覆盆子酮对HepG2细胞胰岛素信号转导通路中SHP-1和IRS-1表达的影响 被引量：7

1

作者 杨浩 谢欣梅 庞晓斌 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1579-1583,共5页

目的观察覆盆子酮对HepG2细胞糖消耗的影响及胰岛素信号转导通路中SHP-1和人胰岛素受体底物(IRS-1)表达的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,采用MTT法检测细胞活力;葡萄糖氧化酶法检测细胞糖消耗;RT-PCR法检测蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1... 目的观察覆盆子酮对HepG2细胞糖消耗的影响及胰岛素信号转导通路中SHP-1和人胰岛素受体底物(IRS-1)表达的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,采用MTT法检测细胞活力;葡萄糖氧化酶法检测细胞糖消耗;RT-PCR法检测蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1的基因表达;Western-blot法检测IRS-1的表达量。结果覆盆子酮可明显促进HepG2细胞对葡萄糖的消耗,明显降低HepG2细胞SHP-1 mRNA基因表达量,并能促进IRS-1蛋白表达量。结论覆盆子酮可能通过影响胰岛素信号转导通路中IRS-1和SHP-1的表达发挥降糖作用。 展开更多

关键词 覆盆子酮 HEPG2 胰岛素信号转导通路 SHP-1 irs-1

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菩人丹超微粉对T2DM大血管病变大鼠骨骼肌组织IRS-1mRNA、GLUT4mRNA表达的影响 被引量：7

2

作者 庞宗然 苏晓慧 +2 位作者 刘祖涵 王朝晖 苏占辉 《上海中医药杂志》 2010年第10期66-69,共4页

目的观察菩人丹超微粉(Pu Ren Dan Superfine Powder,PRD)对2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)大血管病变大鼠骨骼肌组织胰岛素受体底物-1(insulinreceptor substrate-1,IRS-1)mRNA及葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter4 GLUT... 目的观察菩人丹超微粉(Pu Ren Dan Superfine Powder,PRD)对2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)大血管病变大鼠骨骼肌组织胰岛素受体底物-1(insulinreceptor substrate-1,IRS-1)mRNA及葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter4 GLUT4)mRNA表达的影响,探讨PRD调控骨骼肌葡萄糖转运的分子机制。方法以Wistar大鼠造T2DM模型大鼠,造模成功的T2DM大鼠按血糖结合体质量分层随机分为5组:模型组、罗格列酮组、PRD低、中、高剂量(0.885g/kg;1.770g/kg;3.540g/kg)治疗组,另取10只大鼠作为正常对照组。各组动物每日灌胃给药1次,正常对照组和T2DM模型组灌胃等剂量蒸馏水,连续给药4周。实验期间除正常对照组给予普通饲料外,其余各组均给予高脂高热量饲料。采用反转录PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)技术和凝胶电泳成像分析方法,观察T2DM大血管病变大鼠骨骼肌组织IRS-1、GLUT4mRNA表达。结果 T2DM大血管病变大鼠骨骼肌组织IRS-1、GLUT4mRNA表达与正常对照组比较明显降低(P<0.01);PRD治疗组均能提高T2DM大鼠骨骼肌组织IRS-1、GLUT4mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 PRD可提高T2DM大血管病变大鼠骨骼肌IRS-1mRNA及GLUT-4mRNA的表达水平。 展开更多

关键词 菩人丹超微粉 2型糖尿病 胰岛素受体底物-1 葡萄糖转运蛋白4

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橄榄苦苷对胰岛素抵抗HepG2肝细胞胰岛素信号传导的影响 被引量：5

3

作者 杨双 徐继璞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期164-168,共5页

目的：观察橄榄苦苷（oleuropein,OL）对胰岛素抵抗HepG2肝细胞的胰岛素信号传导的影响。方法：常规复苏细胞,于10%FBS＋1%青-链霉素的DMEM（1 g·L^（-1）葡萄糖）培养基中,37℃5%CO_2细胞培养箱中培养,常规细胞培养传至第3代待用... 目的：观察橄榄苦苷（oleuropein,OL）对胰岛素抵抗HepG2肝细胞的胰岛素信号传导的影响。方法：常规复苏细胞,于10%FBS＋1%青-链霉素的DMEM（1 g·L^（-1）葡萄糖）培养基中,37℃5%CO_2细胞培养箱中培养,常规细胞培养传至第3代待用;利用1×10^（-6）mol·L^（-1）胰岛素溶液刺激HepG2肝细胞36 h后建立肝细胞胰岛素抵抗模型,分为模型组,OL组（50μmol·L^（-1））,另设正常HepG2肝细胞为正常组,每组设6个复孔;对数生长期细胞,饥饿培养24 h后,诱导建立胰岛素抵抗模型,进行药物干预36 h后,以细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测OL对细胞活性的影响;OL对胰岛素抵抗HepG2肝细胞干预后,实时荧光定量PCR（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测肝细胞胰岛素受体（InsR）,胰岛素受体底物-1（IRS-1）,葡萄糖转运蛋白-2（GLUT-2）mRNA和蛋白表达水平。结果：与正常组比较,模型组胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性明显降低（P〈0.05）,胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显降低（P〈0.05,P〈0.01）。与模型组比较,OL干预后胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性显著升高（P〈0.01）;胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显升高（P〈0.05,P〈0.01）。结论：OL能够增加胰岛素抵抗肝细胞活性,上调肝细胞胰岛素信号通路中InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白的表达,这可能是其改善胰岛素抵抗的机制之一。 展开更多

关键词 橄榄苦苷 2型糖尿病 胰岛素抵抗 HepG2肝细胞 胰岛素受体 胰岛素受体底物-1 葡萄糖转运蛋白-2

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二甲双胍通过抑制核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6)调节体外人颗粒细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达 被引量：5

4

作者 张永芳 王蒙蒙 +5 位作者 李昕 王永峰 裴秀英 王燕蓉 马会明 徐仙 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期146-153,共8页

目的:探讨二甲双胍对核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k)及胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白及其ser307位点磷酸化表达的影响。方法:利用0.1 mmol/L二甲双胍体外连续作用多囊卵巢综合症(PCOS)患者黄素化颗粒细胞24 h为实验组,设未加二甲双... 目的:探讨二甲双胍对核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k)及胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白及其ser307位点磷酸化表达的影响。方法:利用0.1 mmol/L二甲双胍体外连续作用多囊卵巢综合症(PCOS)患者黄素化颗粒细胞24 h为实验组,设未加二甲双胍培养的颗粒细胞为对照组。通过RT-PCR和Real-time PCR检测P70S6k和IRS-1的表达,细胞免疫荧光化学和Western blotting的方法检测P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白的表达。结果:Real-time PCR结果显示实验组P70S6k和IRS-1m RNA水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞免疫荧光化学检测IRS-1和p-ser307-IRS-1蛋白在颗粒细胞胞质表达,P70S6k和p-thr389-P70S6k蛋白在细胞核表达。Western blotting法结果显示二甲双胍作用24 h前、后卵巢颗粒细胞P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达有统计学差异(P<0.05),灰度值分析显示添加二甲双胍组P70S6k、p-thr389-P70S6k蛋白表达显著升高,IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论:二甲双胍可抑制人颗粒细胞P70S6k的表达,并通过Akt/P70S6k/IRS途径调节IRS-1的表达,从而增加颗粒细胞胰岛素的敏感性。 展开更多

关键词 二甲双胍 核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k) 胰岛素受体底物-1(irs-1) 人颗粒细胞

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不同中药提取物对胰岛素抵抗L6肌细胞葡萄糖摄取率的影响 被引量：4

5

作者 龚连生 李媛媛 邹从贤 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第21期5-10,共6页

目的研究不同中药提取物对构建的L6细胞胰岛素抵抗性的影响。方法构建L6胰岛素抵抗细胞。将大鼠L6肌细胞分为9组:正常L6细胞组(NC)、胰岛素抵抗组(IR)和7组不同中药处理实验组(IRDrug Treated)。随后测定各组细胞葡萄糖摄取量,评估各中... 目的研究不同中药提取物对构建的L6细胞胰岛素抵抗性的影响。方法构建L6胰岛素抵抗细胞。将大鼠L6肌细胞分为9组:正常L6细胞组(NC)、胰岛素抵抗组(IR)和7组不同中药处理实验组(IRDrug Treated)。随后测定各组细胞葡萄糖摄取量,评估各中草药对胰岛素抵抗细胞葡萄糖代谢影响。结果随着时间的延长,IR组细胞葡萄糖摄取率比NC组细胞葡萄糖摄取率显著下降6.4%(P<0.05)。IR组与各实验组对比结果显示:细胞培养6 h时,实验组细胞中只有小檗碱组细胞葡萄糖摄取率比IR组显著上升(P<0.05),其他组细胞葡萄糖摄取率与IR组之间并无明显差异(P>0.05)。细胞培养12 h,中药提取物处理组中小檗碱、葛根素、黄芪多糖、麦冬多糖和大黄素组细胞葡萄糖摄取率较IR组均显著上升(P<0.05),且这种显著性随着培养时间的延长逐步增强;而人参皂苷组细胞和银杏叶提取物组细胞葡萄糖摄取率虽略有上升,但差异并不显著(P>0.05)。结论小檗碱、葛根素、黄芪多糖、麦冬多糖和大黄素均可通过增强IRS-1酪氨酸磷酸化来增强胰岛素抵抗L6细胞葡萄糖摄取能力。 展开更多

关键词 糖尿病 胰岛素抵抗 葡萄糖摄取 胰岛素受体底物-1(irs-1) 葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)

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经验方糖通饮对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢的影响及机制 被引量：2

6

作者 陈俞如 潘艳伶 +1 位作者 马欢 伏红颖 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第4期379-385,共7页

目的探讨经验方糖通饮对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠脂质代谢的影响及机制。方法选取8周龄(SD)雄性大鼠44只,随机取10只作为正常组(基础饲料喂养,注射等剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液),其余大鼠建立T2DM合并NAFLD模型... 目的探讨经验方糖通饮对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠脂质代谢的影响及机制。方法选取8周龄(SD)雄性大鼠44只,随机取10只作为正常组(基础饲料喂养,注射等剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液),其余大鼠建立T2DM合并NAFLD模型(高脂高糖饲料喂养,低剂量链脲佐菌素腹腔注射),连续处理8周,于正常组和造模大鼠中各取2只验证造模成功与否;将余下造模成功的32只大鼠随机分为模型组及糖通饮低(12 g/kg)、中(24 g/kg)、高剂量(36 g/kg)组,各剂量组大鼠分别予相应浓度糖通饮灌胃,模型组和正常组大鼠予等容积双蒸水灌胃,连续8周;各组大鼠灌胃结束后,称取体质量,取尾静脉血检测空腹血糖(FBG)水平;10%水合氯醛腹腔注射麻醉各组大鼠,取腹主动脉血采用ELISA法检测血清胰岛素(FINS),分光光度计比色法检测血清游离脂肪酸(FFA),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感指数(ISI);各组大鼠取血后迅速摘取肝组织计算肝脏指数、GPO-PAP法检测甘油三酯(TG)含量,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肝组织学特征,Western blot法检测磷酸化c-Jun氨基末端激酶-1(p-JNK1)/c-Jun氨基末端激酶-1(JNK1)、磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)/胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠肝细胞内存在明显脂肪样变性,HOMA-IR、肝脏指数、血清FFA水平、肝组织TG含量及肝组织p-JNK1/JNK1、p-IRS-1/IRS-1蛋白表达水平均升高(P<0.05),ISI水平降低(P<0.05);与模型组比较,糖通饮各剂量组大鼠肝细胞脂肪样变性均有不同程度的改善,HOMA-IR、肝脏指数、血清FFA水平、肝组织TG含量、肝组织p-JNK1/JNK1及p-IRS-1/IRS-1蛋白表达水平均降低(P<0.05),ISI水平增高(P<0.05)。结论经验方糖通饮可有效调节T2DM合并NAFLD大鼠肝脏的脂质代谢,减轻肝细胞脂肪变性程度,其机制可能与抑制肝组织JNK信号通路相关蛋白表达� 展开更多

关键词 2型糖尿病 糖通饮 非酒精性脂肪肝 脂质代谢 c-Jun氨基末端激酶-1 胰岛素受体底物-1 磷酸化

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消脂汤对FFA诱导NASH细胞模型的影响及其相关机制 被引量：2

7

作者 朱青 温天燕 +2 位作者 杨道炬 王晓歌 袁冬生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第23期109-115,共7页

目的:探讨消脂汤对游离脂肪酸(FFA)诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)细胞模型的作用及机制。方法:用0.5μmol·L-1FFA诱导Hep G2细胞建立NASH细胞模型,用消脂汤及非诺贝特干预NASH细胞模型;油红O染色观察细胞内脂滴含量;酶联免疫吸... 目的:探讨消脂汤对游离脂肪酸(FFA)诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)细胞模型的作用及机制。方法:用0.5μmol·L-1FFA诱导Hep G2细胞建立NASH细胞模型,用消脂汤及非诺贝特干预NASH细胞模型;油红O染色观察细胞内脂滴含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子-κB(NF-κB)p65,IκB激酶(IKKβ),IκB磷酸化激酶[Phospho-IKKα/β(Ser176/180)],胰岛素受体底物1磷酸化蛋白[Phospho-IRS-1(Ser^(307))],胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白表达。结果:FFA刺激24 h后,模型组内脂滴含量,细胞上清液中TNF-α,IL-6含量高于正常组(P<0.01),IKKβ,p-IKKα/β(Ser176/180),p-IRS-1(Ser^(307)),NF-κB(核蛋白)表达明显增加(P<0.01),IRS-1蛋白表达减少(P<0.05),各给药组p-IKKα/β(Ser176/180),p-IRS-1(Ser^(307)),NF-κB p65(核蛋白)表达减少(P<0.01),尤其是消脂汤高浓度组较非诺贝特p-IKKα/β(Ser176/180),p-IRS-1(Ser^(307))蛋白表达显著减少(P<0.01),各给药组IRS-1蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论:消脂汤可改善FFA诱导的NASH细胞模型中脂质沉积及炎症反应,其机制可能与抑制细胞内IKKα/β,IRS-1 Ser^(307)的磷酸化及IKKβ,NF-κB p65(核蛋白)表达有关。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪性肝炎 HEP G2细胞模型 消脂汤 游离脂肪酸 核转录因子-κB IκB抑制蛋白激酶α/β 胰岛素受体底物-1

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APP17肽对心肺复苏大鼠海马神经元IR IRS-1表达的影响 被引量：1

8

作者 王晶 路毅 +2 位作者 王蓉 赵妍 盛树力 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期831-833,I0002,共4页

目的观察APP17肽对心肺复苏大鼠海马神经元CA1区胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)表达的影响。方法24只SD大鼠随机分为3组：假手术对照组(对照组)、心肺复苏组(复苏组)、APP17肽组,每组8只。用室息法制作大鼠心肺复苏模型。APP1... 目的观察APP17肽对心肺复苏大鼠海马神经元CA1区胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)表达的影响。方法24只SD大鼠随机分为3组：假手术对照组(对照组)、心肺复苏组(复苏组)、APP17肽组,每组8只。用室息法制作大鼠心肺复苏模型。APP17肽组于自主循环恢复(ROSC)时立即静脉注射APP17肽3．33μg/100 g体质量,约5 mL；对照组和复苏组给予等剂量生理盐水。2 h后断头取脑行免疫组化染色,观察3组大鼠海马CAl区神经元IR、IRS-1表达的变化。结果与对照组相比复苏组大鼠海马CA1区IR、IRS-1染色阳性神经元明显减少(P＜0．05-0．01)差异有统计学意义；与复苏组相比APP17肽组IR、IRS-1阳性神经元明显增加,差异有统计学意义(P＜0．05～0．01)。结论心肺复苏大鼠海马神经元IR、IRS-1表达降低,复苏早期给予APP17肽干预可使其表达恢复正常或接近正常。 展开更多

关键词 心肺复苏:APP17肽 胰岛素受体(IR) 胰岛素受体底物-1(irs-1)

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2型糖尿病大鼠肝脏IRS-1的变化及丝胶的调节作用 被引量：1

9

作者 张银广 王佳宇 +3 位作者 李朴涵 吴合亮 王鹏 刘东慧 《承德医学院学报》 2020年第2期101-105,共5页

目的:研究2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体底物-1(IRS-1)表达的变化及丝胶的调节作用。方法:将36只雄性SPF级SD大鼠随机分为正常组(12只)和造模组(24只),造模组大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素+高脂高糖饲料饲养的方法建立2型糖尿病大鼠模型,... 目的:研究2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体底物-1(IRS-1)表达的变化及丝胶的调节作用。方法:将36只雄性SPF级SD大鼠随机分为正常组(12只)和造模组(24只),造模组大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素+高脂高糖饲料饲养的方法建立2型糖尿病大鼠模型,成模后将大鼠随机分为模型组(12只)和实验组(12只)。连续给予实验组大鼠丝胶、其余组大鼠生理盐水灌胃35d。葡萄糖氧化酶法用于检测各组大鼠空腹血糖;SP免疫组织化学法、Real Time Q-PCR法用于检测各组大鼠肝脏IRS-1的表达。结果:同模型组大鼠相比,实验组大鼠血糖明显降低、IRS-1的表达明显升高(P<0.05)。结论:丝胶降低血糖的作用可能是通过上调肝脏IRS-1的表达进而增强胰岛素信号通路的转导效应来实现。 展开更多

关键词 2型糖尿病 肝脏 胰岛素受体底物-1(irs-1) 丝胶

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血脂变化对OLETF大鼠肝脏、脂肪组织胰岛素受体底物1和含2个SH结构的蛋白酪氨酸磷酸酶蛋白表达的影响 被引量：1

10

作者 刘凤 彭定琼 +1 位作者 郭晓蕙 高妍 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期275-277,共3页

目的观察血脂变化对OLETF大鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)和含2个SH结构的蛋白酪氨酸磷酸酶(SH-PTP2)蛋白表达的影响。方法 14只OLETF大鼠被随机分为降脂治疗组和对照组。采用Western杂交技术检测OLETF大鼠肝脏、脂肪组织内IRS-1及SH-PTP2... 目的观察血脂变化对OLETF大鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)和含2个SH结构的蛋白酪氨酸磷酸酶(SH-PTP2)蛋白表达的影响。方法 14只OLETF大鼠被随机分为降脂治疗组和对照组。采用Western杂交技术检测OLETF大鼠肝脏、脂肪组织内IRS-1及SH-PTP2的蛋白表达水平。结果降脂治疗组血糖及血脂水平较对照组下降(P<0.05),肝脏、脂肪组织内IRS-1蛋白表达较对照组增加(t=14.61,15.76,P均<0.01),而SH-PTP2的蛋白表达较对照组减少(t=-3.07、-28.76,P均<0.01)。结论降脂治疗可增加OLETF大鼠肝脏、脂肪组织内IRS-1蛋白表达,减少其SH-PTP2蛋白表达,并可能因此影响其胰岛素信号传导,改善其靶组织对胰岛素的敏感性。 展开更多

关键词 胰岛素受体底物-1 含2个SH结构的蛋白酪氨酸磷酸酶 糖尿病 2型 OLETF大鼠 非诺贝特 脂代谢

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妊娠糖尿病患者网IRS-1与GLUT4的表达及其与胰岛素抵抗关系的研究

11

作者 刘建月 《中医临床研究》 2010年第24期49-49,51,共2页

妊娠期糖尿病指妊娠前无糖尿病亦无糖耐量减低的妇女,在妊娠期间首次发生或发现的葡萄糖耐量异常.

关键词 妊娠期糖尿病(GDM) 胰岛素受体底物-1(irs-1) 葡萄糖转运蛋白4(GLUT4) 胰岛素抵抗(IR)

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白虎汤调节IRS-1/PI3K/Akt信号通路对2型糖尿病大鼠血糖、血脂代谢及血管重构的影响 被引量：21

12

作者 郭杨志 杜娟 姜敏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期23-30,共8页

目的:研究白虎汤对2型糖尿病大鼠的血糖、血脂代谢,血管重构的影响及其对胰岛素受体底物-1(IRS-1)/胞内磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的调节作用。方法:将90只大鼠随机分为正常组、模型组、白虎汤低、中、高剂量组及... 目的:研究白虎汤对2型糖尿病大鼠的血糖、血脂代谢,血管重构的影响及其对胰岛素受体底物-1(IRS-1)/胞内磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的调节作用。方法:将90只大鼠随机分为正常组、模型组、白虎汤低、中、高剂量组及二甲双胍组,15只/组,除正常组大鼠外,其余大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素法建立2型糖尿病模型。白虎汤低、中、高剂量组大鼠根据体质量分别灌胃给予大鼠白虎汤溶液,剂量分别为5,10,20 g·kg^(-1),二甲双胍组灌胃给予大鼠二甲双胍(100 mg·kg^(-1)),正常组及模型组给予等体积生理盐水,所有大鼠每日给药1次,连续给药12周。给药结束后测定各组大鼠空腹血糖,糖化血红蛋白,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肝脏固醇调节元件结合蛋白1C(SREBP1C),乙酰CoA羧化酶(ACC),脂肪酸合成酶基因(FASN)等脂质合成基因及肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A),酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1),重组人中链酰基辅酶A脱氢酶(ACADM)等脂肪酸氧化基因的mRNA水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝脏IRS-1,PI3K,Akt蛋白水平,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胸主动脉血管组织病理学变化,划痕实验检测大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞迁移能力。结果:与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、血清TNF-α,IL-6,IL-1β,TC,TG及LDL-C水平,肝脏脂质合成基因mRNA水平,大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞迁移能力均明显升高(P<0.05),肝脏脂肪酸氧化基因mRNA水平及IRS-1,PI3K,Akt蛋白表达明显降低(P<0.05),大鼠胸主动脉血管壁厚度明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,白虎汤各剂量组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、血清TNF-α,IL-6,IL-1β,TC,TG及LDL-C� 展开更多

关键词 白虎汤 2型糖尿病 胰岛素受体底物-1(irs-1)/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路 血管重构

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小檗碱对体外HepG2细胞IR模型抗IR的效应及机制 被引量：6

13

作者 张敬升 黄伟 谢鸣 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期138-143,共6页

目的：探讨小檗碱对HepG2细胞胰岛素抵抗（IR）模型的改善作用及机制。方法：HepG2细胞采用高糖（25 mmol·L（-1））和高胰岛素（1×10（-6）mol·L（-1））联合诱导24 h,建立体外IR模型。模型培养液中分别加入1×10... 目的：探讨小檗碱对HepG2细胞胰岛素抵抗（IR）模型的改善作用及机制。方法：HepG2细胞采用高糖（25 mmol·L（-1））和高胰岛素（1×10（-6）mol·L（-1））联合诱导24 h,建立体外IR模型。模型培养液中分别加入1×10（-5）,1×10（-6）mol·L（-1）小檗碱,设1×10-3mol·L（-1）二甲双胍作为阳性药,孵育24 h。葡萄糖氧化酶法检测培养液葡萄糖含量,计算细胞葡萄糖消耗量,细胞增殖活性检测（CCK-8）测定细胞增殖活性;生化法检测细胞丙酮酸激酶（PK）活性,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞葡萄糖激酶（GCK）和葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）的活性;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测细胞胰岛素受体（InsR）,磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B（Akt）和GLUT2 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞胰岛素受体底物-1（IRS-1）,磷酸化的磷脂酰肌醇-3激酶（p-PI3K）和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B（p-Akt）的表达水平。结果：与正常组比较,模型组细胞葡萄糖消耗量显著降低（P〈0.01）,PK,GCK,GLUT2蛋白活性显著降低（P〈0.01）,InsR,PI3K,Akt,GLUT2 mRNA表达水平显著降低（P〈0.01）,IRS-1,p-PI3K,p-Akt蛋白表达水平显著降低（P〈0.01）。与模型组比较,小檗碱组和二甲双胍组的细胞葡萄糖消耗量明显增加（P〈0.01）,PK,GCK,GLUT2蛋白活性显著升高（P〈0.01）,InsR,PI3K,Akt,GLUT2 mRNA和IRS-1,p-PI3K,p-Akt1蛋白表达水平均明显升高（P〈0.05,P〈0.01）。结论：小檗碱体外对HepG2细胞IR模型有显著的改善作用,其机制可能通过调节IRS-1/PI3K/Akt信号通路促进肝脏葡萄糖转运和改善葡萄糖代谢。 展开更多

关键词 小檗碱 胰岛素抵抗 HEPG2细胞 胰岛素受体底物-1 (irs-1)/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B (Akt)/葡萄糖转运蛋白2 (GLUT2)通路

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TNF琢对体外培养的人脂肪细胞葡萄糖摄取和IRS-1酪氨酸磷酸化的影响 被引量：3

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作者 王竹晨 顾熊飞 +3 位作者 卢汉平 高锦辉 杨冬梓 邝健全 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期48-50,60,共4页

【目的】探讨肿瘤坏死因子琢(TNF琢)对体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取和胰岛素受体底物1(IRS-1)酪氨酸磷酸化的影响,为多囊卵巢综合征(PCOS)的胰岛素抵抗(IR)病因学研究提供新的实验依据。【方法】脂肪细胞葡萄糖摄取的测... 【目的】探讨肿瘤坏死因子琢(TNF琢)对体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取和胰岛素受体底物1(IRS-1)酪氨酸磷酸化的影响,为多囊卵巢综合征(PCOS)的胰岛素抵抗(IR)病因学研究提供新的实验依据。【方法】脂肪细胞葡萄糖摄取的测定采用3H标脱氧右旋葡萄糖(2-[3H]DG)吸收法,IRS-1酪氨酸磷酸化的检测采用免疫沉淀、Western印迹和增强化学发光蛋白免疫印迹法及图像分析。【结果】①胰岛素(100nmol/L)作用下,TNF琢刺激浓度分别为0、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL时,脂肪细胞2-[3H]DG的摄取分别为(652±203)U,(609±172)U,(511±135)U和(404±168)U,当TNF琢刺激浓度达20ng/mL时,脂肪细胞对葡萄糖摄取的降低有显著性差异(P<0.05)。②胰岛素(100nmol/L)刺激下IRS-1的酪氨酸磷酸化在TNF琢(5ng/mL)作用时(74.50%±16.86%)较无TNF琢作用(94.00%±14.70%)有所降低,但无显著性差异;当TNF琢刺激浓度分别为10ng/mL(31.16%±10.44%)和20ng/mL(27.33%±9.63%)时,胰岛素(100nmol/L)刺激后IRS-1的酪氨酸磷酸化明显降低(P<0.001)。【结论】①TNF琢刺激浓度的升高可抑制体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取。②TNF琢可抑制体外培养的人脂肪细胞胰岛素刺激的IRS-1的酪氨酸磷酸化,并存在一定的量效关系。 展开更多

关键词 irs-1 TNFα 脂肪细胞 葡萄糖摄取 酪氨酸磷酸化 体外培养 胰岛素 刺激 蛋白免疫印迹法 信号传导

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奈比洛尔对血管内皮细胞胰岛素抵抗的影响 被引量：3

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作者 李秋萍 武利军 王燕 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第13期1448-1451,共4页

目的观察奈比洛尔改善人主动脉内皮细胞(HAEC)胰岛素抵抗(IR)的作用及机制。方法HAEC分为空白组(正常培养,胰岛素不刺激),对照组(正常培养,胰岛素刺激),不同浓度奈比洛尔+对照组(对照组基础上加奈比洛尔0.1,1,10μmol·L^(-1)),IR组... 目的观察奈比洛尔改善人主动脉内皮细胞(HAEC)胰岛素抵抗(IR)的作用及机制。方法HAEC分为空白组(正常培养,胰岛素不刺激),对照组(正常培养,胰岛素刺激),不同浓度奈比洛尔+对照组(对照组基础上加奈比洛尔0.1,1,10μmol·L^(-1)),IR组(高糖33.3 mmol·L^(-1)+胰岛素1×10^(-7) mol·L^(-1)),不同浓度奈比洛尔+IR组(IR基础上加奈比洛尔0.1,1,10μmol·L^(-1))。48 h后,细胞无血清饥饿处理12 h。以噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,以葡萄糖氧化酶法测HAEC葡萄糖消耗量,以硝基还原酶法检测上清液一氧化氮(NO)水平,以蛋白质印迹法测定蛋白表达。结果与对照组(100%)比较,IR组细胞活性无显著性改变(95.13±2.10)%,且不同浓度奈比洛尔(0.1、1、10μmol·L^(-1))预处理对IR组和对照组细胞活性均无显著性影响。IR组的细胞葡萄糖消耗量和上清液NO水平分别为(0.53±0.17)mmol·L^(-1),(33.11±1.35)μmol·L^(-1),对照组分别为(1.14±0.24)mmol·L^(-1),(38.50±3.43)μmol·L^(-1);1μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组分别为(0.94±0.15)mmol·L^(-1),(39.15±1.44)μmol·L^(-1),10μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组分别为(0.89±0.19)mmol·L^(-1),(37.31±1.90)μmol·L^(-1),对照组与IR组比较,差异有统计学意义(P<0.05);1,10μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组与IR组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。蛋白质印迹显示IR组细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1),磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),磷酸化Akt(p-Akt),内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达均较对照组降低,p-IRS-1蛋白表达升高(P<0.05);1μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组以上蛋白表达与IR组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论奈比洛尔调节IRS-1/PI3K/Akt/eNOS改善血管内皮细胞IR。 展开更多

关键词 奈比洛尔 内皮细胞 胰岛素抵抗 胰岛素受体底物-1(irs-1)/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)途径

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胰岛素受体底物1低表达促进头颈部鳞状细胞癌的侵袭转移 被引量：3

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作者 罗璇 黄文斌 +3 位作者 翟溯澜 马倬 李萍 王雪融 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第7期744-750,共7页

目的:研究胰岛素受体底物1(insulin re-ceptor substrate 1,IRS-1)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)侵袭转移中的作用及其可能的机制。方法:应用定量RT-PCR法检测HNSCC患者淋巴结转移灶和原发灶癌组织... 目的:研究胰岛素受体底物1(insulin re-ceptor substrate 1,IRS-1)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)侵袭转移中的作用及其可能的机制。方法:应用定量RT-PCR法检测HNSCC患者淋巴结转移灶和原发灶癌组织中IRS-1mRNA的表达,以及不同转移能力头颈部肿瘤细胞株上IRS-1mRNA的表达。用Taqman探针法检测miR-9及U6的相对表达量。利用小干扰RNA技术阻抑IRS-1表达,肿瘤细胞侵袭实验检测IRS-1干扰前后对细胞侵袭能力的影响。用定量RT-PCR和Western blot检测上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的标志物E-cad-herin及vimentin mRNA和蛋白的表达;用SRB法检测细胞存活率。结果:(1)HNSCC患者淋巴结转移灶中IRS-1mRNA的表达低于原发灶(P<0.05);高转移性HNSCC细胞株中IRS-1mRNA的表达低于低转移性细胞株(P<0.05)。(2)下调IRS-1表达,肿瘤细胞的侵袭能力增强,上皮-间叶转化标志物E-cadherin表达下降,同时伴有miR-9表达的升高。结论:IRS-1低表达可能通过上皮-间叶转化和上调miR-9而增强细胞的侵袭能力,促进HNSCC的转移。 展开更多

关键词 胰岛素受体底物1 头颈部鳞状细胞癌 转移 E-钙黏蛋白 MIR-9

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复方贞术调脂方对HepG2细胞胰岛素抵抗的作用及机制研究 被引量：13

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作者 王槾 郭姣 +2 位作者 胡旭光 贝伟剑 韩宗余 《广东药学院学报》 CAS 2014年第2期202-206,共5页

目的观察复方贞术调脂方(FTZ)对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞的作用,为开拓FTZ的治疗范围,阐明FTZ调节糖脂代谢的机制提供实验依据。方法用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞使其产生胰岛素抵抗,用高、中、低3个剂量的FTZ干预后,葡萄糖氧化酶法检测... 目的观察复方贞术调脂方(FTZ)对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞的作用,为开拓FTZ的治疗范围,阐明FTZ调节糖脂代谢的机制提供实验依据。方法用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞使其产生胰岛素抵抗,用高、中、低3个剂量的FTZ干预后,葡萄糖氧化酶法检测HepG2细胞培养液上清液中葡萄糖的含量,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞胰岛素信号PI-3Kp85 mRNA的表达,Western blot检测HepG2细胞胰岛素信号转导蛋白IRS1表达。结果模型细胞培养基上清液中葡萄糖含量高于正常细胞(P<0.05)。给予FTZ(1、25、100μg/mL)后,HepG2细胞培养基上清液中葡萄糖含量均低于模型细胞葡萄糖含量(P<0.05)。胰岛素抵抗细胞与正常细胞相比PI-3Kp85 mRNA和IRS1的蛋白表达显著降低(P<0.05)。给予FTZ干预后,与胰岛素抵抗细胞相比PI-3Kp85 mRNA和IRS1的蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论FTZ可改善胰岛素抵抗HepG2细胞对葡萄糖的摄取。其改善胰岛素抵抗的作用机制之一可能是通过上调胰岛素信号PI-3Kp85 mRNA和IRS1蛋白质在胰岛素抵抗HepG2细胞的表达。 展开更多

关键词 复方贞术调脂方 胰岛素抵抗 磷脂酰肌醇-3-激酶 胰岛素受体底物1

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PKC在软脂酸诱导的肝细胞胰岛素抵抗信号转导中的作用 被引量：3

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作者 万学东 陈宝生 +1 位作者 夏炎枝 王西明 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期115-116,共2页

目的探讨蛋白激酶PKC在软脂酸(PA)诱导的肝细胞胰岛素抵抗中的作用。方法将DMEM培养基中含0.25mmol/L的软脂酸(PA组)与HepG2细胞共同培养24h,并设立正常对照组(Control组)。加入PKC抑制剂chelerythrine chloride(CC),胰岛素刺激后分光... 目的探讨蛋白激酶PKC在软脂酸(PA)诱导的肝细胞胰岛素抵抗中的作用。方法将DMEM培养基中含0.25mmol/L的软脂酸(PA组)与HepG2细胞共同培养24h,并设立正常对照组(Control组)。加入PKC抑制剂chelerythrine chloride(CC),胰岛素刺激后分光光度酶偶联速率法测定胞内糖异生限速酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性,Western blot测定胞内胰岛素受体底物2(IRS-2)蛋白水平。结果PA组与Control组相比,基础及胰岛素刺激的PEPCK活性升高(P<0.05);加入CC与否,Control组IRS-2蛋白水平存在明显差异(P<0.05),PA组中却无明显变化(P>0.05),而PEPCK活性在Control组、PA组均无明显改变(P>0.05)。结论细胞胰岛素抵抗时,糖异生的关键酶活性以及胰岛素信号通路的信号蛋白异常改变,胰岛素信号转导PKC通路可能存在传导障碍。 展开更多

关键词 胰岛素抵抗 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK) 胰岛素受体底物2(irs-2)

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复方黄连降糖片对2型糖尿病大鼠IRS-1基因表达的影响 被引量：5

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作者 宋菊敏 舒适 +2 位作者 刘小美 宋丽娜 周金芳 《上海中医药大学学报》 CAS 2009年第4期71-74,共4页

目的:探讨复方黄连降糖片治疗2型糖尿病的可能作用机制。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予复方黄连降糖片治疗8周。氧化酶法测定血糖,放射免疫双抗体法测定血清胰岛素,RT-PCR法测定大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪... 目的:探讨复方黄连降糖片治疗2型糖尿病的可能作用机制。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予复方黄连降糖片治疗8周。氧化酶法测定血糖,放射免疫双抗体法测定血清胰岛素,RT-PCR法测定大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织IRS-1 mRNA的表达及Western blot法测定肝脏、骨骼肌和脂肪组织IRS-1蛋白的表达。结果:复方黄连降糖片治疗组大鼠的血糖和血清胰岛素均有所下降,各组织IRS-1的基因表达均显著提高。结论:复方黄连降糖片可能通过提高外周组织IRS-1的基因表达,从而对2型糖尿病起到治疗的作用。 展开更多

关键词 2型糖尿病 复方黄连降糖片 胰岛素受体底物-1 实验研究

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清心开窍方对Aβ25-35诱导原代海马神经元损伤IGF-1R、IRS-1及Aβ mRNA表达的影响 被引量：2

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作者 李燕 杨文育 +3 位作者 高诗雨 林坚炜 王天琪 胡海燕 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第8期1810-1814,I0005,共6页

目的：研究清心开窍方对Aβ25-35诱导原代海马神经元细胞损伤胰岛素样生长因子1受体（insulin—like growth factor 1 receptor，IGF-1R）、胰岛素受体底物蛋白1（insulin receptor substrate-1，IRS-1）及β-淀粉样蛋白（β—amyloid，... 目的：研究清心开窍方对Aβ25-35诱导原代海马神经元细胞损伤胰岛素样生长因子1受体（insulin—like growth factor 1 receptor，IGF-1R）、胰岛素受体底物蛋白1（insulin receptor substrate-1，IRS-1）及β-淀粉样蛋白（β—amyloid，Aβ）基因表达的影响，探讨清心开窍方对神经元细胞的保护作用及其机制。方法：制备sD乳鼠原代海马神经元细胞，分为6组：正常对照组、模型组、尼莫地平组（1×107mol.L-1）、清心开窍方低、中、高剂量组（6.25、12.5、25mg/mL）。支持培养至第7天，各治疗组分别给予相应药物预处理24h后，模型组及各治疗组加入老化处理的Aβ25-35。（终浓度为10 μmol.L-1）共同作用24h，建立AD细胞模型。正常对照组给予相等体积的培养液继续孵育24h。采用CCK一8法检测各组的细胞活力，RT—PCR法检测各组IGF-1R、IRS-1和Aβ mRNA的表达水平。结果：模型组与正常对照组比较细胞活性明显降低（P〈0.01），而清心开窍方能有效改善细胞活性；RT—PCR法结果显示模型组IGF-1R mRNA明显降低（P〈0.01），IRS-1和Aβ mRNA表达均明显增加（P〈0.01），而不同浓度的清心开窍方处理后均能提高IGF-1R mRNA的表达（P〈0.01或P〈0.05），减少IRS-1和Aβ mRNA表达（P〈0.01或P〈0.05）。结论：清心开窍方能减轻β一淀粉样蛋白对神经元细胞的毒性作用，提高细胞存活率，保护海马神经元细胞。 展开更多

关键词 清心开窍方 原代海马神经元细胞 胰岛素样生长因子1受体 胰岛素受体底物蛋白1 β-淀粉样蛋白

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