miR-181b-5p对胃癌细胞HGC-27增殖和凋亡的影响 被引量：7

1

作者 张笑添 常新剑 宋林林 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第2期140-147,共8页

该文检测了人胃癌血清和胃癌细胞HGC-27中miR-181b-5p的水平,并研究了miR-181b-5p对胃癌细胞HGC-27增殖和凋亡能力的影响,以探讨miR-181b-5p在胃癌发生和发展中可能的作用。荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,q RT-PCR)检测胃癌... 该文检测了人胃癌血清和胃癌细胞HGC-27中miR-181b-5p的水平,并研究了miR-181b-5p对胃癌细胞HGC-27增殖和凋亡能力的影响,以探讨miR-181b-5p在胃癌发生和发展中可能的作用。荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,q RT-PCR)检测胃癌患者和健康人群血清中miR-181b-5p的水平以及胃癌细胞HGC-27和胃黏膜细胞GES-1中miR-181b-5p的水平,采用脂质体瞬时转染技术将miR-181b-5p抑制剂(inhibitors)以及inhibitors阴性对照分别转入胃癌细胞HGC-27中,用q RTPCR验证转染后miR-181b-5p的水平,CCK-8法检测miR-181b-5p对胃癌细胞HGC-27的增殖能力的影响,流式细胞术检测转染后胃癌细胞HGC-27细胞周期和凋亡的变化。q RT-PCR结果显示,胃癌患者血清中miR-181b-5p的水平高于健康人群(P<0.05);胃癌细胞HGC-27中miR-181b-5p的水平显著高于胃黏膜细胞GES-1中的水平(P<0.01);转染miR-181b-5p inhibitors后其miR-181b-5p的水平显著低于inhibitors阴性对照组(P<0.01)。CCK-8结果显示,将miR-181b-5p的水平下调后,胃癌细胞HGC-27的增殖能力明显下降(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,转染miR-181b-5p inhibitors后,胃癌细胞HGC-27的凋亡率显著增高(P<0.01)。细胞周期检测结果显示,转染miR-181b-5p inhibitors后,其S期明显缩短,G2/M期延长,细胞增殖受到抑制。以上结果表明,血清miR-181b-5p可能作为胃癌早期诊断的一个分子肿瘤标志物;miR-181b-5p在胃癌的发生和发展过程中可能起到癌基因的作用,并有可能作为胃癌分子治疗的一个新靶点。 展开更多

关键词 mir-181b-5p 胃癌 细胞周期 增殖 凋亡

原文传递

食管鳞状细胞癌外泌体miR-181b-5p通过靶向抑制PTEN促进肿瘤相关巨噬细胞极化

2

作者 樊慧 赵乃阔 +4 位作者 陈林林 李治国 柳淼 张远英 周超锋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1441-1446,共6页

目的:探究食管鳞状细胞癌外泌体miR-181b-5p对M2型巨噬细胞极化的影响及机制。方法:提取并鉴定食管鳞状细胞癌外泌体,qRT-PCR检测miR-181b-5p在食管鳞状癌细胞及其外泌体中的表达。M0型巨噬细胞分为PBS组、HEEC exo组、Eca-109 exo组、m... 目的:探究食管鳞状细胞癌外泌体miR-181b-5p对M2型巨噬细胞极化的影响及机制。方法:提取并鉴定食管鳞状细胞癌外泌体,qRT-PCR检测miR-181b-5p在食管鳞状癌细胞及其外泌体中的表达。M0型巨噬细胞分为PBS组、HEEC exo组、Eca-109 exo组、miR-NC exo组、miR-181b-5p exo组、miR-NC组、miR-181b-5p mimic组、si-NC组、si-PTEN组、miR-181b-5p exo+PTEN组,qRT-PCR检测各组细胞中CD163、CD206、iNOS、TNF-α表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-181b-5p和PTEN的靶向关系。结果:miR-181b-5p在食管鳞状癌细胞TE-13、TE-12、TE-10、Eca-109、KYSE30及其外泌体中显著高表达(P<0.001)。相比于miR-NC组,miR-181b-5p mimic组细胞CD163和CD206表达显著上调(P<0.001),iNOS和TNF-α表达显著下调(P<0.001)。双荧光素酶报告基因结果显示PTEN为miR-181b-5p的靶基因。相比于si-NC组,si-PTEN组细胞CD163和CD206表达显著上调(P<0.001),iNOS和TNF-α表达显著下调(P<0.001)。相比于PBS组,Eca-109 exo组细胞CD163和CD206表达显著上调(P<0.001),而iNOS和TNF-α表达显著下调(P<0.001)。相比于miR-NC exo组,miR-181b-5p exo组细胞CD163和CD206表达显著上调(P<0.001),而iNOS和TNF-α表达显著下调(P<0.001)。相比于miR-181b-5p exo组,miR-181b-5p exo+PTEN组CD163和CD206表达显著下调(P<0.001),而iNOS和TNF-α表达显著上调(P<0.001)。结论:外泌体miR-181b-5p抑制PTEN表达而促进M2型巨噬细胞极化。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 外泌体 mir-181b-5p 巨噬细胞 极化

下载PDF 职称材料

雷公藤甲素通过调节miR-181b-5p/SMAD2抑制结直肠癌细胞的增殖和转移

3

作者 李传明 徐婉丽 沈艳 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期143-146,I0006,共5页

目的识别雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖,迁移和侵袭的影响并识别其作用机制。方法CCK-8和EdU检测雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖的影响;使用Transwell检测雷公藤甲素对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响。qRT-PCR检测结直肠癌细胞中miR-181b... 目的识别雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖,迁移和侵袭的影响并识别其作用机制。方法CCK-8和EdU检测雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖的影响;使用Transwell检测雷公藤甲素对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响。qRT-PCR检测结直肠癌细胞中miR-181b-5p和SMAD2 mRNA的表达;使用Western blot实验检测结直肠癌细胞中SMAD2蛋白的表达。结果CCK-8实验表明随着雷公藤甲素浓度增加,结直肠癌细胞存活率逐渐降低。EdU实验表明雷公藤甲素可显著抑制结直肠癌细胞增殖率。Transwell实验显示雷公藤甲素可显著抑制结直肠癌细胞迁移和侵袭数目。qRT-PCR结果证实雷公藤甲素可显著促进miR-181b-5p的表达并抑制SMAD2 mRNA和蛋白表达。此外,过表达SMAD2可部分逆转雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论雷公藤甲素以浓度依赖的方式抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与miR-181b-5p/SMAD2轴有关。 展开更多

关键词 雷公藤甲素 增殖 结直肠癌 mir-181b-5p SMAD2

下载PDF 职称材料

miR-21和miR-155与miR-181b-5p对乙肝肝硬化腹水患者预后的预测价值 被引量：1

4

作者 李爱辉 周萌 +1 位作者 史梦蕾 张玉环 《热带医学杂志》 CAS 2023年第2期208-212,236,共6页

目的探讨miR-21、miR-155和miR-181b-5p在乙肝肝硬化腹水患者中的表达水平及其对预后的预测价值。方法选择2018年2月-2019年10月新乡医学院第一附属医院收治的182例乙肝肝硬化腹水患者、124例乙型肝炎患者、50名健康查体者作为研究对象... 目的探讨miR-21、miR-155和miR-181b-5p在乙肝肝硬化腹水患者中的表达水平及其对预后的预测价值。方法选择2018年2月-2019年10月新乡医学院第一附属医院收治的182例乙肝肝硬化腹水患者、124例乙型肝炎患者、50名健康查体者作为研究对象,分别纳入肝硬化腹水组、乙型肝炎组及对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测外周血miR-21、miR-155和miR-181b-5p表达水平,根据治疗反应性将乙肝肝硬化腹水患者分为普通型腹水组(n=167)及顽固型腹水组(n=15);对患者进行为期2年的随访,根据存活情况分为预后良好组(n=140)及预后不良组(n=42),采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-21、miR-155、miR-181b-5p预测短期治疗效果及长期预后的价值。结果肝硬化腹水组miR-21(1.26±0.31)、miR-155(1.41±0.38)表达水平高于乙型肝炎组[(1.12±0.26)、(1.30±0.29)]及对照组[(0.56±0.10)、(0.58±0.15)],miR-181b-5p表达水平(1.15±0.32)低于乙型肝炎组(1.22±0.20)及对照组(1.45±0.10),差异均有统计学意义(F=129.547、128.700、26.039,P均<0.05)。相关性分析显示,miR-21、miR-155与肝硬化腹水患者血清总胆红素、终末期肝病模型(MELD)评分、Child-Pugh分级成正相关(P<0.05),miR-181b-5p与总胆红素、MELD评分、Child-Pugh分级成负相关(P<0.05)。顽固型腹水组miR-21(1.48±0.30)显著高于普通型腹水组(1.24±0.31),差异有统计学意义(t=2.882,P<0.05),两组miR-155[(1.28±0.33)vs.(1.42±0.38)]、miR-181b-5p[(1.25±0.30)vs.(1.14±0.32)]比较差异无统计学意义(t=1.380、1.184,P>0.05);ROC曲线显示,miR-21、Child-Pugh评分、MELD评分预测短期治疗效果的曲线下面积为0.739、0.889、0.864。预后不良组miR-21、miR-155表达水平高于预后良好组[(1.49±0.26)vs.(1.19±0.29)、(1.64±0.45)vs.(1.34±0.33)],miR-181b-5p低于预后良好组[(0.92±0.27)vs.(1.22±0.33)],差异均有统计学意义(t=6.032、4.710、5.987,P均<0.05);ROC曲线分析显示,miR-21、miR-155 展开更多

关键词 乙型肝炎 肝硬化腹水 mir-21 mir-155 mir-181b-5p

原文传递

miR-181b-5p对于卡波西肉瘤细胞SLK细胞增殖和凋亡的影响 被引量：3

5

作者 丁媛 吴秀娟 +5 位作者 向芳 康晓静 于世荣 冯燕艳 王红娟 普雄明 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第21期4005-4008,4013,共5页

目的:通过脂质转染mi R-181b-5p模拟物及抑制物到卡波西肉瘤细胞系SLK,首次研究mi R-181b-5p对卡波西肉瘤细胞SLK细胞增殖、凋亡生物学功能的影响,为进一步研究mi R-181b-5p在卡波西肉瘤发病机制中的作用奠定理论基础。方法:应用脂质体... 目的:通过脂质转染mi R-181b-5p模拟物及抑制物到卡波西肉瘤细胞系SLK,首次研究mi R-181b-5p对卡波西肉瘤细胞SLK细胞增殖、凋亡生物学功能的影响,为进一步研究mi R-181b-5p在卡波西肉瘤发病机制中的作用奠定理论基础。方法:应用脂质体对人卡波西肉瘤细胞株SLK进行转染,对转染mi R-181b-5p模拟物及抑制物后的卡波西肉瘤细胞株行MTT检测观察细胞增殖曲线;应用流式细胞仪行检测转染48小时后各组细胞凋亡率比较。结果:与阴性对照组比较,mi R-181b-5p模拟物组细胞的增殖能力明显上升,(P<0.01)。mi R-181b-5p抑制物组细胞的增殖能力明显下降,(P<0.01)。mi R-181b-5p抑制物阴性对照组细胞的增殖能力无明显变化。流式细胞仪测定SLK细胞转染mi R-181b-5p模拟物后凋亡率(5.5±0.6)%,与阴性对照组凋亡率(7.6±0.4)%相比,差异有统计学意义,明显下降(P<0.05);mi R-181b-5p抑制物组凋亡率(14.8±1.0)%明显增高,有统计学差异(P<0.05)。结论:通过转染mi R-181b-5p模拟物/抑制物,发现其对SLK细胞的增殖、凋亡造成一定影响,进一步开展mi R-181b-5p生物学特性和其相关靶基因验证的相关研究有十分重要的意义。 展开更多

关键词 mir-181b-5p 卡波氏肉瘤 增殖 凋亡

原文传递

外泌体源性miR-181b-5p在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义 被引量：2

6

作者 洪壹 刘亢亢 +2 位作者 王宁玲 谢志伟 储金华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期643-648,共6页

目的:探讨外泌体源性miR-181b-5p在急性淋巴细胞白血病患儿不同疾病阶段的表达水平差异及其与临床特点的相关性。方法:收集86例ALL患儿骨髓血浆标本,采用外泌体提取试剂盒提取血浆中外泌体,TRIzol法提取外泌体中RNA,采用实时荧光定量聚... 目的:探讨外泌体源性miR-181b-5p在急性淋巴细胞白血病患儿不同疾病阶段的表达水平差异及其与临床特点的相关性。方法:收集86例ALL患儿骨髓血浆标本,采用外泌体提取试剂盒提取血浆中外泌体,TRIzol法提取外泌体中RNA,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测初诊组、复发组、缓解组、对照组患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平,比较分析miR-181b-5p表达水平在各组患儿中的差异,以及miR-181b-5p表达水平与临床特征之间的关系。结果:初诊和复发组ALL患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平均明显低于缓解组和对照组(P<0.05);初诊组T-ALL患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平明显高于B-ALL患儿(P<0.05);初诊组男性患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平明显高于女性患儿(P<0.01)。结论:外泌体源性miR-181b-5p在ALL儿童病程中呈动态变化,可以作为监测疾病状态的标记性miRNA;外泌体可以在肿瘤微环境中传递信息,作为生物分子靶向治疗的潜在载体。 展开更多

关键词 儿童 急性淋巴细胞白血病 外泌体 mir-181b-5p 临床特点

下载PDF 职称材料

miR-181b-5p靶向PDCD4基因调控高糖诱导血管内皮细胞增殖和凋亡的机制 被引量：4

7

作者 吴源 白淑荣 +2 位作者 任红梅 尹彩君 魏述军 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第19期4195-4199,共5页

目的研究miR-181b-5p和程序性细胞死亡因子(PDCD)4在高糖诱导的血管内皮细胞中的表达及其对增殖和凋亡的影响。方法运用qRT-PCR和Western印迹检测高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中miR-181b-5p和PDCD4的表达。用脂质体法将miR-181b-5... 目的研究miR-181b-5p和程序性细胞死亡因子(PDCD)4在高糖诱导的血管内皮细胞中的表达及其对增殖和凋亡的影响。方法运用qRT-PCR和Western印迹检测高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中miR-181b-5p和PDCD4的表达。用脂质体法将miR-181b-5p mimic和PDCD4 siRNA转染至HUVEC,MTT法、流式细胞仪检测高糖诱导HUVEC的增殖和凋亡。Targetscan在线分析网站预测和双荧光素酶报告基因实验验证miR-181b-5p和PDCD4的靶向关系。共转染miR-181b-5p mimic和pcDNA-PDCD4至HUVEC,MTT法、流式细胞仪检测高糖诱导HUVEC的增殖和凋亡。结果与5 mmol/L葡萄糖干预的HUVEC相比,高糖诱导的细胞中miR-181b-5p表达显著上调、PDCD4表达显著下调(P<0.01,P<0.001)。过表达miR-181b-5p、低表达PDCD4均可促进高糖诱导的HUVEC增殖、抑制其凋亡。Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因实验和Western印迹结果显示,miR-181b-5p能够靶向调控PDCD4的表达。上调PDCD4的表达可逆转miR-181b-5p对高糖诱导的HUVEC促进增殖和抑制其凋亡的作用。结论过表达miR-181b-5p可促进高糖诱导的HUVEC增殖,抑制其凋亡,其机制可能与miR-181b-5p靶向调控PDCD4有关。 展开更多

关键词 血管内皮细胞 高糖 mir-181b-5p pDCD4 增殖 凋亡

下载PDF 职称材料

miR-181b-5p在胰腺癌进展中的临床功能及分子机制研究

8

作者 陆厚良 乔莎莎 韦有亮 《中国科技期刊数据库 医药》 2024年第12期001-005,共5页

胰腺癌是一种恶性程度很高的消化系统肿瘤,其发病率和死亡率逐年上升。然而,目前对胰腺癌的治疗效果并不理想,其预后较差,早期诊断困难,传统的化疗效果不佳。因此,寻找有效的分子标志物来诊断和治疗胰腺癌具有重要意义。近年来研究发现m... 胰腺癌是一种恶性程度很高的消化系统肿瘤,其发病率和死亡率逐年上升。然而,目前对胰腺癌的治疗效果并不理想,其预后较差,早期诊断困难,传统的化疗效果不佳。因此,寻找有效的分子标志物来诊断和治疗胰腺癌具有重要意义。近年来研究发现miR-181b-5p在多种肿瘤组织中表达水平异常增高,其可以通过靶向结合靶基因BAP1,抑制BAP1介导的信号通路来促进肿瘤细胞增殖。在胰腺癌中过表达miR-181b-5p可以抑制BAP1介导的信号通路进而促进细胞增殖,这表明miR-181b-5p可能是胰腺癌治疗的潜在靶点。本研究拟通过临床研究、功能研究及分子机制研究,评估miR-181b-5p的诊断和预后价值、分析其对肿瘤进展的影响、探索其生物学功能发挥涉及的分子机制。 展开更多

关键词 mir-181b-5p 胰腺癌 临床功能 分子机制 进展研究

下载PDF 职称材料

miR-181b-5p在人卡波西肉瘤组织中的表达变化及临床意义 被引量：2

9

作者 丁媛 吴秀娟 +1 位作者 康晓静 普雄明 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期2175-2178,共4页

目的检测miR-181b-5p在人卡波西肉瘤(KS)组织中的表达,明确miR-181b-5p是否与KS的发生发展相关。方法收集2012年1月—2013年10月新疆维吾尔自治区人民医院18例行HE染色病理检查明确诊断KS患者的KS组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR检... 目的检测miR-181b-5p在人卡波西肉瘤(KS)组织中的表达,明确miR-181b-5p是否与KS的发生发展相关。方法收集2012年1月—2013年10月新疆维吾尔自治区人民医院18例行HE染色病理检查明确诊断KS患者的KS组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR检测KS组织和癌旁组织中miR-181b-5p表达水平并比较其差异;同时对miR-181b-5p表达的影响因素进行分析。结果 KS组织中miR-181b-5p表达水平为(0.73±0.40),高于癌旁组织中的(0.24±0.16)(t=4.826,P<0.01)。不同年龄、病程、全身皮损面积、全身皮损类型及人疱疹病毒8型(HHV-8)、人类免疫缺陷病毒(HIV)阴阳性患者KS组织miR-181b-5p表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同肿瘤组织病理分期患者miR-181b-5p表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。斑块期、结节期患者miR-181b-5p表达水平高于斑片期(P<0.05)。HIV合并HHV-8双阳性患者miR-181b-5p表达水平为(0.32±0.19),HIV合并HHV-8双阴性患者miR-181b-5p表达水平为(0.43±0.17),差异无统计学意义(t=1.615,P=0.158)。结论 miR-181b-5p可能参与了KS的致瘤过程,miR-181b-5p有可能成为潜在的分子诊断指标之一。 展开更多

关键词 肉瘤 卡波西 mir - 181b - 5p 分子诊断技术

下载PDF 职称材料

微小RNA-181b-5p对皮肤黑素瘤细胞株增殖和侵袭的作用及机制研究 被引量：2

10

作者 夏利 杨林洪 +5 位作者 许丽 孙文国 于亮 翟婉芳 王东霞 邝小弯 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期588-595,共8页

目的探讨微小RNA(miRNA)-181b-5p是否通过靶向普列克底物蛋白(PLEK)抑制皮肤黑素瘤(CM)细胞的增殖及侵袭能力。方法生物信息学分析CM核心基因;双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-181b-5p和PLEK的靶向结合。采用RNA oligo和siRNA分别调控A... 目的探讨微小RNA(miRNA)-181b-5p是否通过靶向普列克底物蛋白(PLEK)抑制皮肤黑素瘤(CM)细胞的增殖及侵袭能力。方法生物信息学分析CM核心基因;双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-181b-5p和PLEK的靶向结合。采用RNA oligo和siRNA分别调控A375细胞miRNA-181b-5p和PLEK的表达,具体分组为:模拟物阴性对照组、miRNA-181b-5p模拟物组、抑制剂阴性对照组、miRNA-181b-5p抑制剂组、PLEK siRNA组、siRNA阴性对照组、miRNA-181b-5p抑制剂和对照siRNA共转染组以及miRNA-181b-5p抑制剂和PLEK siRNA3共转染组。上述各组用相应试剂处理细胞48 h后,采用qPCR检测A375细胞中miRNA-181b-5p和PLEK mRNA的表达,Western印迹检测PLEK蛋白的表达,Transwell小室侵袭实验检测A375细胞的侵袭能力;继续培养24~96 h后,CCK8实验检测A375细胞增殖能力。结果PLEK为CM的核心基因,CM原位癌组织较癌旁组织高表达PLEK(P=0.031),转移组织较原位癌组织高表达PLEK(P=0.001)。与人表皮黑素细胞HEMa-LP相比,A375细胞高表达PLEK mRNA(3.884±0.156比0.997±0.010,t=18.48,P<0.001)及PLEK蛋白(2.840±0.301比1.029±0.094,t=5.47,P=0.005),低表达miRNA-181b-5p(0.333±0.042比0.967±0.069,t=7.83,P=0.001)。双荧光素酶报告基因实验显示,miRNA-181b-5p和PLEK靶向结合。与模拟物阴性对照相比,miRNA-181b-5p模拟物转染后A375细胞的存活率显著降低(48 h,t=7.96,P=0.015;72 h,t=7.50,P=0.002;96 h,t=7.96,P=0.001),侵袭能力也显著降低(t=5.07,P=0.007);相反miRNA-181b-5p抑制剂组A375细胞存活率高于抑制剂阴性对照组(24 h,t=5.38,P=0.013;48 h,t=5.36,P=0.013;72 h,t=7.63,P=0.005;96 h,t=5.99,P=0.004),侵袭能力也高于抑制剂阴性对照组(t=7.24,P=0.002);与对照siRNA组相比,PLEK siRNA转染后A375细胞的增殖能力降低(48、72、96 h时,P值分别为0.015、0.011、0.001),侵袭能力也降低(t=4.93,P=0.008);与miRNA-181b-5p抑制剂和对照siRNA共转染组相比,miRNA-181b-5p抑制剂和PLEK siRNA共转染组A375细胞的增殖� 展开更多

关键词 黑色素瘤 实验性 微RNAS 细胞增殖 肿瘤侵润 mir-181b-5p 普列克底物蛋白

原文传递

沉默LncRNA SNHG7通过调控miR-181b-5p的表达减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤 被引量：2

11

作者 刘振 金卫东 +3 位作者 韩明磊 崔佳佳 侯永兰 徐光翠 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2021年第8期812-817,共6页

目的探讨沉默长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其对miR-181b-5p的靶向调控作用。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,将其随机分为对照组、H/R组、H/R+si-NC组、H/R+si-S... 目的探讨沉默长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其对miR-181b-5p的靶向调控作用。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,将其随机分为对照组、H/R组、H/R+si-NC组、H/R+si-SNHG7组、H/R+si-SNHG7+anti-miR-NC组和H/R+si-SNHG7+anti-miR-181b-5p组。检测乳酸脱氢酶、丙二醛的含量与超氧化物歧化酶的活性;用流式细胞术检测细胞凋亡率;用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG7、miR-181b-5p的表达量;用双荧光素酶报告实验验证SNHG7、miR-181b-5p的靶向关系;蛋白免疫印迹法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达量。结果与对照组相比,H/R组心肌细胞中SNHG7的表达显著升高(P<0.05),miR-181b-5p的表达水平显著降低(P<0.05),乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著升高(P<0.05),超氧化物歧化酶的活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Bax蛋白水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05);与H/R组、H/R+si-NC组相比,H/R+si-SNHG7组乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶的活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Bax蛋白水平显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实SNHG7可靶向结合miR-181b-5p;干扰miR-181b-5p的表达可减弱沉默SNHG7对H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡的作用。结论沉默SNHG7可能通过上调miR-181b-5p的表达抑制H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡,从而对心肌细胞发挥保护作用。 展开更多

关键词 长链非编码RNA SNHG7 mir-181b-5p 缺氧/复氧 心肌细胞 氧化应激 凋亡

原文传递

miR-181b-5p调节EGR1/BIM通路对ALL细胞增殖、凋亡和迁移的影响 被引量：1

12

作者 袁韵 王婷 胡艳 《西部医学》 2023年第8期1129-1135,共7页

目的 探讨miR-181b-5p在急性淋巴细胞白血病(ALL)中的作用及其潜在的分子机制。方法 采用qRT-PCR检测四川大学华西医院2019年1月—2021年1月80例ALL患者miR-181b-5p和早期生长反应因子1(EGR1) mRNA的表达水平。分别使用miR-181b-5p模拟... 目的 探讨miR-181b-5p在急性淋巴细胞白血病(ALL)中的作用及其潜在的分子机制。方法 采用qRT-PCR检测四川大学华西医院2019年1月—2021年1月80例ALL患者miR-181b-5p和早期生长反应因子1(EGR1) mRNA的表达水平。分别使用miR-181b-5p模拟物、miR-181b-5p抑制物或(和)EGR1过表达质粒转染人ALL细胞系NALM-6细胞。采用MTT、流式细胞仪和划痕愈合实验检测miR-181b-5p对细胞增殖、凋亡和迁移的影响。通过双荧光素酶验证miR-181b-5p和EGR1的相互作用关系。Western blot检测细胞中EGR1蛋白和细胞增殖、凋亡和迁移相关蛋白的表达水平。结果 miR-181b-5p在ALL中表达显著上调,EGR1表达下调(P<0.05)。抑制miR-181b-5p不仅抑制细胞增殖、迁移,诱导细胞凋亡,而且上调EGR1和BIM蛋白表达(P<0.05);上调miR-181b-5p则具有与之相反的效果(P<0.05)。EGR1是ALL细胞中miR-181b-5p的靶基因(P<0.05)。miR-181b-5p过表达可明显削弱EGR1过表达对ALL细胞增殖、凋亡和迁移的影响(P<0.05)。结论 抑制miR-181b-5p可通过靶向上调EGR1和BIM表达在ALL中抑制细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 急性淋巴细胞白血病 mir-181b-5p 早期生长反应因子1 增殖 凋亡 迁移

下载PDF 职称材料

miR-181b-5p靶向调控Nr6a1抑制GC-1spg细胞的增殖与迁移 被引量：2

13

作者 周世华 李丹 +1 位作者 刘晓雯 段红艳 《生命科学研究》 CAS CSCD 2017年第4期337-342,共6页

Micro RNA(mi RNA)是一段长约为22 nt的内源性非编码单链RNA,研究表明mi RNA对正常精子发生和雄性发育必不可少。为了探究mi R-181b-5p在雄性生殖细胞发育中的功能以及寻找其靶基因,首先采用流式细胞术、噻唑蓝检测以及划痕实验分析了mi... Micro RNA(mi RNA)是一段长约为22 nt的内源性非编码单链RNA,研究表明mi RNA对正常精子发生和雄性发育必不可少。为了探究mi R-181b-5p在雄性生殖细胞发育中的功能以及寻找其靶基因,首先采用流式细胞术、噻唑蓝检测以及划痕实验分析了mi R-181b-5p在小鼠GC-1spg精原细胞系中的生物学效应,随后利用Targetscan和GO数据库等生物信息学软件预测发现生殖核受体Nr6a1可能为其靶基因,进而通过双荧光素酶报告基因实验以及q PCR证实了mi R-181b-5p与Nr6a1的靶向识别关系,最后采用细胞功能回补实验明确了mi R-181b-5p通过靶向调控Nr6a1来抑制GC-1spg细胞的增殖和迁移。结果表明mi R-181b-5p通过其靶基因Nr6a1在精子发生中起到负调控的作用。 展开更多

关键词 mir-181b-5p Nr6a1 靶基因 精子发生 生物信息学

下载PDF 职称材料

miR-181b-5p调控TIMP3对apoE-/-鼠动脉粥样硬化炎症影响及相关因子检验 被引量：2

14

作者 郑莉 谭成宇 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期2200-2206,共7页

为探究mi R-181b-5p靶向调控TIMP3对apo E^-/-鼠动脉粥样硬化炎症的影响,本研究基于生物信息学预测筛选,并采用双荧光素酶报告基因系统验证mi R-181b-5p靶基因。同时在ox-LDL刺激THP-1巨噬细胞及apo E^-/-动脉粥样硬化模型小鼠中检测mi ... 为探究mi R-181b-5p靶向调控TIMP3对apo E^-/-鼠动脉粥样硬化炎症的影响,本研究基于生物信息学预测筛选,并采用双荧光素酶报告基因系统验证mi R-181b-5p靶基因。同时在ox-LDL刺激THP-1巨噬细胞及apo E^-/-动脉粥样硬化模型小鼠中检测mi R-181b-5p靶基因m RNA及蛋白水平的表达情况,并且检测转染mi R-181b-5p后细胞水平和动物体内炎症因子TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18、CCL2的表达变化。此外,通过病理切片方法检测转染mi R-181b-5p后小鼠主动脉窦处病变情况。研究通过双荧光素酶报告基因系统验证TIMP3为mi R-181b-5p靶基因,并在ox-LDL刺激THP-1巨噬细胞及apo E^-/-动脉粥样硬化模型小鼠中证明了mi R-181b-5p可以降低TIMP3转录水平从而降低其蛋白水平表达,同时研究发现mi R-181b-5p在细胞水平和动物体内均会增强炎症因子TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18、CCL2的表达,并可以增加小鼠主动脉窦处病变面积。研究认为在动脉粥样硬化发生中,mi R-181b-5p可以增加病变面积并且提升相关炎症因子的表达、分泌,其作用机理很可能是通过抑制靶基因TIMP3表达,进而降低TIMP3蛋白水平实现的,为研究动脉粥样硬化机制提供了理论依据。 展开更多

关键词 双荧光素酶报告基因系统 动脉粥样硬化 mir-181b-5p TIMp3

原文传递

miR-181b-5P和EPB41L3蛋白在喉癌中的表达及临床意义

15

作者 黄恒丰 马鲲鹏 +2 位作者 杨迪 张丽君 张盛林 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2023年第1期41-46,55,共7页

目的 miR-181b-5P和红细胞膜蛋白配体4.1样3(EPB41L3)目前在喉癌中表达关系及作用机制尚不明确。论文主要通过研究miR-181b-5P、EPB41L3蛋白在喉癌组织及癌旁正常组织中表达水平并进行相关性分析,探讨miR-181b-5P靶向调控EPB41L3对喉癌... 目的 miR-181b-5P和红细胞膜蛋白配体4.1样3(EPB41L3)目前在喉癌中表达关系及作用机制尚不明确。论文主要通过研究miR-181b-5P、EPB41L3蛋白在喉癌组织及癌旁正常组织中表达水平并进行相关性分析,探讨miR-181b-5P靶向调控EPB41L3对喉癌组织增殖、侵袭及转移的影响。方法 通过生物信息学数据库预测miR-181b-5P在喉癌中的表达情况,采用实时荧光定量PCR技术测定喉癌及癌旁正常组织中miR-181b-5P的表达量。预测miR-181b-5p的靶基因并进行生物信息学分析,EPB41L3蛋白的相对表达由免疫组化SP法测定。结果 喉癌组织中miR-181b-5P的表达明显较癌旁正常组织高(P<0.001),且在有无淋巴结转移间有显著差异(P=0.027 3)。EPB41L3蛋白在喉癌组织的表达明显较癌旁正常组织低(P<0.001)。EPB41L3蛋白在喉癌中的阳性表达率于不同病理分化程度、临床分期及有无淋巴结转移中差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-181b-5p及EPB41L3蛋白在喉癌组织中的表达呈负相关(r=-0.420 8,P=0.002 3)。结论 miR-181b-5P可能通过负性调控EPB41L3的表达,影响喉癌组织的增殖、侵袭、转移,研究可为喉癌的临床靶向治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 喉癌 mir-181b-5p Epb41L3 免疫组织化学 实时荧光定量pCR

原文传递

miR-181b-5p通过靶向结合PAX9促进人急性髓细胞性白血病细胞增殖并诱导其凋亡

16

作者 李斌 陶千山 +2 位作者 胡雪莹 李坦 鲍扬漪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1074-1082,共9页

目的 探究miR-181b-5p通过靶向结合配对盒基因9(PAX9)对急性髓细胞性白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响。方法 分别用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库和肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析AML患者中PAX9的表达水平和预后的关系。在Kasumi-... 目的 探究miR-181b-5p通过靶向结合配对盒基因9(PAX9)对急性髓细胞性白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响。方法 分别用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库和肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析AML患者中PAX9的表达水平和预后的关系。在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染空载体(Vector组)或PAX9(PAX9组),CCK-8法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot法检测细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)和细胞周期蛋白B1(CCNB1)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)的表达。生物信息学分析预测PAX9靶作用的微小RNA(miRNA)、荧光素酶报告系统验证其靶向作用,实时定量PCR检测PAX9 mRNA水平,Western blot法检测PAX9蛋白表达。在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染miR-NC(miR-NC组)或miR-181b-5p(miR-181b-5p组),在miR-181b-5p组细胞中进一步转染PAX9(miR-181b-5p联合PAX9组),采用前述方法分别检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。结果 GEPIA和TCGA数据库显示AML患者PAX9呈低表达趋势并与患者不良预后相关。在Kasumi-1、 AML5细胞中,与Vector组相比,PAX9组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、 BAX蛋白表达升高。双荧光素酶报告基因验证PAX9是miR-181b-5p的靶基因。与miR-NC组相比,miR-181b-5p组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达升高,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、 BAX蛋白表达降低。与miR-181b-5p组相比,miR-181b-5p联合PAX9组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡、 BAX蛋白表达升高。结论 miR-181b-5p靶向抑制PAX9表达促进AML细胞增殖、延缓细胞凋亡。 展开更多

关键词 急性髓细胞样白血病(AML) 配对盒基因9(pAX9) mir-181b-5p 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期

下载PDF 职称材料

LncRNA TUG1通过调节miR-181b-5p/PDCD4轴对高糖诱导的心肌细胞凋亡的影响

17

作者 吕朝阳 黄婷 +4 位作者 徐在革 刘惠双 杨营军 李真真 敖文 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第12期1281-1288,共8页

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)通过调节miR-181b-5p/程序性细胞死亡蛋白4(PDCD4)轴对高糖诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法 采用高糖(25 mmol/L葡萄糖)在体外构建糖尿病心肌病(DCM)细胞模型。AC16细胞分为NG组、H... 目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)通过调节miR-181b-5p/程序性细胞死亡蛋白4(PDCD4)轴对高糖诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法 采用高糖(25 mmol/L葡萄糖)在体外构建糖尿病心肌病(DCM)细胞模型。AC16细胞分为NG组、HG组、HG+sh-NC组、HG+sh-TUG1组、HG+miR-NC组、HG+miR-181b-5p组、HG+sh-TUG1+anti-miR-NC组、HG+sh-TUG1+anti-miR-181b-5p组、HG+miR-181b-5p+pcDNA组、HG+miR-181b-5p+pc-PDCD4组。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒检测LDH释放总量;采用实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测TUG1、miR-181b-5p和PDCD4 mRNA表达;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测B细胞淋巴瘤2-相关X(Bax)、活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)和PDCD4蛋白表达;caspase-Glo3检测试剂盒评估caspase 3活性;双萤光素酶报告基因实验验证TUG1或PDCD4与miR-181b-5p的靶向关系。结果 与NG组比较,HG组细胞活性降低,LDH释放总量、凋亡率、Bax、cleaved caspase 3表达及caspase 3活性升高(P<0.05),敲低TUG1或上调miR-181b-5p表达可拮抗上述变化(P<0.05)。抑制miR-181b-5p可减轻TUG1沉默对高糖处理下心肌细胞活力和凋亡的影响(P<0.05)。PDCD4过表达可减弱miR-181b-5p上调对高糖处理的心肌细胞活力的促进作用和对凋亡的抑制作用。TUG1可通过吸附miR-181b-5p上调PDCD4表达(P<0.05)。结论TUG1通过下调miR-181b-5p、上调PDCD4表达促进高糖诱导的心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 牛磺酸上调基因1 mir-181b-5p 程序性细胞死亡蛋白4 高糖 心肌细胞 凋亡

下载PDF 职称材料

长链非编码RNA FENDRR通过靶基因微RNA-181b-5p调控口腔鳞癌细胞增殖、侵袭迁移的分子机制 被引量：1

18

作者 王晓飞 孟兵 +1 位作者 田泰冲 张丽娟 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2019年第4期438-443,共6页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FENDRR对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭迁移的影响及其可能作用机制.方法以人口腔鳞癌细胞SCC15和人正常口腔上皮细胞HOEC为研究对象,RT-qPCR检测细胞中FENDRR和miR-181b-5p表达,MTT法、Transwell小室法分别检... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FENDRR对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭迁移的影响及其可能作用机制.方法以人口腔鳞癌细胞SCC15和人正常口腔上皮细胞HOEC为研究对象,RT-qPCR检测细胞中FENDRR和miR-181b-5p表达,MTT法、Transwell小室法分别检测过表达FENDRR、抑制miR-181b-5p、同时过表达FENDRR和miR-181b-5p对口腔鳞癌细胞增殖、迁移侵袭的影响,双荧光素酶报告基因实验检测FENDRR是否靶向miR-181b-5p.结果与正常口腔上皮细胞相比,口腔鳞癌细胞中FENDRR表达明显下调(P<0.05),miR-181b-5p表达明显上调(P<0.05);过表达FENDRR明显抑制口腔鳞癌细胞中miR-181b-5p表达,而抑制FENDRR后miR-181b-5p表达明显升高,双荧光素酶报告基因实验结果证实FENDRR靶向miR-181b-5p;过表达FENDRR、抑制miR-181b-5p均明显抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭,而过表达miR-181b-5p则可逆转FENDRR过表达对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用.结论FENDRR具有抑制口腔鳞癌细胞增殖、侵袭迁移的作用,其机制可能与靶向抑制miR-181b-5p表达有关. 展开更多

关键词 口腔鳞癌 长链非编码RNA FENDRR mir-181b-5p 增殖 迁移侵袭

原文传递

miR-181b-5p负调控CYLD的表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量：1

19

作者 朱奕 李世豪 刘宏伟 《医学研究杂志》 2022年第11期82-88,共7页

目的探讨miR-181b-5p通过下调CYLD的表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-181b-5p在膀胱癌细胞系(T24、UM-UC-3、5637)和人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)中的表达水平。在T24和UM-UC-3细胞... 目的探讨miR-181b-5p通过下调CYLD的表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-181b-5p在膀胱癌细胞系(T24、UM-UC-3、5637)和人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)中的表达水平。在T24和UM-UC-3细胞中转染miR-181b-5p模拟物(miR-181b-5p组)和miR-NC(对照组),CCK-8实验和克隆形成实验检测过表达miR-181b-5p对T24和UM-UC-3细胞增殖的影响,Transwell实验检测过表达miR-181b-5p对T24和UM-UC-3细胞迁移和侵袭的影响。采用生物信息学预测miR-181b-5p潜在下游靶基因CYLD,双荧光素酶报告基因实验验证miR-181b-5p是否与CYLD的3′-UTR结合,qRT-PCR检测过表达miR-181b-5p对CYLD mRNA的影响,Western blot法检测过表达miR-181b-5p对CYLD蛋白的影响。在T24和UM-UC-3细胞中沉默CYLD的表达,采用CCK8实验、克隆形成实验和Transwell实验检测沉默CYLD对T24和UM-UC-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果与SV-HUC-1比较,膀胱癌细胞系中miR-181b-5p的表达水平升高(P<0.05)。与对照比较,过表达miR-181b-5p和沉默CYLD均促进膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,过表达miR-181b-5p明显降低野生型CYLD的荧光素酶活性(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot法结果显示过表达miR-181b-5p显著下调CYLD mRNA和蛋白的水平(P<0.05)。结论miR-181b-5p通过负调控CYLD的表达促进膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 膀胱癌 mir-181b-5p CYLD 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭

下载PDF 职称材料

miR-181b-5p靶向调控SPP1在肝细胞癌中过表达的临床意义及作用机制 被引量：1

20

作者 杨孟涛 汪艇 +2 位作者 杜伟 朱双靖 丁振 《医学信息》 2022年第24期79-86,共8页

目的探讨miR-181b-5p与分泌型磷蛋白1(SPP1)的关系及SPP1在肝细胞癌中的表达、临床意义、作用机制。方法首先从Ualcan数据库中筛选出在肝细胞癌中过表达的前25个基因,选取SPP1基因作为研究对象。另检索HPA数据库获得SPP1基因编码的蛋白... 目的探讨miR-181b-5p与分泌型磷蛋白1(SPP1)的关系及SPP1在肝细胞癌中的表达、临床意义、作用机制。方法首先从Ualcan数据库中筛选出在肝细胞癌中过表达的前25个基因,选取SPP1基因作为研究对象。另检索HPA数据库获得SPP1基因编码的蛋白在肝细胞癌与正常肝脏组织中的表达量,免疫荧光结果明确其在肝细胞癌细胞中的定位。通过KaplanMeier plotter数据库分析SPP1表达量与肝细胞癌患者生存及预后的关系。并检索ENCORI数据库中获取靶向调控SPP1基因的miRNAs,筛选出证据最充分的miR-181b-5p作为研究对象。检索Uclcan数据库,获取miR-181b-5p在肝细胞癌中的表达情况。同时在Kaplan-Meier plotter数据库中明确hsa-miR-181b过表达肝细胞癌患者生存及预后的关系。利用GeneMANIA数据库获得SPP1的基因互作图,并筛选出共表达基因。通过Metascape数据库进行功能富集分析预测SPP1在肝细胞癌细胞中的主要功能。最后从CTD数据库中检索能够影响肝细胞癌与SPP1的化学物质。结果Ualcan数据库中筛选出在肝细胞癌中差异过表达的前25个基因,分别为GPC3、LCN2、SPP1、UBE2C、PTTG1、SFN、MDK、UBE2T、CCNB1、AKR1B1O、NDUFA4L2、NT5DC2、PLVAP、G6PD、PDZK1IP1、CENPW、SPARCL1、SPINK1、UBD、THY1、PTP4A3、TK1、TACC3、GMNN、STMN1;与正常肝脏组织比较,SPP1在肝细胞癌组织及泛癌组织中高表达(P<0.05)。免疫组化分析显示,SPP1在肝细胞癌组织中高表达,在正常肝脏组织表达较少;免疫荧光分析显示,SPP1主要分布于肝细胞癌细胞的亚单位高尔基体中。肝细胞癌患者中hasmiR-181b-5p与SPP1呈正相关(r=0.171,P=9.85e-04);生存曲线图分析显示,SPP1高表达、miR-181b-5p高表达的肝细胞癌患者生存周期缩短(P<0.05)。功能富集分析显示,SPP1主要功能为影响细胞的进程、信号传导、发育进程、生物体之间相互作用的生物过程、病毒进程、细胞活动、定位、刺激反应� 展开更多

关键词 肝细胞癌 分泌型磷蛋白1 mir-181b-5p

下载PDF 职称材料