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原发性胆汁性肝硬化患者miR-let-7b的异常表达及其意义 被引量：11
1
作者 钱琤 任传路 +3 位作者 陈孙孝 仲人前 秦琴 邓安梅 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期533-536,共4页
目的探讨原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者外周血单个核细胞（PBMC）microRNA（miR—let-7b）的表达及其临床意义。方法以60例PBC患者和35名健康对照者作为研究对象，应用荧光定量RT-PCR方法检测miR-let-To的表达。分析miR-let-7b）与May... 目的探讨原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者外周血单个核细胞（PBMC）microRNA（miR—let-7b）的表达及其临床意义。方法以60例PBC患者和35名健康对照者作为研究对象，应用荧光定量RT-PCR方法检测miR-let-To的表达。分析miR-let-7b）与Mayo风险评分及临床分期的相关性。检测PBC患者血清白细胞介素18、总胆红素、碱性磷酸酶、y-谷氨酰转移酶的水平，分析其与miR-let-7b的相关性。独立样本数据比较用非参数Mann-Whitney检验;相关分析采用Spearman相关性检验。结果PBC患者的PBMC miR-let-7b的相对表达水平显著低于健康对照者，差异有统计学意义（0．096±0．047与1．000±0．293，Z=-8．101，P〈0．01）。Ⅱ、Ⅲ、IV期PBC患者PBMCmiR-let-7b的相对表达水平显著低于Ⅰ期患者，与Ⅰ期比较，q值分别为7．697，7．075，12．07，P值均〈0．01;IV期患者显著低于Ⅱ、Ⅲ期患者，q值分别为6．499和4．423，P值均〈0．01。PBC患者PBMCmiR-let-7b的相对表达水平与Mayo风险评分呈负相关（r=-0．4930，P〈0．01），与白细胞介素18（r=-0．4643，P〈0．01）、碱性磷酸酶（r=-4119，P〈0．01）水平也呈负相关，与总胆红素、y-谷氨酰转移酶无明显相关陛。结论PBC患者PBMC miR-let-7b）表达水平显著降低，与疾病进程呈负相关，这为今后PBC的诊断和预防提供了新的线索。 展开更多
关键词 原发性胆汁性肝硬化 mir-let-7b 自身免疫性疾病
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miR-let-7b通过调控相关细胞周期蛋白影响皮肤黑色素瘤的增殖和凋亡 被引量：5
2
作者 秦琴 宁花兰 +3 位作者 陈小燕 陈少英 张艳珍 陈大江 《中国美容医学》 CAS 2018年第7期79-82,共4页
目的:探讨mi R-let-7b通过调控相关细胞周期蛋白影响皮肤黑色素瘤的增殖和凋亡。方法:q PCR法检测mi R-let-7b在黑色素瘤组织和细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测mi R-let-7b与CCND1之间的相互作用;MTT增殖实验检测抑制mi R-le... 目的:探讨mi R-let-7b通过调控相关细胞周期蛋白影响皮肤黑色素瘤的增殖和凋亡。方法:q PCR法检测mi R-let-7b在黑色素瘤组织和细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测mi R-let-7b与CCND1之间的相互作用;MTT增殖实验检测抑制mi R-let-7b后黑色素瘤细胞的增殖能力的变化情况;流式细胞术检测抑制mi R-let-7b后黑色素瘤细胞的凋亡行为的变化情况。结果:与癌旁正常皮肤组织相比,黑色素瘤组织中mi R-let-7b的表达水平相对上调,与其他黑色素瘤细胞株相比,A375细胞中mi R-let-7b表达最高;双荧光素酶实验证实mi R-let-7b能与CCND1的3’UTR特异性结合,可以调控CCND1的表达与活性;抑制mi R-let-7b的表达后可以抑制黑色素瘤细胞的增殖能力;同时可以促进黑色素瘤细胞的凋亡行为。结论:mi R-let-7b可以调控CCND1的表达从而影响黑色素瘤细胞的增殖和凋亡。 展开更多
关键词 mi R-let-7b 黑色素瘤 CCND1 凋亡 增殖
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核因子-κB抑制物激酶ε促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展的实验研究 被引量：2
3
作者 郭彩丽 郭高超 +1 位作者 黄强 张振中 《肿瘤基础与临床》 2018年第6期464-468,共5页
目的探讨核因子-κB抑制物激酶ε(IKKε)通过IKKε-Yes相关蛋白1(Yap1)-miR-Let-7b/i途径促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展的具体作用机制。方法构建IKKε短发夹核糖核酸(shRNA)慢病毒及YAP1小干扰RNA(siRNA)。以IKKεshRNA慢病毒转染U87-M... 目的探讨核因子-κB抑制物激酶ε(IKKε)通过IKKε-Yes相关蛋白1(Yap1)-miR-Let-7b/i途径促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展的具体作用机制。方法构建IKKε短发夹核糖核酸(shRNA)慢病毒及YAP1小干扰RNA(siRNA)。以IKKεshRNA慢病毒转染U87-MG细胞,下调细胞中IKKε的表达水平。通过RT-PCR及Western blot检测细胞中IKKε、YAP1及miR-Let-7b/i的表达;通过Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力的变化。以YAP1 siRNA转染U87-MG细胞株,下调细胞中YAP1的表达水平。通过RT-PCR及Western blot检测细胞中YAP1及miR-Let-7b/i的表达。结果与对照组和无义序列组相比较,转染IKKεshRNA组IKKε蛋白及mRNA水平明显降低;YAP1蛋白水平明显降低;miR-Let-7b/i水平明显升高;穿过小室细胞数明显降低(P均<0.05)。与对照组和无义序列组相比较,转染YAP1 siRNA组YAP1蛋白及mRNA水平明显降低;miR-Let-7b/i水平明显升高(P均<0.05)。结论 IKKε可以通过IKKε-YAP1-miR-Let-7b/i途径促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展,有望为人胶质母细胞瘤的治疗提供新的治疗策略。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 核因子-κb抑制物激酶ε Yes相关蛋白1 mir-let-7b mir-let-7i
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MiR-let-7b、IMP3、HMGA2在宫颈鳞癌中的表达及临床意义 被引量：3
4
作者 龙玲艳 王晴 张蓓 《临床与病理杂志》 CAS 2022年第3期539-546,共8页
目的:探究宫颈鳞癌组织中miR-let-7b、IMP3及HMGA2的表达情况,并探讨其相关性以及临床意义。方法:选取2016年1月至2020年7月徐州市中心医院的207例宫颈组织标本为研究对象,其中包括正常宫颈(normal cervix,NC)30例、低度鳞状上皮内病变(... 目的:探究宫颈鳞癌组织中miR-let-7b、IMP3及HMGA2的表达情况,并探讨其相关性以及临床意义。方法:选取2016年1月至2020年7月徐州市中心医院的207例宫颈组织标本为研究对象,其中包括正常宫颈(normal cervix,NC)30例、低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)32例、高度鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)39例、宫颈鳞癌(squamous cancer cervix,SCC)106例。采用real-timeRT-PCR法检测宫颈组织中miR-let-7b的表达水平,免疫组织化学法检测宫颈组织中IMP3、HMGA2的表达,分析miR-let-7b、IMP3、HMGA2在宫颈组织中表达的相关性以及三者与SCC患者临床病理学特征的关系。结果:MiR-let-7b在NC、LSIL、HSIL、SCC中的相对表达量呈逐渐下降的趋势(P<0.01)。IMP3在NC、LSIL、HSIL、SCC中的阳性表达率分别为3.3%、46.9%、79.5%、89.6%;HMGA2在NC、LSIL、HSIL、SCC中的阳性表达率分别为13.33%、53.13%、87.18%、88.68%。SCC、HSIL、LSIL与NC及SCC、HSIL与LSIL的IMP3及HMGA2相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);SCC与HSIL比较,二者的表达组间差异无统计学意义(P=0.05)。SCC患者宫颈组织中miR-let-7b、IMP3、HMGA2表达在不同年龄组的差异无统计学意义(分别P=0.691,P=0.957,P=0.132),而三者在不同分化程度、淋巴结转移状态、FIGO分期、浸润深度的表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:SCC组织中miR-let-7b低表达,IMP3、HMGA2高表达,miR-let-7b与IMP3、HMGA2表达呈负相关,IMP3与HMGA2表达呈正相关。三者表达与SCC患者的FIGO分期、分化程度、淋巴结转移状态、浸润深度有关,联合检测miR-let-7b和IMP3、HMGA2表达可能对宫颈鳞癌的早期诊断、疾病分期、判断预后提供一定帮助。 展开更多
关键词 mir-let-7b IMP3 HMGA2 宫颈鳞癌
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miR-let-7b慢病毒载体促进大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化 被引量：1
5
作者 周雪颖 李双月 +4 位作者 曲淑贤 曲宴慧 邵颖 孙经淞 朴丰源 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第7期1146-1152,共7页
微小RNA在生命体生长、衰老的过程中起着重要的作用,参与骨髓间充质干细胞(MSCs)重要的生物学进程,包括增殖、分化、信号转导和死亡等。该文探讨了miR-let-7b对MSCs来源神经细胞的调控作用。体外分离、扩增大鼠MSCs,通过细胞形态学观察... 微小RNA在生命体生长、衰老的过程中起着重要的作用,参与骨髓间充质干细胞(MSCs)重要的生物学进程,包括增殖、分化、信号转导和死亡等。该文探讨了miR-let-7b对MSCs来源神经细胞的调控作用。体外分离、扩增大鼠MSCs,通过细胞形态学观察、表面标志物的流式细胞仪检测进行鉴定。将MSCs分为miR-let-7b+组、miR-let-7b-组和对照组,分别转染miR-let-7b慢病毒载体、Anti-rno-miR-let-7b Inhibitor载体及不进行任何转染操作,实时荧光定量PCR(RTq PCR)检测各组细胞miR-let-7b的表达水平,确认转染情况。多因子联合法诱导各组MSCs向神经细胞分化,RT-q PCR检测神经细胞标志物MAP-2的表达,免疫细胞化学染色检测神经原特异性烯醇化酶(NSE)的表达和各组MSCs的神经细胞分化率。分离培养的MSCs在镜下呈长梭形或成纤维细胞样,CD90、CD44阳性表达率均大于90%,CD45的表达不足2%,证实得到的细胞即为MSCs。RTq PCR结果显示,与对照组相比,miR-let-7b+组的miR-let-7b表达水平升高,miR-let-7b-组几乎未检测到miR-let-7,提示miR-let-7b载体及miR-let-7b Inhibitor载体均成功转染了MSCs。经诱导分化后,与对照组相比,miR-let-7b+组神经细胞标志蛋白SIM312、Gap43、MBP和NSE与对照组相比表达水平显著升高(P<0.05);miR-let-7b-组SIM312、Gap43、MBP和NSE表达水平与miR-let-7b+组相比具有明显差异(P<0.05)。结果提示,miR-let-7b可以促进MSCs向神经细胞分化,通过控制miR-let-7b的水平可以调控MSCs的神经细胞分化率。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 mir-let-7b 神经元 诱导分化 慢病毒
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miR-let-7b对卵泡颗粒细胞发育的作用
6
作者 巩转娣 魏黎敏 +4 位作者 白生菊 拜小强 牛宇辉 杨娟 魏锁成 《西北民族大学学报（自然科学版）》 2020年第3期35-40,共6页
目的:目前为止,尚不清楚micro-RNA(miR)-let-7b是否通过MAP3K1调节卵泡颗粒细胞(FGCs)凋亡,本研究拟运用PCR和Western blotting方法对此进行实验验证.方法:应用CCK-8测定细胞存活率.设计合成miR-let-7b和MAP3K1 mRNA特异性引物,利用qRT-... 目的:目前为止,尚不清楚micro-RNA(miR)-let-7b是否通过MAP3K1调节卵泡颗粒细胞(FGCs)凋亡,本研究拟运用PCR和Western blotting方法对此进行实验验证.方法:应用CCK-8测定细胞存活率.设计合成miR-let-7b和MAP3K1 mRNA特异性引物,利用qRT-PCR和Western Blotting分析FGCs中miR-let-7b和MAP3K1 mRNA基因与蛋白的表达水平.结果:随着miR-let-7b模拟物剂量(40、60、80、100、120μM)的增加,FGC的增殖活性逐渐降低,MIM-4组的增殖活性明显低于CG和MIM-1组(P<0.05).miR-let-7b表达水平随着模拟物剂量的增加而逐渐降低,MIM-3和MIM-4组的miR-let-7b水平低于MIM-1(P<0.05或P<0.01).MIM-3和MIM-4组MAP3K1 mRNA和蛋白水平显著低于CG,而且MIM-4组MAP3K1 mRNA和蛋白水平低于MIM-1组(P<0.05).结论:miR-let-7b可明显降低FGC增殖活性.下调FGC中miR-let-7b mRNA表达水平,miR-let-7b处理可剂量依赖性地降低MAP3K1 mRNA和蛋白质表达水平. 展开更多
关键词 微小RNA let-7b 卵泡颗粒细胞 MAP3K1 蛋白表达
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miR-let-7b-5p对急性胰腺炎AR42J细胞凋亡及自噬的作用研究 被引量：3
7
作者 刘东菊 潘路娟 +4 位作者 梁华益 周青宏 李雪颀 潘春风 覃月秋 《右江民族医学院学报》 2022年第1期6-10,共5页
目的探讨miR-let-7b-5p对急性胰腺炎AR42J细胞凋亡和自噬的影响。方法以未处理的AR42J细胞作为正常对照组,1×10^(-8) mol/L浓度的雨蛙素诱导大鼠胰腺腺泡细胞(AR42J)24h建立体外急性胰腺炎模型,慢病毒携带miR-let-7b-5p的模拟物(mi... 目的探讨miR-let-7b-5p对急性胰腺炎AR42J细胞凋亡和自噬的影响。方法以未处理的AR42J细胞作为正常对照组,1×10^(-8) mol/L浓度的雨蛙素诱导大鼠胰腺腺泡细胞(AR42J)24h建立体外急性胰腺炎模型,慢病毒携带miR-let-7b-5p的模拟物(miRNA mimic)、抑制物(miRNA inhibitio)和空病毒转染急性胰腺炎模型细胞作为miR-let-7b-5p过表达组、低表达组和阴性对照组,RT-qPCR验证转染效果,检测凋亡基因Caspase-3 mRNA和自噬基因LC3ⅡmRNA的表达量;Western Blot检测Caspase-3及LC3Ⅱ的蛋白表达。结果与正常对照组相比,阴性对照组的miRlet-7b-5p表达量显著降低(P<0.01),凋亡基因Caspase-3mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.01),自噬基因LC3ⅡmRNA及蛋白表达增加(P<0.05)。与阴性对照组相比,过表达组miR-let-7b-5p表达量显著增加(P<0.01),凋亡基因Caspase-3mRNA及蛋白表达均减少(P<0.05),LC3ⅡmRNA及蛋白表达均增加(P<0.05);低表达组miR-let-7b-5p表达量显著降低(P<0.01),凋亡基因Caspase-3mRNA及蛋白表达均增加(P<0.05)、自噬基因LC3ⅡmRNA及蛋白表达均增加(P<0.05)。结论miR-let-7b-5p可调控急性胰腺炎AR42J细胞的凋亡基因Caspase-3和自噬基因LC3Ⅱ的表达,从而影响胰腺细胞的凋亡和自噬。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 mir-let-7b-5p 凋亡 自噬
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miRlet-7b抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移及其机制 被引量：3
8
作者 曲杰 王胜林 +2 位作者 吕喜英 李青山 杨宗伟 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2012年第4期328-331,共4页
目的:观察miR let-7b对乳腺癌MCF-7细胞迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法:合成miR let-7b并转染乳腺癌MCF-7细胞,以miR-control作参照。通过划痕实验观察转染前后细胞迁移能力的变化,运用PCR和蛋白质印迹法检测转染miR let-7b前后M... 目的:观察miR let-7b对乳腺癌MCF-7细胞迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法:合成miR let-7b并转染乳腺癌MCF-7细胞,以miR-control作参照。通过划痕实验观察转染前后细胞迁移能力的变化,运用PCR和蛋白质印迹法检测转染miR let-7b前后MCF-7细胞内IL-6表达水平的变化。最后通过信息生物学软件及双荧光酶素报告基因方法验证miR let-7b与IL-6结合。结果:与对照组比较,转染miR let-7b的MCF-7细胞迁移能力明显降低,而anti-miR let-7b明显促进细胞迁移。转染miR let-7b的乳腺癌MCF-7细胞中IL-6的表达水平较对照组明显降低,而转染anti-miR let-7b的细胞内IL-6的表达水平明显提高。信息生物学软件和双荧光酶素报告基因证实miR let-7b与IL-6结合。结论:miR let-7b在转录水平抑制乳腺癌MCF-7细胞IL-6的表达从而抑制MCF-7细胞的迁移。 展开更多
关键词 mirlet-7b IL-6 乳腺癌MCF-7细胞 迁移
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急性缺血性脑卒中患者血浆miR let-7b-3p水平及意义
9
作者 张彩玲 《牡丹江医学院学报》 2021年第3期64-67,97,共5页
目的探讨急性缺血性脑卒中患者血浆miR let-7b-3p水平及意义。方法选取2016年5月至2019年5月间平顶山市第二人民医院收治的355例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,根据预后情况分为预后不良组和预后良好组。采用实时荧光定量PCR法(RT-q... 目的探讨急性缺血性脑卒中患者血浆miR let-7b-3p水平及意义。方法选取2016年5月至2019年5月间平顶山市第二人民医院收治的355例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,根据预后情况分为预后不良组和预后良好组。采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测患者血浆miR let-7b-3p相对表达量,并分析其与预后的关系。结果355例急性缺血性脑卒中患者出院后3个月内预后不良发生率为45.07%。预后不良组血浆let-7b-3p相对表达量低于预后良好组(P<0.05);出血转化、发病-治疗时间(ONT)、同型半胱氨酸及miR let-7b-3p与急性缺血性脑卒中患者预后密切相关。出血转化、ONT、同型半胱氨酸、let-7b-3p等联合评估急性缺血性脑卒中患者预后的曲线下面积(AUC)高于miR let-7b-3p及出血转化、ONT、同型半胱氨酸的联合(P<0.05)。结论血浆let-7b-3p与急性缺血性脑卒中患者预后关系密切,检测miR let-7b-3p表达情况有助于预测患者预后。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 mir let-7b-3p 预后
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