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3,5-二羟基-4-甲氧基苯甲醇减轻人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的作用及其机制
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作者 杨宗绵 周梦军 +4 位作者 张浴玲 黄丹梅 张扬 黄乃淇 张艳美 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2067-2073,共7页
目的:探讨多酚类化合物3,5-二羟基-4-甲氧基苯甲醇(DHMBA)对人脐静脉内皮细胞(EA.hy926细胞)缺氧/复氧(H/R)损伤的作用及其机制。方法:采用酸性缺氧液结合厌氧工作站构建H/R模型。将EA.hy926细胞分为对照组、H/R组、H/R+不同剂量DHMBA组... 目的:探讨多酚类化合物3,5-二羟基-4-甲氧基苯甲醇(DHMBA)对人脐静脉内皮细胞(EA.hy926细胞)缺氧/复氧(H/R)损伤的作用及其机制。方法:采用酸性缺氧液结合厌氧工作站构建H/R模型。将EA.hy926细胞分为对照组、H/R组、H/R+不同剂量DHMBA组、H/R+抗氧化剂依达拉奉组、H/R+活性氧(ROS)促生成剂寡霉素A+DHMBA组。采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法检测细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;Western blot法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和核因子κB(NF-κB)p65蛋白的磷酸化水平;激光共聚焦显微镜检测细胞内一氧化氮(NO)含量;二硝基苯甲酸显色法测定谷胱甘肽(GSH)氧化还原平衡;流式细胞术检测细胞内总ROS水平;硝基四紫唑显色法测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出;划痕实验检测细胞的迁移能力。结果:DHMBA在125~1000μmol/L的浓度下无明显细胞毒性。在H/R刺激的EA.hy926细胞中,DHMBA可以提高细胞活力,抑制NF-κB磷酸化,减少炎症因子TNF-α和IL-6含量,增加eNOS蛋白磷酸化水平及NO含量;DHMBA能通过抑制H/R诱导的EA.hy926细胞ROS超载,恢复细胞内GSH和其氧化态(GSSH)的比例,减少LDH漏出,提高细胞迁移能力。结论:DHMBA可以减轻H/R所致的人脐静脉内皮细胞氧化应激、炎症反应、细胞损伤和功能障碍,这与其降低细胞内ROS水平有关。 展开更多
关键词 3 5-二羟基-4-甲氧基苯甲醇 血管内皮细胞 缺氧/复氧损伤 氧化应激 内皮功能障碍
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中介素对缺氧/复氧大鼠肾小管上皮细胞增殖作用及细胞周期的影响及其机制 被引量：1
2
作者 王艳红 田继华 +2 位作者 苏晓乐 乔晞 李荣山 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期482-487,共6页
目的探讨中介素(intermedin,IMD)对大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧/复氧(H/R)后细胞增殖、细胞周期的影响。方法 NRK-52E细胞随机分为对照组,模型组:缺氧/复氧组(H/R)、H/R+空质粒组、H/R+IMD质粒组。MTT法检测细胞增殖,比色法检测... 目的探讨中介素(intermedin,IMD)对大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧/复氧(H/R)后细胞增殖、细胞周期的影响。方法 NRK-52E细胞随机分为对照组,模型组:缺氧/复氧组(H/R)、H/R+空质粒组、H/R+IMD质粒组。MTT法检测细胞增殖,比色法检测培养基上清LDH含量,流式细胞术检测细胞周期,Real time-PCR法和Western blot法检测cyclin D1、CDK、p57 mRNA及蛋白表达,间接免疫荧光染色检测cyclin D1亚细胞定位。结果 1与对照组相比,H/R组培养基中LDH含量升高了106%,同时细胞存活率明显下降,与H/R组比较,H/R+IMD组培养基中LDH含量下降了33.85%(P<0.01),而细胞存活率增高(79.15%±1.42%vs 61.22%±1.63%,P<0.05),2细胞周期结果显示,与对照组相比,H/R组细胞G0/G1期比例增加,S期细胞比例降低(P<0.05);与H/R组比较,H/R+IMD组G0/G1期细胞比例明显降低,而S及G2期细胞比例增加(P<0.05)。3H/R可增加cyclin D1、CDK4及p57的表达也增加(与对照组比较,P<0.05);而IMD可进一步上调cyclin D1、CDK4的表达,同时下调p57的表达,与对照组及H/R组相比差异具有显著性(P<0.05)。4免疫荧光检测结果可见,cyclin D1呈红色荧光,在NRK-52E细胞内主要表达在细胞核中。结论 IMD可以上调cyclin D1、CDK4蛋白表达,下调p57的表达,促进细胞周期进展,从而加速肾组织IRI后细胞增殖和修复。 展开更多
关键词 中介素 缺氧/复氧损伤 肾小管上皮细胞 细胞增殖 细胞周期 细胞周期蛋白
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