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大黄酸对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响 被引量:10
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作者 袁小青 马向华 +2 位作者 丁亚琴 王芳 沈捷 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期161-165,共5页
目的:研究大黄酸(rhein,Rh)对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定RH对人前体脂肪细胞增殖的影响;通过形态学观察脂肪细胞的分化程度及形态学变化;并用油红O染色法,检测脂肪细胞内... 目的:研究大黄酸(rhein,Rh)对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定RH对人前体脂肪细胞增殖的影响;通过形态学观察脂肪细胞的分化程度及形态学变化;并用油红O染色法,检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化;应用RT-PCR检测RH干预后分化抑制基因CHOP mRNA的表达。结果:各浓度组RH(0.1、1、2.5、5、10ug/ml)抑制人前体脂肪细胞增殖,作用呈剂量依赖性;RH对脂肪细胞分化的抑制作用亦呈剂量依赖性;1ug/ml的RH使CHOP mRNA表达增加。结论:RH可抑制人前体脂肪细胞增殖与分化,该作用可能与CHOP表达上调有关。 展开更多
关键词 大黄酸 人前体脂肪细胞 增殖与分化 CHOP
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人前体脂肪细胞分化过程及肥胖人群脂肪组织中hsa_circ_0017650高表达
2
作者 张晶 吴凯 黄伟 《基础医学与临床》 2023年第7期1079-1083,共5页
目的探讨hsa_circ_0017650在人前体脂肪细胞分化过程以及肥胖人群脂肪组织中的表达变化。方法RT-qPCR测定人前体脂肪细胞分化第0/1/3/5/7/9/12天hsa_circ_0017650的水平变化;油红O染色观察人前体脂肪细胞分化第0/6/12天脂滴形成;RT-qPC... 目的探讨hsa_circ_0017650在人前体脂肪细胞分化过程以及肥胖人群脂肪组织中的表达变化。方法RT-qPCR测定人前体脂肪细胞分化第0/1/3/5/7/9/12天hsa_circ_0017650的水平变化;油红O染色观察人前体脂肪细胞分化第0/6/12天脂滴形成;RT-qPCR测定人前体脂肪细胞中CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4/ap2)和脂蛋白脂酶(LPL)mRNA水平;根据体质指数(BMI)将125例患者分为肥胖组和对照组,比较2组腹膜后白色脂肪组织hsa_circ_0017650表达差异;Pearson相关性分析hsa_circ_0017650表达水平与肥胖组患者BMI、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)相关性。结果培养第12天时人前体脂肪细胞中C/EBPα、FABP4/ap2和LPL水平均高于第0天(P<0.001);Hsa_circ_0017650表达呈时间依赖性,其中第3天达到峰值(P<0.001)。与对照组相比,肥胖组白色脂肪组织中hsa_circ_0017650水平及BMI、腰臀比、TC、TG、LDL-C水平以及升高(P<0.001);Hsa_circ_0017650与BMI、TG、LDL-C呈正相关(r=0.554、0.569、0.618,P<0.001)。结论Hsa_circ_0017650在人前体脂肪细胞分化过程以及肥胖人群白色脂肪组织中高表达,与患者肥胖密切相关,为肥胖患者的治疗提供靶点。 展开更多
关键词 人前体脂肪细胞 分化 肥胖 Hsa_circ_0017650
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Effects of pioglitazone on proliferation and differentiation of human preadipocytes 被引量:2
3
作者 Jianying Zhou Minjuan Ge +3 位作者 Yamei Wang Haiwei Wu Jie Shen Xianghua Ma 《Journal of Nanjing Medical University》 2007年第2期99-103,共5页
Objective: To explore the effects of thiazolidinediones (TZDs) pioglitazone on proliferation and differentiation of human preadipocytes. Methods:Omental adipose tissue biopsies were obtained from 15 patients who w... Objective: To explore the effects of thiazolidinediones (TZDs) pioglitazone on proliferation and differentiation of human preadipocytes. Methods:Omental adipose tissue biopsies were obtained from 15 patients who were undergoing elective open-abdominal surgery. The primary culture and differentiated induction of human preadipocytes were performed, and the human preadipo-cytes were treated with pioglitazone at different concentrations at proper moments. Dynamic morphological changes of the human preadipocytes were observed, and their proliferation and differentiation were assessed with Colorimetric MTT Assay and Oil Red O Staining. Results:After 24 hours and 72 hours with pioglitazone, 0.1 μmol/L (μmol/ml) pioglitazone increased the MTT values of the human preadipocytes by 25.3% and 34.8%,respectively(P 〈 0.05), while 1 μmol/L pioglitazone by 27.4% and 26.6%(P 〈 0.05), compared with the control group without pioglitazone. The human preadipocytes with pioglitazone cumulated more adipose in the endochylema than those without pioglitazone obviously. 0.1 μmol/L pioglitazone increased the differentiation degree of the human preadipocytes differentiated for 8-10 days by 44.81% and 1 μmol/L pioglitazone by 53.76%(P 〈 0.05). Conclusion:Thi- azolidinediones pioglitazone may significantly promote the proliferation and differentiation of the human omental preadipocytes. 展开更多
关键词 PIOGLITAZONE human preadipocytes proliferation and differentiation insulin sensitivity
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hsa-miR-1908靶基因预测及生物信息学分析 被引量:1
4
作者 杨蕾 季晨博 +5 位作者 史春梅 陈玲 庞玲霞 夏黎 郭锡熔 倪毓辉 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期820-824,共5页
目的对hsa-miR-1908进行系统的生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程及信号通路,为深入研究其在人脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法应用miRBase获取hsa-miR-1908的序列,并分析其特征;应用miRanda预测hsa... 目的对hsa-miR-1908进行系统的生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程及信号通路,为深入研究其在人脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法应用miRBase获取hsa-miR-1908的序列,并分析其特征;应用miRanda预测hsa-miR-1908的靶基因,并取预测结果及基因芯片结果的交集,进一步进行基因功能注释(Gene ontology)和生物通路富集分析(Pathway enrichment)。结果 hsa-miR-1908在各物种之间有一定保守性,其靶基因功能富集于Wnt受体信号的调控、细胞周期、细胞凋亡等生物学过程;其靶基因信号通路富集于促性腺激素释放激素信号通路、MAPK信号通路、胰岛素信号通路、细胞周期等信号转导通路及胰腺癌等疾病通路中。结论 hsa-miR-1908预测的靶基因集合富集于多个信号通路及生物学过程,与肥胖密切相关,为后续has-miR-1908在人脂肪细胞中生物学功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 miR-1908 MIRNA 生物信息学 人脂肪细胞 肥胖
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人前脂肪细胞的体外培养 被引量:1
5
作者 李卫华 孙志成 王文 《武警医学》 CAS 2010年第8期681-684,共4页
目的建立人前脂肪细胞培养及其在药物诱导下向脂肪细胞分化的细胞模型。方法取成人的腹部纯脂肪颗粒,采用消化法进行人前脂肪细胞的原代培养,并在培养液中加入胰岛素和地塞米松对细胞进行诱导。对培养细胞进行形态学研究,测定生长曲线,... 目的建立人前脂肪细胞培养及其在药物诱导下向脂肪细胞分化的细胞模型。方法取成人的腹部纯脂肪颗粒,采用消化法进行人前脂肪细胞的原代培养,并在培养液中加入胰岛素和地塞米松对细胞进行诱导。对培养细胞进行形态学研究,测定生长曲线,并用油红O染色法对前脂肪细胞向脂肪细胞的分化进行定性、定量研究。结果培养出的人前脂肪细胞呈梭形,成分均一,增殖旺盛。经胰岛素和地塞米松诱导后,通过油红O脂肪染色法测定,证明前脂肪细胞已向脂肪细胞分化。结论在成熟的脂肪组织中存在着可以增殖,并可以分化成脂肪细胞的前脂肪细胞,经诱导后可以分化成成熟的脂肪细胞。 展开更多
关键词 人前脂肪细胞 脂肪细胞 生物学特征 细胞培养
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人miR-1908慢病毒载体构建及在人脂肪前体细胞中的表达验证 被引量:1
6
作者 杨蕾 季晨博 +5 位作者 史春梅 陈玲 庞玲霞 夏黎 郭锡熔 倪毓辉 《中国儿童保健杂志》 CAS 北大核心 2014年第10期1018-1021,共4页
目的构建人miR-1908慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪前体细胞中过表达效果。方法以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-1908区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T... 目的构建人miR-1908慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪前体细胞中过表达效果。方法以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-1908区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装病毒,收取病毒上清,纯化后感染人脂肪前体细胞,36h开始观察荧光标记,72h收取细胞,抽提RNA,Realtime PCR检测慢病毒感染下miR-1908的相应表达量。结果成功构建人miR-1908慢病毒表达载体,包装获得的病毒感染人脂肪前体细胞的效率可达到70%以上,miR-1908过表达水平可接近2倍。结论本研究成功构建了人miR-1908慢病毒过表达载体,包被的慢病毒可以在人脂肪前体细胞中实现过表达效果,为后续功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 miR-1908 慢病毒 人脂肪前体细胞
原文传递
hsa-miR-17-92 cluster及其同源体靶基因的生物信息学分析 被引量:1
7
作者 史春梅 徐广峰 +5 位作者 陈玲 赵亚萍 倪毓辉 杨蕾 季晨博 郭锡熔 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期496-500,共5页
目的对hsa-miR-17-92duster及其同源体进行系统的生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程,为深入研究其在脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法1.应用PubMed、Google等信息搜索工具查找hsa-miR-17-92cluste... 目的对hsa-miR-17-92duster及其同源体进行系统的生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程,为深入研究其在脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法1.应用PubMed、Google等信息搜索工具查找hsa-miR-17-92cluster及其同源体的所有研究,综述已有研究进展;2.应用miRBase获取hsa-miR-17-92cluster及其同源体的各成员序列,并分析其序列特征及保守性;3.应用美国国家生物技术信息中心(NCBI)blast、NCBImapviewer、基因组生物信息学(UCSC)Browser工具分析hsa-miR-17-92 cluster及其同源体所在基因组的序列特征;4.应用TargetScan5.1,PicTar及miRanda预测hsa-miR-17-92cluster及其同源体靶基因,取三者预测结果的交集,进一步进行功能注释和Pathway富集分析。结果1.现有研究提示hsa-miR-17-92 cluster及其同源体在脂肪细胞分化、肿瘤疾病、心脏及肺发育、免疫系统与血管形成等生物学过程中有重要作用;2.hsa-miR-17-92 cluster及其同源体进化上高度保守,根据种子序列同源性可分为4类,且在多物种问非常保守;3.hsa.miR-17-92 cluster及其同源体预测靶基因的功能与细胞周期、细胞黏附、Wnt、TGF-β信号、p53、丝裂原活化蛋白激酶等信号通路有较大的相关性,可能参与了前列腺癌、胰腺癌、结肠癌等多种疾病通路。结论通过对hsa-miR-17-92 cluster及其同源体系统的生物信息学分析,初步阐明了hsa-miR一17-92 cluster及其同源体的基本生物学特征,并为hsa-miR-17-92 cluster后续研究提供了功能与机制的线索。 展开更多
关键词 hsa-miR-17-92 CLUSTER 生物信息学 脂肪细胞 肥胖
原文传递
人miR-146b慢病毒载体构建及人脂肪细胞中表达验证
8
作者 陈玲 史春梅 +5 位作者 杨蕾 朱璐 徐广峰 季晨博 郭锡熔 张春梅 《中国儿童保健杂志》 CAS 北大核心 2013年第11期1155-1157,1160,共4页
目的构建人miR-146b慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪细胞中过表达效果。方法以人基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-146b区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装病毒... 目的构建人miR-146b慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪细胞中过表达效果。方法以人基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-146b区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装病毒,收取病毒上清,纯化后感染人脂肪前体细胞,36h开始观察荧光标记,72h收取细胞,抽提RNA,Realtime PCR检测慢病毒感染下miR-146b的相应表达量。结果成功构建人miR-146b慢病毒表达载体,包装获得的病毒感染人脂肪细胞的效率可达到85%以上,miR-146b过表达水平可接近4倍。结论本研究成功构建了人miR-146b慢病毒表达载体,包被的慢病毒可以在人脂肪细胞中实现过表达效果,为后续功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 miR-146b 慢病毒 人脂肪前体细胞
原文传递
hsa-miR-335靶基因预测及生物信息学分析
9
作者 朱璐 史春梅 +4 位作者 崔焱 徐广峰 季晨博 倪毓辉 郭锡熔 《西部医学》 2012年第10期1851-1855,共5页
目的对hsa-miR-335进行系统的生物信息学分析,预测hsa-miR-335可能参与的生物学过程,为本研究小组深入研究其在脂肪细胞分化中的功能和机制奠定基础。方法通过miRbase获取并分析hsa-miR-335序列特征;应用TargetScan,PicTar及miRanda预测... 目的对hsa-miR-335进行系统的生物信息学分析,预测hsa-miR-335可能参与的生物学过程,为本研究小组深入研究其在脂肪细胞分化中的功能和机制奠定基础。方法通过miRbase获取并分析hsa-miR-335序列特征;应用TargetScan,PicTar及miRanda预测hsa-miR-335的靶基因,并结合已证实的靶标基因,进行功能注释(Gene Ontol-ogy)和Pathway富集分析(Pathway Enrichment)。应用NCBI Mapviewer、UCSC Genome Browser等工具对hsa-miR-335进行启动子相关预测。结果 miR-335在各物种之间具有高度保守性,其靶基因功能富集于胰腺外分泌、脂质激酶活性调控、wnt受体信号的调控、细胞周期等生物学过程(P>0.01),其靶基因信号通路富集于促性腺激素释放激素信号通路、MAPK信号通路、胰岛素信号通路、细胞周期等信号转导通路(P<0.05)。启动子预测提示hsa-miR-335为基因内miRNA,在基因组上下游10kb以内存在CpG岛,转录起始位置(TSS)、Poly A信号、转录因子结合位置(TFBS)。结论 hsa-miR-335预测的靶基因集合富集于多个生物学过程,与肥胖密切相关,并可能存在其独立的转录调控机制。为后续miR-335在肥胖人脂肪细胞中生物学功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 miR-335 MIRNA 生物信息学 人脂肪细胞 肥胖
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