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EGFP-LC3稳定细胞系的建立及对Aβ自噬效应的研究
1
作者
房芳
张莹
+3 位作者
彭向雷
王荷
张钊
郑妍鹏
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2015年第7期984-991,共8页
该文建立了稳定表达EGFP-LC3的HEK293细胞系,以10μmol/L的Aβ肽及其不同疏水性氨基酸含量的截短形式处理细胞24 h,计数LC3的荧光斑点数;Western blot检测LC3B表达量的变化;MTT检测特定Aβ诱导细胞自噬后对细胞活性的差异;用透射电镜确...
该文建立了稳定表达EGFP-LC3的HEK293细胞系,以10μmol/L的Aβ肽及其不同疏水性氨基酸含量的截短形式处理细胞24 h,计数LC3的荧光斑点数;Western blot检测LC3B表达量的变化;MTT检测特定Aβ诱导细胞自噬后对细胞活性的差异;用透射电镜确认自噬体的细胞超微结构。结果显示,G418(700μg/m L)筛选6周后,建立了稳定表达EGFP-LC3的HEK293细胞系;Aβ25-35、Aβ40和Aβ42诱导细胞内LC3荧光斑点的效果较明显;Western blot结果显示LC3B的酯化,即LC3BI向LC3BII转变;MTT检测发现,与Aβ40相比,Aβ42处理后伴随自噬的细胞毒性更强;电镜可以见到Aβ诱导的自噬小体。提示,Aβ肽及其截短的疏水性片段均可诱导自噬,且诱导自噬的效果与疏水性氨基酸含量无关;同时,Aβ42细胞损伤强于Aβ40。该研究为进一步探讨AD自噬机制提供了实验基础。
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关键词
β-淀粉样肽(Aβ)
自噬
阿尔茨海默病(AD)
微管相关蛋白轻链
3
(
maplc
3
LC
3
)
自噬小体
原文传递
题名
EGFP-LC3稳定细胞系的建立及对Aβ自噬效应的研究
1
作者
房芳
张莹
彭向雷
王荷
张钊
郑妍鹏
机构
北京交通大学理学院生命科学与生物工程研究院
出处
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2015年第7期984-991,共8页
基金
国家自然科学基金(批准号:81100809
81271417)
北京市自然科学基金(批准号:7152090)资助的课题~~
文摘
该文建立了稳定表达EGFP-LC3的HEK293细胞系,以10μmol/L的Aβ肽及其不同疏水性氨基酸含量的截短形式处理细胞24 h,计数LC3的荧光斑点数;Western blot检测LC3B表达量的变化;MTT检测特定Aβ诱导细胞自噬后对细胞活性的差异;用透射电镜确认自噬体的细胞超微结构。结果显示,G418(700μg/m L)筛选6周后,建立了稳定表达EGFP-LC3的HEK293细胞系;Aβ25-35、Aβ40和Aβ42诱导细胞内LC3荧光斑点的效果较明显;Western blot结果显示LC3B的酯化,即LC3BI向LC3BII转变;MTT检测发现,与Aβ40相比,Aβ42处理后伴随自噬的细胞毒性更强;电镜可以见到Aβ诱导的自噬小体。提示,Aβ肽及其截短的疏水性片段均可诱导自噬,且诱导自噬的效果与疏水性氨基酸含量无关;同时,Aβ42细胞损伤强于Aβ40。该研究为进一步探讨AD自噬机制提供了实验基础。
关键词
β-淀粉样肽(Aβ)
自噬
阿尔茨海默病(AD)
微管相关蛋白轻链
3
(
maplc
3
LC
3
)
自噬小体
Keywords
β-Amyloid
peptide（Aβ）
autophagy
Alzheimer＇s
disease（AD）
microtubule
-
associated
protein
1
light
chain
3
（
maplc
3
LC
3
）
autophagosomes
分类号
R749.16 [医药卫生—神经病学与精神病学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
EGFP-LC3稳定细胞系的建立及对Aβ自噬效应的研究
房芳
张莹
彭向雷
王荷
张钊
郑妍鹏
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2015
0
原文传递
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参考文献
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