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生产用重组哺乳动物细胞株的克隆筛选方法 被引量：2
1
作者 徐睿瑶 蔡洁行 张玉彬 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第5期746-752,共7页
克隆筛选是重组细胞株构建过程中的关键步骤。除了早期的克隆环,有限稀释法、半固体培养法、流式细胞术和细胞分选是目前生物制药行业运用最为广泛的克隆筛选方法。该文综述了克隆筛选方法的原理、特点,介绍了促进方法发展的其他技术如... 克隆筛选是重组细胞株构建过程中的关键步骤。除了早期的克隆环,有限稀释法、半固体培养法、流式细胞术和细胞分选是目前生物制药行业运用最为广泛的克隆筛选方法。该文综述了克隆筛选方法的原理、特点,介绍了促进方法发展的其他技术如单细胞成像和自动化,比较了不同克隆筛选方法的优缺点。针对如何选择合适的克隆筛选方法提出了建议,为从事相关研究与生产领域的科研人员提供帮助。 展开更多
关键词 克隆筛选 有限稀释法 半固体培养法 流式细胞术和细胞分选 单细胞成像 自动化
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应用极限稀释细胞克隆形成实验方法检测血清活力
2
作者 杜连心 赵诲文 余晓菲 《中国实用医刊》 2011年第5期48-50,共3页
目的通过4批次血清活力检验与结果分析，介绍和评价极限稀释（LD）细胞克隆形成实验方法用于血清活力测定的实用性与优缺点。方法将检验细胞作极限稀释，极限值为13，使克隆单位内平均13个细胞，然后加入不同浓度的检验血清组，每1个浓... 目的通过4批次血清活力检验与结果分析，介绍和评价极限稀释（LD）细胞克隆形成实验方法用于血清活力测定的实用性与优缺点。方法将检验细胞作极限稀释，极限值为13，使克隆单位内平均13个细胞，然后加入不同浓度的检验血清组，每1个浓度为1个克隆组，每组50个左右克隆单位；克隆培养5～7d左右，计数克隆阴性单位数。应用泊松分布函数处理实验数据，确定血清活力等级。结果用LD细胞克隆形成实验方法比较准确地测出4批次血清的活力：FBS-1活力等于Ⅱ级，Ⅲ级〉FBS-2活力〉Ⅳ级，FBS-3等于Ⅲ级，FBS-4无活力。结论LD细胞克隆形成实验方法用于检验血清活力，能准确反映血清活力状况，有较大的优势。 展开更多
关键词 极限稀释方法 克隆形成试验 血清活力检测
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H3N2亚型猪流感病毒中国分离株的克隆纯化及生物学特性 被引量：17
3
作者 李海燕 辛晓光 +4 位作者 于康震 杨焕良 李雁冰 赵朴 毕英佐 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期560-563,共4页
以有限稀释克隆法对 2 9株 H3N2亚型猪流感病毒 ( SIV)不同地区分离株进行纯化 ,并对其生物学特性进行了研究。结果 ,8株对鸡呈现中等致病力 ,2 1株对鸡呈现低致病力。不同地区 SIV分离株 (第 5代 )的 EID50 差异较大 ,以安徽分离株最... 以有限稀释克隆法对 2 9株 H3N2亚型猪流感病毒 ( SIV)不同地区分离株进行纯化 ,并对其生物学特性进行了研究。结果 ,8株对鸡呈现中等致病力 ,2 1株对鸡呈现低致病力。不同地区 SIV分离株 (第 5代 )的 EID50 差异较大 ,以安徽分离株最高 ,为 10 - 1 0 .77/ 0 .2 m L,其他毒株在 10 - 5.5～ 10 - 1 0 .56 / 0 .2 m L 之间。黑龙江省分离株和浙江省分离株的L D50 高达 10 - 2 .84 / 0 .1m L ,其他分离株在 10 - 1 .1 7～ 10 - 2 .56 / 0 .1m L之间。经鸡胚分离传代后 ,SIV分离株均能凝集0 .7%人“O”型血、绵羊、兔、豚鼠、小鼠、大鼠及鸡的红细胞 ,其红细胞凝集谱的差异主要表现在对马、牛、驴、猪红细胞的凝集特性上。大部分 SIV分离株为热不稳定型 ,部分毒株表现为中等热稳定型和热稳定型。从其抗原特性看 ,大部分 SIV分离株表现为亲和相 ,对 AIV参考毒株 DKUK6 3和 SIV参考毒株 SWTN77表现出较高的 HI滴度 ;部分分离株经鸡胚传代后 ,出现了相别的变异。 展开更多
关键词 猪 流感 流感病毒 H3N2亚型 中国分离株 克隆 纯化 生物学特性 有限稀释克隆法
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