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mTOR/S6K1在2型糖尿病Wistar大鼠肝脏和肌肉的表达 被引量:2
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作者 吕相川 陈增焱 《解剖科学进展》 CAS 2014年第3期276-278,287,共4页
目的应用Wistar大鼠制备2型糖尿病的动物模型,观察肝脏和肌肉组织mTOR/Rps6kb1(S6K1)表达的变化。方法雄性Wistar成年大鼠高脂饲料喂养8周,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)25mg/kg,注射后第4周检测空腹血糖、胰岛素水平,对结果进行统计分析;解... 目的应用Wistar大鼠制备2型糖尿病的动物模型,观察肝脏和肌肉组织mTOR/Rps6kb1(S6K1)表达的变化。方法雄性Wistar成年大鼠高脂饲料喂养8周,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)25mg/kg,注射后第4周检测空腹血糖、胰岛素水平,对结果进行统计分析;解剖大鼠,取肝脏和肌肉组织,应用RT-PCR和Western blot检测肝脏和肌肉组织mTOR及S6K1表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血糖值升高(<0.05),胰岛素水平下降(<0.05),肝脏和肌肉中的mTOR/S6K1蛋白和mRNA表达均升高(<0.05)。结论 mTOR及S6K1在2型糖尿病大鼠肝脏和肌肉过表达,提示其可能参与2型糖尿病发病过程。 展开更多
关键词 WISTAR大鼠 糖尿病动物模型 mtor S6k1
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丹蛭降糖胶囊通过mTOR/S6K1信号通路对糖尿病肾病大鼠的干预作用研究 被引量:29
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作者 尹昀东 方朝晖 尤良震 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期189-195,共7页
目的研究丹蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠的肾脏病理改变和足细胞自噬水平的影响,初步探讨其相应的作用机制。方法选取GK大鼠40只,采用醋酸脱氧皮质酮-盐皮下注射联合高脂饲料喂养诱导糖尿病肾病模型。造模成功后随机分为模型组、丹蛭降... 目的研究丹蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠的肾脏病理改变和足细胞自噬水平的影响,初步探讨其相应的作用机制。方法选取GK大鼠40只,采用醋酸脱氧皮质酮-盐皮下注射联合高脂饲料喂养诱导糖尿病肾病模型。造模成功后随机分为模型组、丹蛭降糖胶囊低剂量组[0.54 g/(kg·d)]、高剂量组[1.08 g/(kg·d)]、缬沙坦组[10 mg/(kg·d)],每组10只。另选取10只同周龄正常Wistar大鼠作为正常组。模型组和正常组给予等容积生理盐水。连续灌胃10周后检测空腹血糖(FBG)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和尿微量蛋白(U-mAlb)。Western Blot检测肾小球p-mTOR、p-S6K1、Beclin-1、LC3和Nephrin蛋白的表达,HE染色和PAS染色后于光镜下观察肾脏病理变化,电镜下观察各组亚细胞形态结构变化。结果与正常组比较,模型组FBG、SCr、BUN、U-mAlb水平升高(P<0.01);与模型组比较,丹蛭降糖胶囊低、高剂量组和缬沙坦组U-mAlb水平降低(P<0.01)。模型组可见肾小球基底膜增厚,系膜基质沉积,足细胞损伤,各用药组均有不同程度改善,丹蛭降糖胶囊高剂量组足细胞内有较多自噬体形成。与正常组比较,模型组p-mTOR、p-S6K1的表达增高,Nephrin、Beclin-1和LC3的表达水平降低(P<0.01);与模型组比较,各用药组p-mTOR、p-S6K1的表达下降,Nephrin、Beclin-1和LC3的表达增高(P<0.01)。丹蛭降糖胶囊高剂量组和缬沙坦组Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平较丹蛭降糖胶囊低剂量组升高(P<0.05)。结论丹蛭降糖胶囊具有减轻糖尿病肾病大鼠U-mAIb、足细胞损伤及相关肾脏病理改变的作用,其机制可能与抑制mTOR/S6K1信号通路进而提高足细胞的自噬活性有关。 展开更多
关键词 丹蛭降糖胶囊 糖尿病肾病 自噬 mtor/S6k1信号通路 足细胞
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吉西他滨联合顺铂调控mTOR/S6K1/NF-κB信号治疗乳腺癌的机制研究 被引量:8
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作者 左一凡 高立伟 +1 位作者 武素芳 闫江涛 《实用癌症杂志》 2019年第1期26-29,共4页
目的探讨吉西他滨联合顺铂调控mTOR/S6K1/NF-κB信号治疗乳腺癌的机制。方法选取150例女性原发性乳腺癌患者接受吉西他滨联合顺铂化疗2疗程后评价疗效。采用免疫组织化学法检测乳腺癌患者癌组织中mTOR、S6K1和NF-κB蛋白的表达;采用Real... 目的探讨吉西他滨联合顺铂调控mTOR/S6K1/NF-κB信号治疗乳腺癌的机制。方法选取150例女性原发性乳腺癌患者接受吉西他滨联合顺铂化疗2疗程后评价疗效。采用免疫组织化学法检测乳腺癌患者癌组织中mTOR、S6K1和NF-κB蛋白的表达;采用Real-Time PCR法和Western Blot法检测乳腺癌组织中mTOR、S6K1和NF-κB mRNA和蛋白的表达; ELISA法检测患者p65、BCL-2和Caspase 3含量。结果与吉西他滨和顺铂化疗前相比,患者血清CA15-3、CA125和NSE水平均降低,且差异具有统计学意义(P <0.05)。与化疗前相比,化疗后乳腺癌组织中mTOR和S6K1蛋白含量和mRNA表达显著降低(P <0.05),NF-κB蛋白含量和mRNA表达显著上升(P <0.05);患者p65和Caspase 3表达含量显著增加(P <0.05),BCL-2的表达量显著降低(P <0.05)。结论吉西他滨联合顺铂化疗对乳腺癌有一定的临床治疗作用,且mTOR/S6K1/NF-κB信号通路在化疗过程中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 吉西他滨 顺铂 mtor/S6k1/NF-κB
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丹蛭降糖胶囊对糖尿病GK大鼠肝脏胰岛素受体底物的影响 被引量:7
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作者 尹昀东 方朝晖 尤良震 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期4033-4037,共5页
目的:观察丹蛭降糖胶囊(DJC)对糖尿病大鼠肝脏胰岛素抵抗的干预效果,并探讨其缓解肝脏胰岛素受体底物减少的机制。方法:选取12周龄符合糖尿病模型的SPF级雄性GK大鼠40只纳入实验,随机分为模型组,DJC低、高剂量组,吡格列酮组,另设10只同... 目的:观察丹蛭降糖胶囊(DJC)对糖尿病大鼠肝脏胰岛素抵抗的干预效果,并探讨其缓解肝脏胰岛素受体底物减少的机制。方法:选取12周龄符合糖尿病模型的SPF级雄性GK大鼠40只纳入实验,随机分为模型组,DJC低、高剂量组,吡格列酮组,另设10只同周龄正常Wistar大鼠作为正常组。DJC低、高剂量组和吡格列酮组分别予以0.54、1.08g·kg^-1·d^-1 DJC和吡格列酮10mg·kg^-1·d^-1灌胃,模型组及正常组给予等量0.9%氯化钠溶液。连续给药6周后,测定各组大鼠的空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),检测肝脏病理染色和胰岛素受体底物IRS1、IRS2的免疫组化结果,Western blot检测mTOR通路蛋白p-mTOR、p-S6K1,AMPK通路蛋白LKB1、p-AMPK和IRS1、IRS2的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠具有血糖升高,胰岛素抵抗特征,HE染色显示有显著的肝脏细胞脂肪变性;与模型组比较,DJC低、高剂量组的FBG、FINS和HOMA-IR均显著改善(P<0.05),肝脏脂肪病变和炎症浸润减轻;p-mTOR、p-S6K1表达下降(P<0.01);IRS1、IRS2,LKB1、p-AMPK表达增高(P<0.01);其中DJC高剂量组和吡格列酮组的IRS1、IRS2的表达高于DJC低剂量组(P<0.05)。结论:DJC可以增加糖尿病GK大鼠肝脏胰岛素受体底物的表达,减轻肝脏脂肪病变,相关机制可能与抑制mTOR信号通路并增强AMPK信号通路有关。 展开更多
关键词 丹蛭降糖胶囊 糖尿病大鼠 胰岛素受体底物 mtor/S6k1信号通路 LkB1/AMPk信号通路
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基于mTOR/S6K1通路探究CXCR3对糖尿病肾病足细胞损伤、凋亡、自噬的影响 被引量:1
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作者 李明霞 杨谦 +4 位作者 赵轶峰 张冰洁 王晓芳 赵婷 赵铁军 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第19期4806-4809,共4页
目的 探究趋化因子受体(CXCR)3对糖尿病肾病足细胞损伤、凋亡、自噬的影响及其作用机制。方法 将分化成熟的小鼠肾脏足细胞MPC-5分为对照组,模型组,si-NC组和si-CXCR3组,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞24 h、48 h和72 h细胞活力,流式细胞法... 目的 探究趋化因子受体(CXCR)3对糖尿病肾病足细胞损伤、凋亡、自噬的影响及其作用机制。方法 将分化成熟的小鼠肾脏足细胞MPC-5分为对照组,模型组,si-NC组和si-CXCR3组,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞24 h、48 h和72 h细胞活力,流式细胞法检测各组细胞凋亡水平,Western印迹检测细胞凋亡关键蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3表达水平,ELISA法检测各组细胞白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8,肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,qPCR及Western印迹检测各组细胞自噬相关蛋白(beclin)1、人自噬相关蛋白(ATG)5及ATG7表达水平,同时检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/蛋白核糖体S6蛋白激酶(mTOR/S6K1)信号通路关键蛋白的蛋白表达水平及其磷酸化修饰水平。结果 与对照组相比,模型组和si-NC组细胞增殖受到显著抑制,并且随着时间增加抑制能力增强,与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞增殖显著提高(P<0.05);与对照组相比,模型组和si-NC组细胞凋亡均显著增加(P<0.05);与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞凋亡显著降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组和si-NC组细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α释放显著增加(P<0.05);与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α显著降低,但仍高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,模型组和si-NC组细胞自噬相关蛋白Beclin1、ATG5及ATG7表达水平显著降低,而与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组显著升高(P<0.05);与对照组相比,模型组和si-NC组细胞mTOR、S6K1蛋白表达水平显著升高,其磷酸化修饰也相应增加,而与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞mTOR,S6K1蛋白表达水平显著降低,磷酸化修饰也相应降低(P<0.05)。结论 沉默CXCR3可以提高小鼠肾足组细胞活性,降低细胞凋亡,减少炎症因子释放,对肾足细胞具有保护作用,其机制可能通过增强自噬,调控mTOR/S 展开更多
关键词 趋化因子受体(CXCR)3 肾足组细胞 自噬 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/蛋白核糖体S6蛋白激酶(mtor/S6k1)信号通路
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核糖体蛋白S6激酶1抑制剂对气道上皮干/祖细胞增殖及分化功能的影响
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作者 李敏敏 李宽 +2 位作者 孙昕 吴琦 陈怀永 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第5期449-453,共5页
目的研究mTOR信号通路下游元件核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)抑制剂PF-4708671对气道干/祖细胞增殖与分化功能的影响。方法准备10只C57BL/6小鼠,采用流式细胞分选技术将气道干细胞(vClub)和气道祖细胞(Club)从小鼠气道分选出来;采用类器官培... 目的研究mTOR信号通路下游元件核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)抑制剂PF-4708671对气道干/祖细胞增殖与分化功能的影响。方法准备10只C57BL/6小鼠,采用流式细胞分选技术将气道干细胞(vClub)和气道祖细胞(Club)从小鼠气道分选出来;采用类器官培养技术分别把vClub细胞、Club细胞和成纤维细胞(M Lg)混合培养。细胞设0、 4、 20、 100nmol/LPF-4708671处理组,培养第8天时显微镜下观察克隆生长情况,统计克隆形成数量;第10天时荧光定量PCR检测S6K1激酶基因R ps6kb1、Club细胞标志物细胞色素氧化酶(Cyp2f)、纤2 毛细胞标志物乙酰化微管蛋白(Ac)和t 叉头框转录因子J1(Foxj),杯1 状细胞标志物氯化物通道钙活化家族成员3(Clca)叉3 头框转录因子a3(Foxa3)的mRNA表达情况。结果不同浓度的PF-4708671对vClub细胞克隆数量无明显影响(P> 0.05),而 4、 20、100nmol/LPF-4708671浓度组Club细胞克隆数量均较0nmol/L组减少(P< 0.05)。不同浓度的PF-4708671对vClub向Club细胞的分化无明显影响,其特征分子Cyp2f2在 mRNA表达水平差异方面无统计学意义。PF-4708671对Club细胞向纤毛细胞和杯状细胞的分化能力均无明显影响,4组间2种细胞的标志物A c、tFoxj1及 Clca3、Foxa3表达水平差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论 mTOR/S6K1信号通路对小鼠气道干/祖细胞的增殖功能呈正调控作用,对其分化功能影响甚微。 展开更多
关键词 mtor/S6k1信号通路 气道干细胞 细胞增殖 细胞分化
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