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一个新的白血病相关基因LRP16全长cDNA的克隆、序列分析及表达特征 被引量：60
1
作者 韩为东 于力 +5 位作者 楼方定 王全顺 赵瑜 史子江 焦宏远 周建军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期209-214,共6页
克隆一个与白血病复发相关基因 (LRP1 6)的全长 c DNA序列 ,对其进行染色体定位、组织表达谱分析 ,并对该基因编码蛋白质进行原核表达 .首先用获得的一段 3kb DNA片段在 NCBI提供的 h ESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装 ,... 克隆一个与白血病复发相关基因 (LRP1 6)的全长 c DNA序列 ,对其进行染色体定位、组织表达谱分析 ,并对该基因编码蛋白质进行原核表达 .首先用获得的一段 3kb DNA片段在 NCBI提供的 h ESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装 ,再设计引物进行 c DNA末端快速扩增(RACE技术 ) .采用 Northern印迹方法进行组织表达分析 .以高通量基因组序列 (HTGS)数据库为基础进行染色体定位 .对构建的克隆菌用 IPTG诱导重组蛋白表达后进行 SDS- PAGE,同时对重组体测序确证 .钓取了该基因全长 c DNA、推导所编码的氨基酸序列 ,并将该基因定位于染色体1 1 q1 2 .2 .原核表达筛选获得了该基因重组子的一个缺失体 .对 LRP1 6基因全长 c DNA的序列分析提示 ,该基因可能编码两种 N端不同的蛋白质 ,且该基因的转录本可能存在一种丰度较低的剪接体 . 展开更多
关键词 白血病 相关基因 lrp16 重组蛋白 原核表达 CDNA 克隆 序列分析
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LRP、MRP、MDR_1基因在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义 被引量：55
2
作者 王洁 刘叙仪 +4 位作者 蒋薇 梁莉 方健 安彤同 吴梅娜 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期304-307,共4页
目的　探讨肺耐药蛋白 (lungresistanceprotein ,LRP)、多药耐药蛋白 (multidrugresistance associatedprotein ,MRP)和多药耐药基因 (multidrugresistance ,MDR1)mRNA在非小细胞肺癌 (non smallcellcancer,NSCLC)中的共表达及临床意义... 目的　探讨肺耐药蛋白 (lungresistanceprotein ,LRP)、多药耐药蛋白 (multidrugresistance associatedprotein ,MRP)和多药耐药基因 (multidrugresistance ,MDR1)mRNA在非小细胞肺癌 (non smallcellcancer,NSCLC)中的共表达及临床意义。方法　RT PCR检测NSCLC冰冻组织中上述耐药基因的mRNA水平。结果　LRP、MRP、MDR1mRNA阳性率分别为 74.2 % (4 9/ 6 6 )、80 .3% (5 3/ 6 6 )和 37.9%(2 5 / 6 6 ) ;MRP与MDR1、MRP与LRP、LRP与MDR1及MRP、LRP与MDR1共表达者分别为 16 .7% (11/6 6 )、5 3.0 % (35 / 6 6 )、19.7% (13/ 6 6 )及 12 .1% (8/ 6 6 )。LRP与MRP阳性相关 (r =0 .47,P =0 .0 0 1) ,LRP、MRP与MDR1无相关性 (r=0 .98,P =0 .0 77;r =0 .2 5 ,P =0 .0 5 3)。 3种耐药基因表达在NSCLC各期、各分化组中差异无显著性 (P≥ 0 .0 5 )。肺腺癌化疗有效组LRP、MRPmRNA(0 .5 3± 0 .0 8,0 .41±0 .0 1)及鳞癌化疗有效组LRPmRNA表达 (0 .42± 0 .0 3)明显低于化疗无效组 (1.14± 0 .3,0 .82± 0 .0 4,0 .97± 0 .0 1,P <0 .0 5 ) ;LRP与MRP ,LRP、MRP与MDR1共表达者 ,中位生存期明显缩短 (P <0 .0 5 )。多变量Cox回归分析 ,仅LRP +MRP、LRP +MRP +MDR1共表达有预后意义。结论　非小细胞肺癌原发耐药与LRP? 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 lrp基因 MRP基因 MDR1基因
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Alzheimer病和血管性痴呆患者APOE及LRP基因多态性与认知及精神行为症状相关性研究 被引量：13
3
作者 吕泽平 胡才友 +5 位作者 周琴 杨泽 梁庆华 黄春丽 庞国防 杨秀塔 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第5期331-334,共4页
目的探讨Alzheimer病(AD)和血管性痴呆(VD)患者APOE及LRP基因多态性与认知及精神行为症状(BPSD)的相关性。方法收集AD患者79例、VD患者85例和健康对照者(对照组)156名,采用简易精神状态检查量表(MMSE)评定认知功能;采用简明精神病量表... 目的探讨Alzheimer病(AD)和血管性痴呆(VD)患者APOE及LRP基因多态性与认知及精神行为症状(BPSD)的相关性。方法收集AD患者79例、VD患者85例和健康对照者(对照组)156名,采用简易精神状态检查量表(MMSE)评定认知功能;采用简明精神病量表和汉密尔顿抑郁(HAMD)、焦虑量表(HAMA)评定BPSD。采用PCR-RFLP进行APOEε、LRP基因分型。结果 (1)AD组(17.7%)及VD组(20.5%)APOEε4等位基因频率均高于对照组(5.7%,均P<0.01)。(2)AD组和VD组APOEε4携带者MMSE得分均低于同组APOEε4非携带者〔AD组(13.84±2.32)分vs.(14.78±2.54)分,P<0.01;VD组(15.53±1.87)分vs.(18.45±2.23)分,P<0.01〕。(3)AD组患者APOEε4携带者BPSD比例明显高于APOEε4非携带者(55.56%vs.52.83%,P=0.039)。结论 APOEε4可能是AD、VD患者认知障碍的共同危险因素。APOEε4可能是AD的BPSD危险因素。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 血管性痴呆 APOE基因 lrp基因
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新的白血病复发相关候选基因LRP15全长cDNA的克隆 被引量：12
4
作者 徐周敏 于力 +6 位作者 卢学春 韩为东 李续建 靖域 王书红 靳海杰 楼方定 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期22-26,共5页
为了克隆与白血病复发相关的新基因 (LRP15 )的全长cDNA序列 ,应用分子生物学及生物信息学技术对一段已知仅在白血病复发标本中被甲基化的 1.8kb长的DNA片段进行研究分析 ,通过美国生物信息中心 (NCBI)提供的hEST数据库进行电子杂交 ,... 为了克隆与白血病复发相关的新基因 (LRP15 )的全长cDNA序列 ,应用分子生物学及生物信息学技术对一段已知仅在白血病复发标本中被甲基化的 1.8kb长的DNA片段进行研究分析 ,通过美国生物信息中心 (NCBI)提供的hEST数据库进行电子杂交 ,并对获得的相互重叠的EST片段进行组装 ,设计引物进行cDNA末端快速扩增(RACE)。以高通量基因组序列 (HTGS)数据库及SAGE文库为基础 ,将获得的cDNA片段进行染色体定位及组织表达分析。结果表明 ,LRP15基因的cDNA序列全长 1718bp ,含 1个 780bp的开放读码框架 ,编码 2 5 9个氨基酸。该基因定位于染色体 3p2 4 ,在多种组织中表达。结论 :RACE技术是克隆新基因的有效方法 。 展开更多
关键词 白血病 白血病复发相关候选基因 lrp15 基因克隆
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生物信息学研究新基因LRP15 被引量：10
5
作者 徐周敏 于力 +6 位作者 卢学春 韩为东 李续建 靖域 王书红 靳海杰 楼方定 《生物技术通讯》 CAS 2002年第3期187-190,共4页
为了利用生物信息学探索网上克隆基因与预测基因功能的新方法,首先用一段1.8kbDNA片段在人类EST数据库中进行电子杂交并对相互重叠的EST片段组装,通过引物设计进行cDNA末端快速扩增。以高通量基因组序列(HTGS)数据库及SAGE文库为基础,... 为了利用生物信息学探索网上克隆基因与预测基因功能的新方法,首先用一段1.8kbDNA片段在人类EST数据库中进行电子杂交并对相互重叠的EST片段组装,通过引物设计进行cDNA末端快速扩增。以高通量基因组序列(HTGS)数据库及SAGE文库为基础,进行染色体定位及组织表达分析。通过DAS及RPS-BLAST程序预测其蛋白质结构及功能。结果显示,LRP15cDNA全长1718bp,含一个780bp的开放读码框架,编码259个氨基酸。该基因定位于染色体3p24,在多种组织中表达。其编码蛋白含有N端富含亮氨酸重复序列及潜在的穿膜序列。研究表明,生物信息学是克隆与预测基因功能的有效方法;LRP15基因可能是一个参与细胞发育调控的新基因。 展开更多
关键词 生物信息学 新基因 lrp15 基因克隆
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肺癌患者FLK-1、LRP和MDR1的表达与临床研究 被引量：3
6
作者 朱春荣 夏学鸣 +1 位作者 王庆才 康苏娅 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第1期29-32,共4页
　　　目的:探讨血管内皮生长因子受体 (Flk 1),肺耐药蛋白 (LRP)基因以及多药耐药基因 (MDR1)蛋白与肺癌患者临床及病理指标的关系。方法:用免疫组化技术(ABC法)对原发性肺癌组织中三种基因的表达进行检测。结果: 70例肺癌中,非小细胞... 　　　目的:探讨血管内皮生长因子受体 (Flk 1),肺耐药蛋白 (LRP)基因以及多药耐药基因 (MDR1)蛋白与肺癌患者临床及病理指标的关系。方法:用免疫组化技术(ABC法)对原发性肺癌组织中三种基因的表达进行检测。结果: 70例肺癌中,非小细胞肺癌MDR1阳性率 49. 2% (29 /59),明显高于小细胞肺癌 (SCLC) 18. 2% (2 /11)(P<0. 05);非小细胞肺癌LRP阳性率 69. 5% (41 /59),明显高于小细胞肺癌 27. 3% (3 /11) (P<0. 05)。腺癌中MDR1与LRP的表达明显高于鳞癌(P<0. 05)。LRP与Flk 1在NSCLCs中共同表达 49. 2% (29 /59),LRP的表达与肺癌的组织学分级相关,MDR1和LRP的表达与肺癌的组织学类型有关,Flk 1与TNM分期相关,均有统计学意义(P<0. 05)。Flk 1+LRP均阳性、FLK 1+LRP+MDR1均阳性、中药治疗、复发与患者的生存率有关(P<0. 05)。结论:FLK 1、LRP和MDR1基因蛋白产物的检测对肺癌患者的诊治和预后评估有积极意义。 展开更多
关键词 FLK-1基因 lrp基因 MDR1基因 基因表达 免疫组化 肺癌 预后
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MDR1、BCRP和LRP基因在乳腺癌组织中的表达及其意义 被引量：9
7
作者 张桂香 刘新兰 李金平 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期79-83,共5页
目的探讨多药耐药基因(MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及肺耐药蛋白(LRP)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其相互关系,分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR方法检测2007年1月至2007年12月在宁夏医科大学附属医院手术切除的42... 目的探讨多药耐药基因(MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及肺耐药蛋白(LRP)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其相互关系,分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR方法检测2007年1月至2007年12月在宁夏医科大学附属医院手术切除的42例乳腺癌组织、42例癌旁组织及50例乳腺良性病变中MDR1、BCRP和LRP mRNA的表达。结果乳腺癌组织中MDR1、BCRP、LRP mRNA的阳性表达率分别为40.47%、38.09%及61.90%,与癌旁组织及乳腺良性病变组织相比阳性表达率均有统计学差异(P<0.05)。MDR1mRNA表达与绝经状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01),与腋窝淋巴结状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01);BCRP mRNA表达与腋窝淋巴结状况呈正相关(r=0.355,P<0.05);LRP mRNA表达与绝经状况、年龄、腋窝淋巴结状况及肿瘤大小之间均无相关性(P>0.05);MDR1mRNA和BCRP mRNA表达呈正相关(r=0.652,P<0.01),LRP mRNA与MDR1mRNA表达无相关性(r=0.147,P>0.05);LRP mRNA和BCRP mRNA表达无相关性(r=0.111,P>0.05)。2个耐药基因共表达率为47.61%,2种或3种耐药基因共表达率为61.89%。结论乳腺癌组织中存在耐药基因MDR1、BCRP和LRP的表达,单基因和多基因协同作用,以多基因共表达为主;检测MDR1和BCRP基因表达水平可辅助临床判断乳腺癌患者的预后。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 耐药基因 mdr1 BCRP lrp RT-PCR
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LRP16基因在肺癌中的表达及其临床意义 被引量：5
8
作者 梁朝阳 刘慧峰 +3 位作者 周乃康 母义明 柳曦 汪保安 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期598-599,共2页
目的研究肺癌组织中LRP16基因的蛋白表达水平及其临床病理意义。方法收集54例原发型肺癌患者手术切除的新鲜组织标本和部分临床病理资料,用Westernblot方法检测肿瘤组织及癌旁正常肺组织中LRP16蛋白的表达水平,并分析其与临床病理资料... 目的研究肺癌组织中LRP16基因的蛋白表达水平及其临床病理意义。方法收集54例原发型肺癌患者手术切除的新鲜组织标本和部分临床病理资料,用Westernblot方法检测肿瘤组织及癌旁正常肺组织中LRP16蛋白的表达水平,并分析其与临床病理资料间的联系。以肿瘤组织LRP16蛋白的表达较癌旁正常肺组织高2倍为LRP16过表达的标准。结果54例肺癌标本中有15例LRP16过表达,过表达率约27.8%(15/54)。23例肺腺癌中有11例(47.8%)LRP16过表达,27例肺鳞癌中有4例(14.8%)LRP16过表达,二者比较差异显著(P<0.05)。在2例大细胞癌和2例小细胞癌中,LRP16均呈极低表达或未表达。肿瘤直径>3cm的10例仅2例(20.0%)LRP16过表达,直径=3cm的44例中有13例(29.5%)LRP16过表达,二者比较无显著性差异(P>0.05)。有肺门或(及)纵隔淋巴结转移的20例中有10例(50.0%)LRP16过表达,而无转移的34例中仅5例(14.7%)LRP16过表达,二者比较差异显著(P<0.05)。结论LRP16基因在肺腺癌组与鳞癌组、有淋巴结转移组与无淋巴结转移组表达均有较大差异,提示其不仅是一个肺癌相关基因,而且可能与肺癌的分子分期相关。 展开更多
关键词 基因 lrp16 肺肿瘤
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膝骨性关节炎患者低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因与中医体质相关性研究 被引量：7
9
作者 周明旺 李盛华 +2 位作者 陈娴 王金 陈威 《西部中医药》 2016年第10期5-7,共3页
目的:研究膝骨性关节炎(KOA)患者低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因rs3736228位点多态性与中医体质的相关性。方法:对KOA患者进行中医体质问卷调查,对平和质、阳虚质、阴虚质3种高发体质的KOA患者进行LRP5基因多态性检测,同时随机选取54例... 目的:研究膝骨性关节炎(KOA)患者低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因rs3736228位点多态性与中医体质的相关性。方法:对KOA患者进行中医体质问卷调查,对平和质、阳虚质、阴虚质3种高发体质的KOA患者进行LRP5基因多态性检测,同时随机选取54例健康非血缘关系志愿者作为对照组。结果:本次研究共检测出LRP5基因rs3736228位点三种基因型,分别为CC、TT、CT。病例组与对照组比较,各基因型及等位基因差异无统计学意义(P>0.05)。平和质病例组、阳虚质病例组、阴虚质病例组分别与对照组比较,各基因型与等位基因差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LRP5基因rs3736228位点多态性可能与KOA无相关性。 展开更多
关键词 骨性关节炎 膝 中医体质 lrp5 基因多态性
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RNA干扰技术对犬小孢子菌PQ-LRP基因沉默的研究 被引量：6
10
作者 陈昕宜 杨国玲 +3 位作者 刘建雯 刘金鹏 张芳芳 赵晓宣 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期559-562,共4页
目的 构建犬小孢子菌PQ-LRP基因RNA干扰载体,探讨RNA干扰载体对犬小孢子菌PQ-LRP基因表达的影响.方法 用根癌农杆菌介导的T-DNA插入突变技术,加入多克隆位点,引入潮霉素抗性基因,先后构建PUC-PLULT、PCB309-PLULT载体.应用实时PCR方法检... 目的 构建犬小孢子菌PQ-LRP基因RNA干扰载体,探讨RNA干扰载体对犬小孢子菌PQ-LRP基因表达的影响.方法 用根癌农杆菌介导的T-DNA插入突变技术,加入多克隆位点,引入潮霉素抗性基因,先后构建PUC-PLULT、PCB309-PLULT载体.应用实时PCR方法检测PCB309-PLULT载体对犬小孢子菌PQ-LRP基因表达的干扰作用.结果 构建了中间载体PUC-PLUT、PUC-PLULT,并通过PCR、基因测序进行鉴定.成功构建了长为8 825 bp的干扰载体PCB309-PLULT,并通过酶切测定为该目的载体;筛选出犬小孢子菌转化子的潮霉素最佳浓度为300 mg/L;用实时定量PCR方法对犬小孢子菌PQ-LRP基因干扰前后表达量进行鉴定：以干扰前PQ-LRP相对表达量1.0为标准,干扰后PQ-LRP相对表达量为0.39,干扰后下调61％.结论 干扰载体PCB309-PLULT可以明显抑制犬小孢子菌PQ-LRP基因的表达. 展开更多
关键词 犬小孢子菌 RNA干扰 基因 PQ-lrp 基因沉默
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应用酵母双杂交方法筛选LRP16相互作用蛋白 被引量：5
11
作者 杨 韩为东 +4 位作者 赵亚力 伍志强 田丽媛 陈美霞 张燕 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2007年第6期439-441,共3页
目的:应用酵母双杂交技术筛选人乳腺癌细胞MCF-7中可与LRP16相互作用的蛋白。方法:将诱饵质粒pGBKT7-LRP16、MCF-7双链cDNA文库片段及线性化质粒pGADT7-Rec共转化AH109酵母菌,营养缺陷型培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade)筛选阳性菌落。... 目的:应用酵母双杂交技术筛选人乳腺癌细胞MCF-7中可与LRP16相互作用的蛋白。方法:将诱饵质粒pGBKT7-LRP16、MCF-7双链cDNA文库片段及线性化质粒pGADT7-Rec共转化AH109酵母菌,营养缺陷型培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade)筛选阳性菌落。提取阳性克隆质粒进行PCR,将PCR产物测序,并将酵母质粒转化感受态大肠杆菌Top10获得与诱饵质粒有相互作用的单个文库质粒,测序后回复验证其在酵母中的相互作用。结果:获得8个与LRP16相互作用的候选蛋白,选取4个在酵母中进行回复验证,其中有3个可生长出阳性克隆。结论:应用酵母双杂交技术筛选出一族功能基本明确的可与LRP16相互作用的候选蛋白,为研究LRP16的病理生理功能和分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 lrp16 质粒 双杂交技术 基因文库
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急性白血病LRP、mdr_1、MRP基因表达的预后意义 被引量：6
12
作者 任金海 董作仁 +3 位作者 郭晓楠 徐世荣 王福旭 杜行严 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期352-354,共3页
目的　研究急性白血病 (AL)患者肺耐药蛋白(L RP)基因、多药耐药基因 mdr1 及多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达的预后意义。方法　急性白血病 6 1例。正常对照 15例。采外周血或骨髓液 ,肝素抗凝 ,分离单个核细胞及分离总 RNA。逆转录酶合... 目的　研究急性白血病 (AL)患者肺耐药蛋白(L RP)基因、多药耐药基因 mdr1 及多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达的预后意义。方法　急性白血病 6 1例。正常对照 15例。采外周血或骨髓液 ,肝素抗凝 ,分离单个核细胞及分离总 RNA。逆转录酶合成 c DNA。设计扩增 L RP、mdr1 及 MRP基因的引物进行 PCR扩增。结果　正常对照及长期生存组三种耐药基因表达的阳性率均很低 ;初治组表达的阳性率较高 ;且初治组耐药基因表达阳性者 ,其完全缓解率 (CR)显著低于表达阴性者 ;复发难治组表达水平显著高于前三组 (P<0 .0 5 ) ;耐药基因的表达与 FAB分型有关。结论　 AL患者 L RP、mdr1 和 展开更多
关键词 急性白血病 lrp mdr1 MRP 基因表达 预后 耐药性
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安徽地区绝经后妇女低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因多态性与骨密度的关系 被引量：3
13
作者 朱翔 章秋 +3 位作者 王佑民 王长江 杨洋 郭延云 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2007年第5期327-329,共3页
目的研究安徽地区绝经后妇女低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因(LRP5)Q89R和A1330V多态性位点与骨密度的关系。方法采用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测安徽地区247名绝经后妇女LRP5基因Q89R和A1330V多态性位点的基因型,双能X... 目的研究安徽地区绝经后妇女低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因(LRP5)Q89R和A1330V多态性位点与骨密度的关系。方法采用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测安徽地区247名绝经后妇女LRP5基因Q89R和A1330V多态性位点的基因型,双能X线骨密度仪测定腰椎和股骨的骨密度。结果本研究人群中,LRP5基因Q89R和A1330V多态性呈连锁不平衡(χ2=24.48,P<0.01)。Q89R位点QR组的股骨颈、Wards三角和大转子区骨密度明显低于QQ组,A1330V位点AV/VV组的股骨颈骨密度明显低于AA组。在调整年龄、身高、体重、BMI以及绝经年限这些影响因素后,Q89R多态位点与股骨颈和大转子区骨密度显著相关(P<0.05),而A1330V多态性位点则与各位点的骨密度均无相关性。结论LRP5基因Q89R多态性位点可能对绝经后妇女骨密度有影响,提示LRP5基因是影响骨密度的候选基因之一。 展开更多
关键词 lrp5 骨密度 基因多态性 绝经后
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小鼠LRP16基因打靶载体的构建和胚胎干细胞同源重组克隆鉴定 被引量：1
14
作者 伍志强 韩为东 +4 位作者 赵亚力 司艺玲 母义明 孟元光 Masatoshi Nomura 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2006年第3期167-171,共5页
目的既往研究表明LRP16基因是一个雌激素反应基因,其表达水平与乳腺癌细胞增殖及侵袭密切相关。为对该基因进行生理功能研究,本文构建了针对小鼠LRP16基因的打靶载体,转染胚胎干细胞(embryonicstem cell,ES cells)并筛选同源重组克隆。... 目的既往研究表明LRP16基因是一个雌激素反应基因,其表达水平与乳腺癌细胞增殖及侵袭密切相关。为对该基因进行生理功能研究,本文构建了针对小鼠LRP16基因的打靶载体,转染胚胎干细胞(embryonicstem cell,ES cells)并筛选同源重组克隆。方法PCR方法筛选129品系小鼠基因组文库中LRP16克隆,在第5外显子内插入SA-RIES-βgeo序列,构建插入失活型打靶载体并转染ES细胞,经G418筛选,挑取抗性克隆,Southern blot方法鉴定同源重组ES细胞克隆。结果将包含第5至11外显子的LRP16基因组片段亚克隆到pBluescript SKⅡ+载体,SA-IRES-βgeo序列的正确插入第五外显子中,打靶载体成功转染ES细胞,Southern blot结果显示具有一个打靶序列同源重组型插入的ES细胞克隆。结论成功构建了第五外显子插入失活型LRP16基因打靶载体并筛选到同源重组型ES细胞,为下一步建立LRP16缺失型小鼠并为从整体水平研究LRP16基因的生理功能奠定基础。 展开更多
关键词 lrp16 基因打靶 ES细胞
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PQ-LRP基因沉默对犬小孢子菌生长及毒力的影响 被引量：4
15
作者 张芳芳 张渊 +5 位作者 栾莉 王华 黄鑫琳 刘金鹏 赵晓宣 杨国玲 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期336-341,共6页
目的探讨PQ-LRP基因对犬小孢子菌生长及毒力的影响。方法野生株和干扰株分别于沙氏培养基(SDA)培养观察菌落形态;米饭培养基行扫描电镜(SEM)透射电镜(TEM)观察超微结构;构建豚鼠感染模型行直接镜检和组织病理检查观察致病情况;液体沙氏... 目的探讨PQ-LRP基因对犬小孢子菌生长及毒力的影响。方法野生株和干扰株分别于沙氏培养基(SDA)培养观察菌落形态;米饭培养基行扫描电镜(SEM)透射电镜(TEM)观察超微结构;构建豚鼠感染模型行直接镜检和组织病理检查观察致病情况;液体沙氏培养基加入L-半胱氨酸,RT-PCR检测PQ-LRP基因沉默前后mRNA表达的变化。结果菌落形态:干扰株较野生株生长受限;豚鼠模型:干扰株较野生株不易感染宿主;致病豚鼠毛发皮屑真菌镜检:野生株为发内外孢子,孢子多,菌丝粗细均匀,干扰株为发外孢子,孢子少,菌丝粗细不一、弯曲不自然;豚鼠模型:野生株真皮及皮下组织见感染性肉芽肿改变,干扰株感染性肉芽肿改变不明显;半胱氨酸对犬小孢子菌PQ-LRP基因影响:野生株随半胱氨酸的浓度增加PQ-LRP基因表达水平呈上升趋势,干扰株PQ-LRP基因表达水平无规律性。结论PQ-LRP基因抑制后犬小孢子菌形态有变化、毒力减弱,推测PQ-LRP基因可能是犬小孢子菌致头癣的可能毒力基因之一。 展开更多
关键词 犬小孢子菌 基因 PQ—lrp 毒力
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三种肿瘤耐药基因在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量：3
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作者 王燕 张婷 《中国热带医学》 CAS 2008年第1期21-22,25,共3页
目的探讨肺耐药蛋白(Lung resistance protein,LRP),多药耐药蛋白(Multidrug resistance-associated protein,MRP)和多药耐药基因(Multidrug resistance,MDR1)的mRNA在非小细胞肺癌(Non-small cell cancer,NSCLC)中共表达及临床意义。方... 目的探讨肺耐药蛋白(Lung resistance protein,LRP),多药耐药蛋白(Multidrug resistance-associated protein,MRP)和多药耐药基因(Multidrug resistance,MDR1)的mRNA在非小细胞肺癌(Non-small cell cancer,NSCLC)中共表达及临床意义。方法RT-PCR检测NSCLC冰冻组织中上述耐药基因的mRNA水平。结果LRP、MRP、MDR1 mRNA阳性率分别为71.2%、81.8%和37.9%;MRP与、MDR1、MRP与LRP、LRPYU MDR1及MRP、LRPYU MDR1共表达者分别为16.7%(11/66)、53.0%(35/66)、19.7%(13/66)及12.1%(8/66)。LRP与MRP阳性相关(r=0.47,p=0.001),LRP、MRP与MDR1无相关性(r=0.98,p=0.077;r=0.25,p=0.053).3种耐药基因表达在NSCLC各期、各分化组中差异无显著性(P≥0.05)。肺腺癌换了有效组LRP、MRP mRNA(0.53±0.08;0.41±0.01)及鳞癌化疗有效组LRP mRNA表达(0.42±0.03)明显低于换了无效组(1.14±0.3,0.82±0.04,0.97±0.01,P<0.05);LRP与MRP、LRP、MRP与MDR1共表达者,中位生存期明显缩短(P<0.05)。多变量Cox回归分析,仅LRP+MRP、LRP+MRP+MDR1共表达有预后意义。结论非小细胞肺癌原发耐药与LRP、MRP、MDR1共同作用有关。 展开更多
关键词 癌 非小细胞 肺 lrp基因 MRP基因 MDR1基因 基因表达
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非小细胞肺癌患者MDR1、FLK-1和LRP的表达及其临床意义 被引量：2
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作者 廖和和 常彦祥 +3 位作者 李斌 李寒春 王甲林 齐京鹏 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第8期1452-1455,共4页
目的:研究多药耐药基因(MDR1)、血管内皮生长因子受体(Flk-1)、肺耐药蛋白(LRP)基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法:用免组化技术(ABC法)对38例术前未进行化疗及放疗的NSCLC组织中MDR1、Flk-1、LRP表达进行检测。结果... 目的:研究多药耐药基因(MDR1)、血管内皮生长因子受体(Flk-1)、肺耐药蛋白(LRP)基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法:用免组化技术(ABC法)对38例术前未进行化疗及放疗的NSCLC组织中MDR1、Flk-1、LRP表达进行检测。结果:在38例非小细胞肺癌组织中,MDR1、Flk-1、LRP基因阳性表达率分别为42.1%(16/38)、57.9%(22/38)和44.7%(17/38),其共同表达率(MDR1+LRP)为13(34.2%),(Flk-1+LRP)为12(31.6%),(Flk-1+MDR1+LRP)为10(26.3%);MDR1蛋白阳性的肺癌患者出现肺门淋巴结转移率较高,与TNM分期和有无淋巴结转移等各项病理因素无明显相关(P>0.05);LRP的表达与肺癌的组织学类型有关,腺癌中LRP的表达明显高于鳞癌(P<0.05),高分化高表达,而与TNM分期、有无淋巴结转移无明显相关(P>0.05);Flk-1与TNM分期相关,(P<0.05),Flk-1、LRP蛋白表达阳性的肺癌患者出现肺门淋巴结转移率较高,但无统计学意义(P>0.05);MDR1+LRP、Flk-1+LRP和Flk-1+MDR1+LRP基因的表达率在NSCLC的不同病理类型及组织分化程度的表达差异无统计学意义(P>0.05);MDR1+LRP、复发与患者的预后有关(P<0.05)。结论:MDR1、FLK-l和LRP基因蛋白产物的检测对肺癌患者的诊治和预后评估有积极意义。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 MDR1基因 FLK-1基因 lrp基因 免疫组化
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慢生大豆根瘤菌与竞争结瘤相关的lrp基因的克隆 被引量：1
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作者 武波 唐咸来 +4 位作者 柏学亮 唐东阶 吕安国 唐纪良 马庆生 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期399-402,共4页
通过对重组质粒 pGXN30 0中的 2 .3kbEcoRI片段测序分析发现 ,其中含有一完整的lrp基因和部分 putA基因 ,与King等报道的B .japonicum的lrp基因DNA序列有 88%同源性。应用Tn5gusA5定位诱变的方法获得了gusA基因表达的根瘤菌lrp基因突变... 通过对重组质粒 pGXN30 0中的 2 .3kbEcoRI片段测序分析发现 ,其中含有一完整的lrp基因和部分 putA基因 ,与King等报道的B .japonicum的lrp基因DNA序列有 88%同源性。应用Tn5gusA5定位诱变的方法获得了gusA基因表达的根瘤菌lrp基因突变体GX2 0 10 8。植株试验表明 ,突变株结瘤时间明显推迟 。 展开更多
关键词 慢生大豆根瘤菌 竞争结瘤 lrp基因 克隆 序列分析
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HER-2及LRP在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量：3
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作者 侯慧 高爽 +2 位作者 任秋华 肖明明 景士兵 《中国癌症防治杂志》 CAS 2013年第4期315-319,共5页
目的探讨非小细胞肺癌组织中表皮生长因子受体-2(HER-2)和肺耐药蛋白(LRP)的表达及与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学(IHC)EnVision二步法,检测70例非小细胞肺癌组织和35例相应癌旁正常肺组织中HER-2和LRP的表达情况,并结合... 目的探讨非小细胞肺癌组织中表皮生长因子受体-2(HER-2)和肺耐药蛋白(LRP)的表达及与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学(IHC)EnVision二步法,检测70例非小细胞肺癌组织和35例相应癌旁正常肺组织中HER-2和LRP的表达情况,并结合其临床病理特征进行分析。结果在非小细胞肺癌组织中,HER-2和LRP的阳性表达率分别为31.4%、72.9%,均分别高于癌旁正常肺组织的表达(P<0.05)。HER-2在腺癌中的阳性表达率为46.0%,在鳞癌中为15.2%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。HER-2的表达与淋巴结转移、病理分级、临床分期间无明显差异(P>0.05);LRP在腺癌中的阳性表达率为78.4%,在鳞癌中为66.7%(P>0.05)。LRP的表达与淋巴结转移、病理分级及临床分期间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HER-2、LRP在非小细胞肺癌组织中有不同程度的表达,检测两者有助于该癌化疗药物的选择及预后的判断。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 HER-2 lrp 基因表达 免疫组织化学法 预后
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LRP5基因单核苷酸多态性与儿童糖皮质激素性骨质疏松症的相关性研究 被引量：3
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作者 白鹤 王道喜 +1 位作者 吴增丽 李现令 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2021年第4期398-402,共5页
目的探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)基因的两个SNP位点(rs901823和rs3736228)多态性与儿童糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoids-induced osteoporosis,GIOP)的相关性。方法选择2015年1月至2020年12月在北京爱育华妇儿医院和... 目的探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)基因的两个SNP位点(rs901823和rs3736228)多态性与儿童糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoids-induced osteoporosis,GIOP)的相关性。方法选择2015年1月至2020年12月在北京爱育华妇儿医院和首都医科大学附属北京儿童医院就诊的87例GIOP患儿作为研究对象,并纳入同期在本院应用糖皮质激素治疗但骨量正常的100例患儿作为对照组。采用毛细管电泳和片段分析(SNaPshot)技术对SNP位点rs901823(T>C)、rs3736228(C>T)进行基因分型,采用定量实时荧光定量聚合酶链式反应检测法测定LPR5基因mRNA的相对表达量。结果对于LRP5基因rs901823位点,GIOP组和对照组的TT、TC、CC基因型分布差异有统计学意义(χ^(2)=14.176,P=0.001)。相对于TT基因型,TC和CC基因型携带者发生GIOP的风险均更高(P<0.05)。对于rs3736228位点,GIOP组和对照组的的CC、CT、TT基因型分布差异有统计学意义(χ^(2)=9.597,P=0.008)。与CC携带者相比,CT基因型携带者发生GIOP的风险显著增加(P<0.05)。GIOP组和对照组的rs901823位点T、C等位基因频率分布差异有统计学意义(χ^(2)=17.298,P<0.001),rs3736228位点的C、T等位基因频率分布差异也有统计学意义(χ^(2)=9.356,P=0.002)。GIOP患儿的LRP5基因mRNA相对表达量为(1.34±0.26),显著低于对照组的LRP5基因mRNA表达量(3.06±0.42)(t=8.248,P<0.001)。在GIOP患儿中,rs901823位点TT、TC、CC基因型患者的LRP5基因mRNA相对表达量两两比较差异有统计学意义(P<0.001);rs901823位点CC、CT、TT基因型患者的LRP5基因mRNA相对表达量两两比较结果显示,TT组和CT组间差异无统计学意义(P>0.05),但CC组的表达量显著高于CT组和TT组(P<0.05)。结论LRP5基因的rs901823和rs3736228多态性与GIOP的发生具有相关性,可作为预测患儿GIOP的遗传标志。 展开更多
关键词 糖皮质激素性骨质疏松症 lrp5 基因 单核苷酸多态性
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