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葛根素对人肾近曲小管上皮细胞ABCG2表达影响 被引量：11
1
作者 张洪长 张莹 +2 位作者 律广富 王恩鹏 陈新 《上海中医药杂志》 2016年第3期74-77,共4页
目的探讨葛根素(Pur)对人肾近曲小管上皮细胞(HK2)内三磷酸腺苷结合盒转运体G2(ABCG2)基因与蛋白表达的影响,阐明葛根素治疗痛风的可能机制。方法体外培养HK2细胞,分为对照组与25、50、100、200 mg/L葛根素给药组。CCK-8法检测葛根素对... 目的探讨葛根素(Pur)对人肾近曲小管上皮细胞(HK2)内三磷酸腺苷结合盒转运体G2(ABCG2)基因与蛋白表达的影响,阐明葛根素治疗痛风的可能机制。方法体外培养HK2细胞,分为对照组与25、50、100、200 mg/L葛根素给药组。CCK-8法检测葛根素对HK2细胞的影响;检测ALP活性,观察HK2细胞内酶促反应状态;荧光定量PCR法、Western blotting法检测对照组与给药组HK2细胞内ABCG2基因蛋白表达。结果葛根素对HK2细胞有促进增殖作用(P<0.05);100 mg/L葛根素组ALP活性最佳(P<0.01)。荧光定量PCR和Western blotting法检测结果显示,葛根素组HK2细胞内ABCG2基因及蛋白表达明显高于对照组,其中100 mg/L葛根素组HK2细胞内ABCG2最为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论葛根素能够增加HK2细胞内ABCG2基因蛋白的表达,这可能是葛根素调节痛风患者血尿酸水平的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 葛根素 痛风 人肾近曲小管上皮细胞 三磷酸腺苷结合盒转运体G2
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普罗布考抑制氧化低密度脂蛋白诱导的人肾近曲小管上皮细胞转分化的作用及机制研究 被引量：2
2
作者 朱冰冰 迟杨峰 +3 位作者 王浩 刘育军 王云满 彭文 《临床肾脏病杂志》 2015年第10期620-625,共6页
目的研究普罗布考对氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，Ox-LDL）诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2转分化的保护作用，并探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1（lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-... 目的研究普罗布考对氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，Ox-LDL）诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2转分化的保护作用，并探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1（lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1，LOX-1）及氧化应激在其中的作用和相互关系。方法采用不同浓度Ox-LDL（0-100ug／ml）孵育HK-2细胞，并予普罗布考（20umol／L）和LOX-1抑制剂多聚肌苷酸（250ug／m1）干预。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞增殖情况，用DCFH—DA法检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）活性，生化比色法检测一氧化氮（nitric oxide，N0）浓度，Western blot检测E-钙粘素（cadherin）、a平滑肌动蛋白（a-smooth muscle actin，a-SMA）、LOX-1、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（Nicotinamide adenine dinucleotide 2＇-phosphate reduced tetrasodium salt，NADPH）氧化酶4（NOX4）表达。结果12．5～200ug／ml浓度范围内的Ox-LDL对HK-2细胞的增殖无明显影响，25-100ug／ml的Ox-LDL以浓度依赖方式促进HK-2细胞LOX-1、a-SMA蛋白表达上升，E-cadherin下降。而多聚肌苷酸、普罗布考能使LOX-1、a-SMA蛋白表达抑制，E-cadherin表达上调。50ug／ml的Ox-LDL能促进NOX4表达上调，ROS活性增加（451．5ug／ml kg839．8ug／ml，P〈0．05），NO含量略增加（46．0umol／L比46．2umol／L），但无统计学意义（P〉0．05）。而多聚肌苷酸、普罗布考能使NOX4表达下调，ROS活性下降，但对NO浓度无明显影响。结论Ox-LDL可诱导HK-2细胞转分化，其机制可能与其结合LOX-1促进氧化应激有关，而普罗布考可以通过降低LOX-1，抑制氧化应激损伤，从而延缓HK-2细胞转分化的进程。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化 人肾近曲小管上皮细胞 氧化低密度脂蛋白 凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1 活性氧
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胰岛素对人肾小管上皮细胞SREBP-1、FAS表达及脂质代谢的时效性研究 被引量：1
3
作者 郝军 刘淑霞 +5 位作者 刘青娟 赵松 郑书深 姚芳 刘巍 段惠军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期517-521,共5页
目的探讨胰岛素对人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubularepithelial cells line,HKCcells)固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)和脂肪酸合成酶(fat acid synthase,FAS)表达以及细胞... 目的探讨胰岛素对人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubularepithelial cells line,HKCcells)固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)和脂肪酸合成酶(fat acid synthase,FAS)表达以及细胞内脂滴形成的时效性影响。方法给予人肾小管上皮细胞100nmol·L-1胰岛素刺激并根据刺激时间分为0、2、4、6、12和24h组。SREBP-1和FAS mRNA采用RT-PCR检测,SREBP-1蛋白的表达用免疫细胞化学和Western blot检测,细胞内脂滴检测采用油红O染色。结果和0h组相比,2h组HKC细胞未见SREBP-1和FAS mRNA表达变化,而4、6、12h组HKC细胞SREBP-1和FAS mRNA表达均升高,其中6h组升高最明显,分别是0h对照组的3.578倍和4.272倍,差异有统计学意义。Western blot检测显示4、6和12h组HKC细胞SREBP-1蛋白的前体和成熟片段表达均较0h和2h组增强,其中也是6h组表达最强,前体和成熟片段分别是0h组的4.106倍和5.167倍。免疫细胞化学技术显示SREBP-1蛋白在人肾小管上皮细胞株中定位于细胞质,在4、6和12h组HKC内其表达明显强于0、2和24h组。油红O染色提示胰岛素刺激6h后HKC细胞内可见明显红染脂滴颗粒,而其他各组HKC细胞未见着色。结论胰岛素呈时间依赖性引起人肾小管上皮细胞SREBP-1和FAS的上调,且作用在6h达到高峰,并最终导致细胞内脂滴沉积,这可能是代谢综合征引起肾脏脂质沉积的重要机制之一。 展开更多
关键词 胰岛素 人肾小管上皮细胞 固醇调节元件结合蛋白-1 脂肪酸合成酶 脂滴形成 时效性影响
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通过基因芯片研究苯那普利对HK-2细胞TEMT过程的影响作用
4
作者 孙世竹 陈燕 +4 位作者 鲍军 秦雪梅 蒋娟娟 申志祥 高雪燕 《实用老年医学》 CAS 2012年第1期26-30,52,共6页
目的通过基因芯片探讨苯那普利对人肾近端小管上皮细胞(HK-2细胞)向间质肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中的影响作用。方法制备苯那普利含药血清,将HK-2细胞随机分为正常组、模型组、苯那普利(洛丁新)组。采用Illumina Bead Chip的人全... 目的通过基因芯片探讨苯那普利对人肾近端小管上皮细胞(HK-2细胞)向间质肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中的影响作用。方法制备苯那普利含药血清,将HK-2细胞随机分为正常组、模型组、苯那普利(洛丁新)组。采用Illumina Bead Chip的人全基因组基因表达芯片(Human HT-12 v4),提取总RNA分离纯化后,经过逆转录、合成、杂交、洗片和扫描获得差异表达基因,并进行差异基因相关分析。结果通过基因芯片技术成功筛选差异表达基因,模型组与正常组比较差异表达基因80个,其中上调表达53个,下降表达27个;洛丁新组与模型组比较差异表达基因227个,其中上调表达118个,下降表达109个。通过基因GO分析,洛丁新组较模型组在细胞增殖、移动、转分化、连接酶活化等生物过程中有更多参与。结论本实验为更加全面阐明苯那普利对TEMT的调控作用提供了实验依据。 展开更多
关键词 苯那普利 人肾近端小管上皮细胞(HK-2细胞) 肾小管细胞上皮细胞向间质肌成纤维细胞转分 化(TEMT) 基因芯片 差异表达基因 基因GO分析
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