目的:探索白细胞介素(interleukin,IL)-6在胃癌中的作用及相关的分子机制。方法:50 ng/m L IL-6刺激胃癌细胞MGC-803后,利用MTT法检测细胞增殖、划痕实验检测细胞迁移的变化,RT-qPCR实验检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadhe...目的:探索白细胞介素(interleukin,IL)-6在胃癌中的作用及相关的分子机制。方法:50 ng/m L IL-6刺激胃癌细胞MGC-803后,利用MTT法检测细胞增殖、划痕实验检测细胞迁移的变化,RT-qPCR实验检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、锌指转录因子Snail1和miR-152在mRNA水平的表达,Western印迹检测E-cadherin,N-cadherin,vimentin,Snail1在蛋白水平的表达;IL-6与miR-152模拟物(miR-152 mimics)单独处理或者共同处理MGC-803细胞后,RT-qPCR检测PIK3R3在mRNA水平的表达,Western印迹检测PIK3R3、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化-Akt(p-Akt)在蛋白水平的表达。结果:外源性IL-6明显促进MGC-803细胞的增殖与迁移(P<0.05),降低E-cadherin蛋白和mRNA和miR-152 mRNA的表达(P<0.01),增加N-cadherin,vimentin,Snail1,PIK3R3蛋白和mRNA及p-Akt蛋白的表达(P<0.05)。转染miR-152 mimics后明显降低了PIK3R3和p-Akt蛋白水平的表达(P<0.01)。同时,过表达miR-152能够降低IL-6诱导的PIK3R3及p-Akt的表达水平(P<0.01)。各组中Akt的表达均无明显变化(P>0.05)。结论:IL-6可能是通过下调miR-152表达,诱导PIK3R3表达,激活PI3K/Akt信号通路,从而促进胃癌细胞的增殖、迁移和上皮-间质转化。展开更多
为确定microRNA-152(miR-152)对奶牛乳腺上皮细胞中乳蛋白合成的影响,本试验应用脂质体转染技术,改变miR-152在奶牛乳腺上皮细胞的表达量。采用实时荧光定量PCR、Western blotting、细胞活力分析等技术探索miR-152对奶牛乳腺上皮细胞增...为确定microRNA-152(miR-152)对奶牛乳腺上皮细胞中乳蛋白合成的影响,本试验应用脂质体转染技术,改变miR-152在奶牛乳腺上皮细胞的表达量。采用实时荧光定量PCR、Western blotting、细胞活力分析等技术探索miR-152对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳功能的影响。结果显示,miR-152沉默,细胞因子信号传导抑制蛋白3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)表达增强,信号转导通路分子磷酸化信号转导与转录激活因子5(phospho-signal transducer and activator of transcription 5,p-STAT5)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素蛋白(phospho-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)、核糖体S6激酶1(ribosomal protein S6kinase 1,S6K1)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达减弱,细胞增殖能力减弱,β-酪蛋白分泌减少。研究结果表明,miR-152在奶牛乳腺上皮细胞调控的靶基因是SOCS3,通过抑制其表达而发挥作用。miR-152可通过调控p-STAT5、p-mTOR、S6K1、cyclinD1信号转导而促进乳蛋白的合成和乳腺上皮细胞增殖。展开更多
文摘为确定microRNA-152(miR-152)对奶牛乳腺上皮细胞中乳蛋白合成的影响,本试验应用脂质体转染技术,改变miR-152在奶牛乳腺上皮细胞的表达量。采用实时荧光定量PCR、Western blotting、细胞活力分析等技术探索miR-152对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳功能的影响。结果显示,miR-152沉默,细胞因子信号传导抑制蛋白3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)表达增强,信号转导通路分子磷酸化信号转导与转录激活因子5(phospho-signal transducer and activator of transcription 5,p-STAT5)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素蛋白(phospho-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)、核糖体S6激酶1(ribosomal protein S6kinase 1,S6K1)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达减弱,细胞增殖能力减弱,β-酪蛋白分泌减少。研究结果表明,miR-152在奶牛乳腺上皮细胞调控的靶基因是SOCS3,通过抑制其表达而发挥作用。miR-152可通过调控p-STAT5、p-mTOR、S6K1、cyclinD1信号转导而促进乳蛋白的合成和乳腺上皮细胞增殖。
