哮喘大鼠中性粒细胞基质金属蛋白酶9和血清基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达及地塞米松对其的影响 被引量：12

1

作者 周华斐 王昕昕 +6 位作者 童夏生 李绍波 王恩智 阮正英 叶辉 金小红 郭海渊 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第8期870-873,共4页

目的:观察基质金属蛋白酶9(MMP-9)在哮喘大鼠血中性粒细胞(PMN)中的表达及地塞米松对其的影响,探讨血PMN中MMP-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的相关性。方法:采用哮喘大鼠模型,随机分成哮喘组、正常对照组、地塞米松治疗组,对血PM... 目的:观察基质金属蛋白酶9(MMP-9)在哮喘大鼠血中性粒细胞(PMN)中的表达及地塞米松对其的影响,探讨血PMN中MMP-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的相关性。方法:采用哮喘大鼠模型,随机分成哮喘组、正常对照组、地塞米松治疗组,对血PMN进行分离纯化,免疫细胞化学法检测MMP-9的表达水平,ELISA法检测血清TIMP-1的蛋白浓度。结果:哮喘组(0.196±0.011,OD值)和地塞米松治疗组(0.135±0.008,OD值)中MMP-9的表达水平均显著高于正常对照组(0.100±0.010,OD值)(P<0.01),地塞米松治疗组MMP-9的表达水平显著低于哮喘组(P<0.01)。哮喘组[(34.96±4.54)ng/mL]血清TIMP-1的表达水平分别显著高于正常对照组[(26.14±3.43)ng/mL]和地塞米松治疗组[(29.89±3.43)ng/mL](均P<0.01),地塞米松治疗组TIMP-1的表达水平显著高于正常对照组(P<0.05)。MMP-9与TIMP-1的表达水平呈显著正相关(n=29,r=0.741,P<0.01)。结论:PMN能合成MMP-9,且哮喘时其合成水平增加。PMN可能部分通过MMP-9起作用来参与哮喘的炎症过程,其合成功能可以被地塞米松所抑制。MMP-9及其抑制物TIMP-1共同参与哮喘的发病机制。 展开更多

关键词 哮喘 基质金属蛋白酶9 中性粒细胞 基质金属蛋白酶抑制剂-1 免疫细胞化学 大鼠

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脊神经节感觉神经元特异蛋白的研究 被引量：12

2

作者 曹铮 张沛云 +6 位作者 顾晓松 黄红宇 严志强 李炳源 汪家政 杨松成 范明 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 1997年第1期1-5,共5页

本研究从免神经组织中分离、纯化了脊神经节感觉神经元特异蛋白（SNSP），采用HPLC二级分离法分离、制备了SNSP，电泳结果显示该蛋白的分子量为29000，pI＝7．8。将其作为抗原以杂交瘤技术制备了抗SNSP的单克隆抗体。免疫细胞化学研究... 本研究从免神经组织中分离、纯化了脊神经节感觉神经元特异蛋白（SNSP），采用HPLC二级分离法分离、制备了SNSP，电泳结果显示该蛋白的分子量为29000，pI＝7．8。将其作为抗原以杂交瘤技术制备了抗SNSP的单克隆抗体。免疫细胞化学研究结果显示，SNSP仅出现在脊髓灰质Ⅰ～Ⅱ板层背根脊神经节的中与小细胞以及周围神经的皮支中。氨基酸N端序列分析以及免疫组化的结果表明，29000蛋白是脊神经节感觉神经元特异蛋白，分布在浅感觉传入径路中。 展开更多

关键词 脊神经感染 氨基酸序列 神经元 特异蛋白

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免疫细胞化学法检测ITP病人血清血小板抗体 被引量：4

3

作者 熊丽霞 李文林 +2 位作者 石小玉 杨碧云 肖承京 《江西医学院学报》 2002年第1期29-31,F002,共4页

目的 :建立新的原发性血小板减少性紫癜 (ITP)病人的血清学检测方法。方法 :采用免疫细胞化学法 ,用巨核细胞 血小板系Dami细胞株进行涂片 ,利用Dami细胞膜上的表面标志物GpⅡb/Ⅲa、GpⅠb、vWF等作为抗原 ,检测ITP病人血清中的血小板... 目的 :建立新的原发性血小板减少性紫癜 (ITP)病人的血清学检测方法。方法 :采用免疫细胞化学法 ,用巨核细胞 血小板系Dami细胞株进行涂片 ,利用Dami细胞膜上的表面标志物GpⅡb/Ⅲa、GpⅠb、vWF等作为抗原 ,检测ITP病人血清中的血小板自身抗体。结果 :部分Dami细胞内可见红色沉淀颗粒 ,颗粒着色深浅不一 ,部分Dami细胞胞膜呈红色 ,ITP病人组红色沉淀颗粒明显多于正常人组和非ITP性血小板减少组。结论 展开更多

关键词 Dami细胞株 血清血小板抗体 原发性血小板减少性紫癜 免疫细胞化学法 ITP

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生长抑素在齐口裂腹鱼消化道和脑中的定位 被引量：5

4

作者 方静 樊均德 何敏 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期478-483,共6页

采用链霉亲合素-生物素过氧化物酶复合物免疫组化法研究生长抑素(Somatostatin,Som)在齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)脑和消化道中的定位。在消化道中,口咽腔和食道为阴性反应;肠道有Som强阳性细胞,其中前肠密度最高,中肠次之,后肠... 采用链霉亲合素-生物素过氧化物酶复合物免疫组化法研究生长抑素(Somatostatin,Som)在齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)脑和消化道中的定位。在消化道中,口咽腔和食道为阴性反应;肠道有Som强阳性细胞,其中前肠密度最高,中肠次之,后肠最低。这些Som阳性细胞多分布于黏膜上皮,形态多样。肠道巨噬细胞呈Som强阳性反应。Som广泛分布于各脑区的神经元或神经纤维中,呈弱或强阳性反应,其中下丘脑下叶乳头体内Som阳性细胞密度最高,背嗅核、侧嗅核、原始纹体、视前核、内嗅沟旁、缰核下区、前丘脑核、前圆核、下丘脑中叶室、下丘脑下叶、中脑室侧次之;小脑分子层和延脑VI、V核较少。端极和脑上腺有阳性神经纤维。这说明Som在肠道中的分布与该鱼食性、消化道结构和功能密切相关;Som在下丘脑中的分布特点为鱼类GH调控提供了形态学证据;Som在脑中广泛分布,提示可能作为一种神经递质或调质,发挥更为广泛的生理功能。 展开更多

关键词 生长抑素 齐口裂腹鱼 消化道 脑 免疫组织化学

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糖基化终产物促进U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体的表达 被引量：3

5

作者 彭扬 张锦 +4 位作者 李莉 孟馨 王涤非 周一军 侯率 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第2期151-154,共4页

目的　研究糖基化终产物对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体表达的影响。方法　将糖基化终产物与诱导分化4 8h后的U937细胞共同孵育,用免疫细胞化学法和半定量逆转录聚合酶链反应检测细胞清道夫受体BI蛋白及mRNA的表达。结果　免疫细胞化... 目的　研究糖基化终产物对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体表达的影响。方法　将糖基化终产物与诱导分化4 8h后的U937细胞共同孵育,用免疫细胞化学法和半定量逆转录聚合酶链反应检测细胞清道夫受体BI蛋白及mRNA的表达。结果　免疫细胞化学法检测10 0、2 0 0和4 0 0mg/L糖基化终产物刺激后U937巨噬细胞清道夫受体BI蛋白表达的平均积分光密度值分别为18.94±3.5 6、2 7.86±4 .39及35 .0 8±2 .37,较牛血清白蛋白组明显升高(13.76±3.74 ,P <0 .0 5 ) ;4 0 0mg/L糖基化终产物作用6、12、2 4及4 8h后,细胞清道夫受体BI表达的平均积分光密度值分别为16 .87±5 .6 5、2 5 .6 8±6 .97、35 .0 8±8.37及39.6 8±9.37,较0h组明显升高(12 .0 2±3.4 7,P <0 .0 5 )。半定量逆转录聚合酶链反应结果显示,4 0 0mg/L牛血清白蛋白及10 0、2 0 0和4 0 0mg/L糖基化终产物刺激后细胞清道夫受体BImRNA相对表达量分别是0 .32±0 .0 3、0 .5 3±0 .0 5、0 .6 4±0 .0 4和0 .89±0 .0 5 ;4 0 0mg/L糖基化终产物作用0、6、12、2 4及4 8h后,U937巨噬细胞清道夫受体BImRNA相对表达量分别为0 .4 1±0 .0 1、0 .6 2±0 .0 5、0 .80±0 .0 8、0 .87±0 .0 5、1.2 4±0 .13。 展开更多

关键词 病理学与病理生理学 糖基化终产物促进高密度脂蛋白受体表达 半定量逆转录聚合酶链反应 糖基化终产物 高密度脂蛋白受体 巨噬细胞 动脉粥样硬化

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齐口裂腹鱼脑内5-羟色胺免疫组织化学的定位观察 被引量：3

6

作者 方静 樊均德 陈玥 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期143-147,共5页

5-羟色胺（5-Hydroxytryp tamine,5-HT）是一种具有多种功能的神经递质、神经调质,参与各种精神活动的调节如学习、记忆、痛觉传导、睡眠、摄食、行为等,同时还调控动物的生长及性腺的发育[1—4]。1953,Twarog和Page用生物化学方法首次... 5-羟色胺（5-Hydroxytryp tamine,5-HT）是一种具有多种功能的神经递质、神经调质,参与各种精神活动的调节如学习、记忆、痛觉传导、睡眠、摄食、行为等,同时还调控动物的生长及性腺的发育[1—4]。1953,Twarog和Page用生物化学方法首次证明5-HT存在于中枢神经系统中,随后很多学者采用多种方法对5-HT在脑中的分布进行了深入的研究，但这些研究主要集中在哺乳动物和禽类，在鱼类这方面的研究还相对薄弱。 展开更多

关键词 5-羟色胺 齐口裂腹鱼 脑 免疫组织化学

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β-内啡肽在齐口裂腹鱼消化道和脑中的定位分布 被引量：2

7

作者 王悦 杨丽珠 +2 位作者 方静 彭西 樊均德 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期404-412,共9页

β-内啡肽属内源性阿片肽,广泛存在于胃肠道及脑组织中,发挥着多种生理功能。本文采用链霉亲和素-生物素复合物免疫组织化学技术研究β-内啡肽在齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)消化道和脑中的定位分布。食道、后肠呈β-内啡肽阴性反... β-内啡肽属内源性阿片肽,广泛存在于胃肠道及脑组织中,发挥着多种生理功能。本文采用链霉亲和素-生物素复合物免疫组织化学技术研究β-内啡肽在齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)消化道和脑中的定位分布。食道、后肠呈β-内啡肽阴性反应,口咽腔、前肠及中肠呈β-内啡肽阳性反应,阳性细胞多分布于黏膜上皮之间,呈圆形、卵圆形、蝌蚪形、梭形、锥形等。β-内啡肽阳性细胞分布密度在前肠最高,中肠次之,口咽腔最低。β-内啡肽定位于间脑、中脑、小脑神经元及中脑神经纤维中,其阳性神经元密度在中隆起最高,下丘脑中叶前球核、下丘脑下叶次之,侧膝核、前圆核、下圆核、中纵束旁及小脑瓣浦肯野氏细胞层较低,下丘脑下叶乳头体、中脑基部上缘最低。β-内啡肽在消化道的分布与该鱼食性及消化道结构、功能密切相关;β-内啡肽在脑区的分布特性,推测与其参与调节不同脑区的神经内分泌活动有关。综上所述,β-内啡肽广泛分布于齐口裂腹鱼消化道及脑内,进一步证实它是一种双重分布的脑肠肽。本研究为β-内啡肽可能参与调节消化、神经内分泌活动提供了形态学证据。 展开更多

关键词 Β-内啡肽 齐口裂腹鱼 消化道 脑 免疫组织化学

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免疫细胞化学法检测羟基喜树碱对乳腺癌MCF-7细胞的TIMP-3及空泡化作用 被引量：1

8

作者 蒲锦兰 周滢 《中国当代医药》 2012年第25期7-8,共2页

目的探索羟基喜树碱对乳腺癌细胞MCF-7细胞信号转导相关基因TIMP-3表达,观察羟基喜树碱处理乳腺癌细胞MCF-7细胞形态的改变,从而探讨羟基喜树碱在乳腺癌治疗中的潜在新靶点。方法以乳腺癌细胞MCF-7为研究模型,细胞暴露于羟基喜树碱浓度... 目的探索羟基喜树碱对乳腺癌细胞MCF-7细胞信号转导相关基因TIMP-3表达,观察羟基喜树碱处理乳腺癌细胞MCF-7细胞形态的改变,从而探讨羟基喜树碱在乳腺癌治疗中的潜在新靶点。方法以乳腺癌细胞MCF-7为研究模型,细胞暴露于羟基喜树碱浓度为10、40、80mg/L的培养液中24h,PBS组为对照组。采用免疫组化法检测羟基喜树碱(HCPT)对乳腺癌MCF-7细胞TIMP-3表达特征及细胞形态的变化。结果 HCPT对TIMP-3诱导表达作用差异不明显,但HCPT处理组细胞呈现明显的空泡化。结论 HCPT可诱导乳腺癌MCF-7细胞空泡化作用。 展开更多

关键词 羟基喜树碱 空泡化 免疫细胞化学法 金属蛋白酶组织抑制剂-3

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在同一切片标本上,对豚鼠小肠内的生长抑素或生长抑素免疫反应细胞的免疫细胞化学和银染法的比较研究 被引量：1

9

作者 曾孝儒 王云川 《解剖学杂志》 CAS 1988年第3期147-150,220,共5页

Hellerstrm-Hellman(HH)银染法一直被认为是银染法中唯一能够显示生长抑素或生长抑素样免疫反应(SSLI)细胞的较好方法。本试验利用同一切片标本,在光镜水平上,通过免疫细胞化学PAP技术和HH银染法的比较研究,明显地观察到并不是所有的PA... Hellerstrm-Hellman(HH)银染法一直被认为是银染法中唯一能够显示生长抑素或生长抑素样免疫反应(SSLI)细胞的较好方法。本试验利用同一切片标本,在光镜水平上,通过免疫细胞化学PAP技术和HH银染法的比较研究,明显地观察到并不是所有的PAP阳性细胞能够被HH银染法着色;另一方面,某些HH银染阳性细胞都呈现为抗生长抑素免疫反应阴性。试验结果表明,HH银染法用来显示SSLI细胞并不是非常可靠的。 展开更多

关键词 免疫细胞化学方法 生长抑素 生长抑素样免疫反应样细胞

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检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法的建立及初步应用

10

作者 朱晴晖 陆青 刘德琮 《检验医学》 CAS 北大核心 2006年第2期148-151,共4页

目的 建立检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法（BSA—ICC）并作临床初步应用。方法 从健康人外周血单个核细胞（PBMC）中富集CD4细胞，加入莫能霉素，用不同浓度的佛波醇酯（PMA）和钙离子载体（A23817）诱导CD4细胞... 目的 建立检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法（BSA—ICC）并作临床初步应用。方法 从健康人外周血单个核细胞（PBMC）中富集CD4细胞，加入莫能霉素，用不同浓度的佛波醇酯（PMA）和钙离子载体（A23817）诱导CD4细胞不同时间，比较其胞内表达白细胞介素-2（IL-2）／白细胞介素-4（IL-4）的细胞百分率，确定最适诱生条件；用不同稀释度的IL-2McAb、IL-4McAb、不同浓度的生物素化羊抗鼠IgG（bio-SAMIgG）和辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（HRP-SA）作棋盘配比试验，确认McAb、bio-SAMIgG和HRP—SA的最适浓度，根据上述结果建立了检测细胞内细胞因子的BSA—ICC法。用所建方法检测20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中表达IL-2／IL-4细胞的百分率。结果 诱导CD4细胞胞内表达IL-2和IL-4的细胞最高百分率的PMA和A23817浓度分别为100μg/L和2．0μmol／L，诱导高峰时间分别为5和7h，BSA-ICC法中所用IL-2McAb、IL-4McAb最适稀释度分别为1：20和1：40，bio—SAMIgG和HRP-SA浓度分别为10～15μg/ml和15μg/ml。20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中分泌IL-2的细胞百分率分别为（45．90±4．39）％、（37．28±2．67）％和（25．19±3．49）％，分泌IL-4的细胞百分率分别为（10．5±1．50）％、（9．94±1．06）％和（16．13±2．50）％，IL-2^＋CD4^＋／IL-4^＋CD4^＋比值分别为3．65±0．94、3．55±0．76和1．27±0．26。结论 所建方法可用于T辅助（Th）细胞亚型的测定，从而判断Th细胞的极化状态。妇科恶性肿瘤患者Th细胞功能失衡极化，呈Th2反应，可能与恶性肿瘤的发生有关。 展开更多

关键词 细胞内细胞因子 生物素-链霉亲和素 免疫细胞化学法 妇科 恶性肿瘤

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人肝贮脂细胞表达结蛋白的免疫细胞化学观察

11

作者 赵景民 郑国均 +1 位作者 吴照敏 霍冠华 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期93-95,共3页

用免疫细胞化学法观察了正常人肝贮脂细胞表达结蛋白中间丝。发现结蛋白阳性细胞位于血窦旁旁狄氏间隙内,呈星形或纺锤形,于肝小叶内大致均匀分布,有些细胞内含有空泡,每高倍(400X)视野细胞数为15～25个。汇管区结缔组织内及肝静脉周围... 用免疫细胞化学法观察了正常人肝贮脂细胞表达结蛋白中间丝。发现结蛋白阳性细胞位于血窦旁旁狄氏间隙内,呈星形或纺锤形,于肝小叶内大致均匀分布,有些细胞内含有空泡,每高倍(400X)视野细胞数为15～25个。汇管区结缔组织内及肝静脉周围散在少数与小叶内形态相似的结蛋白阳性细胞。结果表明正常人肝贮脂细胞表达结蛋白,可作为研究该细胞的良好标志,并支持了贮脂细胞的肌源性学说。[关键词]贮脂细胞。 展开更多

关键词 结蛋白 免疫细胞化学 贮脂细胞

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运动神经元 190KD 蛋白的免疫细胞化学研究 被引量：3

12

作者 张沛云 张爱国 +3 位作者 曹铮 严志强 谭湘陵 顾晓松 《南通医学院学报》 1998年第3期293-295,共3页

采用ＳＤＳ凝胶电泳方法从人脊神经前根中分离出运动神经元特有的蛋白组份１９０ＫＤ蛋白。将该蛋白作为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，经杂交瘤技术，获得抗１９０ＫＤ蛋白的单克隆抗体。免疫细胞化学检测表明，１９０ＫＤ单抗与脊髓灰... 采用ＳＤＳ凝胶电泳方法从人脊神经前根中分离出运动神经元特有的蛋白组份１９０ＫＤ蛋白。将该蛋白作为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，经杂交瘤技术，获得抗１９０ＫＤ蛋白的单克隆抗体。免疫细胞化学检测表明，１９０ＫＤ单抗与脊髓灰质运动神经元、前根及肌支发生阳性反应。实验结果提示，１９０ＫＤ蛋白分布在脊髓运动神经元胞体及其轴突和肌支纤维中。 展开更多

关键词 运动神经元 190KD蛋白 免疫细胞化学

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免疫细胞化学法测定鱼类淋巴囊肿病毒(LCDV)滴度 被引量：1

13

作者 宋佳蕾 绳秀珍 战文斌 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期55-59,共5页

利用免疫细胞化学法测定鱼类淋巴囊肿病毒(LCDV)滴度。以牙鲆鳃细胞系(FG)作为感染细胞,将生长旺盛的FG细胞接种于48孔培养板中培养至形成细胞单层,用2倍连续稀释的LCDV粗提液分别接种FG细胞。固定各稀释度LCDV感染后的FG细胞,孵育抗牙... 利用免疫细胞化学法测定鱼类淋巴囊肿病毒(LCDV)滴度。以牙鲆鳃细胞系(FG)作为感染细胞,将生长旺盛的FG细胞接种于48孔培养板中培养至形成细胞单层,用2倍连续稀释的LCDV粗提液分别接种FG细胞。固定各稀释度LCDV感染后的FG细胞,孵育抗牙鲆LCDV单克隆抗体,其后再运用生物素-亲合素反应系统,以碱性磷酸酶底物AP-Red试剂盒发色。倒置显微镜观察,被病毒感染的FG细胞的细胞质呈现红色,未被感染细胞的细胞质呈无色。记录各稀释度病毒感染的阳性细胞孔数,按Reed-Muench法计算组织细胞培养半数感染量(TCID50)。结果显示,免疫细胞化学法测得LCDV在FG的滴度为1.77×210 TCID50/mL。该法可以用来有效测定LCDV滴度,且结果直观、准确性较好,灵敏度较高。 展开更多

关键词 淋巴囊肿病毒 牙鲆鳃细胞 组织细胞培养半数感染量 免疫细胞化学法

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不同月经周期人子宫内膜细胞的体外培养特性及鉴定

14

作者 陈佳红 宋晓萍 孙雪荣 《检验医学与临床》 CAS 2010年第21期2330-2331,2334,共3页

目的通过原代培养人子宫内膜细胞,进而建立正常子宫内膜的体外模型,同时观察不同月经周期内膜细胞的培养特性。方法选择因子宫肌瘤而行子宫全切术的12例患者,取子宫内膜细胞进行分离、纯化和培养。并用免疫细胞化学法进行鉴定。结果 12... 目的通过原代培养人子宫内膜细胞,进而建立正常子宫内膜的体外模型,同时观察不同月经周期内膜细胞的培养特性。方法选择因子宫肌瘤而行子宫全切术的12例患者,取子宫内膜细胞进行分离、纯化和培养。并用免疫细胞化学法进行鉴定。结果 12例患者中10例培养成功,在不同月经周期取材的内膜标本其培养细胞生长的数量、质量、成活率及形态上无明显差异;免疫细胞化学法结果显示,间质细胞CK19染色阴性,Vimentin染色阳性,阳性率90%,阳性细胞胞质呈棕黄色;腺上皮细胞CK19染色阳性,Vimentin染色阴性,阳性率85%,阳性细胞胞质染成棕黄色。结论本实验成功对子宫内膜细胞进行了体外的分离培养及鉴定,为研究细胞的生长、分化和代谢以及性激素的作用机制提供了一个理想的实验模型,同时认为内膜细胞的各种培养特性不存在明显的月经周期性改变。 展开更多

关键词 人子宫内膜细胞 月经周期 体外培养 免疫细胞化学法

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