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一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法 被引量：13
1
作者 王旭初 范鹏祥 李银心 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期449-455,共7页
在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性;(3)在预酶解时不加CaCl_2,减少了酶的自切作用;... 在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性;(3)在预酶解时不加CaCl_2,减少了酶的自切作用;(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;(5)直接吸取酶解液进行质谱分析。系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果。 展开更多
关键词 蛋白质组 胶内酶解方法 双向电泳 肽质量指纹图谱 质谱分析
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淀粉液化芽孢杆菌BS5582产蛋白酶的酶谱分析与鉴定 被引量：2
2
作者 徐爱兰 朱林江 +2 位作者 李永仙 王金晶 李崎 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期142-145,150,共5页
本研究对淀粉液化芽孢杆菌BS5582分泌的蛋白酶进行快速分析与鉴定。测定菌株胞外蛋白酶酶活,结果显示蛋白酶在中性条件下活力最高,且在发酵过程中出现三个酶活高峰,表明菌株可能分泌多种蛋白酶。蛋白酶酶谱分析发现共有五条蛋白水解条... 本研究对淀粉液化芽孢杆菌BS5582分泌的蛋白酶进行快速分析与鉴定。测定菌株胞外蛋白酶酶活,结果显示蛋白酶在中性条件下活力最高,且在发酵过程中出现三个酶活高峰,表明菌株可能分泌多种蛋白酶。蛋白酶酶谱分析发现共有五条蛋白水解条带。通过质谱鉴定这些水解条带对应非变性-SDS-PAGE凝胶上的蛋白条带,表明该菌株可能产Bacillopeptidase F、胞外中性金属蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶Bpn'这三种蛋白酶,其中Bacillopeptidase F和胞外中性金属蛋白酶存在两种形式。结果显示酶谱分析法结合质谱鉴定能快速鉴定菌株BS5582分泌的胞外蛋白酶的多种复杂形式,是一种快速鉴定多种蛋白酶的有效方法。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 蛋白酶 酶谱分析 非变性-SDS—PAGE 质谱鉴定
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热激条件下拟南芥Athspr突变体叶片蛋白的表达分析
3
作者 胡喆 吴庆丰 +4 位作者 李萍 孙英莉 许声涛 王新宇 王崇英 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期361-370,共10页
以拟南芥野生型和突变体Athspr为材料,采用双向电泳技术对其在0h(对照)、2h及8h热激条件下的叶片全蛋白进行了分离。应用ImageMaster软件从以上蛋白电泳图谱中分别鉴定出1000多个蛋白点,发现其蛋白表达谱在野生型和突变体中存在明显差... 以拟南芥野生型和突变体Athspr为材料,采用双向电泳技术对其在0h(对照)、2h及8h热激条件下的叶片全蛋白进行了分离。应用ImageMaster软件从以上蛋白电泳图谱中分别鉴定出1000多个蛋白点,发现其蛋白表达谱在野生型和突变体中存在明显差异。同时选取在野生型和突变体中表达明显有差异的3个高丰度蛋白质点进行了质谱鉴定,并进一步通过GPS-MASCOT进行了数据库检索,鉴定出这三个蛋白质组分分别为富含甘氨酸的RNA结合蛋白7、细胞色素b6-f复合物铁硫亚单位及放氧增强蛋白1-2。以上3个蛋白均与植株在胁迫条件下的抗性有关。推测由于T-DNA的插入使得突变体中Athspr基因的功能受到了影响,进而影响了其下游其他基因的表达和上述3种蛋白的表达与功能,产生了突变体的耐热能力以及其他逆境条件下抗逆性下降的一系列表型改变。 展开更多
关键词 拟南芥 Athspr突变体 热激 双向电泳 质谱分析
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花椒精油的提取、抗菌活性研究及GC-MS分析 被引量：17
4
作者 宋蓉 贾晓娟 邵彦春 《中国农学通报》 CSCD 2014年第21期263-270,共8页
中国是花椒主产地。花椒的品种、生长环境以及提取方法的不同都会导致花椒精油化学组成与含量的差异。对产自山东德州的花椒采用索氏提取法提取花椒精油,分析精油抗菌活性,采用气相-质谱联用仪(GC-MS)分析精油化学成分。结果表明,不同... 中国是花椒主产地。花椒的品种、生长环境以及提取方法的不同都会导致花椒精油化学组成与含量的差异。对产自山东德州的花椒采用索氏提取法提取花椒精油,分析精油抗菌活性,采用气相-质谱联用仪(GC-MS)分析精油化学成分。结果表明,不同溶剂提取所得精油在颜色、气味、状态等方面差别明显,对微生物抑制程度也不同,其中,乙醚提取的精油抗菌活性最强,对7种受试菌均有明显抑制作用。GC-MS显示在匹配度大于80%时,乙醚和石油醚提取的精油分别鉴定出45和63种物质,酮类为主要组分,2种精油中都含有大量的未被报道过的1-(2-羟基-4,6-甲氧基苯基)乙酮。花椒精油作为花椒的重要功能成分,将会在食品呈香及抑菌防腐方面发挥重要的作用。 展开更多
关键词 花椒 精油 抗菌活性 气质分析
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常压下能量与电荷在分子间的传递机制 被引量：3
5
作者 陈焕文 张华 +2 位作者 王海东 黄科科 袁龙 《中国科学：化学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期789-794,共6页
离子源是质谱仪的心脏,制备待测物的离子是质谱分析的首要前提.如何有效地电离含有复杂基体的实际样品中的痕量待测物分子是制约实际样品直接质谱分析的重要瓶颈.本文提出了用电子云模型帮助理解能量与电荷传递和中性分子电离过程的关系... 离子源是质谱仪的心脏,制备待测物的离子是质谱分析的首要前提.如何有效地电离含有复杂基体的实际样品中的痕量待测物分子是制约实际样品直接质谱分析的重要瓶颈.本文提出了用电子云模型帮助理解能量与电荷传递和中性分子电离过程的关系,从分子的基本物性参数、能量耦合方式等角度讨论了能量与电荷在不同相态、组成和维度的复杂基体样品分子间传递的过程,着重阐述了能荷传递过程中分子的电子云变化规律及其对分子电离的影响,并简要讨论了这些影响在质谱分析中的应用. 展开更多
关键词 复杂基体样品 能荷传递 电子云 分子电离 直接质谱分析
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线粒体乙酰乙酰辅酶A硫解酶缺乏症一家系报告并文献复习 被引量：1
6
作者 胡宇慧 崔冬 +1 位作者 刘麟 陈淑丽 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期282-286,共5页
目的探讨线粒体乙酰乙酰辅酶A硫解酶缺乏症(简称T2缺乏症)的诊断及预后。方法回顾性分析一家系中3例T2缺乏症患儿的临床资料,并复习相关文献。结果例1和例2为先证者,男孩,同卵双胞胎,因发热、呕吐、气促入院,血气分析均显示严重的代谢... 目的探讨线粒体乙酰乙酰辅酶A硫解酶缺乏症(简称T2缺乏症)的诊断及预后。方法回顾性分析一家系中3例T2缺乏症患儿的临床资料,并复习相关文献。结果例1和例2为先证者,男孩,同卵双胞胎,因发热、呕吐、气促入院,血气分析均显示严重的代谢性酸中毒,尿气相色谱质谱均显示3-羟基丁酸、2-甲基-3-羟基丁酸、甲基巴豆酰甘氨酸-1、3-甲基巴豆酰甘氨酸-1明显增高,二羧酸轻微升高;血串联质谱仪分析结果均显示,C5∶1、C5-OH、C4-OH升高。例3,为例1和例2同胞姐姐,5月龄时因严重代谢性酸中毒住院治疗。3例患儿行ACAT1基因检测均为复合杂合突变,c.622 C>T(p R208X)和c.653 C>T(p S218F)。结论对于以酸中毒为突出表现的患儿,需警惕T2缺乏症,及时行尿气相色谱质谱和血串联质谱分析,以早期诊断和治疗。 展开更多
关键词 线粒体乙酰乙酰辅酶A硫解酶缺乏症 ACAT1基因 尿气相色谱质谱分析 血串联质谱分析
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