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口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测
被引量:
7
1
作者
付元芳
卢曾军
+5 位作者
曹轶梅
郭建宏
张小丽
田美娜
刘在新
才学鹏
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期790-795,共6页
【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘...
【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对2C蛋白进行复性。用金属鳌合亲合层析的方法对表达的FMDV NSP 3A、3B和2C进行纯化。采用ELISA方法对比检测了3种纯化蛋白在检测羊血清NSP抗体的效果。【结果】检测得知3A和3B为可溶性表达蛋白,2C以包涵体形式表达。通过Western-blot分析,表明纯化后蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。纯化的3A、3B和复性后的2C融合蛋白与3ABC抗原的检测结果具有很高的符合性。【结论】该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫电转移印迹技术(EITB)提供了所需的材料。
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关键词
口蹄疫病毒
非结构蛋白
酶联免疫电转移印迹技术(
eitb
)
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职称材料
题名
口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测
被引量:
7
1
作者
付元芳
卢曾军
曹轶梅
郭建宏
张小丽
田美娜
刘在新
才学鹏
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所
甘肃农业大学动物医学院
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期790-795,共6页
基金
国家支撑计划(2006BAD06A12)
国家“973项目”(2005CB523201)~~
文摘
【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对2C蛋白进行复性。用金属鳌合亲合层析的方法对表达的FMDV NSP 3A、3B和2C进行纯化。采用ELISA方法对比检测了3种纯化蛋白在检测羊血清NSP抗体的效果。【结果】检测得知3A和3B为可溶性表达蛋白,2C以包涵体形式表达。通过Western-blot分析,表明纯化后蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。纯化的3A、3B和复性后的2C融合蛋白与3ABC抗原的检测结果具有很高的符合性。【结论】该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫电转移印迹技术(EITB)提供了所需的材料。
关键词
口蹄疫病毒
非结构蛋白
酶联免疫电转移印迹技术(
eitb
)
Keywords
Foot-and-Mouth
Disease
Virus
(FMDV)
non-structural
protein
(NSP)
immunoelectro
-
transfer
blot
(
eitb
)
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测
付元芳
卢曾军
曹轶梅
郭建宏
张小丽
田美娜
刘在新
才学鹏
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
7
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