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Alzheimer病Aβ_(1-42)肽和IL-4双基因表达质粒的构建和表达鉴定
1
作者 倪兵 杨日高 +4 位作者 黎万玲 姜曼 李艳秋 范文辉 吴玉章 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第15期1325-1329,共5页
目的　构建Alzheimer病Aβ1 - 42 基因和小鼠IL 4共表达质粒 ,探讨其作为Alzheimer病特异疫苗的可能性。方法　全基因合成Aβ1 - 42 基因片段并克隆入pMD18 T载体中 ,再从Aβ1 - 42 pMD18 T重组质粒中切下Aβ1 - 42 基因并克隆入TA CE... 目的　构建Alzheimer病Aβ1 - 42 基因和小鼠IL 4共表达质粒 ,探讨其作为Alzheimer病特异疫苗的可能性。方法　全基因合成Aβ1 - 42 基因片段并克隆入pMD18 T载体中 ,再从Aβ1 - 42 pMD18 T重组质粒中切下Aβ1 - 42 基因并克隆入TA CE5真核双表达载体中 ,构建重组质粒Aβ1 - 42 TACE5。从pUMMV mIL4质粒中切下mIL 4并克隆到重组质粒Aβ1 - 42 TACE5中 ,构建双表达重组质粒Aβ1 - 42 mIL 4 TACE5测序鉴定克隆基因的正确性。脂质体试剂Lipofectamine 2 0 0 0体外转染Aβ1 - 42 mIL 4 TACE5重组质粒于BHK 2 1细胞中 ,用ECL Western blot方法鉴定mIL 4和Aβ1 - 42 能在该细胞中共表达。结果　正确构建了Aβ1 - 42 mIL 4 TACE5双表达重组质粒 ,并且在转化此质粒的BHK 2 1细胞中检测出了Aβ1 - 42 和mIL 4的表达。结论　双表达重组质粒Aβ1 - 42 mIL 4 TACE5基本可以满足其作为Alzheimer病特异的候选DNA疫苗的要求 。 展开更多
关键词 ALZHEIMER病 AΒ1-42 mil4 基因疫苗
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蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在哮喘小鼠肺组织的表达及其与气道炎症关系
2
作者 王瑞玲 刘剑波 《中国现代医药杂志》 2011年第5期12-16,共5页
目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在哮喘小鼠肺组织的表达及其与哮喘气道炎症的关系。方法实验分为3组,随机将30只BALB/c小鼠分为对照组(N)、哮喘组(A)、原矾酸钠干预组(S),每组10只。哮喘组采用OVA腹腔注射致敏、长时间反复OVA雾化吸入... 目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在哮喘小鼠肺组织的表达及其与哮喘气道炎症的关系。方法实验分为3组,随机将30只BALB/c小鼠分为对照组(N)、哮喘组(A)、原矾酸钠干预组(S),每组10只。哮喘组采用OVA腹腔注射致敏、长时间反复OVA雾化吸入复制慢性哮喘动物模型。对照组采用等量生理盐水腹腔注射,生理盐水雾化吸入。原矾酸钠组早期同哮喘模型组一样采用OVA腹腔注射及OVA雾化吸入,在动物处死前末周采用原矾酸钠溶液腹腔注射。末次激发后24h内处死动物,支气管肺泡灌洗液(BALF)作细胞计数测小鼠的白细胞总数及分类,免疫组化测IL-4R的表达,逆转录PCR测小鼠肺组织SHP-1mRNA的表达。结果细胞总数A组(7.35±0.589)×105/ml与N组(1.35±0.369)×105/ml比较差异有统计学意义(P<0.05),S组(7.55±0.925)×105/ml与N组差异有统计学意义(P<0.05),A组与S组比较差异无统计学意义(P>0.05)。IL-4RIODA组(149.221±11.154)与N组(92.676±16.414)比较差异有统计学意义(P<0.05),S组(150.337±10.832)与N组差异有统计学意义(P<0.05),A组与S组比较差异无统计学意义(P>0.05)。SHP-1mRNA含量积分光密度A组(0.0763±0.018)与N组(2.728±0.101)比较差异有统计学意义(P<0.05),S组(0.064±0.011)与N组比较差异有统计学意义(P<0.05),A组与S组差异无统计学意义(P>0.05)。各组肺组织中IL-4R与SHP-1mRNA均呈负相关,相关系数分别是A组r=-0.963,S组r=-0.909,N组r=-0.956。结论 SHP-1mRNA的表达与哮喘小鼠炎性细胞及IL-4R的表达呈负相关。 展开更多
关键词 蛋白酪氨酸磷酸酶 SHP-1 哮喘小鼠 il-4R 炎性细胞
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