氨基酮戊酸光动力疗法抑制成纤维细胞生长因子10诱导的HaCaT细胞过度角化及增殖的机制研究 被引量：4

1

作者 易飞 Maya Valeska Gozali 张家安 周炳荣 骆丹 张丽超 王申 刘娟 吴红巾 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期792-796,共5页

目的 探讨氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）对成纤维细胞生长因子10（FGF-10）诱导的HaCaT细胞过度角化及增殖的作用及其机制。 方法 将培养的HaCaT细胞分为4组：空白对照组（无任何处理），FGF-10组（加入FGF-10孵育24 h），ALA-PDT组... 目的 探讨氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）对成纤维细胞生长因子10（FGF-10）诱导的HaCaT细胞过度角化及增殖的作用及其机制。 方法 将培养的HaCaT细胞分为4组：空白对照组（无任何处理），FGF-10组（加入FGF-10孵育24 h），ALA-PDT组（ALA孵育24 h后红光照射），FGF-10 ＋ ALA-PDT组（FGF-10孵育24 h后，再加ALA孵育24 h，红光照射）。用CCK-8法检测各组细胞增殖活性，Western印迹法检测K1、K6、K16及角质形成细胞生长因子受体（KGFR）的含量，ELISA法检测各组细胞上清液中白细胞介素1α（IL-1α）蛋白表达，免疫荧光检测各组细胞KGFR和K6蛋白表达水平。统计学分析采用析因设计的方差分析和单因素方差分析。结果 析因分析显示，ALA-PDT和FGF-10对HaCaT细胞增殖无交互作用（F交互 = 1.369，P = 0.276），FGF-10对HaCaT细胞增殖有促进作用（FFGF-10 = 20.853，P 〈 0.05），而ALA-PDT有抑制作用（FALA-PDT = 24.822，P 〈 0.05）。与空白对照组细胞增殖活性（A值为0.924 ± 0.024）比较，FGF-10组（1.233 ± 0.099）显著升高（P 〈 0.05），而ALA-PDT组（0.718 ± 0.107）显著降低（P 〈 0.05），FGF-10 ＋ ALA-PDT组（0.901 ± 0.014）较FGF-10组显著降低（P 〈 0.05）。Western印迹法显示，FGF-10可促进K1、K6、K16蛋白和KGFR的表达（均P 〈 0.05），而ALA-PDT抑制这些蛋白的表达（均P 〈 0.05），FGF-10 ＋ ALA-PDT组K1、K6、K16和KGFR的相对表达量与FGF-10组比较均显著降低（均P 〈 0.05）。ELISA法显示，FGF-10会增加HaCaT细胞IL-1α蛋白分泌（P 〈 0.05），但ALA-PDT对其没有影响（P = 0.467）。此外，免疫荧光检测显示，FGF-10增加HaCaT细胞K6和KGFR免疫荧光强度（P 〈 0.05），而ALA-PDT降低K6和KGFR免疫荧光强度（P 〈 0.05），FGF-10 ＋ ALA-PDT组K6和KGFR免疫荧光强度显著低于FGF-10组（P 〈 0.05）。 结论 ALA-PDT能抑制FGF-10诱导的HaCaT细胞过度角化及增殖，其机 展开更多

关键词 角蛋白细胞 氨基酮戊酸 成纤维细胞生长因子10 细胞增殖 角蛋白1 角蛋白6 角蛋白16 白细胞介素1Α 痤疮 光动力疗法 HACAT细胞

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细胞分化标志分子在扁平苔藓皮损中异常表达的研究 被引量：3

2

作者 田燕 刘玮 +1 位作者 吴延芳 蔡瑞康 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期482-484,共3页

通过研究扁平苔藓皮损中角质形成细胞分化标志的表达情况,分析扁平苔藓的病理机制。本实验应用免疫组化方法以银屑病和正常皮肤为对照,检测扁平苔藓中TGk、Filaggrin、K17和K16的原位表达。结果显示TGk和Filaggrin在扁平苔藓皮损表皮中... 通过研究扁平苔藓皮损中角质形成细胞分化标志的表达情况,分析扁平苔藓的病理机制。本实验应用免疫组化方法以银屑病和正常皮肤为对照,检测扁平苔藓中TGk、Filaggrin、K17和K16的原位表达。结果显示TGk和Filaggrin在扁平苔藓皮损表皮中表达增强,K17和K16在扁平苔藓皮损表皮中出现阳性染色,银屑病皮损中上述标志分子有类似表达,而正常皮肤中则无此现象。提示扁平苔藓皮损中角质形成细胞存在着过度增生和异常分化,上述增生分化标志可能是其病理改变的分子基础。 展开更多

关键词 角质形成细胞转谷酰胺酶 细丝聚集素 角蛋白17 角蛋白16 扁平苔藓 皮肤损害 免疫组织化学 细胞分化

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抗角蛋白16单克隆抗体对角质形成细胞增殖活性的影响 被引量：2

3

作者 万业宏 李承新 +4 位作者 刘玉峰 高天文 夏汝山 党育平 武彩霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期284-286,共3页

目的研究抗角蛋白单克隆抗体(mAb)对体外培养的角质形成细胞增殖活性与细胞周期的影响。方法以无血清培养基体外原代培养角质形成细胞。应用3H-TdR掺入DNA合成测定法,观察抗角蛋白16mAb(anti-K16mAb)对角质形成细胞代谢增殖的影响。用... 目的研究抗角蛋白单克隆抗体(mAb)对体外培养的角质形成细胞增殖活性与细胞周期的影响。方法以无血清培养基体外原代培养角质形成细胞。应用3H-TdR掺入DNA合成测定法,观察抗角蛋白16mAb(anti-K16mAb)对角质形成细胞代谢增殖的影响。用流式细胞仪分析anti-K16mAb作用后角质形成细胞的细胞周期变化。结果mAb作用后,角质形成细胞样品的cpm降低,并呈抗体剂量依赖方式。流式细胞仪分析表明,处于S期的细胞比例由27%上升至42.2%,同时处于G1期与G2期的细胞比例分别相应下降。结论anti-K16mAb可抑制体外培养的角质形成细胞的增殖活性,且将细胞阻滞于S期,无法进入G2期与M期分裂增殖。 展开更多

关键词 抗角蛋白单克隆抗体 角蛋白16 角质形成细胞 增殖活性 细胞周期

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角蛋白K6、K16在寻常性银屑病皮损中的表达及其临床意义 被引量：1

4

作者 张晓光 四荣联 +2 位作者 李玉平 马耀辉 李艳玲 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期659-661,共3页

目的:探讨角蛋白K6、K16在银屑病发病机制中的地位。方法:用免疫组化法,检测30例银屑病患者皮损处和10例正常对照者皮肤角质形成细胞中角蛋白K6和K16的表达水平。结果:①银屑病组患者皮损处表皮角质形成细胞中K6、K16的表达水平与正常... 目的:探讨角蛋白K6、K16在银屑病发病机制中的地位。方法:用免疫组化法,检测30例银屑病患者皮损处和10例正常对照者皮肤角质形成细胞中角蛋白K6和K16的表达水平。结果:①银屑病组患者皮损处表皮角质形成细胞中K6、K16的表达水平与正常对照组相比,差异具有显著性,其中,病例组棘细胞层K6、K16的表达与对照组相比,差异具有极显著性;②角蛋白K6、K16在银屑病进行期和稳定期的表达差异无显著性,但分别与消退期银屑病相比差异均具有显著性:③角蛋白K6、K16的表达在急性点滴状和慢性斑块状银屑病间差异无显著性。结论:角蛋白K6、K16在银屑病发病机制中可能起重要作用,这两个指标有望作为监测银屑病活动性的指标。 展开更多

关键词 银屑病 寻常性 免疫组化 角蛋白K6 角蛋白K16

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Ⅰ型先天性甲肥厚患者角蛋白16和6A基因多态性研究 被引量：2

5

作者 康晓静 孙淼 +5 位作者 杨威 于敏 鞠强 罗会元 夏隆庆 张学 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期67-70,共4页

目的研究Ⅰ型先天性甲肥厚患者角蛋白16和6A基因多态现象。方法提取患者及其家系成员外周血基因组DNA,其中1个家系有家族史,有4代7例患者,另一为1个散发病例,无家族史。采用聚合酶链反应扩增KRT16和KRT6A基因的全部编码序列,DNA直接测序... 目的研究Ⅰ型先天性甲肥厚患者角蛋白16和6A基因多态现象。方法提取患者及其家系成员外周血基因组DNA,其中1个家系有家族史,有4代7例患者,另一为1个散发病例,无家族史。采用聚合酶链反应扩增KRT16和KRT6A基因的全部编码序列,DNA直接测序,限制性内切酶反应验证。结果有家族史患者KRT16基因DNA测序时发现其2￣3外显子间内含子序列缺失1个碱基G,导致此后的测序结果有很多套峰(出现很多N),经限制性内切酶反应证实是一种多态现象而不是基因突变;同时KRT6A基因第4外显子测序时发现已知的879C>T单核苷酸多态性改变。散发患者的KRT16基因1252C>T单碱基置换,418位密码子CGC被TGC替代,精氨酸变为半胱氨酸(R418C)。但患者表型正常的母亲为1252T纯合子,表型正常的父亲为1252C纯合子,提示1252C>T属于多态性改变;同KRT6A基因的第1外显子检出已知的483T>C和495A>G单核苷酸多态性改变。结论本研究在中国Ⅰ型先天性甲肥厚患者中发现新的、可引起编码氨基酸改变的单核苷酸多态性,同时检测到已知的单核苷酸多态性。 展开更多

关键词 患者 改变 先天性 肥厚 角蛋白16 基因 单核苷酸多态性 碱基 外显子 限制性内切酶

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皮肤局部外涂IL-20,K16反义寡核苷酸乳剂对银屑病样皮损的影响

6

作者 樊平申 付萌 +1 位作者 廖文俊 刘玉峰 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第4期348-350,共3页

目的 :研究白细胞介素 2 0 (IL 2 0 ) ,K16反义寡核苷酸乳剂皮肤局部外涂对豚鼠银屑病样皮损的影响 .方法 :用5 0g·L-1心得安乳剂外涂豚鼠耳背部皮肤成功诱导银屑病样动物模型 ,然后分别以IL 2 0和K16反义寡核苷酸、正义寡核苷酸... 目的 :研究白细胞介素 2 0 (IL 2 0 ) ,K16反义寡核苷酸乳剂皮肤局部外涂对豚鼠银屑病样皮损的影响 .方法 :用5 0g·L-1心得安乳剂外涂豚鼠耳背部皮肤成功诱导银屑病样动物模型 ,然后分别以IL 2 0和K16反义寡核苷酸、正义寡核苷酸乳剂及单纯乳剂基质作用于皮损 ,进而通过HE染色观察皮损的变化和原位杂交检测其表达的水平 .结果 :IL 2 0反义寡核苷酸治疗组较正义寡核苷酸组及单纯乳剂基质对照组皮损评分显著降低 (4 0± 1 0vs 7 0± 0 9,7 6± 1 2 ,P <0 0 1) ;K16反义寡核苷酸治疗组较正义寡核苷酸组及单纯乳剂基质对照组皮损评分也有降低 (5 2± 1 0vs 7 2± 1 0 ,7 6± 1 2 ,P <0 0 5 ) .治疗组IL 2 0和K16的表达与对照组相比均有不同程度的降低 ,具有阳性杂交信号的细胞数量减少 ,信号强度减弱 .结论 :IL 2 0和K16反义寡核苷酸能够抑制豚鼠银屑病样皮损的发展 ,甚至使其逆转 ;IL 2 0和K16反义寡核苷酸乳剂外涂可以抑制靶mRNA的水平及表达 . 展开更多

关键词 皮肤局部外涂 反义寡核苷酸乳剂 银屑病样皮损 发病机制 角蛋白16 白细胞介素20 治疗

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角蛋白16在皮肤屏障功能中的作用 被引量：1

7

作者 李帅 张建忠 栗玉珍 《国际皮肤性病学杂志》 2016年第1期50-53,共4页

角蛋白16是表皮角质形成细胞主要的结构蛋白之一,在维持细胞功能及皮肤屏障功能方面起着重要作用.角蛋白16的表达不仅高度依赖角质形成细胞状态和分化程度,在不同类型的上皮细胞内表达程度也不同,当角蛋白16的表达异常时,病变部位的皮... 角蛋白16是表皮角质形成细胞主要的结构蛋白之一,在维持细胞功能及皮肤屏障功能方面起着重要作用.角蛋白16的表达不仅高度依赖角质形成细胞状态和分化程度,在不同类型的上皮细胞内表达程度也不同,当角蛋白16的表达异常时,病变部位的皮肤屏障功能会受到不同程度的破坏,未受累皮肤的屏障功能也会受到影响,不仅皮肤渗透屏障功能受到影响,还会引起皮肤炎症反应和免疫反应,导致机体受到进一步损害. 展开更多

关键词 角蛋白16 角蛋白细胞 渗透 免疫 屏障 keratin-16

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角蛋白16在喉癌中的表达及临床意义

8

作者 马丽娟 肖旭平 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2013年第2期92-94,共3页

目的探讨角蛋白16(KRT16)在喉癌中的作用及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR对KRT16基因在20例喉癌及癌旁正常黏膜组织中基因水平进行定量检测,同时制作组织芯片应用免疫组化方法检测其在50例喉癌及癌旁正常黏膜组织中蛋白水平的表达... 目的探讨角蛋白16(KRT16)在喉癌中的作用及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR对KRT16基因在20例喉癌及癌旁正常黏膜组织中基因水平进行定量检测,同时制作组织芯片应用免疫组化方法检测其在50例喉癌及癌旁正常黏膜组织中蛋白水平的表达。结果喉癌组及癌旁正常黏膜组KRT16 mRNA的相对表达量分别为0.732±0.201和0.201±0.134,KRT16蛋白的阳性率分别为84.0%(42/50)和22.2%(10/45),两组比较差异均有统计学意义;KRT16的表达与与患者性别、年龄无显著相关性,而与TNM分期、淋巴结转移有显著相关。结论KRT16在喉癌中的表达与肿瘤的发生、侵袭和转移密切相关,可能成为喉癌新的肿瘤标志物或预后因子。 展开更多

关键词 喉肿瘤 角蛋白16 免疫组织化学 微阵列分 析 组织芯片

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子宫颈非典型不成熟鳞状上皮化生与子宫颈鳞状上皮内瘤变Ⅲ级形态学及增殖分化特征比较 被引量：9

9

作者 贾薇 潘晓琳 +5 位作者 陆天才 胡文浩 蒋金芳 李洪安 陶林 杨安强 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期423-428,共6页

目的探讨子宫颈非典型性不成熟鳞状上皮化生(AIM)与子宫颈CINⅢ形态学及增殖分化特征的差异。方法采用形态学观察,AB黏液组化染色,细胞增殖相关抗原Ki-67和角蛋白(CK)10、14免疫组化染色方法,观察55例原诊断为CINⅢ的病例和14例子宫颈... 目的探讨子宫颈非典型性不成熟鳞状上皮化生(AIM)与子宫颈CINⅢ形态学及增殖分化特征的差异。方法采用形态学观察,AB黏液组化染色,细胞增殖相关抗原Ki-67和角蛋白(CK)10、14免疫组化染色方法,观察55例原诊断为CINⅢ的病例和14例子宫颈息肉伴成熟性鳞状上皮化生(OSM)组织病理学特征,黏液残留情况,细胞增殖活性和分化程度;采用半巢式PCR检测HPV16E6DNA。结果(1)参照Crum的组织学诊断标准,在CINⅢ中有1例经组织形态观察符合AIM的诊断标准,即重新诊断为AIM;(2)根据鳞状上皮中的黏液残留情况,从55例CINⅢ中鉴别出7例AIM;(3)AIM的Ki-67表达高于OSM(P=0.022),明显低于CINⅢ(P=0.000)差异有统计学意义;(4)CK10在AIM和CINⅢ中的表达差异有统计学意义(P=0.000);CK14在AIM和CINⅢ组间的表达差异无统计学意义(P=1.000);(5)AIM的HPV16感染检出率为71.4%与CINⅢ的检出率85.4%相比差异无统计学意义(P=0.321)。结论在Crum的AIM形态学诊断标准基础上,结合本研究中各项指标的研究结果,本研究提出AIM与CINⅢ的鉴别诊断依据:①核分裂象数≤15/10HPF,位于上皮下1/3层;②病理性核分裂象罕见;③AB染色显示有黏液残留;④Ki-67PI<50%;⑤CK10弥漫表达于除基底副基底层外黏膜上皮各层。 展开更多

关键词 子宫颈疾病 非典型性不成熟鳞状上皮化生 黏液残留 角蛋白 Ki-67 HPV16

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角蛋白16和17在部分表皮肿瘤中的表达和意义 被引量：1

10

作者 蒋正强 李美芳 +1 位作者 葛朝喜 王阳 《浙江医学》 CAS 2015年第4期291-294,F0003,共5页

目的研究角蛋白16和17(K16、K17)在部分表皮肿瘤中的表达和意义。方法采用免疫组化法检测K16、K17在正常皮肤、脂溢性角化病、日光性角化病、皮角、基底细胞癌、鳞状细胞癌中的表达。结果 K16、K17在正常皮肤表皮各层呈阴性表达;在脂溢... 目的研究角蛋白16和17(K16、K17)在部分表皮肿瘤中的表达和意义。方法采用免疫组化法检测K16、K17在正常皮肤、脂溢性角化病、日光性角化病、皮角、基底细胞癌、鳞状细胞癌中的表达。结果 K16、K17在正常皮肤表皮各层呈阴性表达;在脂溢性角化病表皮各层中除了角质层外大多呈阳性表达;在日光性角化病表皮K16均不表达,K17除了角质层外在其他各层也不表达;K16在皮角表皮棘层呈强阳性表达,但在其他各层均呈阴性表达,K17在皮角表皮各层基本呈阳性或强阳性表达;在基底细胞癌中,K16、K17除了在棘层呈弱阳性表达外,在其他各层均呈阴性表达;在鳞状细胞癌中,K16在基底层呈阴性表达,但在其他各层及K17在表皮全层均呈阳性或强阳性表达。K16除基底层外在肿瘤表皮其他各层表达比较差异均有统计学意义(均P<0.05);K17在表皮各层表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 K16、K17的表达状况可为表皮肿瘤的鉴别诊断提供病理学方面的依据。 展开更多

关键词 角蛋白16角 蛋白17 脂溢性角化病 日光性角化病 皮角 基底细胞癌 鳞状细胞癌

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抗角蛋白16抗体对角质形成细胞外皮蛋白、Toll样受体2和4的调节

11

作者 武彩霞 郑志忠 阎春林 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期628-630,共3页

目的研究抗角蛋白16抗体对角质形成细胞分化、Toll样受体2和4的调节。方法将抗角蛋白16抗体加入培养的角质形成细胞中,以同种型抗体作对照,研究外皮蛋白和Toll样受体2和4 mRNA表达。结果抗角蛋白16抗体作用角质形成细胞6 h、24 h、36 h... 目的研究抗角蛋白16抗体对角质形成细胞分化、Toll样受体2和4的调节。方法将抗角蛋白16抗体加入培养的角质形成细胞中,以同种型抗体作对照,研究外皮蛋白和Toll样受体2和4 mRNA表达。结果抗角蛋白16抗体作用角质形成细胞6 h、24 h、36 h后,Toll样受体2mRNA表达分别上调1.73、1.60、2.52倍:12 h和36 h后Toll样受体4 mRNA表达分别上调3.62和2.21倍;12 h、36 h后外皮蛋白mRNA表达分别上调2.33倍和2.0倍。结论抗角蛋白16抗体可能是联系Toll样受体2和4与角质形成细胞分化的重要环节。 展开更多

关键词 角蛋白细胞 TOLL样受体2 TOLL样受体4 抗角蛋白16抗体 外皮蛋白

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抗角蛋白K16抗体对培养角质形成细胞分化和细胞活性的影响

12

作者 武彩霞 李增战 《中国医学文摘（皮肤科学）》 2014年第3期135-136,147,共3页

目的研究抗角蛋白K16抗体对培养角质形成细胞分化和细胞活性的影响。方法鼠抗人角蛋白K16的IgG单克隆抗体作用培养的角质形成细胞,分别于作用12h,24h和36h,以同种型抗体作对照,采用定量PCR,Western blot的方法分别检测抗角蛋白K16抗体... 目的研究抗角蛋白K16抗体对培养角质形成细胞分化和细胞活性的影响。方法鼠抗人角蛋白K16的IgG单克隆抗体作用培养的角质形成细胞,分别于作用12h,24h和36h,以同种型抗体作对照,采用定量PCR,Western blot的方法分别检测抗角蛋白K16抗体对角质形成细胞分化标志蛋白(nascent polypeptide-associated complex,NACA)和Involucrin mRNA表达的影响,以及对Involucrin和肌动蛋白合成启动蛋白(actin related protein,ARP2)表达的影响。结果 12h,24h和36h后NACA mRNA升高5.93-,3.35-和3.54-倍。12h和36h后Involucrin mRNA升高2.33-和2.0-倍。36h后Involucrin蛋白升高4.5-倍,而Arp2蛋白下降1.82-倍。结论抗角蛋白K16抗体能调节角质形成细胞的分化、影响细胞的活动力,角蛋白K16可能是维持银屑病角质形成细胞高分化和表皮增殖特性的重要因素。 展开更多

关键词 抗角蛋白抗体 角质形成细胞 分化 活性

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