牛蒡子苷元对人前列腺癌PC3细胞侵袭、迁移的影响 被引量：5

1

作者 薛安琪 周冰谦 +2 位作者 韩贝贝 韩婷婷 冯金红 《食品与药品》 CAS 2019年第1期11-15,共5页

目的研究牛蒡子苷元对PC3细胞侵袭、迁移的影响。方法体外培养PC3细胞,采用MTT法检测牛蒡子苷元(ARG)对PC3细胞增殖抑制率,Transwell法检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移,以RT-PCR法检测侵袭、迁移标志物基质金属蛋白酶9(MMP-9),MMP-2,... 目的研究牛蒡子苷元对PC3细胞侵袭、迁移的影响。方法体外培养PC3细胞,采用MTT法检测牛蒡子苷元(ARG)对PC3细胞增殖抑制率,Transwell法检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移,以RT-PCR法检测侵袭、迁移标志物基质金属蛋白酶9(MMP-9),MMP-2,CXC趋化因子受体4(CXCR4)的基因表达,并以Western blot法检测其蛋白表达。结果 ARG可显著抑制PC3细胞增殖,且具有时间依赖性;与空白对照组比较,ARG 10μmol/L组和2.5μmol/L组均能有效抑制PC3细胞侵袭,其侵袭抑制率分别为73.5%和51.3%;10μmol/L组和2.5μmol/L组划痕修复率明显低于空白对照组,其差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);ARG可降低MMP-9,MMP-2,CXCR4的基因与蛋白表达,且具有浓度依赖性。结论 ARG在体外可抑制PC3细胞的侵袭、迁移,下调细胞中MMP-9、MMP-2和CXCR4的基因与蛋白表达。 展开更多

关键词 牛蒡子苷元 前列腺癌 PC3细胞 侵袭 迁移

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油菜花粉脂溶性提取物对人前列腺癌细胞PC-3的体外生长抑制研究 被引量：2

2

作者 杜灵彬 钱丽娟 +2 位作者 顾琳慧 牟瀚舟 曹明富 《中国药物与临床》 CAS 2010年第9期971-973,共3页

目的探讨油菜花粉脂溶性提取物(BPE)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3的杀伤效应。方法光镜观察用药前后PC-3细胞形态,透射电镜观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞术检测BPE对PC-3细胞凋亡的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bax/bcl-... 目的探讨油菜花粉脂溶性提取物(BPE)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3的杀伤效应。方法光镜观察用药前后PC-3细胞形态,透射电镜观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞术检测BPE对PC-3细胞凋亡的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bax/bcl-2基因表达。结果 BPE对PC-3细胞增殖有抑制作用,PC-3细胞随着BPE浓度的增高其活细胞数下降,呈负相关。透射电镜下可见:核结构破坏,染色质稀疏,有些凝聚成团。随着时间的延长,细胞凋亡率上升,BPE与多西他赛能一同促进PC-3细胞发生凋亡。BPE的作用效应不是通过bax/bcl-2基因。结论 BPE可抑制人前列腺癌细胞PC-3的增殖,诱导细胞的凋亡。 展开更多

关键词 细胞凋亡 油菜花粉提取物 人前列腺癌细胞

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中华真地鳖醇提物对人前列腺癌PC3细胞体外作用及其机制研究 被引量：3

3

作者 张越 余佳 +1 位作者 骆衡 戴仁怀 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1051-1056,共6页

探究中华真地鳖醇提物(ESWE)对人前列腺癌PC3细胞生长、迁移和侵袭的影响及作用机制。采用MTT法检测ESWE对PC3细胞的毒活性,流式细胞术、Hoechst 33258染色检测细胞凋亡情况,划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测ESWE对肿瘤细胞体外迁... 探究中华真地鳖醇提物(ESWE)对人前列腺癌PC3细胞生长、迁移和侵袭的影响及作用机制。采用MTT法检测ESWE对PC3细胞的毒活性,流式细胞术、Hoechst 33258染色检测细胞凋亡情况,划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测ESWE对肿瘤细胞体外迁移和侵袭作用的影响,Western Blot法测定不同浓度ESWE处理PC3细胞后,转移相关蛋白金属基质蛋白MMP-2和MMP-9的表达。结果表明,ESWE对人前列腺癌PC3细胞的生长、迁移和侵袭有明显的抑制作用,呈一定的剂量依赖关系,且能下调转移相关蛋白MMP-2和MMP-9的表达。流式和凋亡染色结果显示,ESWE不能诱导PC3细胞凋亡。综上说明ESWE能够抑制人前列腺癌PC3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9蛋白表达有关。 展开更多

关键词 中华真地鳖醇提物 前列腺癌细胞 增殖 侵袭 迁移

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黑米皮提取物对PC-3细胞增殖的抑制作用 被引量：2

4

作者 姜伟伟 遇旭东 任国峰 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期474-477,482,共5页

目的观察黑米皮提取物对人前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用并探讨其机制。方法用不同浓度的黑米皮提取物(20,150和300μg/ml)处理PC-3细胞,通过MTT法、流式细胞仪、western blot法研究提取物对细胞的影响。结果处理组的细胞增殖率随着... 目的观察黑米皮提取物对人前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用并探讨其机制。方法用不同浓度的黑米皮提取物(20,150和300μg/ml)处理PC-3细胞,通过MTT法、流式细胞仪、western blot法研究提取物对细胞的影响。结果处理组的细胞增殖率随着提取物作用浓度和时间的增加而降低(P<0.05);与对照组相比,处理组细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期中,G1期细胞百分比显著增多,S、G2-M期细胞显著减少,细胞被阻滞在G1-S期。与对照组相比,处理组细胞的p-p38、p-JNK的蛋白表达则随着提取物浓度的增加而增强。结论黑米皮提取物能够抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖,改变细胞周期的分布,激活JNK、p38通路,诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 黑米皮提取物 前列腺癌细胞 凋亡 c-Jun氨基末端高激酶 P38

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二甲双胍对体外PC-3人前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及机制 被引量：1

5

作者 李东升 于敬坤 +2 位作者 李立坤 孙丽静 高伟兴 《山东医药》 CAS 2018年第45期32-36,共5页

目的探讨二甲双胍对体外PC-3人前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探究其可能作用机制。方法不同浓度(0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 mg/mL)盐酸二甲双胍作用于PC-3人前列腺癌细胞24h时,采用MTT法选择最佳药物作用... 目的探讨二甲双胍对体外PC-3人前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探究其可能作用机制。方法不同浓度(0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 mg/mL)盐酸二甲双胍作用于PC-3人前列腺癌细胞24h时,采用MTT法选择最佳药物作用剂量。将3.0 mg/mL盐酸二甲双胍作为实验药物剂量(观察组)作用于PC-3人前列腺癌细胞,并设不予进行药物处理的对照组,作用24、48、72 h时,采用MTT法检测各组细胞的增殖能力。另取PC-3人前列腺癌细胞,分别给予含有0、3.0、6.0、9.0 mg/mL盐酸二甲双胍的培养液(设置为CK、MET1、MET2、MET3组),于37℃恒温箱中培养24、48 h后,采用细胞划痕试验及Transwell试验检测各组细胞的迁移、侵袭能力;培养48 h后,采用Western blotting法检测各组细胞迁移、侵袭能力相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及人源葡萄糖转运蛋白1(Glut1)、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP,也称MMP-14)的表达活性。结果不同浓度盐酸二甲双胍作用于PC-3人前列腺癌细胞24 h时,细胞增殖能力随盐酸二甲双胍浓度增高而递减(P<0.05)。与对照组比较,观察组24、48、72 h时细胞OD值均低(P均<0.05)。划痕后0 h,CK、MET1、MET2、MET3四组无细胞区域占比比较,P>0.05,划痕后24、48 h,四组无细胞区域占比比较,P<0.05。CK及MET1组于划痕后0、24、48 h时无细胞区域占比比较,P均<0.05。CK组细胞迁移指数于划痕后24 h、48 h时大于MET1、MET2组(P均<0.05);划痕后48 h时,MET2组的迁移指数低于MET1组(P<0.05); MET3组的迁移指数为负数。侵袭细胞数比较,MET1<MET2<MET3<CK组(P均<0.05)。MMP-2、MMP-9、MMP-14、Glut1蛋白表达水平比较,CK组<MET1组<MET2组<MET3组(P均<0.01)。结论二甲双胍可抑制体外PC-3人前列腺癌细胞的迁移及侵袭能力,可能是通过下调Glut1/MMP-14/MMP-2、MMP-9信号通路实现的。 展开更多

关键词 人前列腺癌细胞 二甲双胍 细胞迁移 细胞侵袭 人源葡萄糖转运蛋白1 膜型基质金属蛋白酶-1 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9

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BRP44基因对前列腺癌生物学行为的影响 被引量：1

6

作者 袁刚 李黔生 +2 位作者 靳风烁 蒋小娟 吴刚 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2008年第3期211-214,共4页

目的研究BRP44高表达的人前列腺癌细胞PC3细胞系(雄激素非依赖性前列腺癌细胞株)细胞的生物学性状的影响,以了解其在人前列腺癌发生发展中可能的机制和作用。方法将已转染BRP44的PC3细胞提取其RNA,进而行Northern Blot检测证明其高表达,... 目的研究BRP44高表达的人前列腺癌细胞PC3细胞系(雄激素非依赖性前列腺癌细胞株)细胞的生物学性状的影响,以了解其在人前列腺癌发生发展中可能的机制和作用。方法将已转染BRP44的PC3细胞提取其RNA,进而行Northern Blot检测证明其高表达,用Alamar Blue检测BRP44高表达的阳性细胞生长情况,流式细胞仪检测其细胞周期变换,采用改良的Tr-answell侵袭小室方法检测细胞侵袭能力。结果BRP44高表达的PC3细胞增殖速度较转染空载体的PC3细胞和正常PC3细胞快,差异有统计学意义(P<0.05)。在体外细胞移动实验中,BRP44高表达的PC3细胞也较另两组细胞表现出更强的穿膜能力、侵袭力(P<0.01)。结论BRP44表达增高与人前列腺癌细胞的恶性表型具有密切相关性,BRP44可能在人前列腺癌的发生、发展中发挥重要作用。 展开更多

关键词 BRP44 人前列腺癌 PC3细胞 增殖 侵袭

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万珂增强NK细胞对前列腺癌细胞杀伤作用的实验研究 被引量：1

7

作者 胡炜 刘丹 +1 位作者 陈曲 王嵬 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第29期31-35,共5页

目的探讨万珂是否能够增强自然杀伤细胞(NK)对前列腺癌细胞的杀伤作用及其作用机制。方法以激素依赖性和激素非依赖性2种前列腺癌细胞株LNCaP和DU145为模型,不同浓度(0、10和20 nmol/L)万珂处理2种前列腺癌细胞株24 h。采用Annexin-V/P... 目的探讨万珂是否能够增强自然杀伤细胞(NK)对前列腺癌细胞的杀伤作用及其作用机制。方法以激素依赖性和激素非依赖性2种前列腺癌细胞株LNCaP和DU145为模型,不同浓度(0、10和20 nmol/L)万珂处理2种前列腺癌细胞株24 h。采用Annexin-V/PI法检测细胞凋亡率,流式细胞术检测人白细胞抗原-ABC(HLA-ABC)蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链反应检测HLA-C mRNA的表达。结果万珂能提高2种细胞系对NK细胞介导的杀伤作用的敏感性,而且在激素非依赖性前列腺细胞株DU145细胞中表现更明显。万珂能下调DU145细胞表面HLA-Ⅰ类分子水平。相对DU145细胞,万珂对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞不敏感,万珂处理后LNCaP细胞中HLA-Ⅰ类分子也没有改变。结论万珂通过下调HLA-Ⅰ类分子的表达,增强NK细胞对前列腺癌的杀伤能力,特别是增强对激素非依赖性前列腺细胞的杀伤,该作用能提高前列腺癌的治疗水平。 展开更多

关键词 万珂 人类前列腺癌 自然杀伤细胞 人白细胞抗原-ABC

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新城疫病毒对人前列腺癌细胞LNCaP免疫性细胞死亡标志物表达的影响

8

作者 王雪珂 邵晓雁 +3 位作者 龚卫华 陈健华 孟松树 许青 《大连医科大学学报》 CAS 2019年第4期295-301,共7页

目的 探讨新城疫病毒(NDV)能否诱导人前列腺癌细胞LNCaP免疫性细胞死亡(ICD)标志物的表达。方法 病毒滴度和蛋白质免疫印迹(WesternBlot,WB)检测NDV在细胞内的复制情况;CCK-8法检测细胞增殖情况;蛋白质免疫印迹(WesternBlot,WB)检测细... 目的 探讨新城疫病毒(NDV)能否诱导人前列腺癌细胞LNCaP免疫性细胞死亡(ICD)标志物的表达。方法 病毒滴度和蛋白质免疫印迹(WesternBlot,WB)检测NDV在细胞内的复制情况;CCK-8法检测细胞增殖情况;蛋白质免疫印迹(WesternBlot,WB)检测细胞上清中的热休克蛋白70/90(HSP70/90)及高迁移率族蛋白1(HMGB1);流式细胞术和免疫荧光检测细胞膜上钙网蛋白(calreticulin,CRT)表达量;荧光素酶法检测细胞外ATP的释放。结果 NDV可以在LNCaP细胞内发生复制,并随着时间的增加而增加,P<0.05。NDV感染细胞的增殖能力较未感染组随时间逐渐降低,P<0.001。NDV感染细胞较未感染细胞,细胞上清中HSP90的表达明显增加,并呈时间依懒性,在细胞上清中可以检测到HSP70和HMGB1的表达。两组细胞的裂解液中HSP70/90和HMGB1的表达未有统计学差异,P>0.05。NDV感染后,细胞表面CRT表达阳性率较未感染组显著增加,差异有统计学意义,P<0.001。另外,病毒感染细胞较未感染组向外释放ATP增加,差异有统计学意义,P<0.05。结论 NDV可诱导人前列腺癌细胞发生免疫性细胞死亡,为溶瘤病毒NDV结合当前免疫疗法和化疗治疗前列腺癌提供了理论依据。 展开更多

关键词 新城疫病毒 人前列腺癌细胞 免疫性细胞死亡标志物

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广藿香醇对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145生长的抑制作用及机制 被引量：14

9

作者 蔡剑 彭成 +4 位作者 朱晓燕 张程 万峰 曾文彤 张蜀武 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2014年第10期165-169,共5页

目的:观察广藿香醇(pachouli alcohol,PA)对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145的凋亡诱导效应及增殖抑制作用,探讨其发生机制。方法:广藿香醇10,20,40,80,160 mg·L-1作用在密度为6×107/L DU145细胞24,48,72 h后,采用四甲基... 目的:观察广藿香醇(pachouli alcohol,PA)对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145的凋亡诱导效应及增殖抑制作用,探讨其发生机制。方法:广藿香醇10,20,40,80,160 mg·L-1作用在密度为6×107/L DU145细胞24,48,72 h后,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测广藿香醇对细胞的生长抑制作用;透射电镜观察药物诱导细胞凋亡形态变化;Annexin V-FITC,PI双标记法流式细胞仪检测药物诱发细胞凋亡的改变;Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、凋亡抑制蛋白Livin的表达。结果:MTT法检测提示广藿香醇处理组细胞增殖抑制作用明显,10,20,40,80,160 mg·L-1广藿香醇对DU145的24,48,72 h抑制率分别为5.73%,16.67%,22.61%;13.42%,25.03%,39.68%;25.92%,31.46%,52.76%;39.61%,54.68%,73.52%;56.42%,77.35%,91.58%,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。透射电镜显示药物作用后细胞出现凋亡形态改变。流式细胞仪检测提示广藿香醇作用使细胞凋亡率明显升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测提示广藿香醇可增强细胞Caspase-3,Bax的表达,下调Livin,Bcl-2蛋白的表达。结论:广藿香醇能抑制DU145细胞增殖,其作用机制可能与诱导细胞凋亡效应有关。 展开更多

关键词 广藿香醇 人前列腺癌细胞DU145 增殖 细胞色素C途径 凋亡

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基于网络药理学和实验验证的芪蓝方治疗前列腺癌的机制研究 被引量：3

10

作者 尤耀东 骆春梅 +4 位作者 申毅锋 朱坤 周静 黄晓朋 常德贵 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期32-40,共9页

目的:采用网络药理学研究芪蓝方治疗前列腺癌的生物学物质基础与药效机制。方法:借助TCMSP、GeneCards等数据库及相关文献构建芪蓝方治疗前列腺癌的“药物-疾病-靶点”网络,利用STRING及Cytoscape插件构建上述药物治疗前列腺癌的蛋白-... 目的:采用网络药理学研究芪蓝方治疗前列腺癌的生物学物质基础与药效机制。方法:借助TCMSP、GeneCards等数据库及相关文献构建芪蓝方治疗前列腺癌的“药物-疾病-靶点”网络,利用STRING及Cytoscape插件构建上述药物治疗前列腺癌的蛋白-蛋白相互作用网络,同时对关键靶点进行GO功能富集分析以及KEGG信号通路富集分析,并以细胞实验进一步验证网络药理学所得结论。结果:芪蓝方治疗前列腺癌的“药物-疾病-靶点”网络共涉及423个生物活性成分,筛选后获得227个靶基因,783个前列腺癌靶点,二者共同靶点89个;芪蓝方中核心活性分子为槲皮素、木犀草素、山柰酚、薯蓣皂苷素、刺芒柄花素、异黄杞苷素。关键靶点为PTGS2、PGR、AR、PPARG、ESR1、RELA;共同靶点的PPI网络中节点度排名前五位的为TP53、ESR1、MYC、AKT1、CCND1。GO富集分析提示芪蓝方治疗前列腺癌的生物学过程及功能集中在细胞增殖、对氧化应激的反应、对活性氧的反应、对类固醇激素的反应、凋亡信号通路的调控、等。KEGG通路富集分析提示芪蓝方治疗前列腺癌主要涉及PI3K-AKT信号通路、细胞凋亡、前列腺癌相关信号通路、内分泌抵抗、lL-17信号通路、化学致癌受体激活、等通路。细胞实验结果显示,与空白对照组相比,35 g/kg芪蓝方含药血清组PC-3凋亡率明显升高,细胞内H2O2、MDA水平升高,BAX、CASP9、P53蛋白明显上调(P<0.05),同时PC-3增殖、侵袭、迁移能力明显降低,细胞内SOD水平、总抗氧化能力明显降低,Ar、Psa mRNA表达下调,BCL-2、p-PI3Kp85、p-AKT、CCND1蛋白明显下调(P<0.05)。结论:芪蓝方治疗前列腺癌的作用靶点和药效机制,可能与其调控细胞增殖凋亡、氧化应激和类固醇反应的生物学过程及PI3K/AKT信号通路相关。 展开更多

关键词 芪蓝方 网络药理学 前列腺癌 人前列腺癌细胞株 凋亡 氧化应激

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硒酸化乳清分离蛋白抗前列腺癌细胞活性

11

作者 殷春雁 张男 +1 位作者 林洁 李灿鹏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第5期75-84,共10页

采用干燥加热法制备硒酸化乳清分离蛋白(selenized whey protein isolate,Se-WPI),通过Se-WPI中有机硒质量分数、硒酸根稳定性、Se-WPI消化率测定,77Se核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)分析以及Se-WPI抑制前列腺癌细胞增殖实验... 采用干燥加热法制备硒酸化乳清分离蛋白(selenized whey protein isolate,Se-WPI),通过Se-WPI中有机硒质量分数、硒酸根稳定性、Se-WPI消化率测定,77Se核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)分析以及Se-WPI抑制前列腺癌细胞增殖实验等,研究其理化性质及抗前列腺癌细胞活性。结果表明,在pH 3.0、加热温度80℃、加热时间24 h条件下制备得到的Se-WPI中有机硒质量分数为2.09%。77Se-NMR和硒酸根稳定性分析结果表明,Se-WPI中的硒以亚硒酸酯的形式存在。经硒酸化的WPI多种生物活性得到改善,消化性明显提高。Se-WPI与亚硒酸钠均具有抑制人前列腺癌LNCaP细胞、DU145细胞增殖的活性。细胞周期、细胞凋亡和Caspase-3活力检测结果从不同角度验证了Se-WPI具有诱导LNCaP细胞凋亡的作用。另外,Se-WPI还能抑制癌细胞与基底膜成分的黏附能力。实验结果可为进一步研究有机硒化合物的抑癌机制提供依据。 展开更多

关键词 硒酸化乳清分离蛋白 LNCAP细胞 抗癌活性

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芪蓝方对人前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的作用机制研究

12

作者 周静 原凡 +4 位作者 骆春梅 朱坤 刘柏言 昌玥 尤耀东 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期255-263,共9页

目的:观察芪蓝方对人前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:以DU145细胞为研究对象,通过观察不同浓度芪蓝方组(400、200、100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.56、0μg/ml)细胞形态变化,筛选出高、中、低浓度应用... 目的:观察芪蓝方对人前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:以DU145细胞为研究对象,通过观察不同浓度芪蓝方组(400、200、100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.56、0μg/ml)细胞形态变化,筛选出高、中、低浓度应用于后续实验,并采用CCK-8法检测DU145细胞增殖,流式细胞术检测DU145细胞周期、凋亡情况,Western印迹检测DU145细胞中细胞周期、凋亡相关蛋白Cyclin D1、Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase 3的表达。结果:筛选结果显示100、200、400μg/ml浓度的芪蓝方均能显著抑制DU145细胞的生长、降低轮廓清晰度和贴壁能力,且200、400μg/ml浓度的芪蓝方可显著降低DU145细胞活力,故确定高中低浓度为400、200、100μg/ml,并用于后续实验研究。与空白组比较,G2期各浓度组DU145细胞数显著增加(P<0.01),而S期高、中浓度组细胞数显著下降(P<0.01、P<0.05);与空白对照组相比,芪蓝方各组DU145细胞总凋亡数均显著增高(P<0.01),高浓度组Cyclin D1表达显著降低,高、中浓度组Bcl-2表达明显降低,Bax和Cleaved-Caspase 3表达水平明显上升(P均<0.01)。结论:芪蓝方能够抑制前列腺癌DU145细胞的细胞增殖,促进其细胞凋亡,其机制可能与下调细胞周期相关蛋白Cyclin D1表达,破坏Bax/Bcl-2平衡,上调Cleaved-Caspase 3表达相关。 展开更多

关键词 芪蓝方 人前列腺癌细胞DU145 细胞增殖与凋亡 细胞周期蛋白D1 B细胞淋巴瘤-2 B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白 裂解半胱天冬酶3

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CRISPR/Cas9技术敲除人前列腺癌PC-3细胞BLM解旋酶基因的研究 被引量：4

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作者 陈琨 许厚强 +2 位作者 赵佳福 段志强 吴萍 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第9期1547-1553,共7页

BLM解旋酶是人类RecQ解旋酶家族的重要一员,在DNA的复制、修复、重组、转录、端粒的维持等细胞代谢过程中具有重要的作用。BLM基因与前列腺癌易感性相关,可作为治疗前列腺癌的候选基因。该研究设计了5个Cas9/SgRNA载体,并通过T7E1酶筛... BLM解旋酶是人类RecQ解旋酶家族的重要一员,在DNA的复制、修复、重组、转录、端粒的维持等细胞代谢过程中具有重要的作用。BLM基因与前列腺癌易感性相关,可作为治疗前列腺癌的候选基因。该研究设计了5个Cas9/SgRNA载体,并通过T7E1酶筛选出活性最强的SgRNA3载体,利用脂质体LTX将其与供体载体共同导入前列腺癌PC-3细胞。BLa和Puro抗性筛选及荧光蛋白标记甄别获得带阳性标记的细胞。Western blot及RTq-PCR检测证明,前列腺癌PC-3细胞中的BLM解旋酶基因被成功敲除,为深入研究BLM解旋酶基因在前列腺癌中的作用提供了重要的科学数据。 展开更多

关键词 BLM解旋酶基因 CRISPR/Cas9表达载体 基因敲除 前列腺癌PC-3细胞

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槲皮素联合喜树碱促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡 被引量：4

14

作者 闵琼 曾海荣 +2 位作者 陆翠燕 张夏炎 兰芬 《中国临床药学杂志》 CAS 2020年第2期107-112,共6页

目的考察槲皮素联用喜树碱对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养PC-3细胞,用CCK-8实验、细胞周期检测实验和Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测实验,考察槲皮素联用喜树碱对PC-3细胞增殖凋亡的影响;用Western-Blot实验检测凋... 目的考察槲皮素联用喜树碱对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养PC-3细胞,用CCK-8实验、细胞周期检测实验和Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测实验,考察槲皮素联用喜树碱对PC-3细胞增殖凋亡的影响;用Western-Blot实验检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、PARP1和Caspase-3)的表达。结果 CCK-8实验结果显示槲皮素和喜树碱都可以一定程度地抑制PC-3细胞增殖,诱导凋亡作用,其中槲皮素和喜树碱联用效果更优。药物作用48 h后其半数抑制浓度(IC_(50))分别为38.76、2.25、1.88μmol·L^(-1)。细胞周期实验显示,药物联用组细胞周期处于S期的细胞比例明显高于单用组(P<0.05);细胞凋亡实验显示,药物联用组的细胞凋亡率显著高于单用组(P<0.05);Western-Blot结果显示,药物联用组对凋亡相关蛋白的影响更为明显,使Bcl-2蛋白表达下降为47%,分别使Bax、PARP1和Caspase-3依次增加1.17、0.77和0.69倍(P<0.05)。结论槲皮素联合喜树碱能够显著促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡。 展开更多

关键词 槲皮素 喜树碱 人前列腺癌PC-3细胞 细胞凋亡 药物联用

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天然产物gochnatiolide A对人前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响及机制研究 被引量：2

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作者 钟祥龙 吕超 +1 位作者 沈云亨 张卫东 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2908-2914,共7页

目的研究兔儿风属植物中天然产物gochnatiolide A抗前列腺癌DU145细胞的作用及机制。方法采用CCK-8法和克隆形成实验检测gochnatiolide A对DU145细胞增殖的影响;DAPI染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测gochnatiolide A对DU145细胞... 目的研究兔儿风属植物中天然产物gochnatiolide A抗前列腺癌DU145细胞的作用及机制。方法采用CCK-8法和克隆形成实验检测gochnatiolide A对DU145细胞增殖的影响;DAPI染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测gochnatiolide A对DU145细胞凋亡和周期的影响;Western blotting法检测gochnatiolide A对DU145细胞内活化的多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、活化的半胱氨酸蛋白酶9(cleaved Caspase-9)、p53、Bcl-2、核转录因子κB p65(NF-κB p65)和核转录因子κB抑制蛋白α、β(IKKα、IKKβ)表达的影响。结果与对照组比较,gochnatiolide A能够显著抑制DU145细胞增殖,其12、24、48 h的半数抑制浓度(IC50)值分别为4.15、2.80、1.74 μmol/L。Gochnatiolide A可以浓度依赖性地促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于G2期和S期;可以显著促进凋亡蛋白cleaved-PARP、cleaved Caspase-9和p53蛋白表达,抑制Bcl-2蛋白表达,抑制NF-κB通路中NF-κB p65、IKKα和IKKβ蛋白的表达。结论 Gochnatiolide A具有很好的抑制DU145细胞增殖及促进凋亡的作用,其机制可能与抑制NF-κB通路有关。 展开更多

关键词 gochnatiolide A DU145细胞 细胞增殖 细胞凋亡 NF-ΚB通路

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槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞增殖的作用 被引量：1

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作者 杨爱琳 刘亚鑫 +6 位作者 黄惠铭 欧阳里山 谢锦欣 刘东晓 王龙燕 屠鹏飞 胡仲冬 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期79-84,共6页

目的:观察槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞自噬的影响及对核纤层蛋白B;(Lamin B;)表达的调控作用,并探讨其在VCaP细胞增殖中发挥的作用。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测0,2,4,6,8,10 g·L^(-1)槐耳清膏在不同时间下对人前... 目的:观察槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞自噬的影响及对核纤层蛋白B;(Lamin B;)表达的调控作用,并探讨其在VCaP细胞增殖中发挥的作用。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测0,2,4,6,8,10 g·L^(-1)槐耳清膏在不同时间下对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用。采用吖啶橙染色法分析槐耳清膏给药对VCaP细胞中自噬溶酶体形成的影响。借助蛋白免疫印迹法(Western blot)检测槐耳清膏给药后细胞中与自噬密切相关的蛋白微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC3),自噬相关蛋白3(Atg3),自噬相关蛋白5(Atg5),自噬相关蛋白7(Atg7)的表达。采用CCK-8法检测槐耳清膏与自噬抑制剂(Bafilomycin A1)联合给药及槐耳清膏单独给药对细胞增殖的作用。通过Western blot检测槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B;表达的影响,并采用RNA干扰技术探究Lamin B;在槐耳抗人前列腺癌VCaP细胞增殖中的作用。结果:与空白组比较,槐耳清膏能抑制人前列腺癌VCaP细胞的增殖(P<0.01),且呈时间与浓度依赖性。槐耳清膏给药后可促进VCaP细胞中自噬溶酶体的生成。与空白组比较,槐耳清膏能上调VCaP细胞中与自噬进程密切相关的蛋白LC3-Ⅱ,Atg3,Atg5,Atg7表达水平(P<0.05),槐耳清膏能够诱导VCaP细胞自噬的发生。进一步研究发现抑制自噬能够降低人前列腺癌VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P<0.05)。与空白组比较,槐耳清膏给药能够抑制人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B;蛋白表达(P<0.01),下调Lamin B;蛋白表达,在一定程度上也能够减弱VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P<0.01)。结论:自噬活化和Lamin B;表达下调可能参与了槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用,能够为槐耳临床应用提供一定的理论基础。 展开更多

关键词 槐耳清膏 人前列腺癌VCaP细胞 自噬 核纤层蛋白B 细胞增殖

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转移潜能不同的人前列腺癌细胞系差异膜蛋白质组学的分析 被引量：2

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作者 李群 李一雷 +3 位作者 李荣贵 张丽红 张慕蕊 李玉林 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第2期118-122,共5页

目的:通过应用鸟枪法蛋白质组学技术发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志。方法:应用鸟枪法蛋白质组学技术,比较人高转移前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移前列腺癌细胞株(PC-3)间膜蛋白表达的差异。用SDS-PAGE胶分离膜蛋白,并且... 目的:通过应用鸟枪法蛋白质组学技术发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志。方法:应用鸟枪法蛋白质组学技术,比较人高转移前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移前列腺癌细胞株(PC-3)间膜蛋白表达的差异。用SDS-PAGE胶分离膜蛋白,并且进行胰酶消化,用反相液相色谱分离肽混合物后进行ESI-MS/MS鉴定,用数据库查询结合生物信息学技术比较分析并识别细胞间的差异表达膜蛋白。结果:1)利用Gel-1DLC-MS/MS分析,在严格的过滤参数条件下鉴定了PC-3和PC-3M两种细胞中的蛋白,在PC-3细胞中鉴定了2172个蛋白,在PC-3M细胞中鉴定了2023个蛋白。2)用GOA分析软件进行分类,PC-3细胞中1499个蛋白为已知细胞组分,其中564(38.13%)个蛋白为膜蛋白或者膜相关蛋白;PC-3M细胞中1391个蛋白为已知细胞组分,细胞组分中527(38.30%)个为膜蛋白或者膜相关蛋白。几个假设蛋白和cDNA序列也被预测。3)用蛋白名称和IPI数据库号对比分析后发现有161个蛋白质仅在PC-3前列腺癌细胞株中检测到有表达,135个蛋白质仅在PC-3M中检测到有表达。结论:人高、低转移前列腺癌细胞株的膜蛋白表达存在明显差异,为进一步发现前列腺癌转移相关分子和阐明前列腺癌侵袭转移的分子机制提供实验证据。 展开更多

关键词 膜蛋白质组学 鸟枪法 转移 人前列腺癌细胞株 差异表达

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番茄红素对人前列腺癌细胞(DU145)生长抑制的离体和整体水平研究 被引量：17

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作者 唐莉莉 曾祥斌 +1 位作者 卢国栋 金泰廙 《卫生毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期1-4,共4页

目的　研究番茄红素对人前列腺癌细胞DU145的影响。方法　体外培养的人前列腺癌细胞DU145经番茄红素作用后用苔盼蓝染色进行活细胞计数 ,绘制生长曲线并计算抑制率 ;应用流式细胞仪分析番茄红素对DU145细胞周期和凋亡的影响。制作裸鼠... 目的　研究番茄红素对人前列腺癌细胞DU145的影响。方法　体外培养的人前列腺癌细胞DU145经番茄红素作用后用苔盼蓝染色进行活细胞计数 ,绘制生长曲线并计算抑制率 ;应用流式细胞仪分析番茄红素对DU145细胞周期和凋亡的影响。制作裸鼠人前列腺癌模型 ,观察番茄红素在整体动物上的作用。结果　番茄红素可以明显抑制DU145细胞的生长 ,且呈剂量 效应和时间 效应关系。 10、2 0、40 μmol L处理细胞 7d后 ,细胞增长的抑制率分别为 10 76 %、92 90 %、99 11% (P <0 0 1)。裸鼠人前列腺癌模型上的研究显示 ,6 %番茄红素油树脂可显著抑制腺瘤的生长 ,30 0mg kg剂量组腺癌抑制率可达到 75 76 % (P <0 0 5 )。用经番茄红素处理过的细胞致瘤力消失。流式细胞仪分析显示番茄红素可影响该细胞周期并引起细胞凋亡 ,凋亡率高达 42 42 %。结论　番茄红素可以在离体细胞和整体动物水平明显抑制雄激素非依赖型人前列腺癌DU 145 ,其抑制机制可能是通过影响人前列腺癌细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。 展开更多

关键词 番茄红素 细胞周期 凋亡 人前列腺癌细胞 裸鼠

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枸杞多糖对人前列腺癌细胞生长影响 被引量：5

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作者 李卓能 罗琼 +3 位作者 杨明亮 闫俊 庞雅琴 姜鸣 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期311-312,共2页

目的观察枸杞多糖对体外培养的雄激素非依赖型人前列腺癌PC-3细胞存活率、细胞周期及其凋亡的影响。方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测枸杞多糖对PC-3细胞作用的时间效应和剂量效应,并计算细胞生长抑制率;流式细胞仪观察枸杞多糖处理P... 目的观察枸杞多糖对体外培养的雄激素非依赖型人前列腺癌PC-3细胞存活率、细胞周期及其凋亡的影响。方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测枸杞多糖对PC-3细胞作用的时间效应和剂量效应,并计算细胞生长抑制率;流式细胞仪观察枸杞多糖处理PC-3细胞后细胞周期以及细胞凋亡的改变。结果枸杞多糖对PC-3细胞的增殖有明显的抑制作用,抑制率可达87.84%,且呈剂量-效应和时间-效应关系;流式细胞仪分析显示,枸杞多糖可影响该细胞周期并引起细胞凋亡,凋亡率高达40%。结论枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞的生长有明显抑制作用,其机制可能是通过诱导人前列腺癌细胞凋亡和影响其生长周期而实现。 展开更多

关键词 枸杞多糖 人前列腺癌细胞 细胞凋亡 细胞周期

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DZNep通过下调EZH2蛋白表达抑制人前列腺癌PC3细胞增殖 被引量：2

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作者 李倩 王清 +2 位作者 杨建林 王艳林 曹春雨 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第22期3689-3693,共5页

目的研究EZH2蛋白抑制剂DZNep对前列腺癌PC3细胞增殖的影响及其用于人前列腺癌治疗的潜在价值。方法 MTT分析DZNep处理、siRNA敲低EZH2和EZH2过表达对PC3细胞增殖的影响,Western blot检测EZH2和Bax/Bcl-2的表达。结果 DZNep抑制PC-3细... 目的研究EZH2蛋白抑制剂DZNep对前列腺癌PC3细胞增殖的影响及其用于人前列腺癌治疗的潜在价值。方法 MTT分析DZNep处理、siRNA敲低EZH2和EZH2过表达对PC3细胞增殖的影响,Western blot检测EZH2和Bax/Bcl-2的表达。结果 DZNep抑制PC-3细胞增殖、诱导细胞凋亡,上调Bax基因表达并下调Bcl-2基因表达。敲低EZH2抑制PC3细胞增殖,过表达EZH2则拮抗DZNep对PC3细胞的增殖抑制。结论 DZNep通过下调EZH2表达、诱导细胞凋亡发生从而抑制PC3细胞增殖。DZNep具有抗人前列腺癌治疗的潜在应用前景。 展开更多

关键词 EZH2 前列腺癌 细胞凋亡 DZNep PC3细胞

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