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嗜麦芽寡养单胞菌氨基糖苷类修饰酶与Ⅰ类整合酶基因的研究 被引量：7
1
作者 邓笑伟 张丹梅 +2 位作者 刘长庭 周红莉 李爱玲 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期2233-2235,共3页
目的了解医院嗜麦芽寡养单胞菌氨基糖苷类修饰酶和Ⅰ类整合酶基因存在的情况。方法收集2006年1月-2007年10月武警总医院住院患者标本中分离到的嗜麦芽寡养单胞菌27株,微量肉汤释释法测定14种抗菌药物的敏感性;PCR方法对嗜麦芽寡养单胞... 目的了解医院嗜麦芽寡养单胞菌氨基糖苷类修饰酶和Ⅰ类整合酶基因存在的情况。方法收集2006年1月-2007年10月武警总医院住院患者标本中分离到的嗜麦芽寡养单胞菌27株,微量肉汤释释法测定14种抗菌药物的敏感性;PCR方法对嗜麦芽寡养单胞菌进行氨基糖苷类修饰酶和Ⅰ类整合酶基因检测。结果嗜麦芽寡养单胞菌对14种抗菌药物耐药严重,27株嗜麦芽寡养单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因ant(2″)-Ⅰ阳性5株(18.5%),aac(3)-Ⅱ3株(11.1%)、aac(6′)-Ⅱ1株(3.7%)、Ⅰ类整合酶(intⅠ)阳性8株(29.6%)。结论嗜麦芽寡养单胞菌对氨基糖苷类耐药的主要原因是ant(2″)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅱ,携带Ⅰ类整合子可能是导致其对氨基糖苷类耐药性高的原因。 展开更多
关键词 嗜麦芽寡养单胞菌 氨基糖苷类修饰酶 ⅰ类整合酶基因 多药耐药
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荧光定量PCR法检测不同状态下铜绿假单胞菌intⅠ1基因的表达 被引量：6
2
作者 刘蓉 杨莉莉 +4 位作者 罗必蓉 唐玲 蒋宏 刘继芬 李明远 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期33-36,共4页
目的检测铜绿假单胞菌Ⅰ类整合酶基因(intⅠ1基因)在生物膜状态和浮游状态表达水平的差异,探讨整合子的作用机制。方法对3株Ⅰ类整合酶阳性的铜绿假单胞菌分别进行液相培养和生物膜细菌培养,常规方法提取3株细菌两种生长状态的总RNA。... 目的检测铜绿假单胞菌Ⅰ类整合酶基因(intⅠ1基因)在生物膜状态和浮游状态表达水平的差异,探讨整合子的作用机制。方法对3株Ⅰ类整合酶阳性的铜绿假单胞菌分别进行液相培养和生物膜细菌培养,常规方法提取3株细菌两种生长状态的总RNA。采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法,以细菌的16srRNA为内参照,分别测定菌株SW07、R07和TH12的浮游细菌和生物膜细菌intⅠ1mRNA的相对表达量,比较3株菌在两种状态下intⅠ1mRNA的表达水平。结果3株铜绿假单菌的生物膜细菌和浮游细菌都检测到intⅠ1基因的表达。3株菌在两种状态下intⅠ1mRNA的表达量不同,生物膜细菌intⅠ1基因的表达水平较高,其中菌株R07、SW07和TH12的生物膜细菌intⅠ1mRNA的表达量分别较浮游细菌高1.4、5.7和128倍。结论在生物膜状态下,铜绿假单胞菌intⅠ1基因的表达上调,本实验结果提示整合子在生物膜细菌中可进行更加活跃的基因盒捕获和积累,整合子和细菌生物膜的形成是导致细菌对抗生素耐药的重要机制。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 生物膜 intⅰ 1基因 荧光定量PCR
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苦参碱对多重耐药表皮葡萄球菌整合子intⅠ和dfrA的影响 被引量：2
3
作者 贾芳 杨江流 +1 位作者 邢立群 刘文慧 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期563-568,共6页
为探索苦参碱对多重耐药表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)整合子整合酶(intⅠ)和二氢叶酸还原酶(dfrA)的影响,试验通过纸片扩散法筛选多重耐药菌株、以肉汤稀释法测定苦参碱对SE的最低抑菌浓度(MIC)和最佳逆转条件;通过普通... 为探索苦参碱对多重耐药表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)整合子整合酶(intⅠ)和二氢叶酸还原酶(dfrA)的影响,试验通过纸片扩散法筛选多重耐药菌株、以肉汤稀释法测定苦参碱对SE的最低抑菌浓度(MIC)和最佳逆转条件;通过普通PCR法测定苦参碱对SE整合子intⅠ和dfrA基因碱基序列的影响;通过荧光定量PCR法测定苦参碱对SE整合子intⅠ和dfrA mRNA表达量的影响,结果显示苦参碱亚浓度作用表皮葡萄球菌后对intⅠ、dfrA基因序列无影响;苦参碱对intⅠmRNA表达量具有抑制作用,而对dfrA mRNA表达量影响不大,结果表明在SE体内苦参碱可从mRNA水平上抑制SE intⅠ的表达量。 展开更多
关键词 苦参碱 表皮葡萄球菌 整合子 整合酶 二氢叶酸还原酶
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IntⅠ1基因突变致鲍曼不动杆菌耐药性丢失
4
作者 张国栋 么作义 +1 位作者 乔国昱 张蕊 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1896-1898,共3页
目的探究鲍曼不动杆菌耐药性丢失与基因组序列的相关性。方法临床分离78株鲍曼不动杆菌,按CLSI进行药敏性实验,以PCR方法对IntⅠ1、ADC基因进行检测,并选择部分菌株进行测序分析。结果 78株鲍曼不动杆菌中,有1株完全不耐药,而相关基因PC... 目的探究鲍曼不动杆菌耐药性丢失与基因组序列的相关性。方法临床分离78株鲍曼不动杆菌,按CLSI进行药敏性实验,以PCR方法对IntⅠ1、ADC基因进行检测,并选择部分菌株进行测序分析。结果 78株鲍曼不动杆菌中,有1株完全不耐药,而相关基因PCR检测的阳性率均为100%。基因测序分析表明,在这株耐药性丢失的鲍曼不动杆菌中,IntⅠ1基因均发生3处DNA突变。结论 IntⅠ1基因对于鲍曼不动杆菌耐药性起着重要作用,相关位点突变将导致耐药性丢失。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 intⅰ 1基因 ADC基因 耐药性丢失
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畜禽粪便堆放地土壤中抗生素抗性基因和细菌群落的垂直分布特征 被引量：18
5
作者 韩婉雪 王凤花 +3 位作者 柏兆海 李文彦 王新珍 马林 《中国生态农业学报（中英文）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期268-275,共8页
本文通过对养殖场猪粪和鸡粪堆放地0~100 cm土壤样品的采集和分析,研究了长期堆放畜禽粪便对土壤中抗生素抗性基因(简称"抗性基因")和细菌群落结构垂直分布的影响。定量PCR结果表明,与对照土壤相比,猪粪和鸡粪堆放增加了0~100... 本文通过对养殖场猪粪和鸡粪堆放地0~100 cm土壤样品的采集和分析,研究了长期堆放畜禽粪便对土壤中抗生素抗性基因(简称"抗性基因")和细菌群落结构垂直分布的影响。定量PCR结果表明,与对照土壤相比,猪粪和鸡粪堆放增加了0~100 cm土壤中四环素类抗性基因(tetC、tetG、tetL、tetW)、磺胺类抗性基因(sulI、sulII)以及整合酶基因(intI1)的检出率和检出丰度,说明粪肥堆放造成堆放地土壤中抗性基因污染。聚类分析结果表明,抗性基因和intI1基因的丰度随土壤深度呈递减趋势,且主要集中在0~30 cm土层,表明堆放地土壤中抗性基因存在向下层土壤迁移的风险。相关性分析表明, intI1基因分别与抗性基因呈显著正相关,说明intI1基因可能在抗性基因传播中起着重要作用。同时高通量测序结果表明,与对照土壤相比,猪粪和鸡粪堆放显著降低了0~10 cm和10~30 cm土层细菌群落结构的多样性, 0~30 cm土层中,猪粪和鸡粪堆放地土壤中细菌群落结构与对照土壤的差异要高于深层土壤。此外,方差分解分析结果表明,土壤化学性质和细菌群落结构均影响了土壤中抗性基因的垂直分布,且细菌群落结构的变化是其主要的影响因素。本研究可为控制畜禽粪便堆放地土壤中抗性基因污染提供科学依据。 展开更多
关键词 畜禽粪便堆放 抗生素抗性基因 细菌群落结构 intⅰ1基因 垂直分布特征
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鲍氏不动杆菌儿童分离株qacE△1-sul1及IntⅠ1基因与抗菌药物多药耐药性关系研究 被引量：11
6
作者 赵瑞珍 郑跃杰 +1 位作者 陈乾 糜祖煌 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期253-256,共4页
目的鲍氏不动杆菌(ABA)在儿科临床分离株的耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sul1)、整合酶基因(IntⅠ1)以及与该基因阳性细菌多药耐药的关系。方法28株ABA收集自2006年分离的儿科住院肺炎患儿的深部痰培养标本,均采用VITEK-32全自动微生物鉴... 目的鲍氏不动杆菌(ABA)在儿科临床分离株的耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sul1)、整合酶基因(IntⅠ1)以及与该基因阳性细菌多药耐药的关系。方法28株ABA收集自2006年分离的儿科住院肺炎患儿的深部痰培养标本,均采用VITEK-32全自动微生物鉴定仪GNI和GNS卡进行细菌鉴定和药敏试验;qacE△1-sul1与IntⅠ1基因检测用聚合酶链反应(PCR)方法。结果检测的28株ABA中3株呈多药耐药性,阳性率10.71%,复方新诺明(SXT)检出4株耐药菌株,耐药率14.29%,qacE△1-sul1基因检出11株,阳性率为39.29%,IntⅠ1基因检出4株,阳性率14.29%;4株复方新诺明耐药菌株(包括3株多药耐药株)均检出qacE△1-sul1和IntⅠ1基因,其余7株qacE△1-sul1基因阳性菌株对复方新诺明表型敏感。结论ABA儿童分离株对SXT耐药的主要原因是获得了qacE△1-sul1基因;对于复方新诺明表型敏感,但qacE△1-sul1基因阳性菌株也应引起重视,防止在抗菌药物的压力下,出现耐药;因qacE△1-sul1、IntⅠ1基因两者之一为阳性即可表明该菌株携带Ⅰ类整合子,即可能含有多药耐药基因,其对抗菌药物表现多药耐药性,应引起儿科医生的高度重视。 展开更多
关键词 鲍氏不动杆菌 儿童 耐消毒剂-磺胺基因 整合酶基因 耐药性 整合子
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基因捕获元件int1和ISCR1在临床菌株中的分布及与细菌耐药性的关系研究 被引量：10
7
作者 陈霞 袁敏 +3 位作者 李桂喜 陈燕 禹惠兰 李娟 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期646-652,共7页
目的研究临床多种细菌中的Ⅰ型整合酶编码基因int1和ISCR1的分布情况,探究其与细菌多药耐药表型的关系。方法收集2011-2012年河北省某医院临床菌株,应用VITEK2COMPACT全自动微生物生化鉴定系统和16SrDNA序列分析进行种属鉴定,利用PCR... 目的研究临床多种细菌中的Ⅰ型整合酶编码基因int1和ISCR1的分布情况,探究其与细菌多药耐药表型的关系。方法收集2011-2012年河北省某医院临床菌株,应用VITEK2COMPACT全自动微生物生化鉴定系统和16SrDNA序列分析进行种属鉴定,利用PCR方法进行int1基因和ISCR1筛查;两种可移动元件的携带情况和菌株的多药耐药表型之间的关系采用卡方检验进行统计计算。结果共收集临床菌株372株,包括325株革兰氏阴性菌和47株革兰氏阳性菌;int1基因和ISCR1在22种(属)175株和18种(属)90株革兰氏阴性细菌中检出,同时在17种(属)71株革兰氏阴性细菌中检出,革兰氏阳性细菌int1基因和ISCR1检测均为阴性;通过对数据分层对比,统计分析发现,在int1基因不存在时,ISCR1的存在与否与菌株是否为多药耐药的关系明显,差异有统计学意义(P<0.01),其存在亦能介导更广泛种类药物耐受,差异亦有统计学意义(P<0.01)。在int1基因存在时,ISCR1的存在能介导更广泛种类药物耐受,差异有统计学意义(P=0.02);在ISCR1不存在时,int1基因的存在与否与菌株是否多药耐药的关系明显,差异有统计学意义(P<0.01),其存在亦能介导更广泛种类药物耐受,差异亦具有统计学意义(P<0.01)。而在ISCR1存在的情况下,上述两种关系不明显。结论基因捕获元件int1基因及ISCR1在革兰氏阴性临床菌株中分布广泛,并与细菌的多重耐药、泛耐药明显相关,特别是ISCR1;应加强可移动元件int1基因或ISCR1流行状况的监测,为其在耐药基因捕获中的作用机制研究和控制多药耐药细菌在临床散播提供可靠的基础数据。 展开更多
关键词 int1基因 ISCR1 复合型ⅰ型整合子 多药耐药
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磷酸二酯酶抑制剂Rolipram对NOD小鼠免疫应答的影响 被引量：4
8
作者 路文盛 师布朵 +1 位作者 王鲁梅 张志利 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期405-410,共6页
目的　探讨磷酸二酯酶Ⅳ型抑制剂Rolipram对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠免疫应答的影响机制,为临床通过免疫干预治疗糖尿病提供理论依据。方法　动物模型分为Rolipram干预组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,分别经DNAladder、免疫组化检测T细胞凋... 目的　探讨磷酸二酯酶Ⅳ型抑制剂Rolipram对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠免疫应答的影响机制,为临床通过免疫干预治疗糖尿病提供理论依据。方法　动物模型分为Rolipram干预组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,分别经DNAladder、免疫组化检测T细胞凋亡;流式细胞、RT- PCR测定T细胞亚群的漂移。结果　与PBS对照组比较,Rolipram干预组外周T淋巴细胞凋亡率增加(Bcl- 2表达减少:0 .3439±0 .0 739vs 0 .736 1±0 .0 839,t=2 .6 82 ,P <0 .0 1;Bax表达增加:0 .7380±0 .1372vs 0 .32 2 7±0 .0 4 2 8,t=2 .6 79,P <0 .0 1;同时DNAladder也呈典型的2 0 0bp及其倍数大小的条带) ;CD4 + TH1型淋巴细胞减少(IL- 2A2 6 0 βactinA2 6 0 :0 .0 33±0 .0 0 1vs 0 .2 87±0 .0 0 6 ,t =2 .70 1,P <0 .0 1)而CD4 + TH2型细胞增加(IL 10A2 6 0 βactinA2 6 0 :0 .32 3±0 .0 0 4vs 0 .0 72±0 .0 0 3,t=2 .135 ,P <0 .0 5 ) ;胰岛炎症积分明显减少(Z =- 1.882 ,P <0 .0 1)。结论　磷酸二酯酶Ⅳ型抑制剂Rolipram能引起T细胞功能抑制,减轻NOD小鼠自身免疫反应程度,保护胰岛β细胞功能,其机制可能是通过T细胞亚群由TH1型向TH2型定向漂移实现的。 展开更多
关键词 磷酸二酯酶抑制剂 ROLIPRAM NOD小鼠 免疫应答 糖尿病 免疫干预 治疗
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鲍曼不动杆菌消毒剂——磺胺耐药基因研究 被引量：1
9
作者 蔡挺 张顺 +1 位作者 陈琳 许小敏 《世界感染杂志》 2007年第4期300-302,共3页
目的了解鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺基因（qacE△1-sul1）存在情况。方法自临床分离27株鲍曼不动杆菌，采用聚合酶链反应法检测qacE△1-sul1基因和Ⅰ类整合酶基因（intⅠ1）。结果27株AB菌检测qacE△1-su1Ⅰ基因阳性22株（81-4％），int... 目的了解鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺基因（qacE△1-sul1）存在情况。方法自临床分离27株鲍曼不动杆菌，采用聚合酶链反应法检测qacE△1-sul1基因和Ⅰ类整合酶基因（intⅠ1）。结果27株AB菌检测qacE△1-su1Ⅰ基因阳性22株（81-4％），intⅠ1基因阳性23株（85.2％）。qacE△l-su1Ⅰ基因和intⅠ1基因具有相关性。结论我院临床分离的鲍曼不动杆菌qacE△1-sul1基因携带率较高。这和qacE△1-sul1基因与Ⅰ类整合酶基因整合在一起有关。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 耐消毒剂-磺胺基因 ⅰ类整合酶基因 PCR
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4种市售水产品抗生素耐药基因和intⅠ1实时荧光定量PCR检测
10
作者 毛海萍 叶繁 +3 位作者 赵巧灵 金仁耀 吴佳佳 戴志远 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第10期247-254,共8页
为掌握水产品中抗生素耐药基因(ARGs)和Ⅰ类整合子intⅠ1含量及分布,本研究建立了水产品常见抗生素耐药基因实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系。以含目的基因tetA、sul2、blaPSE、cmlA、qnrS、aac(6’)-Ib、intⅠ1的重组质粒为标准品,建立q... 为掌握水产品中抗生素耐药基因(ARGs)和Ⅰ类整合子intⅠ1含量及分布,本研究建立了水产品常见抗生素耐药基因实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系。以含目的基因tetA、sul2、blaPSE、cmlA、qnrS、aac(6’)-Ib、intⅠ1的重组质粒为标准品,建立qPCR标准曲线,按照已建立的qPCR体系对市售沼虾、鲫鱼、黄颡鱼、大黄鱼中ARGs和intⅠ1进行定量。结果表明,6种ARGs的最低检出限在11.5~202拷贝/μL之间,blaPSE的最低检出限为6.6×10^(4)拷贝/μL。沼虾、鲫鱼、黄颡鱼、大黄鱼4种样品都存在高丰度的blaPSE,相对丰度范围为1.17×10^(-4)~5.96×10^(-3),aac(6’)-Ib的相对丰度在4种样品中都较低,在2.38×10^(-8)~6.71×10^(-7)之间。该检测体系以样品中细菌总基因组为模板,可对水产品中6种常见ARGs同时定量检测,能够较客观地揭示市售水产样品中ARGs的种类和数量分布信息,对控制水产品中ARGs污染并保障水产食品安全意义深远。 展开更多
关键词 水产品 抗生素耐药基因 ⅰ类整合子 实时荧光定量PCR
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