不同张应力对体外培养的人牙周膜成纤维细胞形态和纤维型肌动蛋白改变的影响 被引量：11

1

作者 彭庭莉 杨军 +1 位作者 周继祥 杨彦春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期898-900,共3页

目的　研究动态张应力对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)形态和微丝改变的影响,进一步了解HPDLF的应力 生物学效应。方法　利用自行设计的膜式动态张应力 体外细胞培养研究体系对体外分离培养的第6代的HPDLF进行不同应力水平、频... 目的　研究动态张应力对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)形态和微丝改变的影响,进一步了解HPDLF的应力 生物学效应。方法　利用自行设计的膜式动态张应力 体外细胞培养研究体系对体外分离培养的第6代的HPDLF进行不同应力水平、频动范围及时相点的张应力加载,所有样本经FITC Phalloidin免疫荧光染色后,以激光扫描共聚焦显微镜观察加力后不同时间细胞及其肌动蛋白形态的变化特征。结果　动态张应力作用16、2 4h后,部分人牙周膜成纤维细胞出现收缩,F actin排列等方面的变化;3 2h后,变化更明显。5kPa的静态张应力作用后,可引起细胞间隙增大等变化,F actin改变较少。结论　不同张应力可引起体外培养的人牙周膜成纤维细胞的形态和F actin发生了有规律的变化,特别是动态张应力组2 ,在细胞投影面积以及细胞平均荧光强度方面均与加力时间呈正比,微丝随加力时间的延长而逐渐变粗。 展开更多

关键词 人牙周膜成纤维细胞 纤维型肌动蛋白 张应力 激光扫描共聚焦显微镜

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两种根充糊剂在根管治疗术一次法中的应用 被引量：10

2

作者 余杰 唐琳 金向青 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2008年第6期345-347,共3页

目的：观察Cortisomol糊剂和AH plus糊剂在慢性尖周炎的根管治疗术一次法后的反应及远期疗效。方法：门诊需要做根管治疗的102例110个牙随机分为Cortisomol糊剂组54个牙和AH plus糊剂组56个牙。常规根管预备后，两组分别用Cortisomol糊... 目的：观察Cortisomol糊剂和AH plus糊剂在慢性尖周炎的根管治疗术一次法后的反应及远期疗效。方法：门诊需要做根管治疗的102例110个牙随机分为Cortisomol糊剂组54个牙和AH plus糊剂组56个牙。常规根管预备后，两组分别用Cortisomol糊剂和AH plus糊剂根管治疗术一次法根管充填。结果：治疗后1～7d Cortisomol糊剂组术后反应率较AH plus糊剂组要低（P〈0．05），远期疗效两组无明显差异（P〉0．05）。结论：Cortisomol糊剂用于一次性根管治疗术后反应较轻，且疗效可靠。 展开更多

关键词 根尖周炎 根管充填材料

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Er:YAG激光照射对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响 被引量：10

3

作者 周志雄 张笋 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期358-361,共4页

目的:观察离体培养的人牙周膜成纤维细胞在Er:YAG激光照射后其增殖能力的变化。方法:离体培养的人牙周膜成纤维细胞,进行常规免疫组化染色,鉴定细胞来源。选用第5代人牙周膜成纤维细胞,随机分为5组,A组为对照组,不接受激光照射。实验组... 目的:观察离体培养的人牙周膜成纤维细胞在Er:YAG激光照射后其增殖能力的变化。方法:离体培养的人牙周膜成纤维细胞,进行常规免疫组化染色,鉴定细胞来源。选用第5代人牙周膜成纤维细胞,随机分为5组,A组为对照组,不接受激光照射。实验组分别接受频率为10 Hz的不同能量Er:YAG激光照射,参数分别为B组:50 m J,C组:100 m J,D组:150m J,E组:200 m J。分别于1、3、5、7、9 d使用CCK-8法测定细胞生长情况,分析其增殖能力的变化。结果:培养第5天时B^E组细胞增殖率高于A组(P<0.05)。结论:低能量,短时间的Er:YAG激光照射能促进牙周膜成纤维细胞的增殖能力。 展开更多

关键词 ER:YAG激光 人牙周膜成纤维细胞 细胞增殖

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机械力诱导牙周膜成纤维细胞p38 MAPK磷酸化反应的实验研究 被引量：8

4

作者 党平 施生根 宋应亮 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2003年第4期202-204,共3页

目的 :研究 p38蛋白激酶 (p38MAPF)是否参与机械压力在牙周膜成纤维细胞的信号转导过程 ,初步探讨咬合创伤对牙周组织的损伤机制。方法 :本实验通过免疫印迹法观察机械压力刺激后 ,牙周膜细胞内磷酸化p38MAPK不同时段强度的变化。结果 ... 目的 :研究 p38蛋白激酶 (p38MAPF)是否参与机械压力在牙周膜成纤维细胞的信号转导过程 ,初步探讨咬合创伤对牙周组织的损伤机制。方法 :本实验通过免疫印迹法观察机械压力刺激后 ,牙周膜细胞内磷酸化p38MAPK不同时段强度的变化。结果 :当压力值为 2 0 0kPa时 ,细胞内p38MAPK磷酸化程度明显增强 ,约 60min后磷酸化水平降至刺激前水平。结论 :初步证明机械力信号可通过跨膜转导激活p38MAPK ,引起牙周膜细胞功能改变 。 展开更多

关键词 机械力 牙周膜成纤维细胞 信号转导 蛋白激酶 咬合创伤 牙周组织损伤

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人牙周膜体外分离培养及其成骨表型的研究 被引量：5

5

作者 敖建华 刘彦普 +1 位作者 董蕊 刘晓亮 《临床口腔医学杂志》 2006年第9期528-530,共3页

目的：体外培养人牙周膜细胞(human periodontal ligament fibroblasts hPDLFs),并对其成骨表型特征进行研究。方法：采用胶原酶消化法获得大量成活率高的人牙周膜细胞。在DMEM培养基中进行原代及传代培养,免疫组化方法检测细胞波形丝... 目的：体外培养人牙周膜细胞(human periodontal ligament fibroblasts hPDLFs),并对其成骨表型特征进行研究。方法：采用胶原酶消化法获得大量成活率高的人牙周膜细胞。在DMEM培养基中进行原代及传代培养,免疫组化方法检测细胞波形丝蛋白及角蛋白的表达,鉴定细胞。使用矿化液诱导,然后应用碱性磷酸酶活性检测、Von Kossa染色等方法观察hPDLFs在矿化液作用下生物学特性的改变。结果：hPDLFs呈星形或长梭形,免疫组化波形丝蛋白阳性,角蛋白阴性,证实该细胞来源可靠。矿化诱导5d后,有部分hPDLFS转化为成骨样细胞,碱性磷酸酶活性显著升高,诱导20 d后可见矿化结节形成。结论：酶消化法可以快速得到大量hPDLFs,且hPDLFs具有一定的成骨表型特征。 展开更多

关键词 人牙周膜细胞 细胞培养 成骨表型

原文传递

组织块法和酶消化法培养人牙周膜细胞 被引量：4

6

作者 王健平 隋晓梅 《黑龙江医药科学》 2002年第6期4-6,共3页

目的:作者分别采用酶消化法和组织块法培养人牙周膜细胞,并对这两种方法进行比较。方法:倒置相差显微镜连续观察体外培养的人牙周膜细胞原代和传代生长情况,从形态学、免疫组化及细胞增殖方面对比两种方法培养细胞的异同。结果:两种方... 目的:作者分别采用酶消化法和组织块法培养人牙周膜细胞,并对这两种方法进行比较。方法:倒置相差显微镜连续观察体外培养的人牙周膜细胞原代和传代生长情况,从形态学、免疫组化及细胞增殖方面对比两种方法培养细胞的异同。结果:两种方法培养的细胞形态大致相同,来源一致,增殖和生长曲线大体一致。组织块法培养的细胞同源性好,但初代培养时间长;酶消化法培养的细胞一次可获得的细胞量大,但容易污染,且初代培养的细胞混有较多的上皮细胞,需多次传代才能去除。结论:组织块法培养HPLFs适用于细胞纯度要求较高的实验,而酶消化法培养HPLFs 适用于短期内获得大量细胞的实验。 展开更多

关键词 组织块法 酶消化法 人牙周膜细胞 细胞培养 免疫组织化学

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没食子水提物对人牙周膜成纤维细胞生物学活性的影响

7

作者 梁猛猛 李恺 +2 位作者 赵玉绒 张若冰 艾林 《中国药业》 CAS 2024年第18期42-46,共5页

目的 探讨没食子水提物在防治口腔炎性疾病中的作用。方法 分离培养人牙周膜成纤维细胞(HPDLF),设立阴性对照组(PBS)、脂多糖组(1μg/mL)、没食子组(10 mg/mL)、氯己定组(0.2%,m/m)。对没食子水提物粉末进行大体检查,采用扫描电子显微... 目的 探讨没食子水提物在防治口腔炎性疾病中的作用。方法 分离培养人牙周膜成纤维细胞(HPDLF),设立阴性对照组(PBS)、脂多糖组(1μg/mL)、没食子组(10 mg/mL)、氯己定组(0.2%,m/m)。对没食子水提物粉末进行大体检查,采用扫描电子显微镜观察没食子水提物粉末的微观特征。采用MTT法检测细胞活力,XTT法检测细胞增殖水平,以划痕伤口愈合迁移试验考察细胞迁移情况,采用酶联免疫吸试验(ELISA)法检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果 没食子水提物粉末大体检查及显微特征明显。没食子组细胞活力显著高于其他组(P <0.05)。给药后第3,5,7天,没食子组HPDLF增殖水平显著高于其他组(P <0.05)。与阴性对照组比较,没食子组IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平显著降低(P <0.05)。没食子组细胞24 h划痕伤口几乎完全闭合。结论 没食子水提物可减轻HPDLF相关炎性反应。 展开更多

关键词 没食子 牙周炎 人牙周膜成纤维细胞 生物学活性 炎性反应

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3种髓腔穿孔修复材料对人牙周膜成纤维细胞毒性的体外研究 被引量：5

8

作者 汪莉 尹仕海 +1 位作者 钟素兰 揭有琼 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期479-482,共4页

目的对三氧化矿物凝聚体(MTA)、Z350纳米复合树脂、银汞合金3种常用髓腔穿孔修复材料对人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)毒性进行体外比较研究。方法采用甲基噻唑基四唑(MTT)法研究3种材料对HPDLF增殖的影响,并采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)... 目的对三氧化矿物凝聚体(MTA)、Z350纳米复合树脂、银汞合金3种常用髓腔穿孔修复材料对人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)毒性进行体外比较研究。方法采用甲基噻唑基四唑(MTT)法研究3种材料对HPDLF增殖的影响,并采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法研究材料对细胞碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)mRNA表达的影响。结果MTA的毒性最小,并能上调HPDLF中ALP mRNA和OC mRNA的表达;Z350的毒性级为1级,能够促进细胞ALP mRNA的表达,对细胞OC mRNA的表达基本无抑制;银汞合金对细胞增殖的抑制作用最大,毒性级为3级,具有中度细胞毒性,对细胞ALP mRNA和OC mRNA表达的抑制最强。结论MTA对HPDLF的毒性最小,并且能促进HPDLF的成骨功能和分化,Z350纳米复合树脂次之,银汞合金的毒性最大,并抑制牙周膜成纤维细胞的分化。 展开更多

关键词 髓腔穿孔 穿孔修复材料 人牙周膜成纤维细胞 细胞毒性

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机械压力对牙周膜成纤维细胞P38蛋白激酶激活及转位的影响 被引量：5

9

作者 党平 施生根 宋应亮 《口腔颌面修复学杂志》 2003年第2期75-77,共3页

目的:研究P38蛋白激酶是否参与机械压力在牙周膜成纤维细胞的信号转导过程,初步探讨咬合创伤对牙周组织损伤机制。方法:本实验通过免疫组化法观察机械压力刺激后,牙周膜细胞内磷酸化P38蛋白激酶不同时间定位、强度的变化。结果:当压力大... 目的:研究P38蛋白激酶是否参与机械压力在牙周膜成纤维细胞的信号转导过程,初步探讨咬合创伤对牙周组织损伤机制。方法:本实验通过免疫组化法观察机械压力刺激后,牙周膜细胞内磷酸化P38蛋白激酶不同时间定位、强度的变化。结果:当压力大于200Kpa时,细胞内P38蛋白激酶磷酸化程度增强,且在30分钟时染色颗粒由胞浆转移至胞核,约60分钟后染色降至刺激前水平。结论:初步证明机械力信号可通过细胞跨膜转导,并激活胞浆内P38蛋白激酶转移至胞核。 展开更多

关键词 机械压力 牙周膜成纤维细胞 P38蛋白激酶 免疫组织化学 咬合创伤 牙周损伤 信号转导

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微丝对牵张应变诱导的人牙周膜成纤维细胞中环氧合酶-2表达的影响 被引量：4

10

作者 熊培颖 黄生高 张建兴 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期353-356,共4页

目的探讨微丝的聚合在人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)正畸力信号传导中的作用。方法将培养的hPDLFs接种于膜式细胞牵张应变施加装置上,随机分为对照组、单纯加力组、加力+细胞松弛素组。对照组牵张应变量为0;单纯加力组和加力+细胞松弛素... 目的探讨微丝的聚合在人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)正畸力信号传导中的作用。方法将培养的hPDLFs接种于膜式细胞牵张应变施加装置上,随机分为对照组、单纯加力组、加力+细胞松弛素组。对照组牵张应变量为0;单纯加力组和加力+细胞松弛素组设定细胞静态牵张应变量为18%,加载时间分别为8h、16h和24h。加力+细胞松弛素组在施加牵张应变量前加入5μg/mL的细胞松弛素B来破坏微丝的聚集作用。用免疫组织化学法检测细胞中环氧合酶-(2COX-2)的表达,测定灰度值并进行统计学处理。结果单纯加力组在18%牵张应变量作用下,COX-2表达随着加载时间的增加而增强;加力+细胞松弛素组在18%牵张应变量作用下,COX-2的表达明显降低,且各加载时间组间表达无差别。结论微丝的聚合介导了hPDLFs中正畸力信号传导,破坏微丝的聚合作用将阻碍力学信号的传导,从而降低COX-2的表达。 展开更多

关键词 人牙周膜成纤维细胞 环氧合酶-2 力信号传导 微丝

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幽门螺杆菌对人牙周膜成纤维细胞的增殖和细胞周期的影响 被引量：4

11

作者 许丹 阎璐 任吉芳 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第1期25-28,共4页

目的:观察幽门螺杆菌(H.pylori)对人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)的增殖和细胞周期的影响。方法:体外分别培养PDLFs细胞株(hPDLF100)和H.pylori)国际标准产毒株NCTC11637,将不同浓度(1×108、2×107、4×106、8×105cfu/mL)... 目的:观察幽门螺杆菌(H.pylori)对人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)的增殖和细胞周期的影响。方法:体外分别培养PDLFs细胞株(hPDLF100)和H.pylori)国际标准产毒株NCTC11637,将不同浓度(1×108、2×107、4×106、8×105cfu/mL)H.pylori分别与PDLFs共同培养,采用四甲基偶氮唑盐比色法(Methylthiazolyl tetraxolium,MTT)和流式细胞术(Flow cytometry,FCM),观察不同浓度H.pylori对PDLFs的生长增殖和细胞周期的影响。结果:各浓度H.pylori作用于PDLFs 6、12、24 h后,与对照组相比,OD值均明显减小(P<0.05),说明不同浓度的H.pylori均能抑制PDLFs的生长;并且随着H.pylori浓度的增加,OD值逐渐减小;相同浓度时,时间越长,OD值也逐渐减小。H.pylori作用于PDLFs 12 h后,随着H.pylori浓度的增加,细胞周期中GoG1期比例逐渐增高,而S期和G2M期的比例则呈下降趋势(P<0.05)。结论:H.pylori能抑制PDLFs的增殖并阻遏其分裂和DNA合成。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 人牙周膜成纤维细胞 细胞增殖 细胞周期

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柚皮苷对脂多糖诱导的人牙周膜成纤维细胞增殖及炎症因子表达的影响 被引量：4

12

作者 刘景 袁媛 《口腔医学》 CAS 2020年第3期198-203,共6页

目的探讨柚皮苷(naringin,NRG)对脂多糖诱导的人牙周膜成纤维细胞增殖及炎症因子表达的影响。方法以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(100μg/mL)诱导人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast,HPDLF)损伤,采用MTT法检... 目的探讨柚皮苷(naringin,NRG)对脂多糖诱导的人牙周膜成纤维细胞增殖及炎症因子表达的影响。方法以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(100μg/mL)诱导人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast,HPDLF)损伤,采用MTT法检测NRG对LPS诱导HPDLF损伤的保护作用,利用ELISA法和Western blotting法检测NRG对LPS诱导的HPDLF中白介素(interleukin,IL)-6、IL-8、IL-1β等炎症因子蛋白表达的影响,同时利用Real-time PCR方法检测NRG对LPS诱导的HPDLF组IL-6、IL-8、IL-1β等炎症因子基因表达的影响。结果经LPS(100μg/mL)刺激后,HPDLF增殖受到抑制,与CON组比较,LPS组细胞存活率显著降低,细胞周期进程受到抑制,差异具有统计学意义(P<0.05);不同浓度的NRG(40,20,10μg/mL)可显著抑制LPS诱导的HPDLF损伤,并可降低细胞内炎症因子表达;与LSP组比较,LPS+NRG 40μg/mL组、LPS+NRG 20μg/mL组、LPS+NRG 10μg/mL组HPDLF存活率显著提升,细胞周期进程加快,抑制IL-6、IL-8、IL-1β蛋白及基因表达水平均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论NRG对LPS诱导的HPDLF损伤具有保护作用,并可通过抑制LPS诱导的HPDLF中IL-6、IL-8、IL-1β的蛋白及基因表达水平,促进HPDLF增殖。 展开更多

关键词 柚皮苷 脂多糖 人牙周膜成纤维细胞 IL-6 IL-8 IL-1β

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丝素胶原支架与人牙周膜成纤维细胞相容性研究 被引量：3

13

作者 杜暘 高秀秋 金鼎 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2009年第9期534-536,共3页

目的探讨丝素胶原支架用作牙周组织工程支架材料的可行性。方法本研究于2008年9月在辽宁医学院实验中心进行。通过冻干法制备丝素胶原支架,用扫描电镜(SEM)观察、噻唑蓝(MTT)法及碱性磷酸酶(ALP)活性检测,了解人牙周膜成纤维细胞(PDLF)... 目的探讨丝素胶原支架用作牙周组织工程支架材料的可行性。方法本研究于2008年9月在辽宁医学院实验中心进行。通过冻干法制备丝素胶原支架,用扫描电镜(SEM)观察、噻唑蓝(MTT)法及碱性磷酸酶(ALP)活性检测,了解人牙周膜成纤维细胞(PDLF)附着于丝素胶原支架的生长情况,评价其生物相容性。结果制备的复合膜孔隙率为80.7%;PDLF在材料浸提液中的生长、增殖状况与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);ALP活性与对照组相比差异亦无统计学意义(P>0.05)。SEM观察可见复合材料具有良好的多孔网状结构,细胞在各复合膜上生长旺盛,伸展充分,形成良好。结论通过冻干法自制的丝素胶原复合物的孔隙率符合牙周组织工程的要求。其良好的三维空间结构和细胞相容性促进了PDLF的生长、黏附及增殖,且无细胞毒性,有望成为牙周组织工程的支架材料。 展开更多

关键词 牙周膜成纤维细胞 胶原 细胞培养 丝素蛋白

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两种方法培养人牙周膜成纤维细胞成功率的比较 被引量：2

14

作者 刘墨 陈绛媛 +1 位作者 孔祥波 阮毅 《广东牙病防治》 2013年第9期457-461,共5页

目的探讨酶消化组织块法及传统组织块法培养人牙周膜成纤维细胞的成功率,并比较两种方法获得的细胞在形态学和生物学特性上的差异。方法分别采用酶消化组织块法及传统组织块法培养人牙周膜成纤维细胞各20份,观察细胞形态并通过免疫细胞... 目的探讨酶消化组织块法及传统组织块法培养人牙周膜成纤维细胞的成功率,并比较两种方法获得的细胞在形态学和生物学特性上的差异。方法分别采用酶消化组织块法及传统组织块法培养人牙周膜成纤维细胞各20份,观察细胞形态并通过免疫细胞化学染色法检测波形蛋白、角蛋白的表达情况,比较两种培养方法的成功率。结果酶消化组织块法成功率为65%,传统组织块法为30%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。两组细胞均以梭形为主,波形丝蛋白染色阳性,角蛋白染色阴性,符合人牙周膜成纤维细胞的形态学特征和生物学特性。结论酶消化组织块法培养成功率高于传统组织块法。两种方法获得的细胞在形态学和生物学特性上无明显差异。 展开更多

关键词 细胞培养 牙周膜成纤维细胞 酶类

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静态牵张应变对人牙周膜成纤维细胞COX-2表达的影响 被引量：2

15

作者 黄生高 熊培颖 张建兴 《临床口腔医学杂志》 2005年第10期579-582,共4页

目的:探讨牵张应变对体外培养的人牙周膜成纤维细胞COx-2表达的影响.方法:牵张应变量设为0%、8%、13%、18%、23%共5组,每组分别加载1 h、8 h、16 h、24 h后收集细胞,免疫组化检测细胞中COX-2的表达,灰度分析并进行统计学处理.结果:8%～... 目的:探讨牵张应变对体外培养的人牙周膜成纤维细胞COx-2表达的影响.方法:牵张应变量设为0%、8%、13%、18%、23%共5组,每组分别加载1 h、8 h、16 h、24 h后收集细胞,免疫组化检测细胞中COX-2的表达,灰度分析并进行统计学处理.结果:8%～18%牵张应变范围,细胞内COX-2表达随着加载时间和应变量的增高而增强,23%应变量作用下COX-2表达降低,且与加载时间无关联.结论:在细胞的生理应变范围(8%、13%、18%)内,静态牵张应变促进人牙周膜成纤维细胞COX-2的表达,当牵张应变量超过生理应变范围(23%),则COX-2的表达量降低. 展开更多

关键词 人牙周膜成纤维细胞 环氧合酶-2 牵张应变

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周期性张应力对牙周膜成纤维细胞增殖的影响 被引量：1

16

作者 邵扬 张广耘 袁晓 《国际口腔医学杂志》 CAS 2011年第4期384-387,391,共5页

目的探讨周期性张应力对人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)增殖的影响及其机制。方法采用多通道细胞牵张应力加载系统,以hPDLF为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型。加力组分别给予1、2、4、6、12和24 h的力学刺激,刺激幅度10%、频率为0.1 Hz... 目的探讨周期性张应力对人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)增殖的影响及其机制。方法采用多通道细胞牵张应力加载系统,以hPDLF为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型。加力组分别给予1、2、4、6、12和24 h的力学刺激,刺激幅度10%、频率为0.1 Hz。以静态组为对照组。应用细胞计数试剂-8(CCK-8)检测hPDLF增殖情况,RT-PCR检测增殖性细胞核抗原(PCNA)和核因子-κB(NF-κB)的表达;以NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨甲酸盐(PDTC)预处理细胞作为对照组,检测hPDLF增殖情况。结果加力组细胞在加力1、2 h增殖下降,6 h开始增殖,12 h增殖达高峰,24 h增殖受到明显的抑制;PDTC抑制细胞增殖以及pcna和nf-κB mRNA的表达。结论在一定的时间范围内,周期性张应力能促hPDLF增殖;随着时间的延长,细胞增殖受抑制;NF-κB信号传导通路在周期性张应力介导的hPDLF增殖中发挥着重要的作用。 展开更多

关键词 周期性张应力 人牙周膜成纤维细胞 增殖 细胞计数试剂-8 核因子-ΚB

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miR-200b靶向ATG12对人牙周膜成纤维细胞自噬及炎症反应的调控作用 被引量：2

17

作者 孙冬梅 王立新 刘军刚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1049-1054,共6页

目的检测炎性人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)及细胞自噬后miR-200b的表达,验证miR-200b在自噬中的作用及与ATG12的靶向关系,探讨miR-200b及细胞自噬对牙周炎的调控。方法检测LPS、雷帕霉素及3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理后的hPDLF细胞中miR-200b... 目的检测炎性人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)及细胞自噬后miR-200b的表达,验证miR-200b在自噬中的作用及与ATG12的靶向关系,探讨miR-200b及细胞自噬对牙周炎的调控。方法检测LPS、雷帕霉素及3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理后的hPDLF细胞中miR-200b的表达,ELISA检测炎性因子IL-6、IL-12及TNF-α的表达,Western blot检测LC3 II/LC3I的蛋白表达,RT-qPCR、Western blot检测ATG12表达量,双荧光素酶验证miR-200b与ATG12的靶向关系。结果 LPS可上调h PDLF中miR-200b的表达(P<0.05),且LPS与miR-200b均可使炎性因子IL-6、IL-12及TNF-α的表达升高,后者上调更为明显;雷帕霉素及miR-200b均可使LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白升高;miR-200b与ATG12存在靶向调控作用关系。结论 miR-200b通过靶向下调ATG12基因的表达调控hPDLF细胞自噬,促进牙周炎的炎性反应。 展开更多

关键词 miR-200b 人牙周膜成纤维细胞 ATG12 自噬

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全牙酶消化法原代培养人牙周膜成纤维细胞及鉴定 被引量：1

18

作者 姬晓炜 葛菲 钟良军 《新疆医科大学学报》 CAS 2011年第6期609-612,共4页

目的 探讨一种快速简便、原代培养成功率高、可重复性高的人牙周膜成纤维细胞培养方法。方法将处理后的牙齿整个用酶进行消化,原代培养人牙周膜成纤维细胞,对培养出的细胞进行形态学观察,免疫组化方法鉴定其来源,通过生长曲线研究其生... 目的 探讨一种快速简便、原代培养成功率高、可重复性高的人牙周膜成纤维细胞培养方法。方法将处理后的牙齿整个用酶进行消化,原代培养人牙周膜成纤维细胞,对培养出的细胞进行形态学观察,免疫组化方法鉴定其来源,通过生长曲线研究其生物学特性。结果 8~14 d内可获得实验用成纤维细胞,原代培养成功率为90%,细胞形态呈长梭形。波形丝蛋白染色呈阳性,角蛋白染色呈阴性,符合人牙周膜成纤维细胞的形态学特征和生物学特性。结论采用全牙酶消化法可以快速、成功地培养出人牙周膜成纤维细胞,且简单易行,可重复性高。 展开更多

关键词 人牙周膜成纤维细胞 原代培养 免疫组化

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不同静压力下脂多糖刺激牙周膜成纤维细胞对炎症相关因子表达的影响 被引量：2

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作者 覃雅庆 沈慧娟 +2 位作者 农冬梅 周华 康娜 《中国美容医学》 CAS 2020年第1期79-83,共5页

目的:探讨牙周炎中牙龈卟啉单胞菌LPS(Porphyromonas gingivalis Lipopolysaccharide,Pg.LPS)和人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast,HPDLF)与正畸炎症相关的牙根吸收作用机制。方法:取4~6代体外培养的HPDLF,MTT... 目的:探讨牙周炎中牙龈卟啉单胞菌LPS(Porphyromonas gingivalis Lipopolysaccharide,Pg.LPS)和人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast,HPDLF)与正畸炎症相关的牙根吸收作用机制。方法:取4~6代体外培养的HPDLF,MTT法检测1~10μg/ml Pg.LPS对HPDLF增殖活性的影响,再选择最佳浓度作用于HPDLF,加载0~5g/cm^2静压力24h,实验组分为静压力组和Pg.LPS+静压力组,通过qRT-PCR和ELISA检测HPDLF白细胞介素17(interleukin 17,IL-17)及白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)的mRNA和蛋白表达水平。结果:①HPDLF增殖在1~4μg/ml Pg.LPS刺激时随浓度增加而增加,在5~7μg/ml随浓度增加而减少,8~10μg/ml细胞增殖明显受到抑制;②两组中IL-17、IL-6的表达量随静压力值增加而增强,相同力值下对照组的IL-17、IL-6表达量高于实验组,差异有统计学意义。结论:Pg.LPS浓度过高能抑制HPDLF增殖,而适当的浓度则促进其增殖;Pg.LPS和静压力均能刺激HPDLF产生炎症相关因子,参与正畸炎症相关牙根吸收发生发展的过程。 展开更多

关键词 人牙周膜成纤维细胞 白细胞介素17 白细胞介素6 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 静压力

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新型温敏性重组人釉原蛋白载体与传统丙二醇藻酸酯载体的体外测试效外测试效果比较

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作者 江文豪 钱垂文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1418-1425,共8页

目的评价新型温敏性重组人釉原蛋白(rhAm)载体和传统丙二醇藻酸酯(PGA)载体的体外表征和对人牙周膜成纤维细胞活性的影响。方法分别利用3.3%PGA与rhAm混合制备PGA-rhAm,2%的壳聚糖(CS)和rhAm混合并使用质量分数60%的β-甘油磷酸钠溶液(... 目的评价新型温敏性重组人釉原蛋白(rhAm)载体和传统丙二醇藻酸酯(PGA)载体的体外表征和对人牙周膜成纤维细胞活性的影响。方法分别利用3.3%PGA与rhAm混合制备PGA-rhAm,2%的壳聚糖(CS)和rhAm混合并使用质量分数60%的β-甘油磷酸钠溶液(βGP)作为交联剂制备CS-βGP-rhAm凝胶;表征通过检测黏度、凝固时间、pH值、溶胀率、体外生物降解率和缓释性能来评估;通过观察金黄色葡萄球菌生长状况比较材料的抗菌效果;生物相容性评估是在人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)上利用CCK8检测各组细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,RT-qPCR检测成骨基因mRNA表达,Westernblot检测蛋白的表达水平,碱性磷酸酶(ALP)染色检测各组细胞成骨分化情况。结果PGA-rhAm具有黏度值3.262±0.055 Pa.s,CS-βGP-rhAm在37℃下具有6 min凝固成型能力、接近口腔环境的pH值、约90%的溶胀率,同时缓释rhAm可维持2周以上,自身降解时间维持3周以上。CS-βGP负载rhAm相比PGA负载rhAm更有效抑制金黄色葡萄球菌生长(P<0.001)。细胞水平上,CS-βGP是否负载rhAm都可促进细胞增殖(P<0.001),PGA促进细胞增殖效果不显著。划痕实验显示,CS-βGP和PGA负载rhAm后均可促进细胞迁移(P<0.01)。RT-qPCR和Westernblot结果显示,CS-βGP负载rhAm能促进RUNX2、OCN mRNA水平(P<0.001),上调Ki67(P<0.001)、RUNX2(P<0.001)、CollagenⅠ(P<0.01)、β-catenin(P<0.05)蛋白表达。PGA负载rhAm促进RUNX2(P<0.05)、OCN(P<0.01)mRNA水平表达,蛋白水平变化无统计学意义。CS-βGP组ALP染色蓝紫色颗粒数增加,PGA组无明显变化。结论CS-βGP具有能缓释rhAm的性能,同时相比传统的PGA载体,CS-βGP具有温度成型的特点、抑制金黄色葡萄球菌生长的性能、显著提高hPDLFs的生物活性并且负载rhAm后不影响其生物活性。 展开更多

关键词 重组人釉原蛋白 壳聚糖 丙二醇藻酸酯 人牙周膜成纤维细胞

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