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大鼠心肌条件培养基对形成小鼠ES细胞集落的影响 被引量:16
1
作者 韩嵘 柴桂萱 尚克刚 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期185-188,共4页
报道一种新的从小鼠囊胚中培养和分离出ES细胞集落的方法。取出生2~3周龄大鼠的心肌组织制备单层培养物,收集6代以内的条件培养基(RHCM)。以RHCM培养C57BL/6J小鼠的囊胚(无饲养层),对照组以小鼠胚胎原代成... 报道一种新的从小鼠囊胚中培养和分离出ES细胞集落的方法。取出生2~3周龄大鼠的心肌组织制备单层培养物,收集6代以内的条件培养基(RHCM)。以RHCM培养C57BL/6J小鼠的囊胚(无饲养层),对照组以小鼠胚胎原代成纤维细胞(ME)为饲养层,并补加LIF因子。经过190个胚的实验证明,以RHCM为培养基培养小鼠囊胚时,胚胎贴壁率、ICM增殖率和ES细胞集落的出现率与对照组没有显著性差异,分别为67%、93%和13%。这种新的方法为简便而有效地建立与培养小鼠ES细胞系提供了有益的资料。 展开更多
关键词 大鼠 心肌 条件培养基 小鼠 胚胎 ES细胞
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卵母细胞携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达 被引量:19
2
作者 陈桂兰 黄天华 +2 位作者 谢庆东 王晓梅 熊小芳 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2005年第3期179-182,共4页
背景与目的:研究卵母细胞携带的乙肝病毒(HepatitisBvirus,HBV)DNA能否在小鼠早期胚胎中复制与表达,为HBV经卵垂直传播提供科学证据。材料与方法:手术暴露昆明小鼠卵巢,将pBR322_HBV重组质粒DNA注射到昆明小鼠卵巢内,1个动情周期(4d)后... 背景与目的:研究卵母细胞携带的乙肝病毒(HepatitisBvirus,HBV)DNA能否在小鼠早期胚胎中复制与表达,为HBV经卵垂直传播提供科学证据。材料与方法:手术暴露昆明小鼠卵巢,将pBR322_HBV重组质粒DNA注射到昆明小鼠卵巢内,1个动情周期(4d)后进行超排卵并与正常雄性小鼠合笼,收集二细胞胚,用荧光原位杂交(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)检测HBV在早期胚胎内的整合和复制;用逆转录聚含酶链反应(Reversetranscriptase_polymerasechainreaction,RT_PCR)和免疫荧光试验检测HBV基因在早期胚胎的表达。结果:FISH在小鼠二细胞胚细胞核上检测到HBVDNA阳性杂交信号,RT_PCR和免疫荧光试验在二细胞胚内检测到HBxmRNA和HBsAg。结论:HBVDNA进入雌性生殖细胞后,可以整合到宿主基因组内,通过自然受精随卵母细胞进入胚胎,并能在胚胎中复制与表达。提示HBV有可能通过雌性生殖细胞进行垂直传递。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒DNA 复制与表达 卵母细胞 小鼠胚胎
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鼠胚成骨细胞的原代培养与鉴定 被引量:19
3
作者 傅德皓 杨述华 +2 位作者 马德彰 李鲲 郜勇 《创伤外科杂志》 2006年第2期157-160,共4页
目的探讨经济、高效的原代成骨细胞培养方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法孕龄19天的昆明孕鼠(KM),无菌条件下剖腹取出胎鼠,然后取胎鼠的颅盖骨,剔净、漂洗、剪碎。用0.25%胰蛋白酶消化10分钟,终止消化后,将碎骨块接种于培养瓶中培... 目的探讨经济、高效的原代成骨细胞培养方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法孕龄19天的昆明孕鼠(KM),无菌条件下剖腹取出胎鼠,然后取胎鼠的颅盖骨,剔净、漂洗、剪碎。用0.25%胰蛋白酶消化10分钟,终止消化后,将碎骨块接种于培养瓶中培养,通过相差显微镜、透射电镜观察,并用碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组化染色和钙结节茜素红染色等方法对所获得的细胞进行鉴定。结果所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,碱性磷酸酶染色、骨钙素染色和钙结节染色均呈阳性。结论改良的组织块培养法可在较短时间内获得大量成骨细胞,所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。 展开更多
关键词 成骨细胞 原代培养 小鼠胚胎
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小鼠胚胎与子宫单层上皮细胞共培养的研究 被引量:23
4
作者 曾国庆 曹宇静 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1996年第2期212-217,共6页
本文报道建立了小鼠胚胎与小鼠子宫单层上皮细胞体外共培养系统。结果揭示;小鼠胚胎与 子宫单层上皮细胞共培养可以促进胚胎的发育、粘附和扩展;如果培养液中加入 3、67 × 10-6mol/L 17β-雌二醇,可以显著提高... 本文报道建立了小鼠胚胎与小鼠子宫单层上皮细胞体外共培养系统。结果揭示;小鼠胚胎与 子宫单层上皮细胞共培养可以促进胚胎的发育、粘附和扩展;如果培养液中加入 3、67 × 10-6mol/L 17β-雌二醇,可以显著提高胚胎在共培养系统中的发育率、粘附率和扩展率。以上结果表明:小鼠 胚胎与小鼠子宫单层上皮细胞共培养系统是研究胚泡着床机理较理想的研究手段。 展开更多
关键词 小鼠 胚胎 子宫 单层上皮细胞 共培养 啮龃
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不同品系小鼠胚胎玻璃化冷冻保存的比较研究 被引量:14
5
作者 刘丽均 顾建忠 +4 位作者 朱东琴 符杰 施美莲 张瑞忠 徐平 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第2期77-80,F003,共5页
目的 研究甘油作为冷冻保护剂、不同基因型小鼠对胚胎玻璃化冷冻的影响。方法 采用 6 5mol L的甘油作为冷冻保护剂 ,采用二步法对CBA、NOD、C57BL 6J、ICR及CD1小鼠 3 5d的胚胎进行玻璃化冷冻 ,并比较了不同品系小鼠胚胎的复苏率及... 目的 研究甘油作为冷冻保护剂、不同基因型小鼠对胚胎玻璃化冷冻的影响。方法 采用 6 5mol L的甘油作为冷冻保护剂 ,采用二步法对CBA、NOD、C57BL 6J、ICR及CD1小鼠 3 5d的胚胎进行玻璃化冷冻 ,并比较了不同品系小鼠胚胎的复苏率及移植受孕率。结果和结论 CBA、NOD、C57BL 6J,ICR及CD1的复苏率分别为 5 7 6 %、4 8%、31 3%、86 5 %及 88% ,移植受孕率为 2 1%、2 3 5 %、11%、38%和 35 5 % ,封闭群小鼠的胚胎复苏率、移植受孕率均显著高于近交系小鼠。这提示胚胎的复苏率及移植受孕率可能与小鼠的不同基因型有关。五个品系中 ,桑椹胚及早期囊胚的体外复苏率均显著高于扩张囊胚。 展开更多
关键词 品系 小鼠 胚胎玻璃化冷冻保存 比较研究 复苏率 移植受孕率
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甲醛对小鼠胚胎的发育毒性 被引量:10
6
作者 李解生 李纯颖 +1 位作者 李勇 吴成秋 《实用预防医学》 CAS 2009年第4期1242-1244,共3页
目的探讨甲醛对小鼠胚胎的体内发育毒性。方法随机选择健康性成熟的昆明种小鼠,雌雄合笼产生孕鼠,孕鼠被随机分成5组,每组8只,分别在小鼠妊娠第6~15d用5、10、20mg/kg.d的甲醛进行灌胃染毒,每天一次,同时设生理盐水对照和环磷酰胺阳性... 目的探讨甲醛对小鼠胚胎的体内发育毒性。方法随机选择健康性成熟的昆明种小鼠,雌雄合笼产生孕鼠,孕鼠被随机分成5组,每组8只,分别在小鼠妊娠第6~15d用5、10、20mg/kg.d的甲醛进行灌胃染毒,每天一次,同时设生理盐水对照和环磷酰胺阳性对照。观察孕鼠的体重增长情况;于妊娠第18d处死孕鼠取出胚胎,观察胚胎的生长发育状况、死胎和吸收胎鼠数及畸形发生情况。结果与生理盐水组比较,中、高剂量甲醛染毒可降低孕鼠体重的增长率(P<0.05),高剂量甲醛染毒孕鼠能使胚胎吸收和死亡发生率增加(P<0.05),并可抑制胎盘和胎仔生长发育,中、高剂量甲醛染毒导致胎鼠畸形发生率增加(P<0.05),但对孕鼠和胎仔的毒作用影响均弱于环磷酰胺的毒性作用(P<0.05)。结论甲醛在体内对小鼠胚胎具有发育毒作用和致畸形作用。 展开更多
关键词 甲醛 小鼠胚胎 发育毒性 致畸性 体内实验
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盐酸克仑特罗对小鼠胚胎体外发育的影响 被引量:9
7
作者 卢丽华 朱伟杰 李菁 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期7-10,共4页
目的:探讨盐酸克仑特罗对小鼠1-细胞胚胎和2-细胞胚胎体外发育的影响。方法:获取小鼠1-细胞和2-细胞胚胎,分别与盐酸克仑特罗10 ng/mL,3 ng/mL和1 ng/mL的3个剂量组共培养,观察胚胎各阶段的发育情况并计算胚胎的发育率。结果:1ng/mL和3n... 目的:探讨盐酸克仑特罗对小鼠1-细胞胚胎和2-细胞胚胎体外发育的影响。方法:获取小鼠1-细胞和2-细胞胚胎,分别与盐酸克仑特罗10 ng/mL,3 ng/mL和1 ng/mL的3个剂量组共培养,观察胚胎各阶段的发育情况并计算胚胎的发育率。结果:1ng/mL和3ng/mL组的1-细胞小鼠胚胎,从4-细胞期到囊胚阶段的发育率与对照组相比差异显著(P<0.05),3 ng/mL组显现出比1ng/mL组更强的抑制作用(P<0.01),10 ng/mL组,2-细胞期就与对照组有差异(P<0.05,其中 4-细胞至囊胚阶段P<0.01),囊胚率只有2.4%。10 g/mL组及3 ng/mL组的2-细胞小鼠胚胎,分别从4-细胞期和8-细胞期与对照组相比差异显著(P<0.05),1 ng/mL组的各个阶段胚胎发育率与对照组相比未见统计学差异(P>0.05)。培养液中含有盐酸克仑特罗使胚胎的粗颗粒增多,部分印裂球碎裂、退化。结论:盐酸克仑特罗对小鼠胚胎的体外发育有毒性作用并呈一定的剂量效应。盐酸克仑特罗使1-细胞小鼠胚胎被抑制在2-细胞期,对处于晚2-细胞期胚胎的影响明显降低。 展开更多
关键词 胚胎 体外发育 盐酸克仑特罗 囊胚阶段 细胞期
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速冻中低温保护剂浓度对小鼠胚胎发育的影响 被引量:8
8
作者 姜国诚 孙艳香 《浙江农业大学学报》 CSCD 1995年第2期208-210,共3页
用快速冷冻方法,冷冻小鼠的2-细胞胚、4-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚和囊胚,低温保护液分别含有0.5,1.5,2.5,4mol/L丙二醇,含10%的犊牛血清和0.25mol/L蔗糖,对于8-细胞以前的小鼠胚胎,快速冷... 用快速冷冻方法,冷冻小鼠的2-细胞胚、4-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚和囊胚,低温保护液分别含有0.5,1.5,2.5,4mol/L丙二醇,含10%的犊牛血清和0.25mol/L蔗糖,对于8-细胞以前的小鼠胚胎,快速冷冻保存时丙二醇的浓度在2.5mol/L和4mol/L时效果较好,随着小鼠早期胚胎(囊胚以前)的发育,抗低温冷冻的能力加强。 展开更多
关键词 小鼠胚胎 发育阶段 内二醇浓度
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不同频率诊断超声对小鼠早孕胚胎组织细胞凋亡影响的对比研究 被引量:5
9
作者 王锦惠 刘立民 +3 位作者 魏濬 雷海胜 贾胜斌 乔中东 《中国医学影像技术》 CSCD 2003年第10期1270-1271,共2页
目的 检测诊断超声不同频率 ,相同时间照射后对早孕小鼠胚胎组织细胞凋亡影响的差别。方法 应用频率 3.5MHz和频率 6 .5MHz的探头固定持续照射孕鼠腹部 ,不同频率的照射组又分为 0min组 ,5min组 ,15min组 ,30min组 ,2 4小时后取出标... 目的 检测诊断超声不同频率 ,相同时间照射后对早孕小鼠胚胎组织细胞凋亡影响的差别。方法 应用频率 3.5MHz和频率 6 .5MHz的探头固定持续照射孕鼠腹部 ,不同频率的照射组又分为 0min组 ,5min组 ,15min组 ,30min组 ,2 4小时后取出标本 ,琼脂糖凝胶电泳观察不同频率照射后DNA片段情况。结果 频率为 3.5MHz探头照射组 ,均出现凋亡梯形 ,且随时间的延长 ,梯形越明显 ;频率为 6 .5MHz照射组 ,15min照射组开始出现凋亡梯形 ,30min照射组凋亡梯形更趋明显。结论 不同频率诊断超声持续照射小鼠胚胎可引起不同程度的胚胎组织细胞凋亡 ,预测使用经阴道高频超声探头检查在诊断中相对更安全。 展开更多
关键词 超声 细胞凋亡 鼠胚胎
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人类体外受精培养液内毒素水平的评价 被引量:7
10
作者 李菁 朱伟杰 张文红 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期328-330,共3页
目的:检测人类体外受精使用的商品性培养液的内毒素水平,评价人精子存活试验和小鼠2-细胞发育试验测试内毒素的差异。方法:36批次的商品性体外受精培养液,使用前(A组,n=36),及使用后的其中25份样品(B组,n=25)采用鲎试验法检测内毒素水... 目的:检测人类体外受精使用的商品性培养液的内毒素水平,评价人精子存活试验和小鼠2-细胞发育试验测试内毒素的差异。方法:36批次的商品性体外受精培养液,使用前(A组,n=36),及使用后的其中25份样品(B组,n=25)采用鲎试验法检测内毒素水平。另对比人精子存活试验和2-细胞胚胎发育试验的敏感性。结果:A组样品无内毒素阳性检出,B组有2份样品检出内毒素。A组和B组样品24h精子活动率改变与对照组比无显著性差异(P>0.05),但A组中有3份样品抑制小鼠2-细胞胚胎的发育。结论:体外培养环境和实验操作须防止内毒素污染。虽然商品性培养液未检出内毒素,仍须对其作严格的质量控制。人精子存活试验测试培养液质量和低内毒素水平的敏感性低于小鼠2-细胞发育试验。 展开更多
关键词 内毒素 培养液 人精子 小鼠胚胎 体外受精
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鼠胚实验在新建IVF实验室中的质控作用 被引量:7
11
作者 徐薇 付景丽 +2 位作者 石云 江飞 胡华 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第14期1701-1704,共4页
目的探讨鼠胚实验对该院新建生殖实验室培养体系进行评估的可行性。方法选择昆明系小鼠进行体内及体外受精胚胎进行培养,观察常规培养条件下不同受精方式来源的小鼠胚胎及不同培养环境下对小鼠体外受精胚胎的受精率、卵裂率、囊胚率。... 目的探讨鼠胚实验对该院新建生殖实验室培养体系进行评估的可行性。方法选择昆明系小鼠进行体内及体外受精胚胎进行培养,观察常规培养条件下不同受精方式来源的小鼠胚胎及不同培养环境下对小鼠体外受精胚胎的受精率、卵裂率、囊胚率。结果体内周期数共35个,获得受精卵共844枚,受精率95.8%,卵裂率92.7%,囊胚率96.2%;体外周期数42,获得卵母细胞1 119枚,受精率79.2%,卵裂率94.8%,囊胚率85.8%;体内受精的受精率和囊胚率与体外受精之间差异显著,且差异有统计学意义。体外受精胚胎在三气培养箱培养卵裂率为79.3%,受精率为95.4%,囊胚率为88.4%;在二气培养箱中卵裂率为82.7%,受精率为95.1%、囊胚率为84.4%;体外受精和体内受精培养在受精率、卵裂率、囊胚率差异不显著。结论无论是体内受精还是体外受精培养的囊胚率均达到了质控标准,所以本实验室的培养环境适合进行人的体外受精操作;小鼠胚胎对二气或者三气培养箱的环境不具有敏感性,小鼠胚胎具有局限性,可重复性不高。 展开更多
关键词 小鼠胚胎 体内受精 体外受精 受精率 囊胚率
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用酶分离小鼠早期胚胎的研究 被引量:6
12
作者 赖双英 菊林花 +1 位作者 晁玉庆 陈玉琦 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2000年第3期46-49,共4页
用酶分离小白鼠 2——细胞、4——细胞和 8——细胞胚胎 ,获取单个卵裂球 ,将其培养在含有牛血清蛋白质的 CZB培养基微滴内。培养的小白鼠胚胎发育情况有 3种 ;(1)正常发育 ;(2 )泡囊化 ;(3)不发育。在体外培养条件下 2——细胞单个卵... 用酶分离小白鼠 2——细胞、4——细胞和 8——细胞胚胎 ,获取单个卵裂球 ,将其培养在含有牛血清蛋白质的 CZB培养基微滴内。培养的小白鼠胚胎发育情况有 3种 ;(1)正常发育 ;(2 )泡囊化 ;(3)不发育。在体外培养条件下 2——细胞单个卵裂球有 86.5 %发育成 2——细胞 ;有 35 .1%发育成 4——细胞 ,有 8.1%发育到 8——细胞 ,有 5 .4%发育到桑椹胚 ;4——细胞胚的单个卵裂球中有 83.3%发育到 2——细胞 ,37.5 %发育到 4——细胞 ,12 .5 %发育到 8——细胞 ,8.3%发育到桑椹胚 ;在 8——细胞胚的单个卵裂球中有 46.7%发育到 2——细胞 ,2 6.7%发育到 4——细胞 ,13.3%发育到 8——细胞、6.7%发育到桑椹胚。实验结果表明用酶分离小白鼠早期胚胎 ,所获卵裂球具有一定的继续发育能力 ,而且没有透明带也能发育。 展开更多
关键词 小鼠胚胎 胰蛋白酶 胚胎分割 酶法分离
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原代和传代培养的人输卵管上皮细胞对小鼠胚胎体外发育的影响 被引量:6
13
作者 钟瑜 潘善培 张春雪 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 1996年第3期100-104,共5页
为了检测人输卵管上皮细胞对早期胚胎体外发育的影响,将小鼠2细胞胚胎与人输卵管上皮细胞进行体外共培养.结果显示:无论原代培养还是传代培养的人输卵管上皮细胞都可使胚胎发育率提高,发育速度加快.经传代4次以后的细胞对胚胎发... 为了检测人输卵管上皮细胞对早期胚胎体外发育的影响,将小鼠2细胞胚胎与人输卵管上皮细胞进行体外共培养.结果显示:无论原代培养还是传代培养的人输卵管上皮细胞都可使胚胎发育率提高,发育速度加快.经传代4次以后的细胞对胚胎发育的促进作用有下降的趋势,所以传代第1至第4代是应用于共培养的最佳选择.同一代细胞中已贴壁稳定生长的细胞对胚胎发育的促进作用比刚经传代尚未贴壁的细胞大. 展开更多
关键词 输卵管 上皮细胞 共培养 体外发育 胚胎发育
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高浓度葡萄糖对昆明小鼠早期胚胎发育的影响 被引量:7
14
作者 罗晓敏 邹海燕 +6 位作者 尹芳 陈宴 张五湖 袁衡 张晓东 祝继明 黄河 《生命科学研究》 CAS CSCD 2008年第4期347-350,共4页
建立昆明小鼠受孕模型,分离并体外培养胚胎细胞.检测了各培养浓度下的细胞增殖、分化与凋亡.胚胎细胞在0.2mmol/L和5.56mmol/L葡萄糖浓度的KSOM培养基中能正常发育和孵化;而在浓度为15.56mmol/L和25.56mmol/L葡萄糖培养基中胚胎发育和... 建立昆明小鼠受孕模型,分离并体外培养胚胎细胞.检测了各培养浓度下的细胞增殖、分化与凋亡.胚胎细胞在0.2mmol/L和5.56mmol/L葡萄糖浓度的KSOM培养基中能正常发育和孵化;而在浓度为15.56mmol/L和25.56mmol/L葡萄糖培养基中胚胎发育和孵化均受到损害(P<0.005),且总细胞数和内细胞团细胞数也明显减少(P<0.01),但其细胞凋亡率与0.2mmol/L和5.56mmol/L葡萄糖浓度下胚胎细胞凋亡率无显著性差异(P>0.05).随着葡萄糖浓度的增高,胚泡总的表面积无明显变化,但胚胎细胞密度呈增加趋势.高血糖对早期胚胎的发育具有毒性作用,提示高糖可能导致妊娠合并糖尿病患者的流产和胎儿畸形率升高. 展开更多
关键词 高血糖 鼠胚胎 糖尿病 体外培养
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不同冷冻保护剂对早期卵裂期小鼠胚胎冷冻后成活率和发育的影响 被引量:3
15
作者 刘伟信 黄萍 +5 位作者 王丽 岳利民 何亚平 张金虎 王颖佳 郑煜 《细胞生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期317-320,共4页
为了评价利用不同冷冻保护剂冷冻早期卵裂期胚胎的效果,用小鼠为实验动物,采用慢速冷冻、快速融解的冷冻技术,比较丙二醇、二甲基亚砜和甘油作冷冻保护剂对小鼠2-细胞、4-细胞、8-细胞胚胎冷冻后胚胎存活率和囊胚形成率的影响。发现以... 为了评价利用不同冷冻保护剂冷冻早期卵裂期胚胎的效果,用小鼠为实验动物,采用慢速冷冻、快速融解的冷冻技术,比较丙二醇、二甲基亚砜和甘油作冷冻保护剂对小鼠2-细胞、4-细胞、8-细胞胚胎冷冻后胚胎存活率和囊胚形成率的影响。发现以丙二醇和蔗糖为冷冻保护剂冷冻4-细胞、8-细胞胚胎,解冻后胚胎成活率和囊胚形成率显著高于以二甲基亚砜或甘油为冷冻保护剂。结果表明,丙二醇是一种冷冻早期卵裂期小鼠胚胎有效的冷冻保护剂。 展开更多
关键词 冷冻保护剂 小鼠胚胎 成活率 囊胚形成率 发育
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Evaluation on Sensitivity of the Human Sperm Motility Assay for Detecting Endotoxin in Culture Medium 被引量:5
16
作者 Wei-jieZHU JingLI +1 位作者 Wen-hongZHANG Kang-shouYAO 《Journal of Reproduction and Contraception》 CAS 2003年第1期31-38,共8页
Objective To investigate the sensitivity of the human sperm motility assay for detecting endotoxin in culture mediumMaterials &. Methods Motile sperm were separated and exposed to different concentrations of endot... Objective To investigate the sensitivity of the human sperm motility assay for detecting endotoxin in culture mediumMaterials &. Methods Motile sperm were separated and exposed to different concentrations of endotoxin (0.5 ng/mL, 1ng/mL, 10ng/mL, 1000ng/mL, 10 000ng/ mL, and 50 000ng/mL), and sperm motility was determined after incubation. Effects of endotoxin on sperm motility in media without albumin were also examined. In addition, at the same concentrations of endotoxin (0. 5ng/mL, 1 ng/mL, and 10 ng/ mL ) , the sensitivity of the human sperm motility assay was compared to those of 1-cell and 2-cell mouse embryo bioassays.Results At levels of 0. 5ng/mL-1000ng/mL endotoxin in media with 2mg/mL albumin, sperm did not show significant change in motility during 24 h of incubation when compared with the control (P>0. 05). However, the sperm motility was significantly inhibited at endotoxin dosages of 10 000 and 50 000 ng/mL. In the absence of albumin supplementation, at endotoxin levels of 50 000ng/mL, and 1 000ng/mL, there was a marked decrease in sperm motility compared with the control after 2 h or 8 h of incubation, respectively (P<0. 01). In media containing 0. 5 ng/mL and 1 ng/ mL endotoxin, 1-cell and 2-cell mouse embryos had significantly reduced developmental rates in all developmental stages, and at the level of 10ng/mL, the development of the embryos was arrested. Conclusion The human sperm motility assay could detect high levels of endotoxin in culture medium but its sensitivity to endotoxin would be inferior to that of the 1-cell or 2-cell mouse embryo bioassay. In the absence of albumin supplementation, the sensitivity of the sperm motility assay could be improved. 展开更多
关键词 ENDOTOXIN human sperm MOTILITY mouse embryo in vitro culture
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应用巢式及复合PCR对小鼠早期胚胎进行性别鉴定 被引量:6
17
作者 王晗 窦忠英 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期158-161,165,共5页
根据小鼠SRY基因,设计并合成内外两对巢式PCR引物;同时,根据ZFY—ZFX基因的同源性,设计 合成其共同的巢式PCR引物,对昆白小鼠组织DNA样品进行了性别鉴定,雄性样品可扩增262bp的SRY基 因和137bp的ZFY-ZFX基因片断,而雌性样品只能扩增137b... 根据小鼠SRY基因,设计并合成内外两对巢式PCR引物;同时,根据ZFY—ZFX基因的同源性,设计 合成其共同的巢式PCR引物,对昆白小鼠组织DNA样品进行了性别鉴定,雄性样品可扩增262bp的SRY基 因和137bp的ZFY-ZFX基因片断,而雌性样品只能扩增137bp的ZFY—ZFX基因片断,其鉴定结果与已知性别 一致。将2-细胞、4-细胞、8-细胞和16细胞胚胎视为微量细胞样品进行PCR扩增,通过常规PCR与巢式PCR、 复合PCR的比较,确立了巢式及复合PCR的扩增体系。结合核型分析和PCR法共鉴定21枚胚胎,其中雄性12 枚,雌性8枚,鉴定准确率为95.2%。 展开更多
关键词 小鼠胚胎 性别鉴定 PCR SRY基因 ZFY-ZFX基因
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Cx43、β-catenin、Smo在第二生心区的表达规律及意义
18
作者 丁泽原 闫玉楠 +3 位作者 谢建山 师亮 景雅 杨艳萍 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第19期3042-3048,共7页
背景:第二生心区对于胚胎心脏发育具有重要意义,其发育异常会导致多种心脏畸形,Cx43基因敲除后第二生心区细胞的形成和增殖减少,但具体原因尚未明确。目的:①明确β-catenin、Smo以及Cx43在内胚层与第二生心区的表达模式,观察其有无共表... 背景:第二生心区对于胚胎心脏发育具有重要意义,其发育异常会导致多种心脏畸形,Cx43基因敲除后第二生心区细胞的形成和增殖减少,但具体原因尚未明确。目的:①明确β-catenin、Smo以及Cx43在内胚层与第二生心区的表达模式,观察其有无共表达;②探究Cx43与Wnt/β-catenin通路或Shh通路之间是否存在相互作用,共同参与第二生心区的发育。方法:选取胚龄10-12 d的ICR小鼠胚胎石蜡包埋连续切片,进行免疫组织化学染色、苏木精-伊红染色、免疫荧光染色;剥离胚龄11 d小鼠胚胎的原始消化管用于蛋白印迹实验和免疫共沉淀。结果与结论:①胚龄10-12 d,Cx43与Isl1在前肠腹侧和心包腔背侧壁的部分间充质细胞呈共表达,Isl1阳性细胞增多的同时Cx43阳性细胞也增多;②胚龄10-12 d,Cx43与β-catenin在内胚层腹侧共表达;③胚龄10-12 d,Cx43与Smo在内胚层上共表达;④免疫共沉淀结果表明Cx43与β-catenin之间存在相互作用,共同参与第二生心区的发育。 展开更多
关键词 小鼠胚胎 第二生心区 流出道 WNT/Β-CATENIN通路 Shh通路 CX43 免疫共沉淀
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不同机械辅助孵化方式对小鼠胚胎体外发育影响的研究 被引量:6
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作者 张爱军 冯云 +3 位作者 夏兰 黄晓燕 孙贻娟 陆小溦 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期675-678,共4页
目的:探讨不同机械切口辅助孵化方式对小鼠胚胎体外发育的影响。方法:将678枚2-4-细胞期昆明白种小鼠胚胎随机分为A(183枚)、B(177枚)、C(168枚)组和对照组(150枚)。A、B、C组采用机械法在透明带上分别开“─”、“┼”、“┤”形状切口... 目的:探讨不同机械切口辅助孵化方式对小鼠胚胎体外发育的影响。方法:将678枚2-4-细胞期昆明白种小鼠胚胎随机分为A(183枚)、B(177枚)、C(168枚)组和对照组(150枚)。A、B、C组采用机械法在透明带上分别开“─”、“┼”、“┤”形状切口,对照组不作切口,比较各组的囊胚获得率和孵出率。结果:A、B、C组d5囊胚获得率分别为92.35%、92.09%和91.07%,与对照组的93.33%比较,无统计学差异(P>0.05);d6囊胚完全孵出率依次为75.00%、91.52%和90.57%,显著高于对照组的48.25%(P<0.001)。B、C组d6囊胚完全孵出率无统计学差异(P>0.05),但均显著高于A组(P≤0.001)。A组的辅助孵化时间(13.88±1.72s)显著小于B、C组(44.46±2.61s和53.73±3.29s)(P<0.05);且B、C组间也有显著差异,P<0.05。结论:不同机械切口的辅助孵化方式均能有效提高囊胚孵出率;“┼”和“┤”形状切口的辅助孵化效果显著优于单一切口者;“┤”较“┼”形状切口的辅助孵化方式更省时、安全,较“─”方式更有效,值得推广。 展开更多
关键词 辅助孵化 小鼠胚胎 体外发育
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小鼠早期胚胎原始生殖细胞的组织化学研究 被引量:4
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作者 诸定寿 刘英琴 +1 位作者 史小林 路欣 《首都医学院学报》 1989年第3期188-192,共5页
对妊娠12.5~16.5d小鼠胚胎的原始性腺做恒冷箱切片与胶原酶分离标本进行组织化学研究。结果证明,原始生殖细胞含有丰富的碱性磷酸酶(AKP)和亮氨酸氨基肽酶(LNAse),后者为作者第一次发现。酸性磷酸酶(ACP),非特异性酯酶(NSE),葡萄糖-6-... 对妊娠12.5~16.5d小鼠胚胎的原始性腺做恒冷箱切片与胶原酶分离标本进行组织化学研究。结果证明,原始生殖细胞含有丰富的碱性磷酸酶(AKP)和亮氨酸氨基肽酶(LNAse),后者为作者第一次发现。酸性磷酸酶(ACP),非特异性酯酶(NSE),葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase),琥珀酸脱氢酶(SDH),3-磷酸腺苷酶(ATPase),糖原及脂类含量极少。用AKP染色可把原始生殖细胞分为大、中和小3类,后者与体细胞很难区别。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 组织化学 小鼠 胚胎
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