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Roscovitine同期化供核细胞对猴—猪异种核移植胚胎发育的影响
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作者 许常龙 秦祖兴 +8 位作者 梁明明 胡林林 罗茜 崔静辉 罗军 左二伟 许惠艳 卢晟盛 卢克焕 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1722-1726,共5页
【目的】探讨Roscovitine同期化供核细胞对食蟹猴—猪异种体细胞核移植胚胎体外发育的影响,为提高灵长类的核移植效率奠定基础。【方法】活体采集4岁雄性食蟹猴的耳组织,经组织块培养获得纯化的食蟹猴耳成纤维细胞,细胞经固定、染色后... 【目的】探讨Roscovitine同期化供核细胞对食蟹猴—猪异种体细胞核移植胚胎体外发育的影响,为提高灵长类的核移植效率奠定基础。【方法】活体采集4岁雄性食蟹猴的耳组织,经组织块培养获得纯化的食蟹猴耳成纤维细胞,细胞经固定、染色后用流式细胞仪分析细胞周期分布。以不同同期化方法处理的食蟹猴耳纤维细胞为供体细胞,以体外成熟、去核的猪卵母细胞为受体细胞,利用电融合法构建食蟹猴—猪异种核移植胚胎,观察异种核移植重构胚胎的体外发育情况。【结果】以15μmol/L Roscovitine处理食蟹猴耳成纤维细胞24、48、72 h获得的G0/G1期细胞比率分别为76.51%、89.69%和90.49%,其中处理48和72 h的G0/G1期细胞比率显著高于对照组(P<0.05)。血清饥饿、接触抑制72 h同期化获得的G0/G1期细胞比率分别为91.12%和90.46%。Roscovitine同期化处理食蟹猴耳成纤维细胞48 h可有效提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率(15.05%),显著高于血清饥饿同期化处理和接触抑制同期化处理的效果(P<0.05)。【结论】Roscovitine可有效同期化食蟹猴耳成纤维细胞在G0/G1期,最终提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率。 展开更多
关键词 猪 食蟹猴 异种核移植 细胞周期 同期化 胚胎发育
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