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再生障碍性贫血病因学的新探索:异常免疫诱导骨髓间充质干细胞的过度脂肪化(英文) 被引量:19
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作者 卢学春 杨波 +1 位作者 迟小华 于睿莉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期173-179,共7页
再生障碍性贫血(简称再障)是一种以血细胞减少为表现的疾病。骨髓脂肪过多且造血前体细胞减少是其显著骨髓病理学特征。本文解读和分析了与再障和脂肪细胞相关的论著和关键综述,旨在对骨髓脂肪细胞在再障发病中的作用进行初步探索。这... 再生障碍性贫血(简称再障)是一种以血细胞减少为表现的疾病。骨髓脂肪过多且造血前体细胞减少是其显著骨髓病理学特征。本文解读和分析了与再障和脂肪细胞相关的论著和关键综述,旨在对骨髓脂肪细胞在再障发病中的作用进行初步探索。这些文献提示,再障相关性毒素和毒性药物,一般也具有诱导骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化的作用。再障的免疫治疗反应时间要远远长于典型免疫相关性血细胞减少症,表明异常免疫的靶细胞不仅仅是造血干/祖细胞,骨髓间充质干细胞也可能也受累。免疫抑制剂和雄激素治疗再障有效,二者也具有抑制骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化的作用。脂肪细胞分泌的很多细胞因子均有抑制骨髓造血作用,包括肿瘤坏死因子(TNF-α),白细胞介素6(IL-6)和干扰素γ(IFN-γ)。动物模型也证实,骨髓过度脂肪化可抑制造血。另外,获得性再生障碍性贫血一般被视作一种免疫介导的疾病,包括免疫细胞和分子介导造血干/祖细胞破坏导致骨髓造血衰竭。综上,骨髓内间充质干细胞向脂肪细胞过度分化可能是再障发病的新的病理学机制之一。 展开更多
关键词 贫血 再生障碍性 间质干细胞 脂细胞
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人脐带间充质干细胞分化为胰岛β细胞的实验研究 被引量:15
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作者 马桂霞 何红燕 +4 位作者 罗敏洁 黄天华 肖升平 崔冰琳 马廉 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期618-620,共3页
目的探讨人脐带华尔通胶质来源的间充质干细胞(MSCs)分化为胰岛素分泌细胞的可能性。方法从足月剖宫产的新生儿脐带华尔通胶质中分离培养出MSCs,传至第5代用含尼克酰胺和β巯基乙醇的低糖达尔伯克必需基本培养基预诱导,以含尼克酰胺和... 目的探讨人脐带华尔通胶质来源的间充质干细胞(MSCs)分化为胰岛素分泌细胞的可能性。方法从足月剖宫产的新生儿脐带华尔通胶质中分离培养出MSCs,传至第5代用含尼克酰胺和β巯基乙醇的低糖达尔伯克必需基本培养基预诱导,以含尼克酰胺和β巯基乙醇的高糖达尔伯克必需培养基诱导其向胰岛素分泌细胞分化,应用免疫细胞化学法检测其胰岛素的表达,以双硫腙染色鉴定胰岛β细胞,并用放射免疫法检测诱导后细胞培养液中胰岛素水平,检测均以未诱导细胞作为实验对照。结果免疫细胞化学法检测结果显示,经尼克酰胺和β巯基乙醇联合诱导后的人脐带MSCs表达胰岛β细胞的标记胰岛素。双硫腙染色发现脐带华尔通胶质来源的MSCs经尼克酰胺和β巯基乙醇诱导后细胞内锌离子增加。通过胰岛素放射免疫法检测诱导前后细胞培养液中胰岛素水平,实验组和对照组分别为(6.63±1.80)U/L和(3.39±0.21)U/L,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论人脐带MSCs经尼克酰胺和β巯基乙醇联合诱导后可表达胰岛素β细胞的表面标记,增加细胞内锌离子水平,使之具备胰岛β细胞的特点,诱导后的细胞也可分泌胰岛素。用尼克酰胺和β巯基乙醇可诱导人脐带MSCs分化成为胰岛素分泌细胞,从而为1型糖尿病的细胞移植治疗提供新的细胞来源。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 胰岛 尼克酰胺
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组织工程化纳米羟基磷灰石/聚己内酯人工骨支架修复兔桡骨大段骨缺损的实验研究 被引量:16
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作者 金光辉 张馨雯 +4 位作者 孙晓飞 章云童 夏琰 杨国士 谢杨 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2015年第1期36-40,共5页
目的用选择性激光烧结(SLS)技术构建纳米羟基磷灰石(Nano-HA)/聚己内酯(PCL)人工骨支架,观察其微观结构,与转基因种子细胞相复合构建出组织工程化Nano-HA/PCL人工骨支架,观察其修复兔桡骨大段骨缺损的效果。方法配置Nano-HA质量... 目的用选择性激光烧结(SLS)技术构建纳米羟基磷灰石(Nano-HA)/聚己内酯(PCL)人工骨支架,观察其微观结构,与转基因种子细胞相复合构建出组织工程化Nano-HA/PCL人工骨支架,观察其修复兔桡骨大段骨缺损的效果。方法配置Nano-HA质量分数为15%的Nano-HA/PCL混合材料粉末,采用SLS技术制备出纯PCL与Nano-HA/PCL人工骨支架并用电子显微镜(SEM)观察Nano-HA/PCL人工骨支架的微观结构。64只新西兰兔制作骨缺损动物模型后随机分为4组,每组16只。以携带h BMP-7目的基因的兔骨髓间充质干细胞(MSC)作为本研究的种子细胞。复合材料组骨缺损处植入Nano-HA/PCL人工骨支架+种子细胞,单纯材料组骨缺损处植入Nano-HA/PCL人工骨支架,对照组骨缺损处植入纯PCL人工骨支架,空白组骨缺损处不植入任何材料。对4组进行术后大体观察,分别于术后第2、4、8、12周各组中随机选取4只兔,经Micro-CT扫描,Micro-view软件进行骨缺损植入区域的三维重建,观察骨缺损修复情况。将各组第12周骨缺损样本石蜡切片用苏木精-伊红染色与Masson染色后,普通倒置显微镜下观察。结果电子显微镜下观察Nano-HA/PCL人工骨支架的骨架具有相互连通的孔隙结构,同时在PCL颗粒表面均匀黏附着NanoHA颗粒粉末。复合材料组术和单纯材料组术后第7天、对照组术后第14天均能用前肢站立;术后第28天,复合材料组右前肢主动活动范围基本正常,单纯材料组右前肢可自主活动但活动受限,对照组右前肢自主活动明显受限,空白组仍不能用前肢站立。术后1~14 d,各组缺损区域均无感染现象,缺损伤口均为甲级愈合。使用Micro-view软件对4组Micro-CT扫描结果进行三维重建,术后第12周时观察到空白组骨缺损两端仍没有完全连接。对照组骨断端已完全连接,但骨髓腔未通,单纯材料组骨缺损区域新骨结构完整、连续,缺损几乎完全修复,骨髓� 展开更多
关键词 创伤和损伤 组织工程 间质干细胞 羟基磷灰石类 材料试验
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TGF-β/BMPs、Wnt和MAPK信号通路在间充质干细胞向成骨细胞分化中的作用 被引量:14
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作者 万晓晨 刘翠平 +1 位作者 陈海啸 李继承 《细胞生物学杂志》 CSCD 2008年第6期697-700,共4页
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种多潜能成体干细胞,具有向成骨细胞分化的能力。在MSCs向成骨细胞分化中,受到多种信号通路调控,其中TGF-β/BMPs、Wnt、MAPK信号通路发挥了重要作用。而且,通过对Smad1蛋白酶体的调节,Wn... 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种多潜能成体干细胞,具有向成骨细胞分化的能力。在MSCs向成骨细胞分化中,受到多种信号通路调控,其中TGF-β/BMPs、Wnt、MAPK信号通路发挥了重要作用。而且,通过对Smad1蛋白酶体的调节,Wnt和MAPK信号可以对TGF-β/BMPs通路进行调控。在相关信号通路的共同作用下,MSCs向成骨细胞分化。现对MSCs分化过程中TGF-β/BMPs、Wnt、MAPK这三条通路进行了简要综述。 展开更多
关键词 间充质干细胞 成骨细胞分化 TGF-β/BMPs信号通路 WNT信号通路 MAPK信号 通路
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人脐血间充质干细胞的体外培养及生物学特性 被引量:10
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作者 金玮 杨安怀 邢怡桥 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2007年第4期488-491,共4页
目的:建立一种体外纯化增殖人脐血源性间充质干细胞(MSCs)的实验方法,并观察其生物学特性。方法:从正常分娩的足月胎儿脐血中分离出MSCs进行原代培养,培养瓶预先用自体血浆包被处理。72-96 h半量更换培养液,弃去未贴壁细胞,以后每3-5 d... 目的:建立一种体外纯化增殖人脐血源性间充质干细胞(MSCs)的实验方法,并观察其生物学特性。方法:从正常分娩的足月胎儿脐血中分离出MSCs进行原代培养,培养瓶预先用自体血浆包被处理。72-96 h半量更换培养液,弃去未贴壁细胞,以后每3-5 d半量换液1次。待细胞达到80%-90%融合时,按1∶2的比例进行传代。倒置或相差显微镜下每日观察原代和传代细胞的生长情况及形态学特征。取第3代脐血MSCs用流式细胞仪检测细胞周期和细胞表面抗原CD29、CD34、CD44、CD45的表达。结果:脐血经分离、培养5-7 d后有间充质样细胞贴壁,3-4周后,细胞生长达80%-90%融合,形态学类似骨髓源性MSCs。连续传至5代以后,增殖能力未见明显减弱。脐血MSCs的大部分细胞(>90%)处于G0/G1期,且均一稳定地表达间充质干细胞表面抗原CD29、CD44,但不表达CD34、CD45。结论:脐带血内含有MSCs,并可在体外纯化增殖,该技术可为实验研究和临床应用提供足够的干细胞来源。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐血 细胞培养 生物学特性
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翼状胬肉纤维组织起源于间充质干细胞的证据 被引量:11
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作者 李永平 朱哲 +2 位作者 张文忻 刘琳 梁丹 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期127-130,136,共5页
【目的】研究翼状胬肉组织病理学特征,探讨多能干细胞在翼状胬肉发生过程中的作用。【方法】对218例手术切除翼状胬肉标本,进行形态学、免疫组织化学和免疫荧光共聚焦显微镜观察其形态学变化及CD34、波形纤维蛋白(VIM)、平滑肌肌动蛋白(... 【目的】研究翼状胬肉组织病理学特征,探讨多能干细胞在翼状胬肉发生过程中的作用。【方法】对218例手术切除翼状胬肉标本,进行形态学、免疫组织化学和免疫荧光共聚焦显微镜观察其形态学变化及CD34、波形纤维蛋白(VIM)、平滑肌肌动蛋白(SMA),S-100在翼状胬肉中的表达。【结果】纤维组织增生及新生血管形成为翼状胬肉的主要病理改变。增生的纤维组织不同区域变化不一,主要呈现两类变化:一为排列致密,类似巩膜纤维组织;另外就是疏松区:仅见一些梭形、多角形、星状具有一些突起的纤维母细胞样的细胞,疏松排列,之间无明显的胶原纤维存在。免疫组织化学和免疫荧光显示一些增生活跃的纤维母细胞明显表达CD34,成熟的纤维组织内的纤维细胞CD34则为阴性。此外,218例中56例显示了平滑肌的存在,44例有脂肪组织。【结论】翼状胬肉组织中的纤维组织源自于间充质干细胞,并可向平滑肌及脂肪组织分化。 展开更多
关键词 翼状胬肉 病理学 间充质干细胞 纤维组织 细胞起源
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淫羊藿水提取物对大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化的影响及其机制 被引量:10
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作者 杨丽 朱晓峰 +2 位作者 王攀攀 黄丰 张荣华 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第22期3182-3187,共6页
目的观察淫羊藿水提取物对SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向分化能力及转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)表达的影响,阐释其防治骨质疏松症的作用机制。方法全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠MSCs;以碱性磷酸酶(ALP)活性及AL... 目的观察淫羊藿水提取物对SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向分化能力及转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)表达的影响,阐释其防治骨质疏松症的作用机制。方法全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠MSCs;以碱性磷酸酶(ALP)活性及ALP染色阳性率确定淫羊藿水提取物促MSCs骨向分化的最佳质量浓度,并以该质量浓度进行MSCs骨向分化实验。按是否添加经典成骨诱导液将大鼠分为对照组、成骨诱导剂组、淫羊藿水提取物(500μg/mL)组、淫羊藿水提取物(500μg/mL)+成骨诱导剂组,每3~4 d各组更换含相应物质培养液1次,连续干预14 d。通过检测各组ALP、I型胶原(Col I)、骨钙素(BGP)和钙化结节等骨向分化指标的变化,以评价淫羊藿水提取物对MSCs骨向分化能力的影响;通过检测TGF-β1、BMP-2的表达,研究淫羊藿水提取物促MSCs骨向分化的作用机制。结果淫羊藿水提取物最佳促MSCs骨向分化的质量浓度为500μg/mL;成骨诱导剂组、淫羊藿水提取物组及淫羊藿水提取物+成骨诱导剂组均能促进MSCs骨向分化及上调TGF-β1和BMP-2的表达。结论淫羊藿促进MSCs骨向分化,上调TGF-β1、BMP-2的表达可能是其作用机制之一。 展开更多
关键词 淫羊藿水提取物 骨髓间充质干细胞 骨向分化 转化生长因子Β1 骨形态发生蛋白2
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脐血间充质干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床疗效观察 被引量:9
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作者 公建庄 杜晨旭 +2 位作者 陈雅宁 韩双印 张延瑞 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期2392-2395,共4页
目的探讨脐血间充质干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床疗效。方法选择2009年8月—2011年2月在郑州大学附属郑州市中心医院就诊的失代偿期肝硬化患者46例,采用随机数字表法分为治疗组24例,对照组22例。对照组患者给予常规治疗,治疗组... 目的探讨脐血间充质干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床疗效。方法选择2009年8月—2011年2月在郑州大学附属郑州市中心医院就诊的失代偿期肝硬化患者46例,采用随机数字表法分为治疗组24例,对照组22例。对照组患者给予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用脐血间充质干细胞移植治疗。观察两组患者治疗前,治疗1、2、4、8、12周时血浆清蛋白、前清蛋白、总胆红素水平变化及不良反应发生情况,并于治疗前、治疗12周时对治疗组患者进行SF-36量表(中文版)评分。结果两组患者治疗前,治疗1、2周时血浆清蛋白、前清蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗组治疗4、8、12周时血浆清蛋白、前清蛋白水平高于对照组(P<0.05);两组患者治疗前,治疗2、4、8、12周时总胆红素水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗组治疗1周时总胆红素水平高于对照组(P<0.05)。治疗组患者治疗后躯体功能、肢体疼痛、总的健康状况、活力、社会功能、心理健康领域评分均高于治疗前(P<0.05),且均有临床和统计学意义;而躯体角色、情绪角色评分治疗前后比较,差异均无统计学意义(P>0.05),亦无临床和社会意义。两组患者均未出现皮疹、恶心、出血、感染等不良反应。结论脐血间充质干细胞移植治疗失代偿期肝硬化安全有效,能有效改善患者肝功能和生活质量,延缓其病程进展。 展开更多
关键词 脐血干细胞移植 间质干细胞 肝硬化 治疗结果
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骨生物衍生材料复合人骨髓间充质干细胞异位成骨的实验研究 被引量:7
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作者 康非吾 唐休发 +2 位作者 温玉明 吴正华 黄欣 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期357-361,共5页
目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)复合骨生物衍生材料异位成骨的可行性和成骨能力。方法将人骨生物衍生材料脱蛋白骨和脱钙骨在体外与人骨髓MSCs复合培养后,植入裸鼠背部左侧皮下。右侧皮下植入单纯生物衍生材料作为对照。于术后2,4,10... 目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)复合骨生物衍生材料异位成骨的可行性和成骨能力。方法将人骨生物衍生材料脱蛋白骨和脱钙骨在体外与人骨髓MSCs复合培养后,植入裸鼠背部左侧皮下。右侧皮下植入单纯生物衍生材料作为对照。于术后2,4,10周各时间点处死动物行大体标本、组织学观察,碱性磷酸酶(ALP)活性检测,比较其成骨能力。结果两种材料脱蛋白骨和脱钙骨均有异位成骨能力,随着植入时间的延长,新骨形成量逐渐增多,表现为软骨化成骨;对照组无成骨现象。ALP活性检测结果显示实验组随着时间的延长,ALP活性显著升高(P<0.05),而在相同各时间点比较,脱蛋白骨的ALP活性明显高于脱钙骨(P<0.05)。结论人骨生物衍生材料脱蛋白骨及脱钙骨和人骨髓MSCs可作为理想的支架材料和种子细胞应用于骨组织工程;且作为支架材料脱蛋白骨优于脱钙骨。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 骨生物衍生材料 骨组织工程
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脐带间质干细胞移植对MRL/lpr狼疮鼠间质性肺炎的影响 被引量:9
10
作者 顾志峰 金鸥阳 +4 位作者 徐婷 马晓蕾 赵盛楠 曹晓蕾 孙凌云 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期33-36,共4页
目的探讨脐带间质干细胞(UC-MSCs)对MRL/Ipr狼疮鼠间质性肺炎的治疗作用。方法体外分离培养UC-MSCs,将24只18周龄雌性MRL/lpr小鼠采用随机数字表法分为1次治疗组、3次治疗组和对照组,1次治疗组和3次治疗组于第18周给予1×10^6... 目的探讨脐带间质干细胞(UC-MSCs)对MRL/Ipr狼疮鼠间质性肺炎的治疗作用。方法体外分离培养UC-MSCs,将24只18周龄雌性MRL/lpr小鼠采用随机数字表法分为1次治疗组、3次治疗组和对照组,1次治疗组和3次治疗组于第18周给予1×10^6第3代UC-MSCs尾静脉注射,3次治疗组在第19、20周时再分别重复1次;对照组给予0.5ml生理盐水尾静脉注射。在第29周时处死小鼠,用HE染色观察各组小鼠的肺病理变化。结果UC-MSCs移植能显著减轻MRL/lpr狼疮鼠的间质性肺炎。1次治疗组和3次治疗组的肺气管损害指数分别为1.40±0.24和1.02±0.29,明显低于对照组的1.95±0.35,差异有统计学意义(q值分别为0.551和0.937,均P〈0.01);1次治疗组和3次治疗组的血管损害指数分别为1.20±0.18和1.08±0.16,明显低于对照组的1.56±0.32,差异有统计学意义(q值分别为0.360和0.479,P〈0.05和P〈0.01);1次治疗组和3次治疗组的肺间质中炎症细胞浸润程度分别为1.30±0.21和1.05±0.15,明显低于对照组的1.72±0.34,差异有统计学意义(q值分别为0.417和0.673,P〈0.05和P〈0.01)。结论UC-MSCs移植对MRL/lpr狼疮鼠的间质性肺炎具有治疗作用。 展开更多
关键词 间质干细胞 肺疾病 间质性 红斑狼疮 系统性
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The Three-Dimensional Collagen Scaffold Improves the Sternness of Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells 被引量:6
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作者 Sufang Han Yannan Zhao +4 位作者 Zhifeng Xiao Jin Han Bing Chen Lei Chen Jianwu Dai 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2012年第12期633-641,共9页
Mesenchymal stem cells (MSCs) show the great promise for the treatment of a variety of diseases because of their self-renewal and multipotential abilities. MSCs are generally cultured on two-dimensional (2D) subst... Mesenchymal stem cells (MSCs) show the great promise for the treatment of a variety of diseases because of their self-renewal and multipotential abilities. MSCs are generally cultured on two-dimensional (2D) substrate in vitro. There are indications that they may simultaneously lose their sternness and multipotentiality as the result of prolonged 2D culture. In this study, we used three-dimensional (3D) collagen scaffolds as rat MSCs cartier and compared the properties of MSCs on 3D collagen scaffolds with monolayer cultured MSCs. The results demonstrated that collagen scaffolds were suitable for rat MSCs adherence and proliferation. More importantly, compared to MSCs under 2D culture, 3D MSCs significantly maintained higher expression levels of stemness genes (Oct4, Sox2, Rex-1 and Nanog), yielded high frequencies of colony-forming units-fibroblastic (CFU-F) and showed enhanced osteogenic and adipogenic differentiation efficiency upon induction. Thus, 3D collagen scaffolds may be beneficial for expanding rat MSCs while maintaining the stem cell properties in vitro. 展开更多
关键词 Three-dimensional culture mesenchymal stem ceils Collagen scaffold stemNESS
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肺爆震伤研究进展 被引量:7
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作者 彭凌华 郭光华 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期156-159,共4页
现代局部战争和恐怖爆炸袭击事件中爆炸性武器(炸药、核弹、燃料空气炸弹等)的使用不断增加,日常突发事件如锅炉、燃用液化石油气及煤层气等爆炸也时常发生。这些爆炸产生强大的冲击波超压,对机体造成的损伤称为原发冲击伤或爆震伤。
关键词 爆震伤 高频通气 间质干细胞
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人羊膜间充质干细胞的生物学特性鉴定 被引量:7
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作者 朴正福 张海燕 +6 位作者 丁淑芹 小林护 佐佐木幸司 菊池爱子 加茂功 樱川宣男 李宁 《国际生物医学工程杂志》 CAS 北大核心 2010年第3期157-162,I0004,共7页
目的分离提纯的人羊膜间充质干细胞的生物学特性鉴定。方法剥去38~40周孕妇剖腹产术后羊膜,用消化酶消化后制备人羊膜间充质细胞(hAMCs)悬浮液。利用流式细胞分选技术从hAMCs中分离提纯干细胞(hAMC-SP细胞),并对于细胞抗原进行... 目的分离提纯的人羊膜间充质干细胞的生物学特性鉴定。方法剥去38~40周孕妇剖腹产术后羊膜,用消化酶消化后制备人羊膜间充质细胞(hAMCs)悬浮液。利用流式细胞分选技术从hAMCs中分离提纯干细胞(hAMC-SP细胞),并对于细胞抗原进行鉴定。结果从hAMCs中分离的hAMC-SP细胞,约占AMCs总数的0.3%。传代培养4~10代后的hAMC-SP细胞表达Nestin、Vimentin、整合素家属成员(CD49b、CD49c、CD49d、CD49e)、CD9、CD13、CD19、CD29、CD44、CD46、CD51、CD59、CD166及干细胞相关的Oct-3/4抗原。HLA-ABC、TRA-1-81及SSEA-4为弱表达;相反CD34、CD45、CD117、CD56、CD90、CD105、CD106、CD133、Fit-1、Musashi 1及HLA-DR无阳性结果,同样TRA-1-60及SSEA-3也表达阴性。体外转化实验表示hAMC-SP细胞在琼脂糖培养基上不形成细胞集落,但阳性对照组的HepG2形成多数细胞集落。结论hAMC-SP细胞表面标记符合骨髓及脂肪间充质等来源的干细胞特点;hAMC-SP细胞迅速而稳定扩增,无致瘤性。由于来源充足,hAMC-SP细胞在消除HLA-ABC阳性细胞亚群下,同种异体移植在内的广泛的再生医学领域中能成为理想的细胞来源。 展开更多
关键词 羊膜间充质细胞 羊膜干细胞 表面标记 再生医学
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人骨髓基质细胞的培养及鉴定 被引量:6
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作者 闫冬梅 徐开林 +2 位作者 杜冰 鹿群先 曾令宇 《临床血液学杂志》 CAS 2009年第2期144-146,共3页
目的:探讨骨髓基质细胞的分离、体外培养方法,为基因治疗提供载体细胞。方法:采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离人骨髓进行体外培养扩增,用倒置显微镜观察细胞形态学特征并用流式细胞仪鉴定其CD90表达。结果:分离培养的骨髓基质细... 目的:探讨骨髓基质细胞的分离、体外培养方法,为基因治疗提供载体细胞。方法:采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离人骨髓进行体外培养扩增,用倒置显微镜观察细胞形态学特征并用流式细胞仪鉴定其CD90表达。结果:分离培养的骨髓基质细胞似成纤维状,原代细胞呈集落生长,并可表达CD90,传代后细胞形态较一致,且随着传代次数的增加CD90表达越高,第3代可达94.31%。结论:骨髓基质细胞可通过体外培养纯化获得,随着传代次数增加,纯度越高,该方法是一种较理想的骨髓基质细胞培养方法。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 骨髓 细胞培养 流式细胞仪
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微重力效应对骨髓间充质干细胞增殖分化影响的研究进展 被引量:6
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作者 毛新建 宋关斌 +1 位作者 罗庆 张晨 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期121-126,共6页
力学刺激对细胞的生长和功能起着重要调节作用。随着空间生命科学与空间生物技术的迅速发展,空间条件下细胞的生物学行为特征、规律及其相关分子机理逐渐成为空间生物学研究的热点和前沿。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal ste... 力学刺激对细胞的生长和功能起着重要调节作用。随着空间生命科学与空间生物技术的迅速发展,空间条件下细胞的生物学行为特征、规律及其相关分子机理逐渐成为空间生物学研究的热点和前沿。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)是一种具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞,在组织修复中起重要作用,是临床细胞治疗的主要材料。近年来,人们利用空间模拟技术在细胞响应微重力环境的生物学特征研究方面取得了重要进展。本文介绍了目前常用的几种地基微重力效应模拟装置,结合相关研究成果对微重力作用下MSCs增殖、分化行为的改变及其相关的分子机理进行简要综述,为预防和治疗微重力相关疾病提供理论参考。 展开更多
关键词 微重力 间充质干细胞 细胞增殖 细胞分化 空间生物力学
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骨髓间质干细胞下调免疫反应的实验研究 被引量:3
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作者 毛飞 许文荣 +5 位作者 许化溪 朱伟 韩崇旭 胡嘉波 孙晓春 钱晖 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期629-632,635,共5页
目的:研究骨髓间质干细胞(M esenchym al stem cells,MSCs)下调免疫反应的作用及其机制。方法:采用流式细胞分析(FCM)鉴定MSCs的纯度,用3H-TdR掺入法测定MSCs对ConA刺激的淋巴细胞增殖的影响,利用RT-PCR和Real-tim e PCR检测TGF-β1、I... 目的:研究骨髓间质干细胞(M esenchym al stem cells,MSCs)下调免疫反应的作用及其机制。方法:采用流式细胞分析(FCM)鉴定MSCs的纯度,用3H-TdR掺入法测定MSCs对ConA刺激的淋巴细胞增殖的影响,利用RT-PCR和Real-tim e PCR检测TGF-β1、IL-8、IL-10的基因表达,同时进行皮肤移植模型研究。结果:MSCs对ConA刺激的淋巴细胞增殖的影响与MSCs和淋巴细胞的比值有关。RT-PCR结果显示MSCs对淋巴细胞分泌TGF-β1无显著性影响,而Real-tim e PCR的结果显示MSCs促进淋巴细胞分泌IL-10,减少淋巴细胞分泌IL-8。皮肤移植实验显示MSCs能延长异种移植皮肤的存活时间。结论:MSCs能下调免疫反应和抑制皮肤移植排斥反应,其可能的机制是通过促进淋巴细胞分泌IL-10以及减少淋巴细胞分泌IL-8来发挥作用。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 免疫调节 淋巴细胞
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骨密质碎片法分离培养小鼠间充质干细胞及其生物学特性鉴定 被引量:6
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作者 乔淑凯 任汉云 石永进 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期74-79,共6页
目的:建立一种从小鼠骨密质中分离培养间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)的高效方法,并证实骨密质来源MSCs具有成骨、成脂肪和成软骨的多向分化能力。方法:采取骨片法从C57BL/6小鼠骨密质中分离和纯化MSCs,荧光倒置显微镜下直... 目的:建立一种从小鼠骨密质中分离培养间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)的高效方法,并证实骨密质来源MSCs具有成骨、成脂肪和成软骨的多向分化能力。方法:采取骨片法从C57BL/6小鼠骨密质中分离和纯化MSCs,荧光倒置显微镜下直接观察不同生长时期MSCs形态学特征;流式细胞术(Flow cytometry,FCM)对其进行免疫表型鉴定;取第5代MSCs进行成骨、成脂肪和成软骨定向诱导并作组织化学染色鉴定,RT-PCR方法检测定向诱导后特异性基因表达:骨特异性的骨钙素(Osteocalcin,OCN)和骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)基因,脂肪特异性的脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LP)和脂肪酶(Adipsin)基因,软骨特异性的Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)和蛋白聚糖(Aggrecan)基因。结果:接种骨密质碎片约24小时后即可见短梭状细胞从骨碎片向周围爬出,呈贴壁生长,经3次传代后即可获得细胞形态均一、贴壁能力强、易于消化的梭形MSCs。第5代C57BL/6小鼠MSCs阳性表达CD44(99.81%)、CD29(99.77%)、Sca-1(99.76%)和CD34(94.51%),阴性表达CD45(0.86%)和CD117(0.17%)。第5代MSCs经诱导后可成功的分化为骨、脂肪和软骨细胞,相应茜素红、油红O和阿利辛蓝染色成阳性,并分别表达骨特异性骨钙素(Osteocalcin,OCN)和骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)基因,脂肪特异性脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LP)和脂肪酶(Adipsin)基因,软骨特异性Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)和蛋白聚糖(Aggrecan)基因。结论:经骨密质碎片法培养可以在较短时间内分离出更高纯度的MSCs,该方法操作简单、经济,稳定性好,分离效率高,可重复性强。培养出的MSCs符合公认的标准(具有塑料粘附、特定的免疫表型和多向分化潜能)。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨密质 细胞培养 鉴定 多向分化
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VEGF基因真核表达载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达 被引量:5
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作者 张从纪 杨彦春 单佑安 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期4-6,共3页
目的探讨经腺病毒表达载体转染血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)165基因的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSCs)体内外基因表达的特点。方法构建VEGF基因腺病毒表达载体,将VEGF165基因转染到MSC... 目的探讨经腺病毒表达载体转染血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)165基因的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSCs)体内外基因表达的特点。方法构建VEGF基因腺病毒表达载体,将VEGF165基因转染到MSCs中。用RT-PCR法检测转基因MSCs中基因表达情况。结果转基因MSCs及其分化的子代细胞均有VEGF165的表达,并持续2周左右时间。结论经腺病毒表达载体转染VEGF165基因的MSCs在体内外均有良好的基因表达。 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子 骨髓间充质干细胞 基因转移
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人脐带间充质干细胞在肝部分切除模型大鼠体内向肝样细胞的分化 被引量:5
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作者 陈政 劳学军 高明 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期615-619,共5页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)移植到肝部分切除模型大鼠体内能否存活并分化为肝样细胞。方法:用胶原酶消化法从人的脐带分离出MSCs,培养并检测人脐带来源的MSCs的细胞表面标志。取第5代人脐带MSCs用PKH26标记,制作大鼠肝部分切除... 目的:探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)移植到肝部分切除模型大鼠体内能否存活并分化为肝样细胞。方法:用胶原酶消化法从人的脐带分离出MSCs,培养并检测人脐带来源的MSCs的细胞表面标志。取第5代人脐带MSCs用PKH26标记,制作大鼠肝部分切除模型,将标记的细胞经门静脉植入大鼠体内,观察移植后第1、2、3周细胞能否存活,以及移植细胞能否向肝样细胞分化,表达肝细胞的标记物白蛋白。结果:人脐带MSCs能在体外大量扩增,移植到肝部分切除模型大鼠肝脏后细胞能存活,并表达肝细胞标记物白蛋白,PKH26标记后细胞在荧光显微镜下发红色荧光,荧光显微镜下可见肝脏冰冻切片中散在分布的标记细胞,免疫荧光染色大多数标记细胞白蛋白染色阳性,并发绿色荧光。结论:人脐带间充质干细胞移植至大鼠体内能够存活并分化为肝样细胞,人脐带间充质干细胞可能作为肝细胞移植的重要来源。 展开更多
关键词 间充质干细胞 肝细胞 干细胞移植 体内 分化
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间充质干细胞的生物学特性及临床应用(英文) 被引量:4
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作者 殷海斌 田新 +1 位作者 杨春会 高晓慧 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第14期2282-2289,共8页
背景:间充质干细胞的临床应用是干细胞移植研究的热点,但其安全性和有效性仍存在争议。目的:回顾总结近年来对于间充质干细胞的生物学特性及临床应用前景的研究。方法:计算机检索Pubmed(1990年1月至2013年11月)和中国知网数据库(2011年... 背景:间充质干细胞的临床应用是干细胞移植研究的热点,但其安全性和有效性仍存在争议。目的:回顾总结近年来对于间充质干细胞的生物学特性及临床应用前景的研究。方法:计算机检索Pubmed(1990年1月至2013年11月)和中国知网数据库(2011年至2013年),检索关键词为"间充质干细胞;分离培养;表面抗体;诱导分化;临床应用"。结果与结论:间充质干细胞可表达多种表面抗原,但没有特异性,同时其具有自我更新和向骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、骨骼肌细胞和神经细胞等的多向分化能力。由于其多向分化潜力,且能分泌多种细胞因子,还具有免疫调节能力,已成为再生医学、血液学和免疫学方面细胞疗法的候选细胞。间充质干细胞临床试验已处于第三期,尽管数据还不多,已发现存在利于肿瘤生长和转移、增加侵袭性真菌感染等方面问题。即使如此,其在血液系统恶性肿瘤等疾病面方面仍存在良好的应用前景。所以,找出间充质干细胞在体内的作用原理及修复其产生的不良影响是目前干细胞移植研究的重点。 展开更多
关键词 间充质干细胞 临床应用 生物学特性 血液系统恶性肿瘤 侵袭性真菌感染 干细胞移植 计算机检索 免疫调节能力
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