ERK在microRNA-433诱导胃癌细胞凋亡中的作用 被引量：5

1

作者 赵轶峰 李明霞 +1 位作者 常贵珍 何向辉 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第48期3954-3957,共4页

目的探讨胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路在miR-433诱导胃癌细胞凋亡中的作用。方法使用慢病毒转染胃癌BGC-823细胞株使其过表达miR433,实验设置空白对照组(BGC-823)、阴性对照组(BGC-823+miR-433空载体)和实验组(miR-433+miR-433,BGC-823... 目的探讨胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路在miR-433诱导胃癌细胞凋亡中的作用。方法使用慢病毒转染胃癌BGC-823细胞株使其过表达miR433,实验设置空白对照组(BGC-823)、阴性对照组(BGC-823+miR-433空载体)和实验组(miR-433+miR-433,BGC-823-pMD18-T-miR-433)。经过相应处理后胃癌细胞株BGC-823分别于培养后24、48、72h后使用cck。8试剂盒行细胞活性检测和Annexinv-FITC细胞凋亡实验,并于培养72h后使用BCA法蛋白定量对ERK1/2检测其蛋白表达。结果体外培养的BGC-823+miR-433细胞生长活性在48h(0.387±0.005)和72h(0.614±0.009)时间点上显著低于BGC-823细胞(0.544±0.009、1.008±0.012)和BGC-823+miR-433阴性对照细胞(0.526±0.008、0.964±0.006),差异均有统计学意义;BGC-823+miR-433细胞凋亡指数在24、48h和72h时显著增加;ERK1/2的表达在BGC-823+miR-433细胞培养72h后显著低于BGC-823细胞组和BGC-823+miR-433阴性对照组;在各个检测中BGC-823细胞和BGC-823+miR-433阴性对照细胞差异均无统计学意义。结论ERK1/2在miR-433诱导胃癌细胞凋亡中起重要作用。 展开更多

关键词 胃肿瘤 mir-433 ERK1/2通路

原文传递

上调miR-433表达抑制结直肠癌细胞系增殖 被引量：5

2

作者 张剑 张彤 +3 位作者 王宏伟 张继红 张保祯 董欣敏 《基础医学与临床》 2021年第8期1127-1132,共6页

目的研究miR-433在结直肠癌中的表达,并初步探讨其功能。方法选择不同分期结直肠癌癌组织(CRC)、癌旁组织与正常结直肠组织,用实时定量PCR检测miR-433表达并比较;体外培养结直肠癌细胞系HT-29、HCT-116和SW480以及正常结直肠细胞系NCM4... 目的研究miR-433在结直肠癌中的表达,并初步探讨其功能。方法选择不同分期结直肠癌癌组织(CRC)、癌旁组织与正常结直肠组织,用实时定量PCR检测miR-433表达并比较;体外培养结直肠癌细胞系HT-29、HCT-116和SW480以及正常结直肠细胞系NCM460,用实时定量PCR检测miR-433表达。随后将miR-433模拟物转染SW480细胞,CCK-8法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室法检测细胞侵袭;流式细胞测量术检测细胞周期。结果与癌旁组织相比,miR-433在结直肠癌组织中表达显著降低(P<0.05)。在结肠癌患者血清中miR-433水平也显著低于健康人群(P<0.05)。此外,从TNM分期Ⅰ期~Ⅳ期,结直肠癌组织内miR-433表达逐渐降低(P<0.05)。与NCM460相比,HT-29、HCT-116和SW480中,miR-433表达下调(P<0.05)。SW480转染miR-433模拟物后,与对照miRNA组相比,在SW480细胞增殖水平明显降低(P<0.05),G2和M期细胞比例增多。上调miR-433后,细胞侵袭和迁移明显减弱(P<0.05)。结论miR-433在结直肠癌中表达降低。在SW480细胞中上调其表达后,可抑制细胞系增殖、侵袭与迁移。 展开更多

关键词 结直肠癌 增殖 mir-433

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miR-433负性调控PI3KCA基因在甲状腺癌中表达及作用机制 被引量：4

3

作者 刘燕青 张艳 田兴德 《临床和实验医学杂志》 2017年第11期1079-1083,共5页

目的探讨miR-433对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖和致肿瘤性的影响及相关的分子机制。方法q PCR检测人PTC组织和对应的正常组织、正常甲状腺上皮细胞Nthyori3-1和人PTC细胞系TPC-1、BCPAP及K1中miR-433表达水平。miR-433模拟物及NC-miRN... 目的探讨miR-433对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖和致肿瘤性的影响及相关的分子机制。方法q PCR检测人PTC组织和对应的正常组织、正常甲状腺上皮细胞Nthyori3-1和人PTC细胞系TPC-1、BCPAP及K1中miR-433表达水平。miR-433模拟物及NC-miRNA转染TPC-1细胞,CCK-8测定细胞增殖情况,q PCR和Western blot分别检测miR-433、PIK3CA mRNA和蛋白表达水平。生物信息学软件Target Scan预测miR-433的靶作用位点,并通过q PCR、Western blot和荧光素酶活性实验证实miR-433的靶作用位点。TPC-1细胞共转染miR-433模拟物及PIK3CA过表达质粒,q PCR、western blot、CCK-8和流式细胞术分别检测PI3KCA mRNA、蛋白表达及TPC-1细胞增殖和细胞周期分布;慢病毒介导的miR-433过表达TPC-1细胞分别通过皮下注射的方式注射入裸鼠左右侧,皮下注射后7、14、21、28、35 d分别测量肿瘤体积,以探讨miR-433对体内肿瘤生长的影响。结果与人正常组织及甲状腺上皮细胞Nthyori3-1相比,PTC组织和PTC细胞中miR-433表达显著下调(P<0.05);CCK-8检测细胞增殖结果表明,与NC-miRNA转染组相比,miR-433转染组PTC细胞增殖速率显著下降(P<0.05),且转染miR-433后,G0/G1期TPC-1细胞比率显著升高,而S期细胞比率显著下降(P<0.05);Target Scan生物学软件预测表明PIK3CA为miR-433潜在的靶基因,荧光素酶实验、q PCR和Western blot结果进一步证实PIK3CA的3'非翻译序列(3'UTR)是miR-433的直接靶点;CCK-8和细胞流式分析结果表明过表达PIK3CA部分逆转了miR-433对TPC-1细胞增殖的抑制作用。结论 miR-433通过靶向作用于PIK3CA基因抑制PTC细胞增殖,其可能为PTC的临床治疗提供新的靶标。 展开更多

关键词 甲状腺乳头状癌 mir-433 PIK3CA 细胞增殖

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miR-433通过JAK2/STAT3信号通路调控氧化应激在大鼠术后认知障碍中的作用研究 被引量：3

4

作者 许琼冠 欧阳一彬 谢镇明 《临床神经外科杂志》 2023年第1期67-73,共7页

目的 探讨miR-433对术后认知障碍(POCD)大鼠海马氧化应激和认知功能的影响及其作用机制。方法 将大鼠随机分为4组,Control组、POCD组、POCD+NC mimic组、POCD+miR-433 mimic组。构建大鼠POCD模型,实时荧光定量PCR实验(RT-qPCR)检测miR-... 目的 探讨miR-433对术后认知障碍(POCD)大鼠海马氧化应激和认知功能的影响及其作用机制。方法 将大鼠随机分为4组,Control组、POCD组、POCD+NC mimic组、POCD+miR-433 mimic组。构建大鼠POCD模型,实时荧光定量PCR实验(RT-qPCR)检测miR-433在POCD大鼠海马组织中的表达;Morris水迷宫试验评价大鼠认知功能;苏木精-伊红(HE)染色检测海马组织病理学变化;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氧化应激水平;双荧光素酶报告基因系统检测miR-433和JAK2的靶向关系;Western blotting检测海马组织中cleaved caspase-3、Bad、Bcl-2、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白的表达。结果 与Control组比较,POCD组大鼠海马组织中miRNA-433表达显著降低,逃避潜伏期延长,穿越目标平台次数减少,POCD组神经细胞紊乱,细胞数量明显减少,神经元细胞凋亡率显著升高,cleaved caspase-3和Bad蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)水平显著降低,丙二醛(MDA)水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与POCD+NC mimic组比较,POCD+miR-433 mimic组大鼠海马组织中miRNA-433表达显著升高,逃避潜伏期缩短,穿越目标平台次数增加,海马内细胞排列较规则,坏死神经细胞数量明显减少,神经元细胞凋亡率显著降低,cleaved caspase-3和Bad蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,SOD水平显著升高,MDA水平显著降低。双荧光素酶报告基因实验结果JAK2是miRNA-433的靶基因,与POCD+miR-433 mimic+Vector组比较,POCD+miR-433 mimic+pcDNA-JAK2组大鼠海马组织中JAK2、p-JAK2、p-STAT3、cleaved caspase-3、Bad蛋白以及MDA水平显著升高,而Bcl-2蛋白、SOD水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-433通过JAK2/STAT3信号通路抑制氧化应激从而预防大鼠术后认知障碍。 展开更多

关键词 mir-433 术后认知障碍 氧化应激 凋亡 JAK2/STAT3通路

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Lnc-ATB通过吸附miR-433促进宫颈癌侵袭及转移 被引量：4

5

作者 李柏森 文敏 +1 位作者 易红梅 姜鹤群 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第17期2848-2852,共5页

目的检测Lnc-ATB在宫颈癌细胞中的表达及其对宫颈癌细胞侵袭及转移能力的影响,并探索潜在机制。方法利用QPCR检测Lnc-ATB在宫颈癌细胞及正常宫颈内皮细胞中的表达情况,利用Transwell和细胞划痕实验检测Lnc-ATB对宫颈癌细胞侵袭和转移能... 目的检测Lnc-ATB在宫颈癌细胞中的表达及其对宫颈癌细胞侵袭及转移能力的影响,并探索潜在机制。方法利用QPCR检测Lnc-ATB在宫颈癌细胞及正常宫颈内皮细胞中的表达情况,利用Transwell和细胞划痕实验检测Lnc-ATB对宫颈癌细胞侵袭和转移能力的影响,利用荧光素酶报告基因实验检测Lnc-ATB是否可结合miR-433,利用QPCR检测Lnc-ATB与miR-433之间的调控关系。结果 QPCR结果显示Lnc-ATB在宫颈癌细胞中的表达高于正常宫颈内皮细胞,沉默宫颈癌细胞Lnc-ATB的表达后,细胞侵袭和转移能力受到抑制。荧光素酶报告基因实验结果显示Lnc-ATB可吸附结合miR-433。QPCR实验结果显示沉默宫颈癌细胞Lnc-ATB的表达可促进miR-433的表达。结论 Lnc-ATB在宫颈癌细胞中异常高表达,可通过吸附miR-433促进宫颈癌细胞侵袭及转移。 展开更多

关键词 宫颈癌 Lnc-ATB mir-433 转移 侵袭

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血清miR-433和miR-455表达对卵巢癌淋巴结转移的诊断价值 被引量：1

6

作者 李小坤 邓振全 +4 位作者 冀文华 冯杰 张星星 尚素霜 解秀明 《国际老年医学杂志》 2023年第5期583-586,共4页

目的 探究血清miR-433和miR-455表达水平对卵巢癌淋巴结转移的诊断价值。方法 选取2020年5月~2022年8月邯郸市第一医院收治的卵巢癌患者作为病例组,根据是否淋巴结转移分为转移组(41例)和非转移组(45例);同期体检的健康者86例作为对照... 目的 探究血清miR-433和miR-455表达水平对卵巢癌淋巴结转移的诊断价值。方法 选取2020年5月~2022年8月邯郸市第一医院收治的卵巢癌患者作为病例组,根据是否淋巴结转移分为转移组(41例)和非转移组(45例);同期体检的健康者86例作为对照组。行彩色超声造影定量分析,血清miR-433、miR-455表达水平采用实时荧光定量PCR法检测。采用ROC曲线分析血清miR-433、miR-455表达水平及超声造影定量参数对卵巢癌淋巴结转移的诊断价值。采用多因素logistic回归分析卵巢癌淋巴结转移的危险因素。结果 观察组血清miR-433、miR-455表达水平低于对照组(P<0.05)。转移组的基础强度低于非转移组(P<0.05),达峰时间短于非转移组(P<0.05),血清miR-433、miR-455表达水平低于非转移组(P<0.05)。logistic回归分析结果显示,血清miR-433、miR-455以及基础强度、达峰时间均为卵巢癌淋巴结转移的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清miR-433、miR-455、基础强度、达峰时间四者联合对卵巢癌淋巴结转移诊断的曲线下面积最大。结论血清miR-433、miR-455联合超声造影定量分析对早期诊断卵巢癌淋巴结转移具有较高的效能,能够作为评价患者是否发生淋巴结转移的重要指标。 展开更多

关键词 mir-433 mir-455 卵巢癌 淋巴结转移 早期诊断

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TLR4、miR-433及PTEN在子宫内膜癌组织中的表达意义及其与患者临床病理特征的关系

7

作者 童小华 闫丰娜 吴媛媛 《临床和实验医学杂志》 2024年第21期2316-2320,共5页

目的探讨Toll样受体4(TLR4)、微小RNA-433(miR-433)及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在子宫内膜癌组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。方法回顾性选取2020年3月至2022年4月期间在商洛市中心医院进行... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)、微小RNA-433(miR-433)及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在子宫内膜癌组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。方法回顾性选取2020年3月至2022年4月期间在商洛市中心医院进行手术治疗的子宫内膜癌患者80例作为研究对象。收集患者病灶组织及癌旁组织(距离肿瘤边缘3 mm以上,无肿瘤浸润),分别纳入研究组和对照组。使用免疫组织化学染色检测TLR4、PTEN的表达情况,采用RT-qPCR检测miR-433的表达情况。比较研究组和对照组组织中TLR4、miR-433、PTEN表达情况,并分析研究组TLR4、miR-433、PTEN表达与临床病理特征的关系。观察子宫内膜癌组织中TLR4、miR-433、PTEN的表达与国际妇产科协会(FIGO)分期、肿瘤细胞分化程度和淋巴结转移情况的相关性,分析其对预后的影响。结果研究组组织中TLR4阳性率、miR-433表达水平和PTEN阳性率分别为27.50%、0.65±0.07、22.50%,均明显低于对照组[75.00%、(1.07±0.10)、81.25%],差异均有统计学意义(P<0.05)。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、细胞分化程度低、淋巴结转移子宫内膜癌组织中TLR4阳性表达率、miR-433的相对表达量和PTEN的阳性表达率均显著低于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、细胞分化程度高、淋巴结无转移,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡组FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、细胞中、低分化、存在淋巴结转移的患者比率、TLR4阴性表达率、miR-433低表达的患者比率、PTEN阴性表达率均高于存活组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组年龄、肌层浸润深度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。TLR4阳性表达、miR-433相对表达量高、PTEN阳性表达的子宫内膜癌患者2年累积生存率高于TLR4阴性表达、miR-433表达量低、PTEN阴性表达的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TLR4、miR-433、PTEN检测方式简单,在子宫内膜癌中的表达降低,且与临床病理特征关系 展开更多

关键词 子宫内膜癌 TOLL样受体4 微小RNA-433 第10号染色体缺失与张力蛋白同源磷酸酶基因 临床病理特征

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MiR433靶向调控Notch1逆转人乳腺癌细胞对多西他赛的耐药性 被引量：3

8

作者 胡晓磊 黄萍妹 +4 位作者 王洁 何婉 赵攀 姚广裕 叶长生 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期888-894,共7页

目的探讨miR-433在多西他赛对乳腺癌耐药机制中的作用。方法将MCF-7乳腺癌细胞暴露于逐渐增强浓度的多西他赛中建立对多西他赛耐药的乳腺癌细胞(MCF-7/DOX),并用miR-433抑制剂及对照剂转染MCF-7/DOX细胞,采用酶标仪(Bio Tek)测量吸光度... 目的探讨miR-433在多西他赛对乳腺癌耐药机制中的作用。方法将MCF-7乳腺癌细胞暴露于逐渐增强浓度的多西他赛中建立对多西他赛耐药的乳腺癌细胞(MCF-7/DOX),并用miR-433抑制剂及对照剂转染MCF-7/DOX细胞,采用酶标仪(Bio Tek)测量吸光度和FACS流式细胞仪检测来评估miR-433的功能和作用;通过生物信息学分析、荧光素酶报告基因测定法等技术确定miR-433的下游靶标。结果实时定量PCR结果显示miR-433在MCF-7/DOX细胞中的表达下调;细胞活力测定结果表明miR-433抑制剂能促进产生多西他赛耐药,并减弱MCF-7细胞的凋亡,而miR-433过表达能增强多西他赛的敏感性并且诱导MCF-7/DOX细胞凋亡。荧光素酶报告基因测定结果显示在miR-433表达显著下调的MCF-7细胞中,Notch1的m RNA和蛋白质表达水平明显增强;miR-433mimics转染的MCF-7/DOX细胞与对照组(mimics-Ctrl)相比,Notch1的m RNA和蛋白表达显着降低。结论 miR-433可通过抑制Notch1的表达来逆转乳腺癌对多西他赛的耐药性,继续发挥药物的有效性。 展开更多

关键词 多西他赛 耐药性 乳腺癌 mir-433 MCF-7 NOTCH1

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膀胱癌患者miR-433表达与临床特征及预后的关系 被引量：2

9

作者 马保录 赵文元 +2 位作者 张欣雨 杨文青 马震霖 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2020年第9期821-824,共4页

目的研究miR-433表达对膀胱癌患者临床特征及预后的影响。方法以我院膀胱癌患者50例为试验组,另于我院随机选取同期健康者50例为对照组,荧光定量PCR法测定miR-433表达:判断miR-433表达与患者临床特征的关系;以复发率、转移率和死亡率为... 目的研究miR-433表达对膀胱癌患者临床特征及预后的影响。方法以我院膀胱癌患者50例为试验组,另于我院随机选取同期健康者50例为对照组,荧光定量PCR法测定miR-433表达:判断miR-433表达与患者临床特征的关系;以复发率、转移率和死亡率为预后特征,判断miR-433表达与预后特征的关系。结果试验组miR-433表达水平1.66±0.24显著低于对照组2.25±0.42(P=0.000),非淋巴结转移者2.01±0.45高于淋巴结转移者1.58±0.45,非远处转移者2.08±0.42高于远处转移者2.08±0.42(P均<0.01);试验组中未复发转移患者的miR-433表达水平2.24±0.45高于复发转移患者1.60±0.49,存活患者miR-433表达水平2.25±0.49明显高于死亡患者1.58±0.46(P均<0.01);miR-433高表达组总生存期和无进展生存期长于miR-433低表达组(P<0.05)。结论miR-433低表达在临床上表现为膀胱癌淋巴结转移和远处转移,预后复发率和转移率更高。 展开更多

关键词 膀胱癌 mir-433 临床特征 预后 复发 转移

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microRNA-433对人结肠癌细胞系Sw620生物学行为的影响 被引量：2

10

作者 王香琛 吕晓红 《解剖科学进展》 2018年第1期76-78,83,共4页

目的探讨microRNA-433对人结肠癌细胞Sw620生物学行为的影响。方法应用细胞转染技术,使Sw620细胞中高表达miR-433并通过实时PCR检测转染效率。将细胞分为con组和高表达miR-433的433组。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及... 目的探讨microRNA-433对人结肠癌细胞Sw620生物学行为的影响。方法应用细胞转染技术,使Sw620细胞中高表达miR-433并通过实时PCR检测转染效率。将细胞分为con组和高表达miR-433的433组。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,Transwell小室实验检测细胞迁移。结果Sw620细胞转染48h后,与con组相比,433组中miR-433表达升高(P<0.001),细胞增殖受到抑制(P<0.05),细胞迁移受到抑制(P<0.01),细胞凋亡及细胞周期无明显变化(P>0.05)。结论miR-433抑制Sw620细胞的增殖和迁移,但对细胞凋亡及细胞周期无明显作用。 展开更多

关键词 mir-433 人结肠癌细胞Sw620 细胞增殖 细胞迁移

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miR-433在子痫前期患者中的表达及对滋养层细胞迁移和侵袭的影响研究 被引量：2

11

作者 张月霞 李翔 +1 位作者 张永苗 董莉 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第2期228-233,238,共7页

目的探讨微小RNA-433(miR-433)在子痫前期(PE)患者中的表达水平及其潜在的生物学功能。方法收集25例健康者和23例子痫前期患者的胎盘组织。采用qRT-PCR检测miR-433在PE患者胎盘组织和正常胎盘组织中的表达差异。在滋养层细胞HTR-8/SVne... 目的探讨微小RNA-433(miR-433)在子痫前期(PE)患者中的表达水平及其潜在的生物学功能。方法收集25例健康者和23例子痫前期患者的胎盘组织。采用qRT-PCR检测miR-433在PE患者胎盘组织和正常胎盘组织中的表达差异。在滋养层细胞HTR-8/SVneo中过表达或抑制miR-433构建稳定细胞系,通过划痕试验和迁移侵袭试验检测miR-433对细胞迁移和侵袭的影响。采用Targetscan和miRanda预测miR-433直接作用的靶基因,通过qRT-PCR、Western blot和双荧光素酶报告基因检测试验进行验证,初步探究miR-433在PE中发挥作用的可能机制。结果在PE患者胎盘组织中miR-433的表达高于正常胎盘组织。抑制miR-433可促进滋养层细胞的迁移和侵袭能力,而过表达miR-433可抑制细胞的迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告基因检测试验结果显示,过表达miR-433可以抑制JNK1的表达。在过表达miR-433的细胞中增加JNK1的表达可以逆转miR-433对细胞迁移和侵袭能力的抑制作用。结论miR-433可能通过靶向JNK1影响滋养层细胞的迁移和侵袭来参与PE的进展,为了解PE的病因和发病机制提供了一个新的视角,同时为PE的早期预测和诊断提供了新的方向。 展开更多

关键词 子痫前期 滋养层细胞 mir-433 JNK1 迁移 侵袭

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miR-433通过JAK2/STAT3信号通路调控氧化应激干预术后认知功能障碍的实验研究

12

作者 许琼冠 欧阳一彬 谢镇明 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第4期655-661,共7页

目的:探讨miR-433对术后认知功能障碍(POCD)大鼠海马氧化应激和认知功能的影响及其作用机制。方法:将大鼠随机分为Control组、POCD组、POCD+NC mimic组、POCD+miR-433 mimic组。构建大鼠POCD模型,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qP... 目的:探讨miR-433对术后认知功能障碍(POCD)大鼠海马氧化应激和认知功能的影响及其作用机制。方法:将大鼠随机分为Control组、POCD组、POCD+NC mimic组、POCD+miR-433 mimic组。构建大鼠POCD模型,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-433在POCD大鼠海马组织中的表达;Morris水迷宫试验评价大鼠认知功能;苏木精-伊红(HE)染色检测海马组织病理学变化;原位末端凋亡(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测氧化应激水平;双荧光素酶报告基因系统检测miR-433和酪氨酸激酶2(JAK2)的靶向关系;免疫印迹法(Western Blot)检测海马组织Cleaved Caspase-3、Bad、Bcl-2、JAK2、p-JAK2、转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3蛋白表达。结果:与Control组比较,POCD组大鼠海马组织miRNA-433表达降低,逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,POCD组神经细胞紊乱,细胞数量减少,神经元细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3和Bad蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达、超氧化物歧化酶(SOD)水平降低,丙二醛(MDA)水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与POCD+NC mimic组比较,POCD+miR-433 mimic组大鼠海马组织中miRNA-433表达升高,逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,海马内细胞排列较规则,坏死神经细胞数量减少,神经元细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3和Bad蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达和SOD水平升高,MDA水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示:JAK2是miRNA-433的靶基因,与POCD+miR-433 mimic+Vector组比较,POCD+miR-433 mimic+pcDNA-JAK2组大鼠海马组织p-JAK2、p-STAT3、Cleaved Caspase-3、Bad蛋白及MDA水平升高,Bcl-2蛋白和SOD水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-433通过JAK2/STAT3信号通路抑制氧化应激,从而预防大鼠发生术后认知功能障碍。 展开更多

关键词 术后认知障碍 mir-433 氧化应激 酪氨酸激酶2/转录激活因子3通路 大鼠 实验研究

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MiR-433抑制Notch1和PAX6表达对视网膜母细胞瘤恶变的影响研究

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作者 田蕴霖 白淑玮 邵娟 《中国肿瘤临床与康复》 2021年第4期454-457,共4页

目的探讨miR-433抑制Notch1和PAX6表达对视网膜母细胞瘤(RB)恶变的影响。方法选取2015年1月至2020年1月间西安市第四医院收治的行手术切除并经病理检查确诊的RB组织50例(未接受放疗前),同时取正常视网膜组织50例。采用qRT-PCR方式分析R... 目的探讨miR-433抑制Notch1和PAX6表达对视网膜母细胞瘤(RB)恶变的影响。方法选取2015年1月至2020年1月间西安市第四医院收治的行手术切除并经病理检查确诊的RB组织50例(未接受放疗前),同时取正常视网膜组织50例。采用qRT-PCR方式分析RB细胞与正常视网膜组织中miR-433表达水平,采用MTT法分析miR-433、miR-433表达抑制(miR-433 Ctrl)和miR-433过表达(anti-miR-433)对RB细胞系增殖与凋亡的影响,采用Western blotting法检测miR-433、miR-433 Ctrl和anti-miR-433对蛋白Notch1和PAX6表达的影响。结果Notch1和PAX6在正常视网膜组织中表达阳性率为20.0%和24.0%,在RB组织中表达阳性率为80.0%和76.0%,组间比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。同正常视网膜组织相比,RB细胞中miR-433的表达水平更低,提示miR-433可能在RB的发育中发挥了重要作用。将RB细胞系分别使用miR-433、miR-433 Ctrl和anti-miR-433进行转染,并于转染24h、48h、72h及96h时使用MTT检测法,分析RB细胞系增殖凋亡情况。细胞增殖方面,anti-miR-433抑制RB细胞增殖,miR-433 Ctrl促进RB细胞增殖,24h、48h、72h和96h时,miR-433 Ctrl组RB细胞增殖>miR-433组>anti-miR-433组(P<0.05)。细胞凋亡方面,anti-miR-433提高RB细胞凋亡水平,miR-433 Ctrl会提高RB细胞抗凋亡能力,组间比较,24h、48h、72h和96h时,miR-433 Ctrl组RB细胞活性>miR-433组>antimiR-433组(P<0.05)。开展蛋白质印迹分析发现,anti-miR-433组RB细胞Notch1和PAX6蛋白表达水平最低,其次为miR-433组,miR-433 Ctrol组最高。结论miR-433可特异性地作用于Notch1和PAX6蛋白靶基因,以影响RB细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 mir-433 NOTCH1 PAX6 视网膜母细胞瘤 恶性变化

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HOTAIRM1靶向miR-433对MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤的影响

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作者 杨庆华 杨隆良 杨晓莉 《卒中与神经疾病》 2021年第3期274-281,共8页

目的探讨同源异型盒A转录本反义RNA1(Homeobox A transcript antisense RNA myeloid-specific 1,HOTAIRM1)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-Methyl-4-phenylpyridine, MPP+)诱导的SK-N-SH细胞损伤的影响及作用机制。方法体外培养SK-N-SH细胞... 目的探讨同源异型盒A转录本反义RNA1(Homeobox A transcript antisense RNA myeloid-specific 1,HOTAIRM1)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-Methyl-4-phenylpyridine, MPP+)诱导的SK-N-SH细胞损伤的影响及作用机制。方法体外培养SK-N-SH细胞,分为对照组(Con组)、Model组、乱序无意义阴性序列(Out-of-order nonsense negative sequence, si-NC)组、HOTAIRM1小干扰RNA (HOTAIRM1 small interfering RNA,si-HOTAIRM1)组、si-HOTAIRM1+抑制剂阴性序列(Inhibitor negative sequence, anti-miR-NC)组和si-HOTAIRM1+miR-433抑制剂(MiR-433 inhibitor, anti-miR-433)组;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;Western Blot检测兔抗人B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)蛋白表达水平;试剂盒检测丙二醛(Malonaldehyde, MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-Px)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)水平;实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测HOTAIRM1和微小RNA-433(microRNA-433,miR-433)表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-433与HOTAIRM1靶向关系。结果与Con组比较,Model组SK-N-SH细胞的细胞周期G0-G1期延长(P<0.05),S期缩短(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白、MDA和OTAIRM1表达水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白、GSH-Px和SOD活性及miR-433表达水平降低(P<0.05);与Model组比较,si-HOTAIRM1组SK-N-SH细胞的细胞周期G0-G1期缩短(P<0.05),S期延长(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白、MDA和OTAIRM1表达水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白、GSH-Px和SOD活性及miR-433表达水平升高(P<0.05);与si-HOTAIRM1+anti-miR-NC组比较,si-HOTAIRM1+anti-miR-433组SK-N-SH细胞的细胞周期G0-G1期延长(P<0.05),S期缩短(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白和MDA水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白、GSH-Px水平和SOD活性降低(P<0.05);Model组与si-NC组、si-HOTAIRM1组与si-HOTAIRM1+anti-miR-NC组各检测指标水平比较均无显著差异(P>0.05)� 展开更多

关键词 同源异型盒A转录本反义RNA1 mir-433 1-甲基-4-苯基吡啶离子 细胞凋亡 氧化应激

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下调miR-433表达抑制高糖介导的肾纤维化机制研究

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作者 张丽华 黄云华 +3 位作者 罗景梅 吴斌 何君一 李嵘 《广东医学》 CAS 2020年第6期563-569,共7页

目的探讨下调表达miR-433抑制高糖刺激下肾纤维化的机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测体外高糖刺激的大鼠原代肾小管上皮细胞(TECs)和肾小球系膜细胞(MMCs)中miR-433水平及纤维化指标:胶原Ⅰ、Ⅳ(Col-Ⅰ,Col-Ⅳ)、粘连蛋白(FN)和... 目的探讨下调表达miR-433抑制高糖刺激下肾纤维化的机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测体外高糖刺激的大鼠原代肾小管上皮细胞(TECs)和肾小球系膜细胞(MMCs)中miR-433水平及纤维化指标:胶原Ⅰ、Ⅳ(Col-Ⅰ,Col-Ⅳ)、粘连蛋白(FN)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。高糖刺激稳定表达miR-433上调及miR-433下调NRK52E和MMCs细胞系,从核酸和蛋白水平检测上述纤维化指标。结果高糖刺激的TECs和MMCs中miR-433、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ、FN和α-SMA的表达升高(P<0.001)。高糖刺激下,上调miR-433表达的TECs和MMCs中miR-433和纤维化指标的表达明显升高(P<0.001),而下调miR-433表达TECs和MMCs中miR-433和纤维化指标的表达明显抑制(P<0.001)。结论高糖刺激下,大鼠TECs和MMCs miR-433和纤维化指标表达升高,下调miR-433表达可抑制高糖介导的肾纤维化;miR-433表达可作为糖尿病肾脏疾病潜在治疗靶点。 展开更多

关键词 mir-433 肾纤维化 肾小管上皮细胞 肾小球系膜细胞

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低miR-433的表达与卵巢上皮性癌的相关性研究

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作者 侯玲玲 王敏 《中外女性健康研究》 2021年第6期89-90,共2页

目的探析卵巢上皮性癌与低miR-433的表达的相关性研究。方法在115个卵巢上皮性癌(EOC)组织和45个正常组织中通过逆转录定量即时聚合酶链反应(qRT-PCR)分析检测miR-433的表达。通过卡方检验和Kaplan-Meier方法分别测定miR-433表达与临床... 目的探析卵巢上皮性癌与低miR-433的表达的相关性研究。方法在115个卵巢上皮性癌(EOC)组织和45个正常组织中通过逆转录定量即时聚合酶链反应(qRT-PCR)分析检测miR-433的表达。通过卡方检验和Kaplan-Meier方法分别测定miR-433表达与临床病理特征以及EOC患者存活率之间的关系。miR-433的预防价值可通过Cox回归分析来估测。结果miR-433在EOC组织中的表达显著低于正常组织(P<0.05)。低miR-433表达与肿瘤大小(P=0.050)、晚期FIGO阶段(P=0.009)以及肿瘤复发(P=0.002)密切相关。Kaplan-Meier分析证明具有低miR-433表达的EOC患者比具有高miR-433表达的患者的总存活率(P<0.001)更低。多变量分析鉴定miR-433(P=0.013;HR=2.973;95%CI=1.260~7.012)是EOC患者的独立预后因子。结论miR-433在EOC的表达降低且可能与EOC的肿瘤进展相关,是EOC患者的独立预后标志。 展开更多

关键词 预后因子 卵巢上皮性癌 mir-433

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miR-433-3p靶向MAPK8对肝癌细胞MHCC97H增殖、凋亡和迁移的调控作用 被引量：29

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作者 万智双 熊丁 曹宸 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期57-62,共6页

目的:探究miR-433-3p对有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK8)的靶向调控作用及其对肝癌细胞MHCC97H增殖、凋亡和迁移的调控作用。方法:RT-PCR检测了SMMC-7721、HepG2、MHCC97H、Hep3B肝癌细胞株和HL-7702人正常肝细胞株中miR-433-3p的表达。... 目的:探究miR-433-3p对有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK8)的靶向调控作用及其对肝癌细胞MHCC97H增殖、凋亡和迁移的调控作用。方法:RT-PCR检测了SMMC-7721、HepG2、MHCC97H、Hep3B肝癌细胞株和HL-7702人正常肝细胞株中miR-433-3p的表达。荧光素酶报告实验检测miR-433-3p和MAPK8的相互作用。将MHCC97H细胞分为空白对照(Control)组、阴性对照(NC)组、miR-433-3p组、pc-MAPK8组和miR-433-3p+pc-MAPK8组,按照分组分别转染miR-433-3p mimic或pc-MAPK8,RT-PCR检测miR-433-3p和MAPK8转录水平,CCK8法检测细胞增殖,Hoechst法检测细胞凋亡,划痕愈合法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blot检测MAPK8、增殖细胞核抗原(PCNA)、活化半胱天冬酶3(cl-CASP3)、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)蛋白表达。结果:与正常肝细胞株HL-7702比较,肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2、MHCC97H、Hep3B中miR-433-3p表达显著降低。在荧光素酶报告实验中,与MAPK8野生型(WT)+NC比较,MAPK8 WT+miR-433-3p组荧光素酶活性显著降低。在细胞实验中,与Control组比较,miR-433-3p组miR-433-3p表达升高,MAPK8转录和蛋白表达降低,MHCC97H细胞的增殖水平降低,凋亡水平升高,迁移和侵袭能力下降,PCNA和N-cadherin蛋白表达下降,cl-CASP3和E-cadherin蛋白表达升高;pc-MAPK8组MAPK8蛋白表达升高,MHCC97H细胞的增殖水平升高,凋亡水平降低,迁移和侵袭能力提高,PCNA和N-cadherin蛋白表达升高,cl-CASP3和E-cadherin蛋白表达降低。与pc-MAPK8组比较,miR-433-3p+pc-MAPK8组MAPK8蛋白表达降低,MHCC97H细胞的增殖水平降低,凋亡水平升高,迁移和侵袭能力下降,PCNA和N-cadherin蛋白表达降低,cl-CASP3和E-cadherin蛋白表达升高。结论:miR-433-3p可靶向作用于MAPK8,抑制肝癌细胞MHCC97H的增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 肝癌 mir-433-3p 有丝分裂原活化蛋白激酶8 增殖与凋亡 侵袭与迁移

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LncRNA OSER1-AS1靶向miR-433-3p对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：9

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作者 江旭林 范星 +4 位作者 汤俊 陈校力 严伟 罗庆伟 李志红 《现代消化及介入诊疗》 2020年第5期603-608,612,共7页

目的探讨OSER1-AS1对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法培养人正常结直肠黏膜细胞系FHC和结直肠癌细胞系SW480、DLD-1和HCT116,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中OSER1-AS1和miR-433-3p表达水平。以SW480细胞为研究对象,... 目的探讨OSER1-AS1对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法培养人正常结直肠黏膜细胞系FHC和结直肠癌细胞系SW480、DLD-1和HCT116,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中OSER1-AS1和miR-433-3p表达水平。以SW480细胞为研究对象,通过转染OSER1-AS1小干扰RNA或miR-433-3p模拟物(mimics)构建沉默OSER1-AS1或过表达miR-433-3p的SW480细胞,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western blot)检测细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和活化的半胱天冬酶-3(Cleaved-caspase-3)蛋白水平。双荧光素酶报告基因实验验证OSER1-AS1和miR-433-3p调控关系。结果与FHC细胞比较,结直肠癌细胞系SW480、DLD-1和HCT116中OSER1-AS1水平显著升高(P<0.05),miR-433-3p水平显著降低(P<0.05)。沉默OSER1-AS1或过表达miR-433-3p表达均可降低SW480细胞存活率和CyclinD1蛋白表达水平(P<0.05),提高SW480细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达水平(P<0.05)。OSER1-AS1靶向负调控miR-433-3p表达。沉默miR-433-3p可逆转沉默OSER1-AS1对SW480细胞存活率、凋亡率及CyclinD1和Cleaved-caspase-3蛋白表达的影响。结论沉默OSER1-AS1可抑制结直肠癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,其可能通过上调细胞中miR-433-3p表达发挥作用。 展开更多

关键词 OSER1-AS1 mir-433-3p 结直肠癌 细胞增殖 凋亡

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黄芩苷联合奥沙利铂调控miR-433-3p/SRC对胃癌细胞增殖和侵袭的影响 被引量：3

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作者 周菲 庄敏之 吴瑛 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第3期529-537,共9页

目的探究黄芩苷联合奥沙利铂调控miR-433-3p/SRC对胃癌细胞增殖和侵袭的影响。方法将SGC-7901细胞分为对照组、黄芩苷(100、200、300μmol·L^(-1))组、奥沙利铂(33μmol·L^(-1))组,联合用药(300μmol·L^(-1)黄芩苷+33μm... 目的探究黄芩苷联合奥沙利铂调控miR-433-3p/SRC对胃癌细胞增殖和侵袭的影响。方法将SGC-7901细胞分为对照组、黄芩苷(100、200、300μmol·L^(-1))组、奥沙利铂(33μmol·L^(-1))组,联合用药(300μmol·L^(-1)黄芩苷+33μmol·L^(-1)奥沙利铂)组,miR-433-3p组、miR-NC组、anti-miR-433-3p组、anti-miR-NC组、pcDNA-SRC组、si-SRC组,miR-433-3p+联合用药组、anti-miR-433-3p+联合用药组、pcDNA-SRC+联合用药组、si-SRC+联合用药组、miR-433-3p+pcDNASRC+联合用药组。CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-433-3p表达;双荧光素酶报告检测miR-433-3p和SRC的靶向关系;Western blotting检测细胞中SRC蛋白表达。结果与对照组相比,黄芩苷(100、200、300μmol·L^(-1))组、奥沙利铂组、联合用药组细胞增殖抑制率、凋亡率和miR-433-3p表达显著增加(P<0.05),细胞侵袭数目、SRC蛋白表达显著减少(P<0.05);与黄芩苷300μmol·L^(-1)组、奥沙利铂组相比,联合用药组细胞增殖抑制率、凋亡率显著增加,细胞侵袭数目显著减少;与黄芩苷300μmol·L^(-1)组比较,miR-433-3p表达显著增加(P<0.05);与奥沙利铂组比较,SRC蛋白表达显著减少(P<0.05)。与对照组比较,miR-433-3p组细胞中miR-433-3p表达显著升高,SRC蛋白表达显著降低,anti-miR-433-3p组细胞中miR-433-3p表达显著降低,SRC蛋白表达显著升高(P<0.05);miR-433-3p+联合用药组细胞增殖抑制率和凋亡率显著高于联合用药组,细胞侵袭数目显著少于联合用药组(P<0.05),anti-miR-433-3p+联合用药组细胞增殖抑制率和凋亡率显著低于联合用药组,细胞侵袭数目显著多于联合用药组(P<0.05)。miR-433-3p组SRC-WT荧光素酶活性显著低于miR-NC组(P<0.05)。si-SRC组细胞中SRC蛋白表达显著低于对照组(P<0.05),pcDNA-SRC组细胞中SRC蛋白表达显著高于对照组(P<0.05);与pcDNA-SRC组相比,miR-433-3p+pcD 展开更多

关键词 黄芩苷 奥沙利铂 mir-433-3p/SRC 胃癌 增殖 侵袭

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HR-MRI联合miR-433-5p及D-二聚体对缺血性脑卒中预后的预测价值

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作者 雷毅武 邓承迪 《北华大学学报（自然科学版）》 CAS 2025年第1期60-65,共6页

目的 探讨高分辨磁共振血管壁成像(HR-MRI)联合miR-433-5p及D-二聚体对缺血性脑卒中预后的预测价值。方法 选取缺血性脑卒中患者(A组,80例)、大脑中动脉粥样硬化非卒中患者(B组,40例)为研究对象,行HR-MRI检查,评价薄纤维帽、斑块强化,... 目的 探讨高分辨磁共振血管壁成像(HR-MRI)联合miR-433-5p及D-二聚体对缺血性脑卒中预后的预测价值。方法 选取缺血性脑卒中患者(A组,80例)、大脑中动脉粥样硬化非卒中患者(B组,40例)为研究对象,行HR-MRI检查,评价薄纤维帽、斑块强化,记录血管面积、管腔面积、管壁面积、血管最狭窄处,以及参考层面的血管面积、管腔面积,计算得到斑块负荷、斑块面积、管腔狭窄率、重构指数、标准化管壁指数。qPCR检测血清miR-433-5p表达水平,免疫比浊法测定D-二聚体浓度。根据随访情况,将mRS≤2分的患者纳入预后良好组,mRS>2分的患者纳入预后不良组。结果 A组患者薄纤维帽比例(P<0.001)、斑块强化比例(P<0.001)、斑块负荷比例(P<0.01)、管腔狭窄率(P<0.01)明显高于B组。A组患者血清miR-433-5p表达水平(0.28±0.07)明显低于B组(P<0.001),D-二聚体浓度(2.35±0.79)mg/L明显高于B组(P<0.01)。预后不良组患者薄纤维帽比例、斑块强化比例及斑块负荷比例、管腔狭窄率明显高于预后良好组(P<0.05)。预后不良组缺血性脑卒中患者血清miR-433-5p表达水平明显低于预后良好组(P<0.001),D-二聚体浓度(2.94±1.03)mg/L明显高于预后良好组(P<0.01)。ROC曲线分析显示,薄纤维帽、斑块强化、斑块负荷、管腔狭窄率、miR-433-5p、D-二聚体联用对缺血性脑卒中患者预后的预测价值最高(AUC=0.962),其次为miR-433-5p(AUC=0.864)、斑块强化(AUC=0.835)、管腔狭窄率(AUC=0.802)、薄纤维帽(AUC=0.793)、D-二聚体(AUC=0.778)、斑块负荷(AUC=0.741)。结论 HR-MRI参数薄纤维帽、斑块强化、斑块负荷、管腔狭窄率及miR-433-5p、D-二聚体与缺血性脑卒中预后相关,联用对预后具有较高的预测价值。 展开更多

关键词 缺血性脑卒中 高分辨磁共振血管壁成像 mir-433-5p D-二聚体 预后水平