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转玉米C_4型pepc水稻成熟胚为外植体的水稻悬浮细胞系的优化 被引量：4
1
作者 王满 李霞 +3 位作者 石牡丹 钱宝云 魏晓东 方先文 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期644-654,共11页
为了研究外源玉米光合作用关键酶C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)基因在C3植物水稻中提高光合效率的分子机理,本研究以高表达玉米C4型pepc水稻(PC)和未转基因野生型Kitaake(WT)为材料,探索高效且稳... 为了研究外源玉米光合作用关键酶C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)基因在C3植物水稻中提高光合效率的分子机理,本研究以高表达玉米C4型pepc水稻(PC)和未转基因野生型Kitaake(WT)为材料,探索高效且稳定水稻悬浮细胞系建立的方法。结果表明:PC成熟胚愈伤组织的诱导培养基中添加2mg/L2,4-D和1mg/L6-BA,可出诱导出高频的愈伤组织;再通过3次继代培养(2～0.5mg/L2,4-D,2～0.2mg/L6-BA,1mg/LABA),逐步降低2,4-D和6-BA的浓度,可获得了疏松、颗粒状且分散的愈伤组织块;然后转接到水稻悬浮细胞液体培养基中(0.5mg/L2,4-D,0.2mg/L6-BA和1mg/LABA),在28℃下培养,新原液的比例为3:1,经42d,可建立稳定且高效的供试水稻悬浮细胞系。 展开更多
关键词 水稻 转C4pepc基因水稻 成熟胚 悬浮培养 激素调优
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稻瘟病菌粗毒素对水稻成熟胚愈伤组织生长和分化的影响及抗性筛选 被引量：2
2
作者 高立宏 吕艳杰 汉丽萍 《长春师范学院学报（自然科学版）》 2008年第3期70-73,共4页
利用目前稻瘟病不同的优势小种菌株的液体培养提取的粗毒素对水稻成熟胚进行处理，粗毒素液对水稻愈伤组织的生长及分化有严重的抑制作用，与对照相比差异性极显著；不同浓度的粗毒素提取液其作用效果不同，随着毒素浓度的增大或是作用... 利用目前稻瘟病不同的优势小种菌株的液体培养提取的粗毒素对水稻成熟胚进行处理，粗毒素液对水稻愈伤组织的生长及分化有严重的抑制作用，与对照相比差异性极显著；不同浓度的粗毒素提取液其作用效果不同，随着毒素浓度的增大或是作用时间的延长，水稻分化受到的抑制作用越强。水稻成熟胚组织培养中进行抗稻瘟病菌突变体筛选的毒素浓度在25％～30％较好；愈伤组织浸泡12～24h可以得到分化出苗。在愈伤组织上直接加上毒素并长时间处理对愈伤组织的生长有很大的破坏作用，每个愈伤组织滴加的毒素应小于2．0ml。不同的水稻品种产生的耐性不同，可以筛选出抗稻瘟病的突变体。 展开更多
关键词 稻瘟病菌粗毒素 成熟胚愈伤组织 抗性筛选
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小麦成熟胚离体培养及植株再生技术优化 被引量：8
3
作者 张小红 赵雪晶 +2 位作者 李波 黎飞飞 闵东红 《草业学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期334-339,共6页
本实验利用冬小麦品种周麦27成熟胚进行了愈伤组织诱导和植株再生技术的优化,以提高小麦成熟胚离体再生频率,为以成熟胚进行遗传转化奠定基础。探讨了外植体不同接种方法、Dicamba浓度和细胞分裂素种类、转分化时间和愈伤组织干燥处理... 本实验利用冬小麦品种周麦27成熟胚进行了愈伤组织诱导和植株再生技术的优化,以提高小麦成熟胚离体再生频率,为以成熟胚进行遗传转化奠定基础。探讨了外植体不同接种方法、Dicamba浓度和细胞分裂素种类、转分化时间和愈伤组织干燥处理等因素对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,1)小麦成熟胚十字形切割法接种愈伤组织分化率较高,达到66.7%,分别是刮胚法和整胚接种的2.1和4.3倍;2)附加2,4-D和Dicam-ba均可以高频率诱导成熟胚愈伤组织的形成,但Dicamba诱导形成的愈伤组织分化率高于2,4-D的达4倍之多,在Dicamba浓度为2.0～4.0mg/L时愈伤组织诱导和分化效果较好;3)愈伤组织在附加2.0mg/L 6-BA的分化培养基上分化率最高为45.8%,其次为在不含激素或含KT 2.0mg/L时分化率分别达到38.5%和37.0%,而在附加TDZ和ZT时分化率较低;4)成熟胚外植体在诱导培养2～3周后进行分化培养,绿苗分化率最高;5)愈伤组织分化前干燥处理6h愈伤组织分化率略有提高,但与未干燥处理的相比差异不显著,而干燥12h后分化率却明显降低。 展开更多
关键词 小麦 成熟胚 愈伤组织诱导 植株分化
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影响小麦成熟胚再生频率因素的研究(简报)(英文) 被引量：3
4
作者 于洋 卫志明 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2007年第6期443-450,共8页
以小麦成熟胚为外植体,研究了基本培养基、预处理类型、接种方式、植物激素的浓度和不同组合以及分化培养基中是否添加抗生素对愈伤组织诱导和分化的影响,在此基础上建立了一套高效的小麦成熟胚植株再生系统。经过试验,我们选择在MS培... 以小麦成熟胚为外植体,研究了基本培养基、预处理类型、接种方式、植物激素的浓度和不同组合以及分化培养基中是否添加抗生素对愈伤组织诱导和分化的影响,在此基础上建立了一套高效的小麦成熟胚植株再生系统。经过试验,我们选择在MS培养基上接种经无菌水预处理的纵切成熟胚作为起始的试验条件。在含2mg/L 2,4-D的MS培养基上,初级愈伤组织的诱导频率可达80%以上,在继代培养基中添加0.5mg/L 6-BA和0.2mg/L NAA可以显著提高胚性愈伤组织的产生。而在再生培养基中加入适当浓度的头孢霉素可以有效提高胚性愈伤组织再生出小植株的比例。利用该再生系统,我们从5个小麦优良主栽品种的成熟胚再生出了可育的植株,再生频率达15.3%-34.5%。 展开更多
关键词 小麦 成熟胚 愈伤组织 组织培养 植株再生
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一种改进的水稻成熟胚愈伤组织高效基因转化系统 被引量：29
5
作者 陈惠 赵原 种康 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2008年第3期322-331,共10页
以成熟胚愈伤组织为材料的农杆菌介导水稻转化法虽已建立,但转化频率仍有待提高。本文以粳稻(Oryzasativa)品种(中花10号和中花11号)的成熟胚诱导的愈伤组织为受体材料,对组织培养体系及影响遗传转化的因素进行优化,建立了一套改进的农... 以成熟胚愈伤组织为材料的农杆菌介导水稻转化法虽已建立,但转化频率仍有待提高。本文以粳稻(Oryzasativa)品种(中花10号和中花11号)的成熟胚诱导的愈伤组织为受体材料,对组织培养体系及影响遗传转化的因素进行优化,建立了一套改进的农杆菌介导的水稻高效遗传转化系统。农杆菌菌株为EHA105,质粒载体是pUN1301/OsRAA1,其中含有标记基因GUS和筛选基因HPT。愈伤组织诱导培养基为NBD2(NB+2mg·L^(-1)2,4-D),继代培养基为NBD0.5,预分化与分化培养基为RE1(MS+1mg·L^(-1)6-BA+0.25mg·L^(-1)NAA+0.5mg·L^(-1)KT+0.2mg·L^(-1)ZT)和RE2(MS+1mg·L^(-1)6-BA+0.5mg·L^(-1)NAA+0.5mg·L^(-1)KT+0.2mg·L^(-1)ZT)。另外,还分析了影响T-DNA转移的多种因素,如外植体种类、愈伤组织预培养基和愈伤组织继代次数等。采用优化的转化程序,水稻愈伤组织转化率和植株转化率可达70%以上。 展开更多
关键词 农杆菌介导的遗传转化 成熟胚诱导的愈伤组织 水稻
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