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优化密码子及诱导温度提高雪白根霉脂肪酶在毕赤酵母中的表达
被引量:
3
1
作者
王建荣
刘丹妮
+6 位作者
夏雨
杨玲
刘金山
唐业
陈丽芝
黄佳乐
李阳源
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期18-23,共6页
根据毕赤酵母密码子的偏好性,通过在线软件对雪白根霉脂肪酶基因(rnl)进行密码子优化。优化后的脂肪酶基因(rnl-opt)GC含量由原来的46%提高到49%,碱基A,T,C,G均匀分布,减少了AT和GC富集区,适应指数由0.82提升到0.85。将rnl-opt连接到表...
根据毕赤酵母密码子的偏好性,通过在线软件对雪白根霉脂肪酶基因(rnl)进行密码子优化。优化后的脂肪酶基因(rnl-opt)GC含量由原来的46%提高到49%,碱基A,T,C,G均匀分布,减少了AT和GC富集区,适应指数由0.82提升到0.85。将rnl-opt连接到表达载体p PICZαA并转入毕赤酵母X33中。将含有rnl和rnlopt的重组工程菌在摇瓶和50 L发酵罐中进行诱导表达。摇瓶培养条件下,含有rnl和rnl-opt重组工程菌的最大酶活分别为458、956 U/m L。50 L发酵罐培养条件下,含有rnl和rnl-opt重组工程菌的最大酶活和总蛋白浓度分别为14 856、30 500 U/m L和3.61、7.8 g/L。为了进一步提高含rnl-opt重组工程菌的表达酶活,对其在50L发酵罐培养的诱导温度进行优化,当诱导温度为22℃时,含rnl-opt重组工程菌的酶活和细胞湿重均达到最大值分别为39 520 U/m L和461 g/L。相对于30℃,酶活和细胞湿重分别提高了30%和16%。
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关键词
密码子优化
诱导温度优化
雪白根霉
脂肪酶
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职称材料
题名
优化密码子及诱导温度提高雪白根霉脂肪酶在毕赤酵母中的表达
被引量:
3
1
作者
王建荣
刘丹妮
夏雨
杨玲
刘金山
唐业
陈丽芝
黄佳乐
李阳源
机构
广东溢多利生物科技股份有限公司
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期18-23,共6页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2014AA093514)
文摘
根据毕赤酵母密码子的偏好性,通过在线软件对雪白根霉脂肪酶基因(rnl)进行密码子优化。优化后的脂肪酶基因(rnl-opt)GC含量由原来的46%提高到49%,碱基A,T,C,G均匀分布,减少了AT和GC富集区,适应指数由0.82提升到0.85。将rnl-opt连接到表达载体p PICZαA并转入毕赤酵母X33中。将含有rnl和rnlopt的重组工程菌在摇瓶和50 L发酵罐中进行诱导表达。摇瓶培养条件下,含有rnl和rnl-opt重组工程菌的最大酶活分别为458、956 U/m L。50 L发酵罐培养条件下,含有rnl和rnl-opt重组工程菌的最大酶活和总蛋白浓度分别为14 856、30 500 U/m L和3.61、7.8 g/L。为了进一步提高含rnl-opt重组工程菌的表达酶活,对其在50L发酵罐培养的诱导温度进行优化,当诱导温度为22℃时,含rnl-opt重组工程菌的酶活和细胞湿重均达到最大值分别为39 520 U/m L和461 g/L。相对于30℃,酶活和细胞湿重分别提高了30%和16%。
关键词
密码子优化
诱导温度优化
雪白根霉
脂肪酶
Keywords
codon
optimization
induction
temperature
optimization
Rhizopus
niveus
lipase
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q55
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
优化密码子及诱导温度提高雪白根霉脂肪酶在毕赤酵母中的表达
王建荣
刘丹妮
夏雨
杨玲
刘金山
唐业
陈丽芝
黄佳乐
李阳源
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
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