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编码与大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人6A8cDNA在真核细胞的表达 被引量:5
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作者 张立新 马凤蓉 +6 位作者 朱立平 李波 石伟 张淑珍 李国燕 王汛 赵方萄 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期268-271,共4页
目的观察6A8cDNA(1358bp)在真核细胞的表达。方法Northernblot,构建6A8cDNA表达载体pRc/CMV-6A8cDNA,转染COS-7细胞,及基因免疫小鼠。结果6A8cDNA有4.3kb和3.... 目的观察6A8cDNA(1358bp)在真核细胞的表达。方法Northernblot,构建6A8cDNA表达载体pRc/CMV-6A8cDNA,转染COS-7细胞,及基因免疫小鼠。结果6A8cDNA有4.3kb和3.5kb两种mRNA转录形式。4.3kbmRNA以外周血白细胞最丰富,其次为淋巴结、脾脏和骨髓,胸腺组织表达较少,胎肝则缺如。3.5kb者也以外周血白细胞最丰富,其次为肝脏、淋巴结和骨髓,胸腺和脾脏表达量最少。pRc/CMV-6A8cDNA在COS-7细胞表达了分子量45000左右的蛋白质,与单抗6A8有反应。pRc/CMV-6A8cDNA基因免疫小鼠,6/10只小鼠血清与人活化B细胞株3D5细胞膜有反应,5/5只对照小鼠血清呈阴性反应。结论6A8cDNA(1358bp)在真核细胞获得表达,但此cDNA非为全长。 展开更多
关键词 RNA 信使 DNA 互补 甘露糖苷酶 真核细胞
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甘露聚糖酶协同水解甘露聚糖研究进展 被引量:6
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作者 王瑶 王睿琪 +2 位作者 那金 郭尚旭 赵丹 《中国农学通报》 2017年第21期21-26,共6页
甘露聚糖是软质木材中的重要多糖。不同植物来源的甘露聚糖在成分、结构和复杂性上差异很大。甘露聚糖水解为单糖需要甘露聚糖酶、甘露糖苷酶、半乳糖苷酶等多种酶的协同作用,但研究其两者或三者之间的作用较少。为了进一步探究甘露聚... 甘露聚糖是软质木材中的重要多糖。不同植物来源的甘露聚糖在成分、结构和复杂性上差异很大。甘露聚糖水解为单糖需要甘露聚糖酶、甘露糖苷酶、半乳糖苷酶等多种酶的协同作用,但研究其两者或三者之间的作用较少。为了进一步探究甘露聚糖酶协同水解甘露聚糖的作用机制,本研究在概述甘露聚糖来源及结构的基础上,重点论述了甘露聚糖酶的来源、种类、作用方式及产物类型,尤其是通过多种甘露聚糖酶的协同作用增加甘露聚糖的水解效率。最后,展望了甘露聚糖酶协同作用进程与机理的研究方向,为甘露聚糖酶开发利用提供基础。 展开更多
关键词 甘露聚糖 甘露聚糖酶 甘露糖苷酶 半乳糖苷酶 协同作用
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沉默高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ表达对人胃癌BGC-823细胞侵袭和迁移能力的影响 被引量:2
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作者 杨雅莹 易永芬 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期402-407,共6页
目的:探讨RNA干扰沉默高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidaseⅡ,GMⅡ)基因表达对人胃癌BGC-823细胞侵袭和迁移的影响。方法:为沉默GMⅡ基因,构建了4个分别针对不同靶位点的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)质粒表达载体,同时合... 目的:探讨RNA干扰沉默高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidaseⅡ,GMⅡ)基因表达对人胃癌BGC-823细胞侵袭和迁移的影响。方法:为沉默GMⅡ基因,构建了4个分别针对不同靶位点的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)质粒表达载体,同时合成阴性对照质粒表达载体。应用LipofectAMINE2000将质粒转染入BGC-823细胞。分别采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染后GMⅡmRNA和蛋白表达的变化,选出沉默效果最佳的质粒。应用Transwell侵袭实验和划痕损伤实验分别检测GMⅡ基因沉默对人胃癌细胞BGC-823侵袭和迁移能力的影响。结果:质粒载体pGPU6/GFP/Neo-1303沉默GMⅡ基因的效果最好。转染pGPU6/GFP/Neo-1303组穿透小室基质的细胞数明显少于空白对照组和转染阴性对照组(P<0.05)。无血清培养液培养24h后,转染pGPU6/GFP/Neo-1303组细胞的迁移能力较空白对照组和转染阴性对照组明显降低(P<0.05)。结论:RNA干扰技术可沉默人胃癌BGC-823细胞中GMⅡmRNA和蛋白的表达,从而抑制BGC-823细胞的侵袭和迁移能力。GMⅡ可能成为胃癌治疗的新靶点之一。 展开更多
关键词 胃肿瘤 甘露糖苷酶类 基因沉默 肿瘤侵润 细胞迁移分析
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一个与编码大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人cDNA分子克隆 被引量:9
4
作者 张立新 朱立平 +5 位作者 石伟 马凤蓉 祝庆麟 张淑珍 王汛 李国燕 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期34-38,共5页
用抗人B细胞和T细胞共同分化抗原6A8单克隆抗体从人扁桃体细胞λgt11cDNA文库克隆到1个长1358bp的cDNA。此cDNA内有一个长1278bp(26~1303bp)的开放阅读框架,编码425个氨基酸的蛋白质... 用抗人B细胞和T细胞共同分化抗原6A8单克隆抗体从人扁桃体细胞λgt11cDNA文库克隆到1个长1358bp的cDNA。此cDNA内有一个长1278bp(26~1303bp)的开放阅读框架,编码425个氨基酸的蛋白质。此蛋白质氨基酸序列中第157位到223位为疏水跨膜区。蛋白质的氨基酸序列与大鼠ERα-甘露糖苷酶(1040个氨基酸)的632~1038位氨基酸序列间的相同性和相似性高达82.045%和88%。它与酵母Saccharomycescervisiaeα-甘露糖苷酶(1083个氨基酸)的659~1083位氨基酸序列间的相同性和相似性也有32.5%和51.75%。前者163~277位间与后者832~946位间115个氨基酸序列间的相同性和相似性达到57%和74%。由于6A8cDNA核苷酸顺序未见于国外基因库资料,故已为NIHGenBank接受登记,接受号为U37248。 展开更多
关键词 分化抗原 序列分析 甘露糖苷酶 CDNA 分子克隆
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Ⅰ类α-甘露糖苷酶诱导HIV-1包膜糖蛋白降解及机制研究
5
作者 刘笑辰 王绍清 +7 位作者 王立平 吴桐 于秀文 王俊苹 张晓杰 张英博 樊丽 李鸿梅 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1007-1012,共6页
目的探究Ⅰ类α-甘露糖苷酶诱导HIV-1包膜糖蛋白(HIV-1 Env)的降解及其机制。方法将携带红色荧光表达Ⅰ类α-甘露糖苷酶的质粒与携带绿色荧光表达HIV-1 Env的质粒共转染293T细胞,Western Blot检测Ⅰ类α-甘露糖苷酶对HIV-1 Env表达水平... 目的探究Ⅰ类α-甘露糖苷酶诱导HIV-1包膜糖蛋白(HIV-1 Env)的降解及其机制。方法将携带红色荧光表达Ⅰ类α-甘露糖苷酶的质粒与携带绿色荧光表达HIV-1 Env的质粒共转染293T细胞,Western Blot检测Ⅰ类α-甘露糖苷酶对HIV-1 Env表达水平的影响;激光共聚焦成像系统观察Ⅰ类α-甘露糖苷酶的亚细胞定位及Ⅰ类α-甘露糖苷酶与HIV-1 Env之间的相互作用;内质网相关蛋白质降解(ERAD)途径抑制剂探讨Ⅰ类α-甘露糖苷酶诱导HIV-1 Env降解的可能途径。结果Ⅰ类α-甘露糖苷酶可显著降低HIV-1 Env的表达水平,降低幅度达25%至68%;敲低Ⅰ类α-甘露糖苷酶的表达水平后,HIV-1 Env表达水平升高;ERAD抑制剂可显著升高HIV-1 Env的表达水平;激光共聚焦显微镜观察结果显示,Ⅰ类α-甘露糖苷酶与HIV-1 Env之间存在相互作用;激光共聚焦显微镜观察结果显示Ⅰ类α-甘露糖苷酶定位于内质网和高尔基体,与其行使生物学功能的部位相同。结论Ⅰ类α-甘露糖苷酶可能通过ERAD途径诱导HIV-1 Env降解。 展开更多
关键词 Ⅰ类α-甘露糖苷酶 1型艾滋病病毒包膜糖蛋白 激光共聚焦 内质网相关蛋白质降解途径
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甜瓜α-甘露糖苷酶基因家族的全基因组分析 被引量:1
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作者 乌斯呼吉日嘎拉 赵爱奇 +2 位作者 莘少红 郝金凤 哈斯阿古拉 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期144-149,155,F0003,共8页
α-甘露糖苷酶(α-mannosidases,α-Man)是生物界广泛存在的一种糖苷水解酶。通过已公布的甜瓜基因组数据库预测α-Man基因家族成员,其蛋白序列都含有完整的Glyco_hydro_47或Glyco_hydro_38保守结构域。再将筛选出的成员与拟南芥、大豆... α-甘露糖苷酶(α-mannosidases,α-Man)是生物界广泛存在的一种糖苷水解酶。通过已公布的甜瓜基因组数据库预测α-Man基因家族成员,其蛋白序列都含有完整的Glyco_hydro_47或Glyco_hydro_38保守结构域。再将筛选出的成员与拟南芥、大豆、番茄、可可树、葡萄、黄瓜、马铃薯、谷子的相应基因编码的蛋白序列进行进化分析比对,建立系统发生树和保守基序的预测分析。结果表明,甜瓜基因组中含有8个α-man基因,分为Ⅰ类和Ⅱ类,并分成5个亚族。同一类成员的蛋白结构域具有较高相似性与保守性,并且大部分成员基序的顺序和种类相同,不同类的成员之间基序差距较大。对甜瓜α-甘露糖苷酶基因家族的系统分析鉴定,有助于甜瓜α-甘露糖苷酶基因克隆和功能的进一步研究,为研究其他植物α-甘露糖苷酶基因家族的功能和进化提供参考依据。 展开更多
关键词 甜瓜 α-甘露糖苷酶 进化分析 生物信息学
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地衣芽孢杆菌NK-27菌株β-甘露糖苷酶的产酶条件及粗酶性质 被引量:23
7
作者 杨先芹 孙丹 +1 位作者 杨文博 白钢 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期117-120,共4页
地衣芽孢杆菌 NK-2 7菌株可以产生胞外β-甘露聚糖酶和胞内β-甘露糖苷酶 .β-甘露糖苷酶活力主要集中于细胞匀浆液中 .以 2 .0 %魔芋粉、1 .0 % ( NH4) 2 SO4为碳、氮源地衣芽孢杆菌 NK-2 7菌株经 30℃振荡培养 2 0~2 4 h产生 β-甘... 地衣芽孢杆菌 NK-2 7菌株可以产生胞外β-甘露聚糖酶和胞内β-甘露糖苷酶 .β-甘露糖苷酶活力主要集中于细胞匀浆液中 .以 2 .0 %魔芋粉、1 .0 % ( NH4) 2 SO4为碳、氮源地衣芽孢杆菌 NK-2 7菌株经 30℃振荡培养 2 0~2 4 h产生 β-甘露糖苷酶酶活力最高 .该酶于 30~ 4 0℃、p H6 .0时酶活力最高 ,在 30~ 4 0℃、p H5 .4~ 7. 展开更多
关键词 β-甘露糖苷酶 地衣芽孢杆菌NK-27菌株 粗酶性质
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山羊甘肃棘豆中毒临床病理学研究 被引量:11
8
作者 顾百群 段得贤 +1 位作者 崔中林 曹光荣 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 1990年第3期62-68,共7页
每天以10g/kg的剂量,经瘤胃瘘管给山羊甘肃棘豆(Oxytropis kansuensis)粉,20d后受试羊(n=8)陆续出现与自然病例相同的中毒症状,中毒羊血清碱性磷酸酶、谷草转氨酶、精氨酸酶、肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶活性和尿素氮含量明显升高,尿低聚... 每天以10g/kg的剂量,经瘤胃瘘管给山羊甘肃棘豆(Oxytropis kansuensis)粉,20d后受试羊(n=8)陆续出现与自然病例相同的中毒症状,中毒羊血清碱性磷酸酶、谷草转氨酶、精氨酸酶、肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶活性和尿素氮含量明显升高,尿低聚糖及其中甘露糖含量明显升高,血清α-甘露糖苷酶活性和E-玫瑰花环形成率明显下降,脑脊液乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、肌酸磷酸激酶活性明显升高。表明甘肃棘豆对山羊脑、肝、肾、心和其他脏器有不同程度的损害作用,并能降低机体细胞免疫功能,其有毒成分属于吲哚兹定生物碱。 展开更多
关键词 甘肃棘豆 病理学 临床病理学 甘露糖苷酶 吲哚兹定生物碱 疯草病
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α-甘露糖苷酶研究进展 被引量:13
9
作者 刘红霞 苏卫 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第11期697-702,共6页
N-糖基化是机体蛋白质翻译后的一种重要的修饰过程。蛋白质N-糖基化生物过程和相关的许多酶主要定位于胞浆内质网和高尔基体。α-甘露糖苷酶是一种参与糖蛋白合成和代谢的重要蛋白酶,它的功能是修剪N-聚糖中的甘露糖。本文重点介绍α-... N-糖基化是机体蛋白质翻译后的一种重要的修饰过程。蛋白质N-糖基化生物过程和相关的许多酶主要定位于胞浆内质网和高尔基体。α-甘露糖苷酶是一种参与糖蛋白合成和代谢的重要蛋白酶,它的功能是修剪N-聚糖中的甘露糖。本文重点介绍α-甘露糖苷酶的分类、在体内参与糖蛋白的成熟和降解过程,以及α-甘露糖苷酶基因突变可导致的相关疾病。 展开更多
关键词 蛋白质 糖基化 甘露糖苷酶
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酵母N-糖基化工程研究进展 被引量:2
10
作者 詹洁 吴军 《生物技术通讯》 CAS 2004年第3期272-274,共3页
酵母表达系统可用来生产具生物活性的重组糖蛋白,但其在N-糖基化过程中会生成高甘露糖型糖链。通过引入相关的甘露糖苷酶和糖基转移酶基因、切断酵母自身的高甘露糖链形成通道能够改变酵母宿主N-糖基化的类型。本文对酵母N-糖基化工程... 酵母表达系统可用来生产具生物活性的重组糖蛋白,但其在N-糖基化过程中会生成高甘露糖型糖链。通过引入相关的甘露糖苷酶和糖基转移酶基因、切断酵母自身的高甘露糖链形成通道能够改变酵母宿主N-糖基化的类型。本文对酵母N-糖基化工程的研究状况、最新进展及存在问题作简要阐述。 展开更多
关键词 酵母 N-糖基化 高甘露糖型 甘露糖苷酶 糖基转移酶
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内质网相关性降解与呼吸系统疾病 被引量:3
11
作者 王花枝 姜迪譞 +1 位作者 胡瑞成 戴爱国 《国际呼吸杂志》 2014年第7期555-560,共6页
内质网相关性降解(ERAD)通过清除内质网腔内的错误折叠蛋白质,从而预防和缓解内质网应激,是真核生物蛋白质质量控制和维持细胞正常功能状态的重要机制。ERAD包含底物(即错误折叠蛋白)识别、底物泛素化与逆转运、底物降解三个基本... 内质网相关性降解(ERAD)通过清除内质网腔内的错误折叠蛋白质,从而预防和缓解内质网应激,是真核生物蛋白质质量控制和维持细胞正常功能状态的重要机制。ERAD包含底物(即错误折叠蛋白)识别、底物泛素化与逆转运、底物降解三个基本环节,其中任何一个环节失调都会导致细胞功能障碍,并可能进一步导致疾病的发生与发展。近几年研究发现,ERAD参与了COPD、肺癌、肺囊性纤维化等疾病发生过程。本文就参与ERAD的相关因子的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 内质网应激 内质网相关性降解 泛素化蛋白 凝集素样蛋白 甘露糖苷酶 蛋白酶体 吸系统疾病
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新型紫外线吸收剂的合成及其在聚乳酸超细纤维膜中的应用 被引量:1
12
作者 沈云 黄丹 蒋学 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期740-744,共5页
以D-甘露糖和2,4-二羟基二苯甲酮(UV-O)为原料,合成了新型的紫外线吸收剂(3-羟基-4-苯甲酰基)苯基-2,3;4,6-二-O-亚环己基-D-β-吡喃甘露糖苷(UV-O-DHM),其完全分解温度可达372.6℃,具有很好的热稳定性。将UV-O-DHM均匀地掺入聚乳酸(PLA... 以D-甘露糖和2,4-二羟基二苯甲酮(UV-O)为原料,合成了新型的紫外线吸收剂(3-羟基-4-苯甲酰基)苯基-2,3;4,6-二-O-亚环己基-D-β-吡喃甘露糖苷(UV-O-DHM),其完全分解温度可达372.6℃,具有很好的热稳定性。将UV-O-DHM均匀地掺入聚乳酸(PLA)的二氯甲烷溶液中,通过静电纺丝制得了可生物降解的抗紫外线PLA超细纤维膜。采用扫描电子显微镜观察了纤维形貌,纤维的粗细均匀,直径为3~4μm,且纤维表面有均匀的纳米孔结构。随着PLA纤维中UV-O-DHM浓度的增大超细纤维的紫外辐射透过率降低。当UV-O-DHM的掺入量为1.1%时,在230~350 nm范围内,透过率基本接近于0,同时在365~380 nm的紫外光范围内抗紫外辐射效果明显优于同等条件下的UV-O/聚乳酸纤维。 展开更多
关键词 静电纺丝 聚乳酸 超细纤维膜 紫外线吸收剂 甘露糖苷
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Effect of Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang on deficiency of N-glycan/nitric oxide and islet damage induced by streptozotocin in diabetic rats
13
作者 xiao-Qiu Liu Ling Wu Xue-Jun Guo 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2009年第14期1730-1737,共8页
AIM: To investigate the effect of Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang (Decoction for Reinforcing Middle Jiao and Replenishing Qi) on deficiency of N-glycan/nitric oxide (NO) and islet damage induced by injecting two medium doses of s... AIM: To investigate the effect of Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang (Decoction for Reinforcing Middle Jiao and Replenishing Qi) on deficiency of N-glycan/nitric oxide (NO) and islet damage induced by injecting two medium doses of streptozotocin (STZ). METHODS: Diabetes was induced by intraperitoneal injection of STZ at 55 mg/kg on day 1 and day 8. Islet damage was evaluated using a scoring system. Nitrite, nitrate, α-mannosidase and amylase activities were measured by colorimetry. N-glycan patterns of amylase were determined with lectin [ConA, pisum sativum agglutinin (PSA), peanut agglutinin (PNA), and lens culinaris agglutinin (LCA)] affinity precipitation method. RESULTS: Severe islet necrosis and mild islet atrophy were observed in diabetic rats. The number and size ofislets, the activities of α-mannosidase, amylase and nitrite were decreased, while the binding of PNA and LCA to amylase was increased. All of which were improved after treatment with Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang. Islet damage was significantly correlated with nitrite, nitrate, α-mannosidase, amylase and the binding of LCA, PNA, and PSA to amylase.CONCLUSION: STZ-induced islet damage is related to N-glycan deficiency in proteins by blocking α-mannosidase activity and no deficiency, accumulation of unfolded proteins, and endoplasmic reticulum stress and activation of cellular signals, all of which are improved after treatment with Bu-Zhong-YiQi-Tang. 展开更多
关键词 N-Giycan Nitric oxide Diabetic rats Isletdamage Alpha mannosidase Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang
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黄花棘豆对山羊的毒性研究 被引量:48
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作者 王凯 曹光荣 +2 位作者 段得贤 李绍君 高巨星 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期80-86,共7页
本试验从瘤胃瘘管每天给5只山羊投服黄花棘豆粉末(10g/kgB·W),以研究该草对山羊的毒性。试验羊在18~22天开始出现神经症状,表现为精神沉郁,目光呆滞,反应迟纯,喜卧,四肢无力,后肢麻痹,少尿等;在33~65天内死亡。实验室检查发现,... 本试验从瘤胃瘘管每天给5只山羊投服黄花棘豆粉末(10g/kgB·W),以研究该草对山羊的毒性。试验羊在18~22天开始出现神经症状,表现为精神沉郁,目光呆滞,反应迟纯,喜卧,四肢无力,后肢麻痹,少尿等;在33~65天内死亡。实验室检查发现,肝功明显变化,GOT活性,黄疸指数明显升高,血浆α-甘露糖苷酶活性降低,血液高铁血红蛋白含量及全血谷胱甘肽过氧化物酶活性无明显变化,尿低聚糖含量升高,在浓缩尿中可检出生物碱。主要病理组织学变化为小脑蒲肯野氏细胞,胰腺泡细胞空泡变性;肝细胞,心肌细胞及肾小管上皮细胞颗粒变性。试验结果排除了黄花棘豆中毒是由硒和脂肪族硝基化合物引起的可能性,同时证明了黄花棘豆中毒的毒素是吲哚兹定生物碱,该生物碱对α-甘露糖苷酶的抑制作用是中毒的主要环节。 展开更多
关键词 黄花棘豆 山羊 性试验
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地衣芽孢杆菌α-淀粉酶基因的克隆和及其启动子功能鉴定 被引量:16
15
作者 牛丹丹 徐敏 +1 位作者 马骏双 王正祥 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期576-580,共5页
根据已知α-淀粉酶编码基因保守区核苷酸序列,通过PCR和反向PCR技术克隆出Bacillus licheniformisCICIM B0204α-淀粉酶编码基因amyL全长序列及其上下游序列。B.licheniformisCICIM B0204amyL由1539bp组成,其上游180bp为启动子序列,下游... 根据已知α-淀粉酶编码基因保守区核苷酸序列,通过PCR和反向PCR技术克隆出Bacillus licheniformisCICIM B0204α-淀粉酶编码基因amyL全长序列及其上下游序列。B.licheniformisCICIM B0204amyL由1539bp组成,其上游180bp为启动子序列,下游160bp为终止子序列;成熟肽由512个氨基酸残基组成,氨基端的29个氨基酸残基为α-淀粉酶的信号肽。通过基因及其氨基酸序列比对发现,amyL及其编码产物与芽孢杆菌来源的α-淀粉酶具有高度相似性。将amyL的结构基因在PT7介导下于大肠杆菌中诱导表达,获得具有α-淀粉酶活性的表达产物。将amyL的启动子序列和信号肽序列与B.licheniformisCICIM B2004的β-甘露聚糖酶结构基因进行读框内重组,在大肠杆菌中获得了β-甘露聚糖酶的分泌表达,重组大肠杆菌表达295U/mL的β-甘露聚糖酶酶活。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 Α-淀粉酶 Β-甘露聚糖酶 基因克隆 启动子 信号肽
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小花棘豆苦马豆素对小白鼠肝脏α-甘露糖苷酶基因相对表达的影响 被引量:15
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作者 张建军 韩敏 +1 位作者 王宇 白颖 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期50-54,共5页
本试验旨在研究不同剂量苦马豆素(SW)胃内灌服小白鼠,检测其对肝脏α-甘露糖苷酶(AMA)基因在不同时间转录表达的影响。采用动物组织总RNA试剂盒提取肝脏组织总RNA,酶标仪法测定RNA纯度,凝胶电泳检测RNA完整性,实时荧光定量PCR技术检测AM... 本试验旨在研究不同剂量苦马豆素(SW)胃内灌服小白鼠,检测其对肝脏α-甘露糖苷酶(AMA)基因在不同时间转录表达的影响。采用动物组织总RNA试剂盒提取肝脏组织总RNA,酶标仪法测定RNA纯度,凝胶电泳检测RNA完整性,实时荧光定量PCR技术检测AMA基因的转录表达水平。结果显示,试验组及对照组AMA基因均有表达,但各试验组中转录表达水平不同,与对照组相比,低剂量SW能促进肝脏AMA基因的表达,且随着试验的进行促进效果更加明显,高剂量和中等剂量SW初期也能提高AMA基因的相对表达,长时间却能严重抑制AMA基因的表达,随着试验的进行抑制效果愈明显。结果表明,不同剂量SW能在不同时间、不同程度地影响小白鼠肝脏AMA基因的转录表达。 展开更多
关键词 苦马豆素 α-甘露糖苷酶基因 实时荧光定量PCR
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棉花两个β-甘露糖苷酶cDNA的克隆及其特征 被引量:3
17
作者 蒋建雄 郭旺珍 张天真 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2004年第2期216-220,共5页
从陆地棉纤维cDNA文库中分离出两个β-甘露糖苷酶的cDNA克隆,GhManAl和GhManA2。它们的开放读码框编码长度分别为834个氨基酸和976个氨基酸的多肽序列,这两个多肽C-末端的747个氨基酸残基是完全一致的,而N-末端的序列差异较大。GhManAl... 从陆地棉纤维cDNA文库中分离出两个β-甘露糖苷酶的cDNA克隆,GhManAl和GhManA2。它们的开放读码框编码长度分别为834个氨基酸和976个氨基酸的多肽序列,这两个多肽C-末端的747个氨基酸残基是完全一致的,而N-末端的序列差异较大。GhManAl和GhManA2均属于糖基水解酶家族2的成员,它们与其它植物来源的该家族中β-甘露糖苷酶之间具有较高的同源性,而与非植物来源的β-甘露糖苷酶之间的同源性较低,但不同蛋白序列中均存在糖基水解酶家族2的酶催化活性所需的两个Glu保守残基。这两个多肽的N-末端均没有信号肽序列,因此可能为胞内酶。从表达特征来看,GhManAl属于组成型表达基因,而GhManA2则为纤维细胞优势表达基因。 展开更多
关键词 陆地棉 β-甘露糖苷酶 表达特征
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小花棘豆中毒对家兔脑组织α-甘露糖苷酶的影响 被引量:10
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作者 贾琦珍 王帅 +2 位作者 张玲 郭武 陈根元 《塔里木大学学报》 2015年第1期18-23,共6页
探讨小花棘豆对家兔脑组织α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将24只家兔随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按试验Ⅰ组添加15%,试验Ⅱ组添加30%,试验Ⅲ组添加45%的比例制作混... 探讨小花棘豆对家兔脑组织α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将24只家兔随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按试验Ⅰ组添加15%,试验Ⅱ组添加30%,试验Ⅲ组添加45%的比例制作混合饲料,饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒后第14、35、70 d每次每组随机采集2只家兔的全脑,检测家兔不同脑区AMA活性及表达的变化。结果显示,小花棘豆中毒可不同程度地导致家兔脑组织AMA活性和表达下降,从第14d起,所有试验组小脑AMA活性及mRNA表达量均显著低于对照组(P﹤0.05),试验Ⅲ组家兔大脑和丘脑AMA活性及mRNA表达量均显著低于对照组(P﹤0.05),但3个试验组海马和脑干AMA活性及mRNA表达量与对照差异均不显著(P﹥0.05)。结果表明,不同剂量小花棘豆均可降低家兔脑组织AMA活性及其mRNA表达量,小脑、大脑和丘脑是其主要作用的靶区,而且小脑的变化较大脑和丘脑明显。 展开更多
关键词 小花棘豆 α-甘露糖苷酶 中毒 家兔
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6A8α-甘露糖苷酶表达减弱和表达正常鼻咽癌细胞间的差异基因表达 被引量:8
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作者 陈双玲 时岩 +3 位作者 靳玉兰 刘音 赵方萄 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期305-310,共6页
目的发现因转导反义6A8cDNA致恶性生物学行为减弱的人鼻咽癌细胞CNE-2L2(AS)和野生型细胞(W)间的差异表达基因。方法用DNA微列阵方法比较AS细胞和W细胞基因表达的差异。用Northern印迹和RT-PCR验证所得结果的可靠性。结果与W细胞相比,A... 目的发现因转导反义6A8cDNA致恶性生物学行为减弱的人鼻咽癌细胞CNE-2L2(AS)和野生型细胞(W)间的差异表达基因。方法用DNA微列阵方法比较AS细胞和W细胞基因表达的差异。用Northern印迹和RT-PCR验证所得结果的可靠性。结果与W细胞相比,AS细胞有34个基因的表达上调,有42个基因的表达下调。其表达增强可能对肿瘤恶性行为有抑制作用的基因有P130mRNAfor130Kprotein、TGF-betaIIRalpha、GABBR1、TGFBR1、TNFAIP1、STANIN、E-CADHERIN、CTNNA1、CTNNA2、RFX2及TMPO等,其表达减弱可能对肿瘤恶性行为有抑制作用的基因有CD44、NDRG1、TGFB1、RPS5、LEGUMAI、CBS、CD59及SNRPA1等。Northern印迹和RT-PCR验证了DNA微列阵方法检测的结果。结论与W细胞相比,AS细胞有34个基因表达上调,有42个基因表达下调,某些基因表达的改变可能与AS细胞恶性生物学行为的减弱相关。 展开更多
关键词 DNA微列阵 基因表达 肿瘤 6A8 α-甘露糖苷酶
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苦马豆素抑制α-甘露糖苷酶的剂量效应关系 被引量:7
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作者 孔祥雅 荆新堂 +2 位作者 张丽慧 李勤凡 郭伟 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第1期43-46,共4页
根据苦马豆素(Sw)抑制α-甘露糖苷酶(AMA)的特点,建立了SW抑制AMA的剂量效应关系曲线和酶法测定SW溶液浓度的方法。SW溶液浓度范围在5×10-8mol/L^5×10-6mol/L时,SW溶液浓度的负对数与其抑制AMA活性百分比呈线性关系,线性方程Y... 根据苦马豆素(Sw)抑制α-甘露糖苷酶(AMA)的特点,建立了SW抑制AMA的剂量效应关系曲线和酶法测定SW溶液浓度的方法。SW溶液浓度范围在5×10-8mol/L^5×10-6mol/L时,SW溶液浓度的负对数与其抑制AMA活性百分比呈线性关系,线性方程Y=0.026X+5.167 4,R2=0.994 7。建立了酶法测定SW溶液浓度的方法,为疯草的进一步研究提供技术支持。 展开更多
关键词 苦马豆素 α-甘露糖苷酶 活性
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