狼毒大戟水提取物中化学成分的分离与鉴定 被引量：18

1

作者 简丽 丁立军 +1 位作者 庞丽纹 张前程 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第9期675-677,共3页

为了研究狼毒大戟水提取物的化学成分,依次用乙醚、丙酮等不同溶剂对狼毒大戟水提取物进行了萃取,乙醚萃取物真空浓缩后用硅胶柱色谱分离,不同溶剂洗脱,分离得到了5个化合物,经质谱、红外和核磁测定,证明3个为萜类,2个为苯乙酮类。石油... 为了研究狼毒大戟水提取物的化学成分,依次用乙醚、丙酮等不同溶剂对狼毒大戟水提取物进行了萃取,乙醚萃取物真空浓缩后用硅胶柱色谱分离,不同溶剂洗脱,分离得到了5个化合物,经质谱、红外和核磁测定,证明3个为萜类,2个为苯乙酮类。石油醚洗脱得到β-香树脂醇乙酸酯(-βamyrin acetate);V(石油醚)∶V(乙醚)=9∶1洗脱得到Jolk inolide A;氯仿洗脱得到3,3′-二乙酰基-4,4′-二甲氧基-2,2,′6,6′-四羟基二苯甲烷;V(氯仿)∶V(乙醚)=8∶1洗脱得到2,4-二羟基-6-甲氧基-3-甲基苯乙酮(狼毒乙素)和Jolk inolide B。 展开更多

关键词 狼毒大戟 水提取物 β-香树脂醇乙酸酯 jolkinolide

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RP-HPLC法测定狼毒中岩大戟内酯A和B的含量 被引量：23

2

作者 乔春峰 韩全斌 +2 位作者 贺震旦 宋景政 徐宏喜 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1204-1206,共3页

目的:建立测定狼毒药材中2个二萜内酯类成分岩大戟内酯A和B的HPLC定量分析方法。方法:采用C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-水(75:25)洗脱,流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为250nm。结果:狼毒大戟和月腺大戟中普遍含有岩大戟... 目的:建立测定狼毒药材中2个二萜内酯类成分岩大戟内酯A和B的HPLC定量分析方法。方法:采用C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-水(75:25)洗脱,流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为250nm。结果:狼毒大戟和月腺大戟中普遍含有岩大戟内酯A和B,2个成分的含量范围分别为0.007%～0.043%和0.012%～0.204%。瑞香狼毒和海芋中不含有这2个成分。结论:本方法专属性强,结果准确,简便可行,适用于狼毒药材中岩大戟内酯A和B的含量测定。 展开更多

关键词 狼毒 岩大戟内酯A 岩大戟内酯B 高效液相色谱法 含量测定

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猫眼草化学成分的研究 被引量：9

3

作者 张文静 翁连进 +1 位作者 易立涛 耿頔 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期554-558,共5页

目的研究猫眼草Euphorbia lunulata的化学成分。方法利用硅胶、凝胶等柱色谱法进行分离和纯化,通过理化性质和核磁共振波谱进行化合物的结构鉴定。结果从猫眼草90%乙醇提取物中分离得到了17个化合物,分别鉴定为正二十八烷醇（1）、β-... 目的研究猫眼草Euphorbia lunulata的化学成分。方法利用硅胶、凝胶等柱色谱法进行分离和纯化,通过理化性质和核磁共振波谱进行化合物的结构鉴定。结果从猫眼草90%乙醇提取物中分离得到了17个化合物,分别鉴定为正二十八烷醇（1）、β-谷甾醇（2）、咖啡酸十八烷酯（3）、cycloart-23Z-en-3β,25-diol（4）、东莨菪素（5）、24-亚甲基环阿尔廷醇（6）、豆甾醇（7）、短叶苏木酚（8）、o-phthalic acid bis-（2-ethyl decyl）-ester（9）、阿魏酸二十六烷酯（10）、东莨菪素苷（11）、β-香树脂醇（12）、没食子酸（13）、蔗糖（14）、17-羟基-岩大戟内酯A（15）、岩大戟内酯A（16）、岩大戟内酯B（17）。结论化合物1、3、8~12、14~17均为首次从该植物中分离得到,化合物9为首次从大戟属中分离得到。 展开更多

关键词 大戟科 猫眼草 24-亚甲基环阿尔廷醇 β-香树脂醇 岩大戟内酯A

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超声波辅助提取狼毒大戟中二萜类物质Jolkinolide B 被引量：4

4

作者 简丽 贾慧凯 +2 位作者 庞丽纹 丁立军 张前程 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期972-974,共3页

以w(C2H5OH)=95%的乙醇为提取剂,HPLC法测定的Jolkinolide B提取率为指标,考察了利用超声波辅助技术提取狼毒大戟中二萜类物质的适宜提取条件。测定出狼毒大戟中w(Jolkinolide B)=0.0216%。考察了提取时间、提取温度、料液质量比等因素... 以w(C2H5OH)=95%的乙醇为提取剂,HPLC法测定的Jolkinolide B提取率为指标,考察了利用超声波辅助技术提取狼毒大戟中二萜类物质的适宜提取条件。测定出狼毒大戟中w(Jolkinolide B)=0.0216%。考察了提取时间、提取温度、料液质量比等因素对Jolkinolide B提取率的影响。室温下,提取时间从10 min到60 min,Jolkinolide B的提取率由0.014%提高至0.0149%;温度从室温到85℃,提取率从0.014%提高到0.020 5%;超声波辅助提取10 min,提取率与浸泡提取200 h的提取率相当;超声波辅助提取中适宜的m(狼毒大戟)∶m(提取剂)=1∶8。该文报告工作的新颖性已为内蒙古自治区科学技术信息技术研究所2007年3月12日出具的第20071500100031号《科技查新报告》所证实。 展开更多

关键词 狼毒大戟 超声辅助提取 二萜 jolkinolide B 中药现代化技术

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基于网络药理学和实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制

5

作者 高文分 吴凡 +5 位作者 朱朋艳 乔妙 张洲 杨会菊 王晶 袁文娟 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2023年第3期497-508,共12页

通过网络药理学方法及生物学实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制。通过TCMSP等数据库预测Jolkinolide B作用靶点,并通过靶点富集分析及分子对接预测其防治结肠肿瘤的作用机制,基于预测结果,体内生物学实验初步验证Jolkinolid... 通过网络药理学方法及生物学实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制。通过TCMSP等数据库预测Jolkinolide B作用靶点,并通过靶点富集分析及分子对接预测其防治结肠肿瘤的作用机制,基于预测结果,体内生物学实验初步验证Jolkinolide B对移植瘤小鼠肿瘤的抑制作用,MTT法检测不同浓度的Jolkinolide B对HCT116细胞的增殖抑制活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验观察其对HCT116细胞迁移能力的影响。Western blot检测相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、金属基质蛋白酶MMP3和MMP12的表达。网络靶点分析结果显示Jolkinolide B与结肠癌(CRC)匹配后得到78个靶点,富集信号通路主要有IL-17信号通路、PD-1/PD-L1信号通路等。分子对接结果显示Jolkinolide B以氢键与STAT3、MAPK8、JUN核心蛋白结合,结合构象较稳定。体内实验结果表明,Jolkinolide B能有效抑制移植瘤小鼠肿瘤体积;细胞水平验证实验结果表明,Jolkinolide B能够有效地抑制结肠肿瘤细胞HCT116的增殖,促进细胞的凋亡,抑制细胞的迁移;Western blot结果表明Jolkinolide B明显上调Bax/Bcl-2蛋白的表达,诱导了HCT116细胞的凋亡;同时,Jolkinolide B明显下调金属基质蛋白酶MMP3、MMP12的表达,抑制肿瘤细胞侵袭和转移。综上,Jolkinolide B可通过多靶点、多途径实现干预CRC的作用,其抗肿瘤活性可能与影响凋亡基因Bax及Bcl-2、金属基质蛋白酶MMP3、MMP12的表达有关。本研究为Jolkinolide B的临床用药和防治的作用机制研究提供了参考。 展开更多

关键词 jolkinolide B 结肠肿瘤 分子对接 网络药理学 体内外实验

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UPLC法同时测定狼毒大戟中岩大戟内酯A和B 被引量：1

6

作者 刘雷 马玉坤 +3 位作者 郭丽娜 马德志 孙宇 刘吉成 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1547-1550,共4页

目的建立UPLC法同时测定狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud.中岩大戟内酯A和B的含有量。方法狼毒大戟甲醇提取物的分析采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;检测波长2... 目的建立UPLC法同时测定狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud.中岩大戟内酯A和B的含有量。方法狼毒大戟甲醇提取物的分析采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;检测波长250 nm;柱温35℃。结果岩大戟内酯A和B分别在1.804~54.12μg/mL(r=0.999 5)和9.663~209.8μg/mL(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.3%、98.6%,RSD分别为0.76%、0.77%。结论该方简便准确,重复性好,可用于狼毒大戟的质量控制。 展开更多

关键词 狼毒大戟 岩大戟内酯A 岩大戟内酯B UPLC

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岩大戟内酯A和岩大戟内酯B通过Akt信号通路影响MCF-7细胞的增殖和凋亡 被引量：1

7

作者 沈雷 张善强 +3 位作者 刘雷 吴雨轩 刘树民 刘吉成 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1374-1379,共6页

观察岩大戟内酯A(Jolkinolide A,JA)和岩大戟内酯B(Jolkinolide B,JB)二萜类单体对MSC-7乳腺癌细胞的增殖、凋亡影响,并分析JA或JB的作用机制。若分别用40、60、80μg/m L浓度的JA(或JB)刺激MCF-7细胞,则为不同浓度的JA刺激组或JB刺激组... 观察岩大戟内酯A(Jolkinolide A,JA)和岩大戟内酯B(Jolkinolide B,JB)二萜类单体对MSC-7乳腺癌细胞的增殖、凋亡影响,并分析JA或JB的作用机制。若分别用40、60、80μg/m L浓度的JA(或JB)刺激MCF-7细胞,则为不同浓度的JA刺激组或JB刺激组,正常培养的MCF-7为对照组。分别用CCK-8细胞增殖实验检测JA刺激组或JB刺激组的细胞增殖OD值,Western Blot实验检测JA刺激组或JB刺激组MCF-7细胞中Caspase 9蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染检测MCF-7细胞凋亡,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测JA刺激组或JB刺激组细胞中Akt、STAT3蛋白的含量。结果发现,与40、60、80μg/m L的JA刺激组MCF-7细胞分别相比,相应浓度JB刺激组的MCF-7细胞增殖OD值均明显降低,但是JB刺激组MCF-7细胞的Caspase 9蛋白相对吸光度、凋亡率显著升高;相对于40、60、80μg/m L JA刺激组,相应浓度的JB-刺激组MCF-7细胞上清液中的VEGF含量分别均降低,相应浓度JB刺激组MCF-7细胞的Akt、STAT3蛋白表达均降低。实验结果表明:岩大戟内酯B明显地通过抑制Akt-STAT3信号通路而抑制MCF-7细胞增殖,促进MCF-7凋亡。 展开更多

关键词 岩大戟内酯A 岩大戟内酯B MCF-7细胞 细胞增殖 AKT信号通路

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岩大戟内酯4种活性单体对人脑胶质瘤U251细胞增殖及凋亡的影响 被引量：3

8

作者 王晓丽 洪楠楠 +4 位作者 韩翠艳 李宏铃 马国芳 野津 刘吉成 《医学研究杂志》 2017年第12期46-50,共5页

目的研究岩大戟内酯4种活性单体对人脑胶质瘤U251细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法用不同浓度的岩大戟内酯A(JA)、17-羟-岩大戟内酯A(HJA)、岩大戟内酯B(JB)、17-羟-岩大戟内酯B(HJB)处理U251细胞,分别在12、24、48 h时间点,用MTT法... 目的研究岩大戟内酯4种活性单体对人脑胶质瘤U251细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法用不同浓度的岩大戟内酯A(JA)、17-羟-岩大戟内酯A(HJA)、岩大戟内酯B(JB)、17-羟-岩大戟内酯B(HJB)处理U251细胞,分别在12、24、48 h时间点,用MTT法检测细胞增殖抑制率;在24 h时间点,通过LDH释放检测细胞毒性,流式细胞术检测细胞早期凋亡率,Western blot法检测凋亡相关信号蛋白Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3的表达。结果 JA、HJA对U251细胞无作用。与空白对照组比较,JB、HJB使细胞增殖均受到抑制,并呈浓度和时间依赖关系(P<0.05);使LDH释放率、早期凋亡率、Bax和cleaved-caspase-3表达均随着给药浓度的升高而增大,而Bcl-2的表达降低(P<0.05)。结论 JB和HJB可能通过诱导细胞凋亡而对人脑胶质瘤U251细胞产生作用。 展开更多

关键词 岩大戟内酯 U251 细胞增殖 细胞凋亡

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MSPD-UPLC法同时测定狼毒大戟中4种成分 被引量：2

9

作者 刘雷 马玉坤 +4 位作者 孙宇 刘琦 张金玲 郭丽娜 刘吉成 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1520-1525,共6页

目的建立基质固相分散-超高效液相色谱法(MSPD-UPLC)测定狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud.中岩大戟内酯A、17-羟基-岩大戟内酯A、岩大戟内酯B、17-羟基-岩大戟内酯B的含有量。方法样品前处理采用MSPD法,以硅胶为分散剂,乙腈为洗脱... 目的建立基质固相分散-超高效液相色谱法(MSPD-UPLC)测定狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud.中岩大戟内酯A、17-羟基-岩大戟内酯A、岩大戟内酯B、17-羟基-岩大戟内酯B的含有量。方法样品前处理采用MSPD法,以硅胶为分散剂,乙腈为洗脱溶剂;样品分析采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;检测波长250 nm;柱温35℃。结果各目标分析物在各自范围内具有良好的线性关系(r≥0.999 5),检出限与定量限分别介于0.072~0.78μg/mL和0.24~2.61μg/mL之间,平均加样回收率93.0%~94.4%。结论该法操作简单、溶剂用量少、分析时间短,可用于狼毒大戟中活性成分的提取与检测。 展开更多

关键词 狼毒大戟 基质固相分散萃取 超高效液相色谱 岩大戟内酯A 17-羟基-岩大戟内酯A 岩大戟内酯B 17-羟基-岩大戟内酯B

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17-羟-岩大戟内酯B的半合成及晶体结构

10

作者 肖丹妮 宁超祥 +4 位作者 徐媛媛 鄂佳欣 王胜 刘吉成 卜明 《广东化工》 CAS 2021年第20期29-30,共2页

17-羟-岩大戟内酯B均具有显著抗肿瘤活性,但分离含量较低。本研究以岩大戟内酯A(1)为原料,通过氧化、溴代、乙酰化和还原等反应探索半合成标题化合物17-羟-岩大戟内酯B(5)。其中,合成中间体化合物3时以四氯化碳/二氯甲烷=2/1体积比,n(2)... 17-羟-岩大戟内酯B均具有显著抗肿瘤活性,但分离含量较低。本研究以岩大戟内酯A(1)为原料,通过氧化、溴代、乙酰化和还原等反应探索半合成标题化合物17-羟-岩大戟内酯B(5)。其中,合成中间体化合物3时以四氯化碳/二氯甲烷=2/1体积比,n(2)︰n(NBS)为1︰5且分批间隔投料的条件下,收率达70%。另外,以单晶衍射确定了化合物5的绝对构型。 展开更多

关键词 狼毒大戟 岩大戟内酯A 17-羟-岩大戟内酯B 半合成 晶体结构

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狼毒大戟中4种Jolkinolide型二萜的二维核磁共振研究 被引量：16

11

作者 潘勤 施敏锋 闵知大 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期16-19,共4页

目的 :应用NMR技术对狼毒大戟中Jolkinolide型二萜jolkinolideA和B以及 17 hydroxyjolkinolideA和B的1 H和1 3 CNMR信号进行了准确归属。方法 :运用 2DNMR技术 (1 H 1 HCOSY、HSQC、HMBC和NOESY实验 )和选用高灵敏度低噪音的二维脉冲序... 目的 :应用NMR技术对狼毒大戟中Jolkinolide型二萜jolkinolideA和B以及 17 hydroxyjolkinolideA和B的1 H和1 3 CNMR信号进行了准确归属。方法 :运用 2DNMR技术 (1 H 1 HCOSY、HSQC、HMBC和NOESY实验 )和选用高灵敏度低噪音的二维脉冲序列、反式梯度场探头。结果与结论 :首次准确地归属了 4种Jolkinolide型二萜NMR谱中1 H、1 3 C信号的化学位移 ,并确定了 17 展开更多

关键词 Jolkinohde型二萜 二维NMR 相对构型

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反相高效液相色谱法测定狼毒中岩大戟内酯B的含量 被引量：10

12

作者 王灿坚 严小红 +3 位作者 谢演晖 江英桥 刘东辉 马双成 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期521-524,共4页

目的建立狼毒药材中岩大戟内酯B的含量测定方法。方法狼毒药材经粉碎后利用乙醇超声提取,采用高效液相色谱法对岩大戟内酯B的含量进行测定,色谱条件如下:C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(65:35),流速:1.0mL/min,检测波长为... 目的建立狼毒药材中岩大戟内酯B的含量测定方法。方法狼毒药材经粉碎后利用乙醇超声提取,采用高效液相色谱法对岩大戟内酯B的含量进行测定,色谱条件如下:C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(65:35),流速:1.0mL/min,检测波长为238nm,进样量10μL,外标法定量。结果岩大戟内酯B在4.070～32.560μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.02%,RSD为1.02%。结论该方法专属性强,快速简便,可作为狼毒药材中岩大戟内酯B的含量测定方法,可为狼毒质量标准的制定提供相关依据。 展开更多

关键词 狼毒 岩大戟内酯B 高效液相色谱法 含量测定

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17-羟-岩大戟内酯B对U251细胞增殖及凋亡作用的影响 被引量：10

13

作者 王晓丽 岳丽玲 +1 位作者 周丽 刘吉成 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第18期254-257,共4页

目的:探讨17-羟-岩大戟内酯B(HJB)对人脑胶质瘤细胞U251增殖及凋亡的影响。方法:将U251细胞分为空白对照组,5-氟尿嘧啶组(80μmol.L-1),HJB组(6.25,12.5,25,50,100,200,400,800μmol.L-1)。用不同浓度的药物作用24h及药物半数抑制浓度(I... 目的:探讨17-羟-岩大戟内酯B(HJB)对人脑胶质瘤细胞U251增殖及凋亡的影响。方法:将U251细胞分为空白对照组,5-氟尿嘧啶组(80μmol.L-1),HJB组(6.25,12.5,25,50,100,200,400,800μmol.L-1)。用不同浓度的药物作用24h及药物半数抑制浓度(IC50)浓度作用不同时间(12,24,48,72 h),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞仪Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率,分光光度法检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)的相对活性。结果:与空白对照组相比,HJB对U251细胞的增殖有显著抑制作用,并呈浓度依赖及时间依赖性(P<0.05),作用24 h后IC50为62.236 11μmol.L-1。HJB可诱导U251细胞凋亡,浓度30,60,120μmol.L-1分别处理细胞24 h后,早期凋亡率明显升高(P<0.05),且呈浓度依赖关系;Caspase-3及Caspase-9的相对活性均升高(P<0.05),并呈浓度依赖关系。结论:HJB明显抑制体外U251细胞生长并诱导其凋亡,线粒体途径可能是诱导其凋亡的机制之一。 展开更多

关键词 17-羟-岩大戟内酯B U251 细胞凋亡 CASPASE-3 CASPASE-9

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岩大戟内酯B对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响 被引量：9

14

作者 林宇 崔红霞 +3 位作者 许惠玉 周丽 牛英才 刘吉成 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期780-783,共4页

目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡及其可能机制。方法:分别应用MTT和AnnexinV-FITC/PI双染法检测jolkinolide B对Bcap37细胞的生长抑制率和细胞凋亡率;用流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞内游离Ca2+浓... 目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡及其可能机制。方法:分别应用MTT和AnnexinV-FITC/PI双染法检测jolkinolide B对Bcap37细胞的生长抑制率和细胞凋亡率;用流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞内游离Ca2+浓度的变化;RT-PCR检测jolkinolide B对Bcap37细胞caspase-3mRNA表达的影响。结果:jolkinolide B可显著抑制Bcap37细胞的增殖,呈剂量和时间效应关系;随jolkinolide B剂量增加,细胞凋亡率明显增加;线粒体膜电位下降,并伴有细胞内游离钙浓度增加,与对照组相比差异显著(P<0.01),同时caspase-3mRNA表达水平明显增高。结论:jolkinolide B可通过提高细胞游离Ca2+水平,激活内源性线粒体信号转导途径而诱导Bcap37细胞凋亡。 展开更多

关键词 岩大戟内酯B BCAP37 凋亡 线粒体膜电位 钙离子

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17-羟-岩大戟内酯B对K562细胞增殖及凋亡的影响 被引量：9

15

作者 王晓丽 周丽 刘吉成 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期197-200,共4页

目的:探讨17-羟-岩大戟内酯B(HJB)对人白血病K562细胞增殖及凋亡的影响。方法:将K562细胞分为3组,分别为:空白对照组,5-氟脲嘧啶组(浓度为100μmol.L-1),HJB组(浓度为6.25,12.5,25,50,100,200,400μmol.L-1)。用不同浓度的药物作用24 h... 目的:探讨17-羟-岩大戟内酯B(HJB)对人白血病K562细胞增殖及凋亡的影响。方法:将K562细胞分为3组,分别为:空白对照组,5-氟脲嘧啶组(浓度为100μmol.L-1),HJB组(浓度为6.25,12.5,25,50,100,200,400μmol.L-1)。用不同浓度的药物作用24 h和200μmol.L-1的HJB浓度作用不同时间(12,24,48 h),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性,并与空白对照组和5-氟脲嘧啶组作对比;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率;分光光度法检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)的相对活性。结果:与空白对照组相比,HJB对K562细胞的增殖有显著性抑制作用,并呈浓度依赖关系及时间依赖关系(P<0.05),作用24 h后IC50为158.7μmol.L-1。HJB可诱导K562细胞凋亡,用50,100,200μmol.L-1药物分别处理细胞24 h后,早期凋亡率较空白组明显升高(P<0.05),且呈浓度依赖关系;Caspase-3及Caspase8的相对活性均较空白对照组升高(P<0.05),并呈浓度依赖关系。结论:HJB明显抑制体外K562细胞生长并诱导其发生凋亡,且死亡受体途径可能是诱导其凋亡的一个机制。 展开更多

关键词 17-羟-岩大戟内酯B K562 细胞凋亡 半胱氨酸蛋白酶-3 半胱氨酸蛋白酶-8

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Fas/FasL信号途径参与17-羟-岩大戟内酯B诱导U251细胞凋亡 被引量：9

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作者 王晓丽 韩翠艳 +2 位作者 李宏铃 马国芳 野津 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2017年第1期46-49,共4页

目的 :探讨Fas/Fas L信号转导途径在17-羟-岩大戟内酯B诱导人脑胶质瘤细胞U251细胞凋亡中的作用及机制。方法:以5-氟尿嘧啶(浓度为10μg/ml)为阳性对照。各组样品用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增值抑制率;流式细胞仪Annexin V-FITC/P... 目的 :探讨Fas/Fas L信号转导途径在17-羟-岩大戟内酯B诱导人脑胶质瘤细胞U251细胞凋亡中的作用及机制。方法:以5-氟尿嘧啶(浓度为10μg/ml)为阳性对照。各组样品用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增值抑制率;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI检测细胞早期凋亡率;分光光度法检测Caspase-3和Caspase-8的相对活性;Western Blot法检测Fas和Fas L的蛋白表达。结果:与空白对照组相比,10μg/ml的17-羟-岩大戟内酯B对U251细胞的增殖没有显著性改变,但20μg/ml和40μg/ml的17-羟-岩大戟内酯B对U251细胞的增殖有显著性抑制作用,但40μg/ml的17-羟-岩大戟内酯B对U251细胞的增殖的抑制作用没有进一步改变,故应用20μg/ml 17-羟-岩大戟内酯B做后续试验。与单独应用20μg/ml 17-羟-岩大戟内酯B组相比,经0.1μg/ml、0.5μg/ml或1μg/ml抗Fas单克隆抗体预处理后,再加入20μg/ml17-羟-岩大戟内酯B时,U251细胞增值抑制率明显减弱,并选用0.5μg/ml抗Fas单克隆抗体进行后续实验。单独应用20μg/ml17-羟-岩大戟内酯B,细胞早期凋亡率、Caspase-3及Caspase-8相对活性较空白组明显升高,Fas及Fas L蛋白表达水平明显增强;而经0.5μg/ml抗Fas单克隆抗体预处理后再加入20μg/ml17-羟-岩大戟内酯B,可使细胞早期凋亡率、Caspase-3及Caspase-8的相对活性较单独应用20μg/ml17-羟-岩大戟内酯B明显下降,Fas及Fas L蛋白表达明显减弱。结论:17-羟-岩大戟内酯B可抑制U251细胞增殖和诱导细胞凋亡;Fas/Fas L信号通路介导了17-羟-岩大戟内酯B诱导的凋亡;Fas/Fas L通路活化导致了下游caspase途径的活化。 展开更多

关键词 17-羟-岩大戟内酯B U251 细胞凋亡 FAS/FASL Caspase-3 CASPASE-8

原文传递

JAK2/STAT3信号转导通路在岩大戟内酯B诱导的前列腺癌细胞PC-3凋亡中的作用 被引量：8

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作者 王贻兵 刘丹 王佳贺 《实用药物与临床》 CAS 2016年第9期1065-1068,共4页

目的探讨岩大戟内酯B诱导的人前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡以及JAK2/STAT3信号转导通路在此过程中的作用。方法不同浓度的岩大戟内酯B处理人前列腺癌细胞系PC-3细胞0、24、48、72 h后,采用台盼蓝染色法检测PC-3细胞存活率;采用Annexin V-... 目的探讨岩大戟内酯B诱导的人前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡以及JAK2/STAT3信号转导通路在此过程中的作用。方法不同浓度的岩大戟内酯B处理人前列腺癌细胞系PC-3细胞0、24、48、72 h后,采用台盼蓝染色法检测PC-3细胞存活率;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测PC-3细胞凋亡率;Western blot分析检测岩大戟内酯B作用不同时间后JAK2/STAT3信号转导通路的表达;预先用不同浓度的JSI-124(选择性STAT3途径抑制剂)处理PC-3细胞60 min,观察岩大戟内酯B作用不同时间后PC-3细胞的凋亡情况。结果岩大戟内酯B能够诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡,降低磷酸化-JAK2/STAT3的表达,JSI-124可以提高岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。结论 JAK2/STAT3信号转导通路参与了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡过程。JSI-124通过特异性地抑制STAT3活性提高了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。 展开更多

关键词 岩大戟内酯B 前列腺癌 PC-3细胞 细胞凋亡

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岩大戟内酯B对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响 被引量：8

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作者 林宇 岳丽玲 蒋丽艳 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期132-136,共5页

目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及生长周期的影响。方法:取对数生长期的MDA-MB-231细胞,加入JB,使终质量浓度分别为0,2.5,5,10,20,40,80 mg·L-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测岩大戟内酯B对MD... 目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B,JB)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及生长周期的影响。方法:取对数生长期的MDA-MB-231细胞,加入JB,使终质量浓度分别为0,2.5,5,10,20,40,80 mg·L-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的生长抑制率。另设10,20,40,80 mg·L-1组的JB,采用流式检测技术分析岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的细胞周期,RT-PCR及Western blot检测真核细胞翻译起始因子(e IF4E),细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)基因mRNA表达及蛋白水平。结果:随着岩大戟内酯B浓度增加可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖,G1期细胞阻滞。与空白组比较,20,40μmol·L-1的岩大戟内酯B可抑制Cyclin D1和e IF4E的mRNA表达,转染e IF4E-siRNA组Cyclin D1的mRNA表达及蛋白水平也被抑制,同时细胞周期阻滞在G1期(P<0.05,P<0.01)。结论:岩大戟内酯B可通过下调e IF4E及Cyclin D1的表达而阻滞细胞周期于G1期。 展开更多

关键词 岩大戟内酯B 真核细胞翻译起始因子 细胞周期

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RP-HPLC法测定狼毒中狼毒乙素和岩大戟内酯B的含量 被引量：7

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作者 王灿坚 江英桥 +3 位作者 毕福钧 林彤 严小红 刘东辉 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期839-842,共4页

目的：建立同时测定狼毒药材中狼毒乙素和岩大戟内酯B的HPLC定量分析方法。方法：采用Lichrospher C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以乙腈（A）-水（B）为流动相梯度洗脱（0-5 min,40%A;5-10 min,40%A→50%A;10-30 min,50%A→55%... 目的：建立同时测定狼毒药材中狼毒乙素和岩大戟内酯B的HPLC定量分析方法。方法：采用Lichrospher C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以乙腈（A）-水（B）为流动相梯度洗脱（0-5 min,40%A;5-10 min,40%A→50%A;10-30 min,50%A→55%A;30-40 min,55%A→60%A;40-45 min,60%A→70%A）,流速1.0 mL·min^-1;检测波长226 nm,柱温30℃。结果：狼毒乙素线性范围为0.005-0.863μg（r=0.9999）,平均回收率为96.4%（RSD=1.4%,n=6）;岩大戟内酯B线性范围为0.003-0.496μg（r=0.9999）,平均回收率为96.0%（RSD=2.1%,n=6）。结论：本方法专属性强,结果准确,简便可行,可用于狼毒药材的质量控制。 展开更多

关键词 狼毒 狼毒乙素 岩大戟内酯B 高效液相色谱法 含量测定

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岩大戟内酯B诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究 被引量：6

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作者 林宇 田华 《齐齐哈尔医学院学报》 2015年第30期4527-4528,共2页

目的探讨岩大戟内酯B对乳腺癌细胞MDA-MB-435S凋亡的影响。方法将不同浓度的岩大戟内酯B作用于MDA-MB-435S细胞,采用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态。结果随着岩大戟内酯B浓度增加,细胞凋亡率明显增加;电镜显示... 目的探讨岩大戟内酯B对乳腺癌细胞MDA-MB-435S凋亡的影响。方法将不同浓度的岩大戟内酯B作用于MDA-MB-435S细胞,采用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态。结果随着岩大戟内酯B浓度增加,细胞凋亡率明显增加;电镜显示药物处理后细胞出现核固缩,细胞器空泡变性,出现凋亡小体,甚至坏死。结论岩大戟内酯B可诱导乳腺癌细胞凋亡,为临床开发新药提供理论依据。 展开更多

关键词 岩大戟内酯B MDA-MB-435S 细胞凋亡

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