查中浆的多模式成像中发挥更大的价值。 展开更多
关键词 炫彩成像 中心性浆液性脉络膜视网膜病变 视网膜下积液 渗漏点 视网膜色素上皮病损
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PEDV与TGEV双重荧光RT-LAMP检测方法的建立与评价
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作者 臧冉 徐飞飞 +5 位作者 郑丹阳 赵治钤 赵谜 王慧 高洁 穆杨 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1600-1610,共11页
为建立可快速鉴别检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的双重荧光RT-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,从Ge... 为建立可快速鉴别检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的双重荧光RT-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,从GenBank下载PEDV和TGEV不同毒株M基因序列进行比对后,针对高度保守区设计合成内、外引物对和探针,在PEDV探针5′端标记FAM基团,3′端标记BHQ1基团,在TGEV探针5′端标记CY5.5基团,3′端标记BHQ2基团,对反应条件和体系优化后建立了一种快速鉴别PEDV和TGEV的双重荧光RT-LAMP检测方法。采用建立的方法在63℃水浴锅中反应60 min,然后再85℃作用10 min结束反应,将反应管置于多色荧光成像仪,在520、690 nm双通道下即可观察结果。用该方法检测其他猪常见病毒性病原均无交叉反应;以10倍稀释的重组质粒为模板评价该方法的灵敏度,结果最低检测限为10^(2)拷贝/μL重组质粒,是常规RT-PCR方法敏感度的10倍。从175份有腹泻症状仔猪的肛拭子样品中采用建立的方法共检出PEDV阳性样品72份,TGEV阳性样品49份,PEDV和TGEV混合感染样品40份,均比采用常规RT-PCR方法的检出率高。本研究建立的双重荧光RT-LAMP方法采用普通水浴锅即可进行扩增反应,而无需对反应产物进行凝胶电泳,为快速方便的进行PED与TGE的鉴别诊断和PEDV与TGEV混合感染的同步检测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 双重荧光RT-LAMP 多色荧光成像仪
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Upconversion NaGdF4 nanoparticles for monitoring heat treatment and acid corrosion processes of hair 被引量:1
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作者 刘云新 陈增辉 +6 位作者 吴笑峰 胡仕刚 胡盼 余意 戴港涛 颜焕元 唐志军 《Journal of Rare Earths》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第5期475-482,共8页
Lanthanide-based upconversion core-shell NaGdF4 nanocrystals with strong upconversion luminescence and biocompatibility were synthesized by the solvothermal method.The multicolor upconversion emission of these NaGdF4 ... Lanthanide-based upconversion core-shell NaGdF4 nanocrystals with strong upconversion luminescence and biocompatibility were synthesized by the solvothermal method.The multicolor upconversion emission of these NaGdF4 nanoparticles could be easily obtained by controlling the core-shell compositions.These multicolor core-shell NaGdF4 upconversion nanocrystals could be employed as fluorescent probes for imaging the mouse hair,by which the porous and scalelike structure of the mouse hair were presented clearly.Meanwhile,it was directly shown by fluorescent signals that the mouse hair could resist the corrosion of the strong acid even when the concentration of hydrochloric acid was increased to 36.5%,but could not avoid the carbonization at high temperature of 400 oC.This procedure based on upconversion fluorescent nanoprobes opens a novel route for investigating the basic physical structure and chemical properties of biological tissue and organism. 展开更多
关键词 upconversion multicolor imaging mouse hair rare earths
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超分辨光学显微的成像原理及应用进展 被引量:9
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作者 付芸 王天乐 赵森 《激光与光电子学进展》 CSCD 北大核心 2019年第24期13-25,共13页
突破了衍射极限的超分辨光学显微成像通常被用于观测亚细胞的结构特性及其相互作用,对于研究基因组和攻克重大疾病具有重要意义。首先分别介绍了4种典型的超分辨显微成像技术的工作原理,然后阐述了多色荧光成像和三维成像等观测手段的... 突破了衍射极限的超分辨光学显微成像通常被用于观测亚细胞的结构特性及其相互作用,对于研究基因组和攻克重大疾病具有重要意义。首先分别介绍了4种典型的超分辨显微成像技术的工作原理,然后阐述了多色荧光成像和三维成像等观测手段的研究进展,最后综述了近年来国内外超分辨光学成像在细胞活动观测、细菌细胞研究和细胞骨架观测中的应用现状。文中指出,影响成像质量的主要因素包括荧光蛋白较差的光稳定性、低的光活化速率以及弱的荧光强度等。随着上述问题的解决,超分辨光学成像将在厚样品三维成像、多色荧光成像和活细胞快速成像等方面得到广泛应用,最终推动生命科学、材料科学的发展。 展开更多
关键词 显微 衍射极限 荧光成像 活细胞成像 多色荧光成像 三维定位
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基于多光谱荧光成像技术和SVM的葡萄霜霉病早期检测研究 被引量:9
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作者 张昭 王鹏 +5 位作者 姚志凤 秦立峰 何东健 徐炎 张剑侠 胡静波 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2021年第3期828-834,共7页
葡萄霜霉病是全球危害最严重的葡萄病害,对该病进行早期检测和防治,可提高葡萄品质和产量,提出一种基于多光谱荧光成像技术(MFI)和支持向量机模型(SVM)的霜霉病早期检测方法。对人工接种霜霉病的葡萄叶片(145个)和健康对照叶片(145个)... 葡萄霜霉病是全球危害最严重的葡萄病害,对该病进行早期检测和防治,可提高葡萄品质和产量,提出一种基于多光谱荧光成像技术(MFI)和支持向量机模型(SVM)的霜霉病早期检测方法。对人工接种霜霉病的葡萄叶片(145个)和健康对照叶片(145个)从叶背面连续6天进行多光谱荧光成像,获得试验叶片16个荧光参数(4个单独波段F440,F520,F690,F740及其相互比值)的图像。在分析不同荧光波段图像随接种天数(DPI)变化规律基础上,通过单因素方差分析和相关性分析,优选出进行霜霉病早期检测的4个波段特征F520,F690,F440/F740,F690/740,利用这4个特征构建基于SVM的霜霉病检测模型。试验发现,16个荧光参数都有早期检测霜霉病的潜力,四个单独波段中F440和F520比F690和F740对霜霉病的侵染更敏感,6DPI才显症的病斑能在F440和F520波段2DPI(接种后第二天)的荧光图像中凸显,接种叶片F440和F520波段荧光强度均随着DPI增加快速升高,在2DPI显著高于健康叶片(p<0.01),并随着DPI增加更加显著(p<0.0001);接种叶片F690和F740波段荧光强度均随着DPI增加逐渐减小,1DPI—3DPI与健康叶片无显著差异,从4DP I开始显著低于健康叶片(p<0.05),并在5DPI—6DPI更加显著(p<0.01);健康叶片荧光参数变化很小。F440极易受干扰,变异系数最大,F520最稳定。随着DPI增加,叶片被侵染程度加深,4个特征融合的SVM模型对健康和接种叶片检测准确率逐渐提高,1DPI的准确率为65.6%,3DPI检测准确率为82.2%,整个试验周期(1DPI—6DPI)的平均检测准确率达84.6%,高于单一特征中最优波段F520的阈值检测结果(1DPI的准确率为61.1%,3DPI检测准确率为78.9%,整个试验周期为80.0%)。结果表明利用MFI技术和SVM模型能实现霜霉病显症前的早期检测,为便携式葡萄霜霉病早期诊断设备的开发提供了理论依据。 展开更多
关键词 多光谱荧光成像 葡萄霜霉病 病害检测 支持向量机 特征选择
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OCTA与炫彩激光扫描眼底成像对糖尿病视网膜病变黄斑区微动脉瘤的检出比较
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作者 汤远琳 邵东平 《临床眼科杂志》 2023年第3期207-210,共4页
目的对比观察炫彩激光扫描眼底成像(MSLI)与相干光层析血管成像术(OCTA)在对糖尿病视网膜病变(DR)患眼黄斑区微动脉瘤(MAs)的检出情况。方法回顾性病例研究。临床检查确诊的DR患者32例(49只眼)纳入研究。采用Heidelberg HRA行荧光素眼... 目的对比观察炫彩激光扫描眼底成像(MSLI)与相干光层析血管成像术(OCTA)在对糖尿病视网膜病变(DR)患眼黄斑区微动脉瘤(MAs)的检出情况。方法回顾性病例研究。临床检查确诊的DR患者32例(49只眼)纳入研究。采用Heidelberg HRA行荧光素眼底血管造影(FFA)及炫彩眼底照相检查;采用Cirrus OCTA行黄斑区OCTA检查,扫描范围3 mm×3 mm。将MSLI、OCTA、FFA各自检出的MAs数进行比较分析。结果三种检测手段对MAs检出数结果比较分析差异有统计学意义:FFA[13(9,20)]>OCTA[9(7,14)]>MSLI[6(5,9)],(Wald=136.907,P<0.001)。结论OCTA与MSLI对黄斑区的MAs都能很好的进行检测,但OCTA的检出数明显高于MSLI。 展开更多
关键词 光学相干断层扫描血管成像 炫彩眼底成像 糖尿病视网膜病变 微动脉瘤
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基于Curvelet的彩色癌细胞分割新方法 被引量:2
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作者 李健 牛振山 《计算机工程与设计》 CSCD 北大核心 2012年第2期654-657,共4页
针对彩色图像分割问题,将Curvelet变换与SVM理论相结合,形成了有效的彩色图像分割新方法。通过曲波变换将彩色图像分解到各通道,用Mean Shift找到各通道上特征图像的模式点,再用模式点周围的样本训练SVM,用训练好的SVM对各通道样本进行... 针对彩色图像分割问题,将Curvelet变换与SVM理论相结合,形成了有效的彩色图像分割新方法。通过曲波变换将彩色图像分解到各通道,用Mean Shift找到各通道上特征图像的模式点,再用模式点周围的样本训练SVM,用训练好的SVM对各通道样本进行精确分类,把所有通道滤波后的图像进行重构,使癌细胞凸显并二值化。该方法可以快速,精确地定位到多目标物边界。通过MATLAB进行仿真实验,表明了该方法的有效性。 展开更多
关键词 机器视觉 曲波滤波 均值漂移 多分类支持向量机 彩色图像分割
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