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当归多糖对结直肠癌细胞顺铂耐药性的影响及作用机制
1
作者 杨柳 彭飞 +1 位作者 陆平 傅永吉 《北华大学学报（自然科学版）》 CAS 2024年第4期448-453,共6页
目的 探讨当归多糖对结直肠癌细胞顺铂耐药性的影响及作用机制。方法 将人结直肠癌细胞HT-15、顺铂耐药细胞株HT-15/DDP仅使用30μmol/L浓度的顺铂干预设为对照组,使用对应质量浓度1.0、1.5、2.0 mg/mL的当归多糖干预12 h后再加入30μmo... 目的 探讨当归多糖对结直肠癌细胞顺铂耐药性的影响及作用机制。方法 将人结直肠癌细胞HT-15、顺铂耐药细胞株HT-15/DDP仅使用30μmol/L浓度的顺铂干预设为对照组,使用对应质量浓度1.0、1.5、2.0 mg/mL的当归多糖干预12 h后再加入30μmol/L浓度顺铂设为当归多糖组。通过脂质体细胞转染技术分别将miR-10b-5p inhibitor、TGFBR2 mimics转染至HT-15/DDP细胞中,再加入2.0 mg/mL当归多糖干预48 h,然后将其分为当归多糖(2.0 mg/mL)+miR-10b-5p inhibitor组、当归多糖(2.0 mg/mL)+TGFBR2 mimics组。MTT法检测细胞增殖能力;Transwell小室试验检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡能力。RT-PCR检测miR-10b-5p、TGFBR2 mRNA表达水平;Western blot检测TGFBR2蛋白表达水平。结果 单独顺铂干预的对照组HT-15/DDP细胞增殖率、细胞迁移个数明显高于HT-15细胞(P<0.01);经不同质量浓度当归多糖预处理12 h后,可明显增强HT-15/DDP细胞对顺铂的敏感性,HT-15/DDP细胞增殖率、细胞迁移个数明显降低(P<0.01)。单独顺铂干预的对照组HT-15/DDP细胞凋亡率明显低于HT-15细胞(P<0.01);经不同质量浓度当归多糖预处理12 h后,明显增强了HT-15/DDP细胞对顺铂的敏感性,HT-15/DDP细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。HT-15/DDP细胞miR-10b-5p、TGFBR2表达水平在各组间比较差异均具有统计学意义(P<0.01);不同剂量当归多糖组中HT-15/DDP细胞miR-10b-5p表达水平明显低于对照组,TGFBR2表达水平明显高于对照组(P<0.01),随着当归多糖剂量的增加miR-10b-5p表达水平逐渐降低,TGFBR2表达水平逐渐升高(P<0.01)。使用生物信息学数据库(TargetScan、miRanda)预测miR-10b-5p的靶基因,结果显示,TGFBR2是miR-10b-5p的候选靶基因。miR-10b-5p表达下调后,HT-15/DDP细胞中TGFBR2相对表达量明显高于对照组HT-15/DDP细胞中TGFBR2相对表达量(P<0.01)。当归多糖(2.0 mg/mL)+miR-10b-5p inhibitor组、当归多糖(2.0 mg/mL)+TGFBR2 mimics组的HT-15/D 展开更多
关键词 当归多糖 结直肠癌 HT-15细胞 HT-15/DDp细胞 顺铂耐药 mir-10b-5p TGFbR2
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黄芪多糖通过miR-10b-5p/AGPAT3分子轴调控结直肠癌细胞顺铂耐药性 被引量：4
2
作者 陆曲折 罗永有 +2 位作者 王鑫 张莉莉 陈胜华 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期970-978,共9页
目的探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)通过miR-10b-5p/(1-acylglycerol-3-phosphate-O-acyltransferase 3;AGPAT3)分子轴调控结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞顺铂(cisdiammine dichloroplatinum;CDDP)耐药性的分子机... 目的探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)通过miR-10b-5p/(1-acylglycerol-3-phosphate-O-acyltransferase 3;AGPAT3)分子轴调控结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞顺铂(cisdiammine dichloroplatinum;CDDP)耐药性的分子机制。方法采用RT-qPCR检测SW620及SW620/CDDP细胞miR-10b-5p表达水平;使用MTT法或Transwell法检测不同浓度的APS或不同浓度的顺铂处理SW620及SW620/CDDP细胞后的细胞活力;通过双荧光素酶报告基因系统检测miR-10b-5p与AGPAT3的靶向结合关系;使用Western blotting检测AGPAT3、E-cadherin、Vimentin、Ki-67及zinc finger E-box binding homeobox 1(Zeb1)的表达情况。结果miR-10b-5p在SW620/CDDP细胞中表达水平显著上调(P<0.01);经不同浓度的APS处理后,SW620/CDDP细胞增殖(P<0.05)及迁移(P<0.05)水平受到显著抑制,APS与顺铂联合使用,显著增加了SW620/CDDP细胞对顺铂的敏感性(P<0.05);双荧光素酶报告基因验证AGPAT3是miR-10b-5p的靶基因;Western blotting检测结果显示,过表达miR-10b-5p或敲降AGPAT3可显著抑制E-cadherin的表达(P<0.01),并上调Vimentin、Ki-67及Zeb1的表达水平(P<0.01)。结论APS通过miR-10b-5p/AGPAT3分子轴调控CRC细胞顺铂耐药性,APS可作为CRC的化疗辅助药物,调节细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 黄芪多糖 mir-10b-5p AGpAT3 结直肠癌 顺氯氨铂
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MiR-10b-5p通过靶向NCOR2调控乳腺浸润性导管癌细胞的迁移和侵袭
3
作者 郭晨明 王仡阳 +3 位作者 罗志文 荆宇博 地力木拉提·艾斯木吐拉 毛新民 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第2期176-182,共7页
目的探讨miR-10b-5p通过靶向人源重组蛋白(NCOR2)调控乳腺浸润性导管癌细胞的迁移和侵袭。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析了1109例乳腺浸润性导管癌和113例相邻正常组织中miR-10b-5p和NCOR2的mRNA水平,根据miR-10b-5p表达中位... 目的探讨miR-10b-5p通过靶向人源重组蛋白(NCOR2)调控乳腺浸润性导管癌细胞的迁移和侵袭。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析了1109例乳腺浸润性导管癌和113例相邻正常组织中miR-10b-5p和NCOR2的mRNA水平,根据miR-10b-5p表达中位数分为高表达组和低表达组,分析两组的总生存率(OS)、无进展生存期(PFI),同时采用实时荧光定量PCR法检测20例患者乳腺癌组织及对应的相邻正常组织miR-10b-5p和NCOR2的mRNA水平。在细胞水平应用乳腺癌细胞系MCF-7构建miR-10b-5p对照组(转染miR-NC),miR-10b-5p过表达组(转染miR-10b-5p mimics),运用qRT-PCR法和Western blot法检测NCOR2 mRNA水平和蛋白水平表达量,采用MTT法检测细胞增殖情况,采用划痕法检测细胞水平迁移情况,采用transwell法检测细胞垂直迁移情况。结果miR-10b-5p在乳腺癌组织中的表达明显低于相邻正常组织(P<0.05),而NCOR2在乳腺癌组织中的表达明显高于相邻正常组织(P<0.05)。与低表达组相比,高表达组miR-10b-5p影响着乳腺浸润性导管癌患者的OS(P>0.05,HR=0.94)、PFI(P<0.05,HR=0.69)。与miR-10b-5p对照组相比,miR-10b-5p过表达组的乳腺癌细胞系MCF-7中NCOR2 mRNA表达水平和蛋白水平均下调(P<0.05),MCF-7细胞过表达组后水平和垂直迁移能力下降。结论过表达的miR-10b-5p可能通过调节NCOR2分子抑制乳腺浸润性导管癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 mir-10b-5p 乳腺浸润性导管癌 靶向人源重组蛋白 转移
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miR-10b-5p通过靶向SUFU介导乳腺癌细胞对放疗的敏感性 被引量：3
4
作者 覃波 陆录 赵涛 《肿瘤药学》 CAS 2022年第6期752-758,共7页
目的探讨miR-10b-5p在乳腺癌细胞放疗敏感性中的作用及相关机制。方法采用qPCR和West‐ern blotting检测正常乳腺细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231中miR-10b-5p mRNA、SUFU mRNA和蛋白的表达。在MDA-MB-231细胞中转染m... 目的探讨miR-10b-5p在乳腺癌细胞放疗敏感性中的作用及相关机制。方法采用qPCR和West‐ern blotting检测正常乳腺细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231中miR-10b-5p mRNA、SUFU mRNA和蛋白的表达。在MDA-MB-231细胞中转染miR-10b-5p inhibitor对miR-10b-5p进行敲减,6 Gy^(60)Coγ-射线照射2 h,分别采用克隆形成实验和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡水平;双荧光素酶报告实验验证靶基因SUFU,回补实验验证miR-10b-5p是否通过靶向SUFU介导乳腺癌细胞对放疗的敏感性。结果3种乳腺癌细胞系中miR-10b-5p的表达均显著高于正常乳腺细胞MCF-10A(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-10b-5p inhibitor组细胞增殖水平明显下降(P<0.05),凋亡水平显著上升(P<0.05)。敲减miR-10b-5p可增加野生型SUFU 3'UTR的荧光强度(P<0.05),而对突变型SUFU 3'UTR的荧光强度无明显影响(P>0.05)。此外,miR-10b-5p inhibitor组SUFU蛋白表达水平显著高于miR-NC组(P<0.05)。与miR-NC+si-NC组相比,miR-10b-5p inhibitor+si-NC组细胞增殖水平显著降低(P<0.05),miR-10b-5p inhibitor+si-SUFU#2组细胞增殖水平明显回升,且高于miR-10b-5p inhibitor+si-NC组(P<0.05)。结论乳腺癌细胞中miR-10b-5p呈高表达,敲减miR-10b-5p可增强乳腺癌细胞对放疗的敏感性,其机制可能与靶向抑制SUFU相关。 展开更多
关键词 mir-10b-5p SUFU 乳腺癌 放射治疗
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miR-10b-5p在糖尿病胃轻瘫中医诊疗中的临床意义
5
作者 吴奇 唐青 +2 位作者 余跃 杨欢 许仁炜 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2023年第7期0189-0191,共3页
探讨益气养阴健脾方辩证加减治疗糖尿病胃轻瘫的效果及对miR-10b-5p的影响。方法 随机将九江学院附属医院内分泌科收治的60例2型糖尿病胃轻瘫患者分为观察组与对照组,对照组应用莫沙必利治疗,观察组在对照组基础上进行益气养阴健脾方辩... 探讨益气养阴健脾方辩证加减治疗糖尿病胃轻瘫的效果及对miR-10b-5p的影响。方法 随机将九江学院附属医院内分泌科收治的60例2型糖尿病胃轻瘫患者分为观察组与对照组,对照组应用莫沙必利治疗,观察组在对照组基础上进行益气养阴健脾方辩证加减治疗,对比两组治疗效果及对血清miR-10b-5p指标的影响。结果 观察组治疗总有效率以及中医疗效评估有效率均明显高于对照组(P<0.05);治疗后观察组胃排空率明显高于对照组(P<0.05);治疗前两组血清miR-10b-5p水平比较无显著差异(P>0.05),治疗后观察组miR-10b-5p水平明显优于对照组(P<0.05);观察组治疗后生活质量评分明显高于对照组(P<0.05)。结论 益气养阴健脾方辩证加减对糖尿病胃轻瘫患者消化功能具有良好的改善作用,提高治疗有效率并提升患者生活质量,改善患者外周血miR-10b-5p水平,具有应用及推广价值。 展开更多
关键词 益气养阴健脾方辩证加减 莫沙必利 糖尿病胃轻瘫 临床疗效 mir-10b-5p
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鸡miR-10b-5p生物信息学及组织表达分析 被引量：2
6
作者 黄正洋 赵振华 +4 位作者 黄华云 李春苗 王钱保 穆春宇 黎寿丰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第4期1262-1270,共9页
【目的】通过对苏禽3号肉鸡的miR-10b-5p进行靶基因预测、生物信息学分析及其在鸡不同生长时期组织表达变化规律研究,探索其在鸡肌肉生长发育中作用。【方法】通过文献和miRBase检索脊椎动物的miR-10b-5p序列,利用Ensembl数据库查询并确... 【目的】通过对苏禽3号肉鸡的miR-10b-5p进行靶基因预测、生物信息学分析及其在鸡不同生长时期组织表达变化规律研究,探索其在鸡肌肉生长发育中作用。【方法】通过文献和miRBase检索脊椎动物的miR-10b-5p序列,利用Ensembl数据库查询并确定miR-10b-5p在基因组中的位置,根据前体序列构建系统进化树;使用miRDB、microT和TargetScan网站预测miR-10b-5p靶基因,并对靶基因进行GO功能和KEGG通路分析,进而揭示miR-10b-5p的基因功能。采用实时荧光定量PCR技术检测不同生长时期鸡miR-10b-5p组织表达量,探索其在大脑、小脑、垂体、下丘脑、胸肌、腿肌、卵巢、心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织中表达变化。【结果】miRBase检索共获得59种动物59条miR-10b-5p序列,即每一种动物都只有一种miR-10b-5p形式。基因定位分析发现,鸡miR-10b-5p位于2号染色体上的HOX基因家族中。常见物种miR-10b-5p成熟序列比对分析结果表明,miR-10b-5p的成熟序列相似性较高,物种间较为保守。系统进化树分析发现,miR-10b在哺乳类中的灵长目、啮齿目、鸟类、鱼类中各自先聚为一支,然后再共同聚为一类,这表明miR-10b在进化过程中是保守的。靶基因预测发现,miR-10b-5p共有300个靶基因。GO功能分析发现,靶基因主要富集到染色质组装和基因表达的转录后调控、组蛋白甲基转移酶复合物、转录因子复合物等功能。KEGG通路分析表明,靶基因主要富集到Wnt和p53信号通路上。组织表达分析显示,miR-10b-5p在检测的各个组织中均有表达;3日龄时大脑、小脑、垂体、胸肌和腿肌中miR-10b-5p表达量显著高于心脏、下丘脑、肾脏和肺脏等组织(P<0.05);90日龄时,垂体、胸肌、腿肌和大脑中miR-10b-5p表达量显著高于其他组织(P<0.05)。与3日龄雏鸡相比,90日龄时垂体、胸肌和腿肌中miR-10b-5p表达量均显著上升(P<0.05)。【结论】鸡miR-10b-5p是组织广泛 展开更多
关键词 鸡 mir-10b-5p 靶基因 表达分析 生物信息学
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miR-10b-5p作用于胰腺癌潜在靶基因及分子机制的探讨 被引量：1
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作者 蒋梦彤 唐瑞雪 罗殿中 《中国癌症防治杂志》 CAS 2017年第3期177-181,共5页
目的探讨miR-10b-5p在胰腺癌发生发展中潜在的靶基因和分子机制。方法通过高通量基因表达(gene expression omnibus,GEO)数据库和在线预测数据库对潜在靶基因进行初步探讨,再利用生物信息学计算,对miR-10b-5p与靶基因间的相互作用关系... 目的探讨miR-10b-5p在胰腺癌发生发展中潜在的靶基因和分子机制。方法通过高通量基因表达(gene expression omnibus,GEO)数据库和在线预测数据库对潜在靶基因进行初步探讨,再利用生物信息学计算,对miR-10b-5p与靶基因间的相互作用关系进行分析。结果本研究共得到586个miR-10b-5p潜在靶基因。基因富集分析(gene ontology,GO)表明,靶基因主要在蛋白转运途径中富集。京都基因与基因组百科全书通路分析(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)显示miR-10b-5p靶基因主要存在于两个重要途径:癌症相关通路和胰腺癌相关通路。蛋白-蛋白网络互作分析(protein-protein interaction,PPI)重点展示了胰腺癌相关通路上7个突变基因(EGFR、RAC3、SMAD4、PIK3CA、CDK6、Bcl2L1和STAT3)之间的相互作用关系。结论 miR-10b-5p可能通过靶向潜在的基因和途径在胰腺癌的发生发展中发挥作用。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 MI R-10b-5p 生物信息学 靶基因 分子机制
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