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β-半乳糖苷酶基因(lacZ)在大型经济海藻裙带菜中的瞬间表达 被引量：6
1
作者 于道展 秦松 +1 位作者 孙国琼 曾呈奎 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第8期93-95,共3页
用高压氦气式基因枪将SV4 0启动子驱动下的 β 半乳糖苷酶基因 (lacZ)导入大型经济海藻裙带菜不同部位的组织切块中 ,4 8小时后染色检测 ,在假根、孢子叶和叶片中均检测到了lacZ的瞬间表达。研究还发现 ,对于裙带菜组织块的基因枪法转... 用高压氦气式基因枪将SV4 0启动子驱动下的 β 半乳糖苷酶基因 (lacZ)导入大型经济海藻裙带菜不同部位的组织切块中 ,4 8小时后染色检测 ,在假根、孢子叶和叶片中均检测到了lacZ的瞬间表达。研究还发现 ,对于裙带菜组织块的基因枪法转化 ,压强130 0psi优于 110 0psi。另外在裙带菜中没有发现半乳糖苷酶的染色本底。本文结果提示 :基因枪法是有效的裙带菜遗传转化方法 ;lacZ可以作为裙带菜基因工程研究的报告基因 ,SV4 0启动子能有效驱动外源基因在裙带菜中表达 ,没有组织特异性。这是lacZ在裙带菜中表达的首次报道 。 展开更多
关键词 Β-半乳糖苷酶基因 大型经济海藻 裙带菜 lacz SV40启动子 基因枪法 瞬间表达 培育 基因工程
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报告基因技术及其在土壤质量监测中的应用 被引量：7
2
作者 茆婷 何伟 +2 位作者 钟文辉 林先贵 董元华 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期6733-6740,共8页
报告基因包括lux、gfp、lacZ、inaZ、luc、cat、xylE及uidA等,其中土壤质量监测中最常用的报告基因有lux、gfp、lacZ和inaZ4种。从不同角度比较了土壤质量监测中最常用的上述4种报告基因,简要阐述了应用于土壤质量监测中的微生物监测报... 报告基因包括lux、gfp、lacZ、inaZ、luc、cat、xylE及uidA等,其中土壤质量监测中最常用的报告基因有lux、gfp、lacZ和inaZ4种。从不同角度比较了土壤质量监测中最常用的上述4种报告基因,简要阐述了应用于土壤质量监测中的微生物监测报告基因的定义、类别、性质及特点,展示了报告基因表达系统的构建方式与检测方法,总结了报告基因技术在监测土壤重金属、污染物质、营养物质等化学物质以及在土壤微生物及其活动、土壤根际微生物与土壤中原生动物、植物间的相互作用等方面的应用。讨论了目前报告基因技术应用的局限性及未来研究方向和重点。 展开更多
关键词 报告基因技术 LUX GFP lacz inaZ 土壤质量监测 土壤化学物质
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副溶血弧菌LacZ报告基因融合实验方法的建立与应用 被引量：6
3
作者 杜德燕 张义全 +2 位作者 郭兆彪 彭广能 周冬生 《生物技术通讯》 CAS 2012年第4期550-553,共4页
目的:建立副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的LacZ报告基因融合实验方法。方法:PCR扩增靶基因的整个启动子区序列,并将其直接克隆入pHRP309质粒中,构建重组质粒;将重组质粒VPA1513转入VP野生株(WT)和opaR突变株(ΔopaR)中,而后... 目的:建立副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的LacZ报告基因融合实验方法。方法:PCR扩增靶基因的整个启动子区序列,并将其直接克隆入pHRP309质粒中,构建重组质粒;将重组质粒VPA1513转入VP野生株(WT)和opaR突变株(ΔopaR)中,而后通过比较两者β半乳糖苷酶活性的差异,确定OpaR对VPA1513的调控关系,以检验实验的稳定性。结果:构建出9个VP生物膜或毒力相关基因的LacZ重组质粒;OpaR对VPA1513的转录具有抑制作用。结论:建立了VP的LacZ报告基因融合实验方法,为后续转录调控机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 lacz报告基因 融合实验 调控子蛋白OpaR
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一种lacZ报告基因T载体的构建及其在沙门氏菌鞭毛主调控基因flhDC表达活性测定中的应用 被引量：4
4
作者 刘蕾 李永霞 +2 位作者 刘金泽 王明晓 余旭平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期711-716,共6页
为研究5'-非翻译区(UTR)对沙门氏菌鞭毛主调控基因flhDC表达的影响,本研究以鼠伤寒沙门氏菌542(STM542)基因组DNA为模板,扩增含不同长度5'-UTR的flhDC全长基因(共5种),并将其克隆至含阿拉伯糖启动子的质粒PBAD33中。通过测定含... 为研究5'-非翻译区(UTR)对沙门氏菌鞭毛主调控基因flhDC表达的影响,本研究以鼠伤寒沙门氏菌542(STM542)基因组DNA为模板,扩增含不同长度5'-UTR的flhDC全长基因(共5种),并将其克隆至含阿拉伯糖启动子的质粒PBAD33中。通过测定含阿拉伯糖的半固体平板上包含不同长度flhDC基因的重组大肠杆菌菌落的直径,初步评估不同5'-UTR调控序列对flhDC基因表达的影响。为精确测定不同调控序列的活性差异,本实验室进一步构建了以lacZ为报告基因的T载体,并将扩增的对应于前4种flhDC基因调控序列片段克隆于构建的T载体,通过测定其β-半乳糖苷酶活性获得相应调控序列的活性参数。结果显示,在阿拉伯糖诱导下,对应于1572bp的flhDC基因片段的调控序列活性最低,对应于1201bp的flhDC基因片段的调控序列活性最高,本实验为进一步研究flhDC基因的调控功能奠定基础。 展开更多
关键词 flhDC基因 鞭毛 lacz报告基因 T载体
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基因枪法建立紫菜丝状体遗传转化模式
5
作者 张喆 姜鹏 +3 位作者 杨锐 费修绠 唐学玺 秦松 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期204-207,共4页
以坛紫菜和条斑紫菜的自由丝状体为材料,利用基因枪法分别转化CaMV35S、SV40、FCP、Amt、Ubi 5种启动子与报告基因组合,转化后48h进行原位组织化学染色检测,首次针对重要经济红藻紫菜的自由丝状体建立并优化遗传转化技术,为紫菜研究提... 以坛紫菜和条斑紫菜的自由丝状体为材料,利用基因枪法分别转化CaMV35S、SV40、FCP、Amt、Ubi 5种启动子与报告基因组合,转化后48h进行原位组织化学染色检测,首次针对重要经济红藻紫菜的自由丝状体建立并优化遗传转化技术,为紫菜研究提供了新工具。结果显示,SV40启动子可以驱动laeZ报告基因(编码β-半乳糖苷酶)在紫菜丝状体中的瞬间表达,空白与阴性对照未检测到本底;其它4种启动子未检测到基因表达。进一步优化实验发现,在可裂膜650psi、轰击距离6cm下获得最高转化效率为8.0×10^(-5),经定量检测与双因子方差分析,是最佳转化参数,提示基因枪参数对外源基因转化效率具显著影响。 展开更多
关键词 紫菜 丝状体 基因枪 lacz报告基因 SV40启动子
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含LacZ报告基因的pcDNA3.0裸质粒转染青光眼滤过术后家兔模型的表达 被引量：1
6
作者 喻箭 李平 +1 位作者 周元国 叶剑 《国际眼科杂志》 CAS 2007年第3期658-660,共3页
目的:观察含LacZ报告基因的裸pcDNA3.0重组质粒在体转染小梁切除术后家兔眼的表达情况,建立动物模型,评价其应用价值,为利用裸质粒对抗青光眼术后瘢痕行基因治疗打下基础。方法:制作家兔双眼小梁切除术后模型,采用自身对照,术后1d在右... 目的:观察含LacZ报告基因的裸pcDNA3.0重组质粒在体转染小梁切除术后家兔眼的表达情况,建立动物模型,评价其应用价值,为利用裸质粒对抗青光眼术后瘢痕行基因治疗打下基础。方法:制作家兔双眼小梁切除术后模型,采用自身对照,术后1d在右眼术区局部注射含LacZ报告基因的pcD-NA30裸质粒0.1mL(100μg),左眼术区注射等剂量空质粒,通过X-gal染液原位染色检测注射后1,3,6,15d组织标本中报告基因LacZ的表达情况,绘制感染效率曲线。结果:重组pcDNA3.0裸质粒100μg可以转染术后滤过区结膜下成纤维细胞并表达携带的基因,表达高峰期3～6d,15d时仍可检测到少量表达细胞,对照侧各个时相点均未检测到表达。结论:重组pcDNA3.0裸质粒可以携带外源性基因转染家兔小梁切除术后术区成纤维细胞,适用于对青光眼滤过术后动物模型行基因治疗。 展开更多
关键词 小梁切除术 基因治疗 裸质粒 lacz报告基因
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以LacZ为报告基因探讨促进基因表达及基因免疫应答物质的筛选
7
作者 陈创夫 余兴龙 +5 位作者 马正海 李红卫 李作生 吕宗吉 涂长春 殷震 《塔里木农垦大学学报》 2000年第3期1-7,共7页
应用分子生物学技术构建了LacZ报告基因的pcDLacZ真核表达载体 ,并对多种促进基因表达的物质进行了筛选。应用筛选的促进基因表达物质对pcDST基因疫苗的免疫增强效果进行了观察。结果 :构建的LacZ报告基因的pcDLacZ真核表达载体 ,肌注... 应用分子生物学技术构建了LacZ报告基因的pcDLacZ真核表达载体 ,并对多种促进基因表达的物质进行了筛选。应用筛选的促进基因表达物质对pcDST基因疫苗的免疫增强效果进行了观察。结果 :构建的LacZ报告基因的pcDLacZ真核表达载体 ,肌注后 1天就有表达 ,到第 7天达到高峰。通过对多种促进基因表达的物质进行筛选证明 ,4.5 %斯苯、1 %甘油、2 5 %蔗糖有明显促进基因的表达作用。 4.5 %斯苯、1 %甘油能促进pcDST猪瘟基因疫苗的免疫效果。表明 :4.5 %斯苯、1 展开更多
关键词 lacz报告基因 基因疫苗 基因表达 基因免疫应答
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