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人源载体介导的minidystrophin-EGFP融合基因在Cos-7细胞中的表达(英文) 被引量：4
1
作者 梁羽 梁德生 +7 位作者 薛志刚 龙志高 邬玲仟 潘乾 胡艺俏 戴和平 夏昆 夏家辉 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期493-496,共4页
目的构建微小肌营养不良蛋白(minidystrophin)和增强绿色荧光蛋白(enhanced greenfluoresce protein, EGFP)融合基因的人源载体,观察该载体在Cos-7细胞中的表达。方法以正常人肌营养不良基因cDNA(GenBank NM 004006)为模板,通过PCR克隆... 目的构建微小肌营养不良蛋白(minidystrophin)和增强绿色荧光蛋白(enhanced greenfluoresce protein, EGFP)融合基因的人源载体,观察该载体在Cos-7细胞中的表达。方法以正常人肌营养不良基因cDNA(GenBank NM 004006)为模板,通过PCR克隆的方法构建minidystrophin基因,融合EGFP基因后连接到人源载体pHrneo,大量提取重组质粒,转染Cos-7细胞,通过逆转录聚合酶链反应、荧光显微镜观察等方法检测该载体在细胞内的表达。结果成功构建pHrnDysG载体,转染Cos-7后,逆转录聚合酶链反应可扩增出735 bp特异条带,荧光显微镜观察可见表达蛋白分布于细胞膜上。结论pHrn载体介导的minidystrophin基因可以在真核细胞表达,并被有效地转运至细胞膜,可望用于杜氏肌营养不良基因治疗的研究。 展开更多
关键词 人源载体 融合基因 COS-7细胞 基因表达 微小肌营养不良蛋白 增强绿色荧光蛋白 杜氏肌营养不良
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