目的:观察环孢素A(CsA)处理急性单核细胞白血病细胞株THP-1后对柔红霉素(DNR)的耐药性及与多药耐药相关蛋白-1(MRP1)表达的关系,探讨CsA对THP-1细胞的化疗增敏作用及相关机制。方法:噻唑蓝(MTT)法、荧光分光光度法、共聚焦激光扫描显微...目的:观察环孢素A(CsA)处理急性单核细胞白血病细胞株THP-1后对柔红霉素(DNR)的耐药性及与多药耐药相关蛋白-1(MRP1)表达的关系,探讨CsA对THP-1细胞的化疗增敏作用及相关机制。方法:噻唑蓝(MTT)法、荧光分光光度法、共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)法分别检测CsA处理前后50% THP-1细胞生长受抑的DNR浓度(IC50)、THP-1细胞内DNR含量及分布的变化。免疫细胞化学法、Western blot法检测CsA处理前后THP-1细胞MRP1蛋白表达量的变化。结果:CsA处理后THP-1细胞的IC50明显下降(1.5364±0.1751 vs 0.5588±0.0547,P<0.01),细胞内DNR含量明显增加(21.40±1.71 vs 131.96±16.45,P<0.01),且胞浆内分布更加均匀;同时MRP1蛋白表达量增高(0.2665±0.0042 vs 0.3169±0.0062,P<0.01)。结论:CsA可增加THP-1细胞对DNR的敏感性,降低其耐药性,并提示CsA对THP-1细胞耐药性的改变不是通过降低其MRP1蛋白表达量来实现的。展开更多
文摘目的:观察环孢素A(CsA)处理急性单核细胞白血病细胞株THP-1后对柔红霉素(DNR)的耐药性及与多药耐药相关蛋白-1(MRP1)表达的关系,探讨CsA对THP-1细胞的化疗增敏作用及相关机制。方法:噻唑蓝(MTT)法、荧光分光光度法、共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)法分别检测CsA处理前后50% THP-1细胞生长受抑的DNR浓度(IC50)、THP-1细胞内DNR含量及分布的变化。免疫细胞化学法、Western blot法检测CsA处理前后THP-1细胞MRP1蛋白表达量的变化。结果:CsA处理后THP-1细胞的IC50明显下降(1.5364±0.1751 vs 0.5588±0.0547,P<0.01),细胞内DNR含量明显增加(21.40±1.71 vs 131.96±16.45,P<0.01),且胞浆内分布更加均匀;同时MRP1蛋白表达量增高(0.2665±0.0042 vs 0.3169±0.0062,P<0.01)。结论:CsA可增加THP-1细胞对DNR的敏感性,降低其耐药性,并提示CsA对THP-1细胞耐药性的改变不是通过降低其MRP1蛋白表达量来实现的。
文摘目的探讨小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)对口腔鳞癌多药耐药基因mdr1(MDRI)及其表达产物P-糖蛋白(permeability-glyco-protein,P-gp)的干扰作用。方法体外构建针对MDR1的小干扰RNA,将其转染至人舌癌耐药细胞系Tca8113/DDP,采用RT-PCR法检测转染前后MDR1 m RNA的表达;采用免疫细胞化学技术比较转染前后P-gp的表达;采用MTT法检测转染前后肿瘤耐药细胞对顺铂的敏感性。结果 Tca8113/DDP细胞经MDR1-si RNA转染后48 h的转染率达最高,为71.3%;转染后mdr1 m RNA表达较对照组显著降低,降低率为68.32%,转染48 h后P-gp的表达较对照组明显降低;si RNA可显著提高Tca8113/DDP细胞对DDP的敏感性,逆转其耐药性,耐药倍数为2.05。结论 si RNA可以明显干扰口腔鳞癌MDR1及相应蛋白P-gp的表达。
