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Advances in chloroplast engineering 被引量:6
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作者 Huan-Huan Wang Wei-Bo Yin Zan-Min Hu 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2009年第7期387-398,共12页
The chloroplast is a pivotal organelle in plant cells and eukaryotic algae to carry out photosynthesis, which provides the primary source of the world's food. The expression of foreign genes in chloroplasts offers se... The chloroplast is a pivotal organelle in plant cells and eukaryotic algae to carry out photosynthesis, which provides the primary source of the world's food. The expression of foreign genes in chloroplasts offers several advantages over their expression in the nucleus: high-level expression, transgene stacking in operons and a lack of epigenetic interference allowing stable transgene expression. In addition, transgenic chloroplasts are generally not transmitted through pollen grains because of the cytoplasmic localization. In the past two decades, great progress in chloroplast engineering has been made. In this paper, we review and highlight recent studies of chloroplast engineering, including chloroplast transformation procedures, controlled expression of plastid transgenes in plants, the expression of foreign genes for improvement of plant traits, the production of biopharmaceuticals, metabolic pathway engineering in plants, plastid transformation to study RNA editing, and marker gene excision system. 展开更多
关键词 chloroplast (plastid) transformation homologous recombination protein expression marker excision
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突破复杂性状多基因转化技术壁垒,首创胚乳花青素高积累的水稻新种质 被引量:6
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作者 朱丽 钱前 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期539-542,共4页
随着转基因技术的日趋成熟,利用生物工程手段加快改良作物农艺性状,已经越来越显示出其巨大的应用潜力。在改良多基因调控的复杂农艺性状方面,单基因转化收效甚微,而长期以来多基因转化不仅受限于技术因素,而且在协调表达调控、代谢及... 随着转基因技术的日趋成熟,利用生物工程手段加快改良作物农艺性状,已经越来越显示出其巨大的应用潜力。在改良多基因调控的复杂农艺性状方面,单基因转化收效甚微,而长期以来多基因转化不仅受限于技术因素,而且在协调表达调控、代谢及修饰等一系列相关基因方面更是难于突破。近期,我国科学家首次利用自创的多基因垛叠表达系统,成功在水稻(Oryza sativa)胚乳中合成了具有抗氧化活性的花青素,在复杂性状多基因转化领域取得了突破性进展。 展开更多
关键词 花青素 多基因转化 胚乳 无选择标记 水稻
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ahFAD2基因RNA干扰体的删除筛选标记载体构建及其遗传转化 被引量:3
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作者 黄冰艳 苗利娟 +4 位作者 张新友 严玫 翁海波 易明林 陈占宽 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期13-16,共4页
将Napin启动子与含花生FAD2基因反向重复片段的RNA干扰结构连接,亚克隆至含雌激素诱导重组系统的植物表达载体pNCX相应位点中,构建完成由Napin启动子驱动的FAD2RNAi删除筛选标记表达载体pNCX-FAD2RNAi,经酶切鉴定,获得相应的启动子片段... 将Napin启动子与含花生FAD2基因反向重复片段的RNA干扰结构连接,亚克隆至含雌激素诱导重组系统的植物表达载体pNCX相应位点中,构建完成由Napin启动子驱动的FAD2RNAi删除筛选标记表达载体pNCX-FAD2RNAi,经酶切鉴定,获得相应的启动子片段、FAD2RNAi片段及NCX-FAD2RNAi片段。利用农杆菌介导法进行遗传转化,已获得抗性丛生芽214丛。 展开更多
关键词 ahFAD2 RNA干扰 删除筛选标记 载体构建
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基于φC31整合酶的高等真核生物基因组操作技术研究进展(英文) 被引量:2
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作者 许龙霞 赵爱春 +2 位作者 龙定沛 谭兵 向仲怀 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期507-519,共13页
位点特异性重组系统已经成为基因组操作的强有力工具。来自链霉菌噬菌体φC31的整合酶是丝氨酸重组酶家族的一员,可催化2个不同的识别位点attB和attP间发生有效的单向性重组。总结了φC31整合酶可能的重组机制以及在人类细胞、小鼠胚胎... 位点特异性重组系统已经成为基因组操作的强有力工具。来自链霉菌噬菌体φC31的整合酶是丝氨酸重组酶家族的一员,可催化2个不同的识别位点attB和attP间发生有效的单向性重组。总结了φC31整合酶可能的重组机制以及在人类细胞、小鼠胚胎干细胞、果蝇和植物等真核生物基因组操作上的应用,并对该系统的优点和存在问题进行了分析。φC31整合酶系统有望成为高等生物基因功能分析、转基因标记删除、生物合成等研究领域最强有力的手段之一,为此也简要介绍了家蚕个体水平上φC31整合酶介导的盒式交换的研究进展,期望能为家蚕基因组的操作技术研究提供一些借鉴。 展开更多
关键词 ΦC31整合酶 位点特异性重组 基因功能分析 转基因标志删除 生物合成
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应用Cre/loxP系统在转化细胞水平上高效删除转基因水稻的标记基因 被引量:5
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作者 赵艳 张晓丽 +1 位作者 郭龙彪 钱前 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期580-586,共7页
研究了Cre/loxP系统在转化细胞水平上删除转基因水稻中抗性标记基因的可行性和效率。采用农杆菌介导法将Cre/loxP标记基因剪切系统载体pNCG导入水稻细胞,用G418筛选法获得水稻抗性愈伤组织后,在组织培养不同阶段的培养基中添加25μmol/... 研究了Cre/loxP系统在转化细胞水平上删除转基因水稻中抗性标记基因的可行性和效率。采用农杆菌介导法将Cre/loxP标记基因剪切系统载体pNCG导入水稻细胞,用G418筛选法获得水稻抗性愈伤组织后,在组织培养不同阶段的培养基中添加25μmol/L雌激素进行Cre基因的诱导表达和标记基因的剪切,PCR检测T0植株中标记基因nptⅡ、重组酶基因Cre和目标基因gusA的整合情况。将扩增结果为gusA(+)/nptⅡ(-)/Cre(-)的转基因植株统计为标记基因剪切成功的植株。结果表明,在抗性愈伤组织培养的预分化前、预分化和分化阶段添加雌激素诱导表达重组酶Cre均能成功切除标记基因序列,标记基因剪切成功率为6.82%~46.43%。在预分化前采用液体培养基添加雌激素诱导处理愈伤组织3d,T0植株中标记基因的剪切效率高达173.33%,主要原因是雌激素处理提高了愈伤组织绿苗分化率。直接在分化培养基中添加雌激素诱导处理,T0植株中标记基因剪切成功率达46.43%,剪切效率(144.44%)也较高。表明雌激素诱导的Cre/loxP系统能在水稻抗性愈伤组织水平上实现对标记基因序列高效快速删除。 展开更多
关键词 水稻 雌激素诱导 Cre/loxP重组酶系统 转化细胞 标记基因删除
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Production of Transgenic Plants:More, Better, and Faster
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作者 J. Layton L. Gilbertson 《分子植物育种》 CAS CSCD 2007年第2期273-273,共1页
Over the last two decades, transgenic plants have moved from being solely laboratory vehicles for basic research work to providing new varieties grown on large areas throughout the world. A number of
关键词 土豆 小麦 玉米 产量 种植
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