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一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法
被引量:
13
1
作者
王旭初
范鹏祥
李银心
《植物生理与分子生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期449-455,共7页
在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性;(3)在预酶解时不加CaCl_2,减少了酶的自切作用;...
在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性;(3)在预酶解时不加CaCl_2,减少了酶的自切作用;(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;(5)直接吸取酶解液进行质谱分析。系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果。
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关键词
蛋白质组
胶内酶解方法
双向电泳
肽质量指纹图谱
质谱分析
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职称材料
题名
一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法
被引量:
13
1
作者
王旭初
范鹏祥
李银心
机构
中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室
出处
《植物生理与分子生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期449-455,共7页
基金
国家"863"计划项目(No.2007AA091705)
中国科学院重要方向性项目(No.KSCX2-YW-N-013)资助。~~
文摘
在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性;(3)在预酶解时不加CaCl_2,减少了酶的自切作用;(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;(5)直接吸取酶解液进行质谱分析。系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果。
关键词
蛋白质组
胶内酶解方法
双向电泳
肽质量指纹图谱
质谱分析
Keywords
proteomics
in-
gel
digest
method
two-dimensional
gel
electrophoresis
peptide
mass
fingerprinting
massspectrometry
analysis
分类号
Q51-3 [生物学—生物化学]
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作者
出处
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1
一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法
王旭初
范鹏祥
李银心
《植物生理与分子生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
13
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