灵芝酸A对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响（英文） 被引量：10

1

作者 邵建立 李志忠 +2 位作者 焦根龙 孙国栋 周志刚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期619-624,共6页

目的探讨灵芝酸A对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法体外培养人骨肉瘤HOS和mg-63细胞与0.1、0.25和0.5 mmol/L的灵芝酸A孵育,采用CCK8检测HOS和MG-63细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞的迁移和侵袭。Western ... 目的探讨灵芝酸A对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法体外培养人骨肉瘤HOS和mg-63细胞与0.1、0.25和0.5 mmol/L的灵芝酸A孵育,采用CCK8检测HOS和MG-63细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞的迁移和侵袭。Western blot检测细胞中p-STAT3、STAT3、p-p38、p38和NF-ΚB1蛋白的表达变化。结果灵芝酸A能够显著抑制人类骨肉瘤HOS和MG-63细胞的增殖,促进细胞凋亡以及抑制细胞迁移,并且这种效应存在剂量依赖性。与0.5 mmol/L灵芝酸A孵育能够显著降低HOS和MG-63细胞中STAT3的磷酸化水平,增加p38磷酸化水平,同时增加NF-κB1的表达水平。结论灵芝酸A能够杀死人类骨肉瘤HOS和MG-63细胞,可以作为抗骨肉瘤的药物进行开发。 展开更多

关键词 灵芝酸A 人骨肉瘤 增殖 凋亡

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腺病毒载体介导的ING4基因对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用 被引量：8

2

作者 井莹莹 杨吉成 +6 位作者 缪竞诚 盛伟华 胡志清 单云波 刘铁连 韩亚丽 包婉蓉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期234-239,共6页

目的:用人源化改造的鼠肿瘤生长抑制因子(mING4)基因构建的腺病毒表达载体(Ad-ING4)研究对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用。方法:以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过基因定点突变技术对mING4基因进行人源化改造,采用腺病毒载体的基因... 目的:用人源化改造的鼠肿瘤生长抑制因子(mING4)基因构建的腺病毒表达载体(Ad-ING4)研究对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用。方法:以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过基因定点突变技术对mING4基因进行人源化改造,采用腺病毒载体的基因重组和体外包装技术获得表达与人ING-4氨基酸序列相同的重组腺病毒子(Ad-ING4),感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING4在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法和流式细胞技术检测ING4基因表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;荧光共聚焦显微镜观察MG-63细胞凋亡的形态学变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因表达对MG-63细胞中的Bax、Bcl-2基因表达的影响。结果:基因测序和PCR分析结果显示,人源化改造的小鼠ING4分子氨基酸序列与人ING4分子完全相同,成功构建了Ad-ING4腺病毒表达载体,在MG-63细胞中ING4基因的表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡,出现典型细胞凋亡形态学变化,ING4基因表达可通过上调细胞中Bax和下调Bcl-2基因表达诱导细胞凋亡。结论:转染ING4基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导细胞凋亡,该现象可能是通过改变Bax,Bcl-2表达水平来发挥抗肿瘤作用的。 展开更多

关键词 ING4基因 腺病毒载体 MG-63人骨肉瘤细胞 凋亡

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补骨脂素通过miR-101/PI3K/Akt轴对骨肉瘤细胞侵袭、转移的影响

3

作者 史博 杨健 张立喜 《西北药学杂志》 CAS 2024年第4期64-69,共6页

目的探讨补骨脂素对骨肉瘤细胞侵袭、转移的抑制作用及可能的作用机制。方法用不同浓度补骨脂素作用于人骨肉瘤细胞(human osteosarcoma cells,MG-63),用CCK-8法检测细胞的存活情况,筛选最佳抑制浓度;用实时荧光定量法检测骨肉瘤组织与... 目的探讨补骨脂素对骨肉瘤细胞侵袭、转移的抑制作用及可能的作用机制。方法用不同浓度补骨脂素作用于人骨肉瘤细胞(human osteosarcoma cells,MG-63),用CCK-8法检测细胞的存活情况,筛选最佳抑制浓度;用实时荧光定量法检测骨肉瘤组织与正常组织中微小RNA(microRNA,miR)-101的相对表达量。将对数生长期骨肉瘤细胞MG-63随机分为对照组、miR101模拟物阴性对照组(miR-NC组)、miR-101组、补骨脂素组和补骨脂素联合miR-101组。用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]实验检测细胞增殖抑制率;用肿瘤细胞侵袭实验(Transwell)检测细胞侵袭和迁移能力;用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肌磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)mRNA的表达情况;用蛋白印迹法(Western blotting)检测磷酸化肌磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达情况。结果与对照组比较,miR-101组、补骨脂素组和补骨脂素联合miR-101组的细胞增殖抑制率升高,细胞侵袭数量、细胞迁移数量、PI3K和Akt mRNA,p-PI3K、p-Akt、MMP2和MMP9蛋白的表达水平均降低(P<0.05)。与miR-101组和补骨脂素组比较,补骨脂素联合miR-101组的细胞增殖抑制率升高,细胞侵袭数量、细胞迁移数量、PI3K和Akt mRNA,p-PI3K、p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平均降低(P<0.05)。结论补骨脂素能够降低骨肉瘤细胞MG-63的增殖能力,并抑制其侵袭和迁移能力,其作用机制可能与调节miR-101水平、影响PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多

关键词 补骨脂素 miR-101 人骨肉瘤细胞 肌磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B

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基于ERK5通路探讨蟾酥抑制人骨肉瘤MG-63细胞的作用机制 被引量：1

4

作者 卞泗善 苏庆红 +2 位作者 滕加文 盖辉 孔鹏 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2023年第5期682-686,共5页

目的:研究蟾酥对人骨肉瘤细胞MG-63的作用效应及作用机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞MG-63,采用不同浓度的蟾酥含药血清(0%、2.5%、5%)进行干预,采用qPCR法检测各组c-myc、caspase-9的mRNA表达量,采用免疫荧光法检测各组整合素α4的含... 目的:研究蟾酥对人骨肉瘤细胞MG-63的作用效应及作用机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞MG-63,采用不同浓度的蟾酥含药血清(0%、2.5%、5%)进行干预,采用qPCR法检测各组c-myc、caspase-9的mRNA表达量,采用免疫荧光法检测各组整合素α4的含量并采用Western Blot法检测MEK5、Nur77的表达情况。分别采用ERK5抑制剂XMD8-92、XMD8-92联合5%蟾酥含药血清、MEK5过表达腺病毒干预人骨肉瘤细胞MG-63,采用Western Blot法检测c-myc、caspase-9及整合素α4的表达量。结果:相较于空白对照组(%),2.5%、5%蟾酥含药血清干预后的c-myc及整合素α4表达下降,caspase-9表达上升(P<0.05),且蟾酥含药血清干预后MEK5、Nur77表达下降(P<0.05),与干预浓度呈负相关;相较于5%蟾酥含药血清干预组,XMD8-92联合5%蟾酥含药血清组c-myc及整合素α4表达下降、caspase-9表达上升(P<0.05),而过表达MEK5联合5%蟾酥含药血清组的表达情况相反(P<0.05)。结论:蟾酥可以通过调控ERK5通路抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖、转移并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 ERK5通路 蟾酥 人骨肉瘤细胞

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蛇床子素促进人骨肉瘤细胞株SAOS-2凋亡 被引量：4

5

作者 吕怡凝 刘天华 +3 位作者 彭燕丽 刘真宏 王璐 单宏丽 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第11期2012-2015,共4页

目的:观察蛇床子素(osthole)对人骨肉瘤细胞SAOS-2增殖和凋亡的影响及潜在的调控机制。方法:采用MTT法、TUNEL染色技术和流式细胞术检测不同浓度蛇床子素对骨肉瘤细胞凋亡的影响;Western blot检测蛇床子素对骨肉瘤细胞中与细胞凋亡密切... 目的:观察蛇床子素(osthole)对人骨肉瘤细胞SAOS-2增殖和凋亡的影响及潜在的调控机制。方法:采用MTT法、TUNEL染色技术和流式细胞术检测不同浓度蛇床子素对骨肉瘤细胞凋亡的影响;Western blot检测蛇床子素对骨肉瘤细胞中与细胞凋亡密切相关的蛋白(Bax、Bcl-2)的变化。结果:蛇床子素作用于SAOS-2细胞后,MTT结果显示SAOS-2细胞的活力受到明显抑制,且与蛇床子素浓度和时间相关;Western blot结果显示细胞中的促凋亡蛋白Bax表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显减弱,且呈剂量依赖性。结论:蛇床子素可显著抑制人骨肉瘤细胞的增殖且促进其凋亡的作用,可能与上调凋亡蛋白Bax和下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。 展开更多

关键词 蛇床子素 人骨肉瘤细胞 细胞凋亡

原文传递

丹皮酚对人骨肉瘤MG-63细胞增殖、迁移和CXCR4/STAT3通路的影响

6

作者 吴琪 陈建锋 +1 位作者 李浩 文峰 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1202-1209,共8页

目的:探讨丹皮酚对人骨肉瘤(OS) MG-63细胞增殖、迁移和趋化因子受体4(CXCR4)/信号传导与转录激活因子3 (STAT3)通路的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养MG-63细胞,分为对照组(不给予药物干预)和不同浓度丹皮酚组(给予10、20... 目的:探讨丹皮酚对人骨肉瘤(OS) MG-63细胞增殖、迁移和趋化因子受体4(CXCR4)/信号传导与转录激活因子3 (STAT3)通路的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养MG-63细胞,分为对照组(不给予药物干预)和不同浓度丹皮酚组(给予10、20、40、80、160和320 mg·L^(-1)丹皮酚)。采用CCK-8法检测各组细胞存活率并选择半数抑制浓度(IC50)值作为后续实验药物浓度。将MG-63细胞分为对照组和丹皮酚(215.8 mg·L^(-1))组,采用Western blotting法检测各组细胞中CXCR4、白细胞介素6 (IL-6)、磷酸化STAT3 (p-STAT3)和STAT3蛋白表达水平。将MG-63细胞分为对照组(不给予药物干预)、丹皮酚组(给予215.8 mg·L^(-1)丹皮酚)、丹皮酚+空载组(给予215.8 mg·L^(-1)丹皮酚+空载质粒)和丹皮酚+过表达组(给予215.8 mg·L^(-1)丹皮酚+CXCR4过表达质粒)。采用细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成率,Western blotting法检测各组细胞中CXCR4、IL-6、p-STAT3和STAT3蛋白表达水平。结果:与对照组比较,40、80、160和320 mg·L^(-1)丹皮酚组MG-63细胞存活率降低(P<0.05),丹皮酚IC50值为215.8mg·L^(-1)。与对照组比较,丹皮酚(215.8mg·L^(-1))组MG-63细胞中CXCR4、IL-6和p-STAT3蛋白表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,丹皮酚组和丹皮酚+空载组MG-63细胞划痕愈合率及细胞克隆形成率降低(P<0.05),细胞中CXCR4、IL-6和p-STAT3蛋白表达水平降低(P<0.05);与丹皮酚组比较,丹皮酚+空载组MG-63细胞划痕愈合率、细胞克隆形成率和细胞中CXCR4、IL-6、p-STAT3及STAT3蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与丹皮酚组比较,丹皮酚+过表达组MG-63细胞划痕愈合率和细胞克隆形成率升高(P<0.05),细胞中CXCR4、IL-6和p-STAT3蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:丹皮酚能抑制MG-63细胞的增殖、迁移和克隆形成,其机制可能与调控CXCR4/STAT3信号通路有关。 展开更多

关键词 丹皮酚 人骨肉瘤细胞 细胞增殖 趋化因子受体4 信号传导与转录激活因子3

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Ad-IL-24对MG-63人骨肉瘤细胞抑癌效应的体内外实验 被引量：2

7

作者 韩亚丽 缪竞诚 +6 位作者 盛伟华 汪小华 井莹莹 单云波 刘铁连 包婉蓉 杨吉成 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1538-1545,共8页

本研究旨在分析腺病毒携带的IL-24基因在体内外对人骨肉瘤细胞生长抑制效应及其分子机制。将Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法、流式细胞技术和Hoechst染色法检测IL-2... 本研究旨在分析腺病毒携带的IL-24基因在体内外对人骨肉瘤细胞生长抑制效应及其分子机制。将Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法、流式细胞技术和Hoechst染色法检测IL-24基因的表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;半定量RT-PCR法检测IL-24基因的表达对MG-63细胞中的bcl-2、bax、caspase-3相关基因表达的影响。用Ad-IL-24重组腺病毒在MG-63骨肉瘤荷瘤裸鼠的瘤体内进行注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重。并通过免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3等与细胞凋亡相关因子的表达。结果表明Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞后,能明显抑制MG-63细胞增殖,并能通过上调细胞中bax、caspase-3和下调bcl-2基因表达,诱导细胞凋亡,呈现出典型细胞凋亡形态学变化。Ad-IL-24重组腺病毒瘤内注射MG-63裸鼠荷瘤骨肉瘤移植瘤后,能显著抑制肿瘤生长,瘤重的抑制率可达52%,免疫组化结果显示Ad-IL-24重组腺病毒能明显上调与细胞凋亡相关因子Bax和Caspase-3的表达和下调Bcl-2和CD34的表达。本研究结果显示腺病毒介导的IL-24基因在体内外均可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导其凋亡,其机制可能与下调bcl-2,上调bax、caspase-3的基因表达水平有关,由此为骨肉瘤的基因治疗提供实验依据。 展开更多

关键词 IL-24基因 腺病毒载体 MG-63人骨肉瘤细胞 肿瘤抑制

原文传递

全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞凋亡的诱导作用 被引量：2

8

作者 袁林 郭风劲 陈安民 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期60-62,共3页

目的研究全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法在培养液体系中加入不同浓度的全反式维甲酸（ATRA）进行不同时间长度的诱导，以MTT法，流式细胞术，TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果1～50μmol／LATRA均能抑制骨肉瘤细胞增殖。5、1... 目的研究全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法在培养液体系中加入不同浓度的全反式维甲酸（ATRA）进行不同时间长度的诱导，以MTT法，流式细胞术，TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果1～50μmol／LATRA均能抑制骨肉瘤细胞增殖。5、10、50μmol／LATRA作用细胞4d后的凋亡率分别为（12．46±2．37）％、（18．36±1．32）％、（27．15±2．17）％，与对照组[（4．09±1．18）％]比较差异均有显著性意义（均P＜0．05）。ATRA浓度越高，抑制作用越明显，呈明显的剂量依赖效应。50μmol／LATRA作用细胞1、2、3、4d后的凋亡率分别为（7．35±1．28）％、（10．72±1．68）％、（17．65±2．14）％、（27．15±2．17）％，与对照组[（4．09±1．18）％]比较差异均有显著性意义（均P〈0．05）。ATRA作用时间越长，抑制作用也越明显，呈明显的时间依赖效应。结论ATRA能够诱导人骨肉瘤细胞发生凋亡，呈时间和剂量依赖效应。 展开更多

关键词 全反式维甲酸 人骨肉瘤细胞 细胞凋亡

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1,25(OH)_2D_3对人骨肉瘤MG63细胞基质GLA蛋白及Wnt信号通路的影响 被引量：2

9

作者 杨雅 谢菲飞 +3 位作者 张洁 符刘晨 符晓玲 赖晓阳 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期35-42,共8页

目的观察1,25(OH)_2D_3对人成骨肉瘤MG63细胞株Wnt信号通路及MGP表达的影响,探讨其在骨质疏松发病中可能的新机制。方法分别使用10-8mol/L 1,25(OH)_2D_3、200 ng/ml Wnt信号通路阻断剂DKK-1、10-8mol/L 1,25(OH)_2D_3+200 ng/ml DKK-1... 目的观察1,25(OH)_2D_3对人成骨肉瘤MG63细胞株Wnt信号通路及MGP表达的影响,探讨其在骨质疏松发病中可能的新机制。方法分别使用10-8mol/L 1,25(OH)_2D_3、200 ng/ml Wnt信号通路阻断剂DKK-1、10-8mol/L 1,25(OH)_2D_3+200 ng/ml DKK-1干预人骨肉瘤细胞MG63细胞株48 h,使用实时荧光定量RT-PCR及western-blot技术测定Wnt/β-catenin信号通路中相关因子β-catenin、Runx2、LRP5及MGP基因及蛋白表达的影响。结果 (1)10-8mol/L 1,25(OH)_2D_3上调MG63细胞中Wnt/β-catenin信号通路中相关因子β-catenin、Runx2、LRP5及MGP的基因表达及蛋白的表达,其中上调基因分别是对照组的2.73倍、3.72倍、1.53倍、2.31倍,差异有统计学意义(P<0.05);上调蛋白表达分别是对照组的1.13倍、1.17倍、1.14倍、1.21倍,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)DKK1下调β-catenin、LRP5、Runx2、MGP的基因及蛋白表达,其中下调基因表达分别是对照组的0.34倍、0.52倍、0.42倍、0.78倍,差异有统计学意义(P<0.05)。下调蛋白表达分别是对照组的0.93倍、0.92倍、0.87倍、0.86倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3有可能通过Wnt/β-catenin信号通路影响MGP的表达。 展开更多

关键词 维生素D 基质GLA蛋白 骨肉瘤细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路 骨质疏松

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帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响 被引量：2

10

作者 李宏维 胡旭昌 +1 位作者 马兵 张海鸿 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1054-1060,共7页

目的:研究帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:Western印迹检测骨肉瘤细胞株(MG-63,Saos-2和U2OS)及正常人成骨细胞株hFOB1.19中DJ-1和第10号染色体上缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(pho... 目的:研究帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:Western印迹检测骨肉瘤细胞株(MG-63,Saos-2和U2OS)及正常人成骨细胞株hFOB1.19中DJ-1和第10号染色体上缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome 10,PTEN)基因的表达。DJ-1 siRNA处理人骨肉瘤细胞后,采用Western印迹检测DJ-1的蛋白表达水平;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞存活率;膜联蛋白V(annexin V)-异硫氰酸荧光素(uorescein isothiocyanate,FITC)/碘化吡啶(propidium iodide,PI)双染检测细胞凋亡;Transwell侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移水平。结果:与hFOB1.19细胞比较,骨肉瘤细胞DJ-1蛋白表达水平显著升高(均P<0.05),其中U2OS细胞升高最为显著(P<0.01)。DJ-1 siRNA可显著降低U2OS细胞中DJ-1蛋白表达水平、降低细胞存活率、促进细胞凋亡、抑制细胞侵袭和迁移水平,以及增加PTEN蛋白表达水平(均P<0.05)。另外,与hFOB1.19细胞比较,PTEN在骨肉瘤细胞中的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:DJ-1可抑制人骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞侵袭和迁移水平,其机制可能与增加PTEN蛋白的表达水平有关。 展开更多

关键词 帕金森病相关蛋白DJ-1 人骨肉瘤细胞 增殖 凋亡 侵袭和迁移

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姜黄素对顺铂抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响 被引量：2

11

作者 李飞 杜远立 +2 位作者 王华 邓桂 乐锦波 《医学综述》 2010年第20期3180-3182,共3页

目的研究姜黄素对顺铂抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响。方法采用噻唑蓝比色法检测姜黄素和顺铂不同浓度组合时对MG63细胞增殖的影响,荧光倒置显微镜观察药物作用后细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率的改变。结果随着姜黄素和... 目的研究姜黄素对顺铂抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响。方法采用噻唑蓝比色法检测姜黄素和顺铂不同浓度组合时对MG63细胞增殖的影响,荧光倒置显微镜观察药物作用后细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率的改变。结果随着姜黄素和顺铂的药物浓度逐渐升高,单药对MG63细胞的增殖抑制率呈上升趋势(P<0.05)。两药联合作用后细胞明显变形、发泡,细胞凋亡数进一步增加,细胞排列更加紊乱,大量细胞脱落悬浮于培养液中。结论不同浓度的姜黄素对顺铂抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响不一样,可以是拮抗、相加或协同。 展开更多

关键词 姜黄素 顺铂 人成骨肉瘤细胞 细胞凋亡

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澳洲茄胺对人骨肉瘤移植瘤的抑制作用及其机制 被引量：1

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作者 杨利 李小健 李朝军 《安徽医药》 CAS 2021年第4期664-668,共5页

目的探讨澳洲茄胺对人骨肉瘤移植瘤的抑制作用及其机制。方法该研究于2018年1月至2019年3月完成。MG63细胞株购于中科院上海细胞库。将0.2 mL人骨肉瘤MG63细胞悬液(共2×106个细胞)注射于裸鼠右侧腋窝皮下,建立人骨肉瘤移植瘤模型,... 目的探讨澳洲茄胺对人骨肉瘤移植瘤的抑制作用及其机制。方法该研究于2018年1月至2019年3月完成。MG63细胞株购于中科院上海细胞库。将0.2 mL人骨肉瘤MG63细胞悬液(共2×106个细胞)注射于裸鼠右侧腋窝皮下,建立人骨肉瘤移植瘤模型,实验分为4组,即对照组和澳洲茄胺组(10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg),隔日腹腔注射给药1次,连续4周。测量移植瘤的质量和体积,原位末端标记(TUNEL)染色法检测细胞的凋亡,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白、血管生成相关因子和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的表达。结果与对照组相比,澳洲茄胺组的移植瘤质量(0.45±0.12)g和在21 d(510.62±95.78)mm~3和28 d(579.56±92.04)mm~3的体积降低,且以40 mg/kg组的抑制效应最明显(P<0.05)。与对照组相比,澳洲茄胺组的原位末端标记的异硫氰酸荧光素(TUNEL-FITC)的荧光强度升高,且以40 mg/kg组最明显。与对照组相比,澳洲茄胺组移植瘤中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)(3.55±0.39)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)(3.94±0.33)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Cleaved caspase-9)(3.59±0.31)、凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)(3.70±0.41)蛋白的表达量上调,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)(0.31±0.15)、血管内皮生长因子(VEGF)(0.25±0.12)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)(0.39±0.12)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)(0.33±0.11)蛋白的表达量下调,且以40 mg/kg组的效应最明显(P<0.05)。结论澳洲茄胺可以抑制人骨肉瘤细胞皮下移植瘤的生长,诱导细胞凋亡,下调VEGF的表达,上调TSP-1的表达,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路的抑制有关。 展开更多

关键词 澳洲茄胺 龙葵 人骨肉瘤细胞 细胞凋亡 血管内皮生长因子 凝血酶敏感蛋白1

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Bak1腺病毒表达载体的构建及对人成骨肉瘤细胞的影响 被引量：1

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作者 柴爽 黄红 +3 位作者 万雷 王吉利 王伟 黄宏兴 《广东医学》 CAS 2018年第9期1332-1336,共5页

目的构建人Bcl2拮抗1(Bak1)基因重组表达腺病毒pAd-Bak1,并感染人成骨肉瘤细胞MG63建立过表达Bak1的细胞模型,检测其对细胞活性的影响。方法利用qPCR扩增Bak1全长cDNA,利用穿梭质粒pENTER构建载有Bak1基因的重组穿梭质粒pENTER-Bak1,通... 目的构建人Bcl2拮抗1(Bak1)基因重组表达腺病毒pAd-Bak1,并感染人成骨肉瘤细胞MG63建立过表达Bak1的细胞模型,检测其对细胞活性的影响。方法利用qPCR扩增Bak1全长cDNA,利用穿梭质粒pENTER构建载有Bak1基因的重组穿梭质粒pENTER-Bak1,通过基因测序鉴定载体序列。将重组载体PmeⅠ线性化、脱磷酸化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAd-Amp的感受态BJ5183细胞中进行基因同源重组。将重组腺病毒质粒pAD-Bak1经PacⅠ酶切线性化后,用Lipofectamine 2000脂质体转染到HEK-293细胞中进行包装扩繁,荧光定量PCR法测定病毒滴度。感染MG63细胞,qPCR和Western blot检测Bak1的表达,MTT检测细胞活性。结果测序及酶切验证pENTER-Bak1构建成功。pAD-Bak1感染MG63细胞,qPCR检测到细胞中Bak1基因过表达(与NC对照组和空白对照组相比P<0.01、P<0.01),Western blot检测到细胞中Bak1蛋白过表达。MTT检测显示与NC对照组相比,细胞活性减弱(P<0.05)。结论成功构建了Bak1重组表达腺病毒,验证了其能够感染MG63细胞表达Bak1蛋白,证明了过表达Bak1可以减弱细胞的活性。为进一步研究Bak1的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 人Bcl2拮抗1(Bak1)蛋白 重组腺病毒载体 人成骨肉瘤细胞MG63

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氧化苦参碱干预人体骨肉瘤细胞增殖周期 诱导其凋亡的作用 被引量：1

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作者 朱均 吴智南 +2 位作者 陈俊 林毅辉 周全荣 《浙江临床医学》 2012年第7期769-771,共3页

目的研究氧化苦参碱对人体骨肉瘤细胞（MG-63）凋亡的影响。方法在培养液体中加入不同浓度的氧化苦参碱（Oxymatrine，OM）进行不同时间长度的诱导，以流式细胞术法检测人体骨肉瘤细胞（MG-63）增殖、周期及凋亡情况。结果1～50μmol／... 目的研究氧化苦参碱对人体骨肉瘤细胞（MG-63）凋亡的影响。方法在培养液体中加入不同浓度的氧化苦参碱（Oxymatrine，OM）进行不同时间长度的诱导，以流式细胞术法检测人体骨肉瘤细胞（MG-63）增殖、周期及凋亡情况。结果1～50μmol／L氧化苦参碱均能抑制骨肉瘤细胞增殖，同时能够阻滞MG-63细胞进入S和G2／M期，使细胞停滞于G0／G1期，与空白对照组比较，差异有统计学意义，且氧化苦参碱高剂量组最明显（P〈0．05）。5、10、50μmol／L氧化苦参碱作用细胞96h后的凋亡率分别为（10．96±0．41）％、（20．74±1．09）％、（27．05±2．00）％，与对照组（4．66±1．26）％比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。氧化苦参碱浓度越高，抑制作用越明显，呈明显的剂量依赖效应。50¨mol／L氧化苦参碱作用于细胞48h、72h、96h后的凋亡率分别为（6．65±1．49）％、（14．82±5．79）％、（27．05±2．00）％，与对照组各时间点（4．01±0．86）％、（4．31±0．68）％、（4．66±1．26）％比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。氧化苦参碱作用时间越长，抑制作用也越明显，呈明显的时间依赖效应。结论氧化苦参碱可通过时间依赖性和剂量依赖性方式，促使细胞G2／M期阻滞和抑制细胞有丝分裂，从而诱导人体骨肉瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 氧化苦参碱 人体骨肉瘤细胞 细胞凋亡 细胞周期

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氟化钠对人成骨肉瘤Saos-2细胞PI3K/Akt信号表达及凋亡的影响 被引量：1

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作者 蒋香菊 张利 +5 位作者 贺怡 张荣 尚香玉 谢玉 贺梦雅 张亚楼 《中华地方病学杂志》 CAS 北大核心 2021年第3期190-194,共5页

目的观察氟化钠(NaF)对人成骨肉瘤Saos-2细胞磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号表达及凋亡的影响。方法采用成组设计,按NaF剂量将Saos-2细胞分为0(对照)、5、10、20、40 mg/L染氟组(n=3)。体外培养24、48 h后收集细胞,采用蛋... 目的观察氟化钠(NaF)对人成骨肉瘤Saos-2细胞磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号表达及凋亡的影响。方法采用成组设计,按NaF剂量将Saos-2细胞分为0(对照)、5、10、20、40 mg/L染氟组(n=3)。体外培养24、48 h后收集细胞,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测PI3K、Akt和线粒体凋亡途径相关分子Forkhead转录因子(FoxO)1的蛋白表达,采用流式细胞仪检测Saos-2细胞的凋亡水平。结果体外培养24、48 h时,各组Saos-2细胞PI3K、Akt蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。24 h时,5、10、20、40 mg/L染氟组磷酸化PI3K(p-PI3K)蛋白表达(0.40±0.06、0.45±0.02、0.37±0.06、0.32±0.06)均高于对照组(0.28±0.04,P均<0.05);48 h时,5、10 mg/L染氟组p-PI3K蛋白表达(0.46±0.06、0.58±0.03)均高于对照组(0.29±0.04,P均<0.05),而40 mg/L染氟组(0.21±0.03)低于对照组(P<0.05)。24 h时,5、10、20 mg/L染氟组磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达(0.27±0.01、0.30±0.03、0.27±0.03)均高于对照组(0.20±0.02,P均<0.05);48 h时,5、10 mg/L染氟组p-Akt蛋白表达(0.42±0.04、0.60±0.02)均高于对照组(0.27±0.01,P均<0.05),而40 mg/L组(0.18±0.02)低于对照组(P<0.05)。24 h时,10、20、40 mg/L染氟组FoxO1蛋白表达(0.38±0.07、0.41±0.06、0.47±0.08)均高于对照组(0.34±0.04,P均<0.05);48 h时,5、10、20、40 mg/L染氟组FoxO1蛋白表达(0.36±0.08、0.37±0.10、0.54±0.04、0.73±0.04)均高于对照组(0.28±0.04,P均<0.05)。24、48 h时,对照组和5、10、20、40 mg/L染氟组细胞凋亡率分别为(2.867±0.583)%、(3.647±0.035)%、(3.773±0.095)%、(5.440±0.325)%、(7.203±0.476)%,(3.707±0.286)%、(4.023±0.241)%、(4.970±0.368)%、(12.473±0.949)%、(19.387±1.892)%。24 h时,40 mg/L染氟组凋亡水平高于对照组(P<0.05);48 h时,20、40 mg/L染氟组凋亡水平均高于对照组(P均<0.05)。结论氟可以直接激活成骨细胞内的PI3K/Akt信号通路,进而产生抗凋亡作用。 展开更多

关键词 氟化钠 人成骨肉瘤细胞 磷脂酰肌醇-3-激酶 蛋白激酶B 细胞凋亡

原文传递

HELQ对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移的影响及机制

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作者 钟俊桥 周云飞 +3 位作者 刘家明 刘东宁 周扬 刘志礼 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第48期15-18,共4页

目的探讨POLQ样蛋白解旋酶(HELQ)对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移的影响及作用机制。方法将体外培养的人源骨肉瘤细胞系U2-OS、143B随机分为Lv-HELQ组、NC组、Lv-sh HELQ组,分别转染Lv-HELQ、Lv-Negative、Lv-sh HELQ慢病毒载体。转染48 h... 目的探讨POLQ样蛋白解旋酶(HELQ)对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移的影响及作用机制。方法将体外培养的人源骨肉瘤细胞系U2-OS、143B随机分为Lv-HELQ组、NC组、Lv-sh HELQ组,分别转染Lv-HELQ、Lv-Negative、Lv-sh HELQ慢病毒载体。转染48 h时,采用Western blotting法检测HELQ蛋白表达,结果显示两种细胞Lv-HELQ组HELQ蛋白相对表达量均高于NC组,Lv-sh HELQ组均低于NC组,组间比较P均<0.05,提示HELQ转染成功。三组(两种细胞)转染48 h时,采用CCK8法检测细胞增殖情况(光密度值),采用Wound healing法检测细胞迁移率,采用Transwell invasion法检测细胞穿膜细胞数(侵袭能力),采用彗星实验检测彗星尾部DNA百分比。结果两种细胞Lv-HELQ组光密度值均高于NC组,Lv-sh HELQ组光密度值均低于NC组,组间比较P<0.05或<0.01。两种细胞Lv-HELQ组细胞迁移率、穿膜细胞数及均彗星尾部DNA百分比均低于NC组,Lv-sh HELQ组均高于NC组,组间比较P均<0.05。结论 HELQ可抑制人骨肉瘤细胞增殖、侵袭、转移,修复DNA损伤可能是其作用机制。 展开更多

关键词 骨肉瘤 POLQ样蛋白解旋酶 人骨肉瘤细胞 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 DNA损伤

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澳洲茄胺抑制人骨肉瘤细胞生长的实验研究

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作者 曾斌 黄云川 +1 位作者 曹晓磊 苟林 《河北医药》 CAS 2020年第10期1487-1490,共4页

目的研究澳洲茄胺(solasodine)对人骨肉瘤细胞的增殖、凋亡及迁移的影响,探讨澳洲茄胺抑制人骨肉瘤细胞生长的作用机制。方法以澳洲茄胺浓度为梯度和澳洲茄胺处理时间为梯度,采用MTT法检测澳洲茄胺对人骨肉瘤细胞MG-63的增殖影响,并通... 目的研究澳洲茄胺(solasodine)对人骨肉瘤细胞的增殖、凋亡及迁移的影响,探讨澳洲茄胺抑制人骨肉瘤细胞生长的作用机制。方法以澳洲茄胺浓度为梯度和澳洲茄胺处理时间为梯度,采用MTT法检测澳洲茄胺对人骨肉瘤细胞MG-63的增殖影响,并通过趋势线计算处理48 h时澳洲茄胺对MG-63的半抑制浓度;将半抑制浓度澳洲茄胺处理过的MG-63设为处理组,未处理的MG-63设为对照组,用流式分析技术检测2组细胞凋亡情况,用Transwell检测2组细胞的侵袭转移情况,并用Western blot检测2组细胞中与调亡、侵袭、迁移相关信号通路AKT/GSK-3β/β-catenin相关蛋白的表达情况。结果MTT检测结果显示,澳洲茄胺明显抑制人骨肉瘤细胞MG-63的增殖,并呈现浓度依赖性。澳洲茄胺处理48 h时,澳洲茄胺对MG-63的半抑制浓度为54.03μmol/L。流式分析结果显示,澳洲茄胺处理组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01)。Transwell结果显示,澳洲茄胺处理组细胞迁移能力与侵袭能力均明显低于对照组(P<0.01)。Western blot结果显示,与对照组相比,MG-63细胞经澳洲茄胺处理后pAKT、pβ-cateninze显著减少(P<0.01),pGSK-3β显著增加(P<0.01)。结论澳洲茄胺介导人骨肉瘤细胞AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路,促进人骨肉瘤细胞凋亡,抑制人骨肉瘤细胞增殖和侵袭转移。 展开更多

关键词 澳洲茄胺 人骨肉瘤细胞 增殖 凋亡 侵袭转移

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磁性阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的合成及其对MG-63人骨肉瘤细胞的效应 被引量：2

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作者 王栋峰 蔡林 +3 位作者 胡治平 胡昊 金伟 王建平 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2008年第5期610-616,共7页

目的:利用FeCl2.4H2O、FeCl3.6H2O、α-氰基丙烯酸正丁酯、盐酸阿霉素等试剂合成磁性阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的稳定胶体液,并研究其对MG-63型人骨肉瘤细胞的作用。方法:①用FeCl2.4H2O、FeCl3.6H2O、盐酸阿霉素、α-氰基丙烯酸... 目的:利用FeCl2.4H2O、FeCl3.6H2O、α-氰基丙烯酸正丁酯、盐酸阿霉素等试剂合成磁性阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的稳定胶体液,并研究其对MG-63型人骨肉瘤细胞的作用。方法:①用FeCl2.4H2O、FeCl3.6H2O、盐酸阿霉素、α-氰基丙烯酸正丁酯等试剂合成磁性阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒。②在透射电镜下观察纳米粒的物理形态;用振动样品磁强计检测纳米粒的饱和磁化强度;用紫外分光光度计测定药物的包封率、载药量。③用扫描电镜观察、MTT法和流式细胞仪测定法检测其对MG-63型人骨肉瘤细胞的作用。结果:利用FeCl2.4H2O、FeCl3.6H2O、盐酸阿霉素、α-氰基丙烯酸正丁酯等试剂成功合成了一种稳定的棕色胶体溶液;透射电镜下观察,形态近似于球形,分散度好,平均直径184.60 nm;振动样品磁强计检测胶体中纳米粒的饱和磁化强度为0.558 emu/g,紫外分光光度计等仪器测定药物的包封率为90.73%,载药量为10.68%;通过扫描电镜、MTT法和流式细胞仪测定法检测,表明该胶体溶液较ADM对MG-63人骨肉瘤细胞有更强的抑制作用。结论:该胶体溶液性质稳定,药物颗粒不超过300 nm,理论上可以在动物血管中随循环流动而不会沉淀;该纳米粒的饱和磁化强度为0.558 emu/g,微粒可被4 250 Gs的磁场所吸引,以达到磁靶向的效应;药物的包封率为90.73%,载药量为10.68%,表明药物合成的效率较好;且该胶体溶液较ADM对MG-63人骨肉瘤细胞有更强的抑制作用,为下一步动物实验提供了基础。 展开更多

关键词 阿霉素 磁性纳米粒 合成 MG-63型人骨肉瘤细胞

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靶向Bak1的shRNA表达腺病毒构建及其对人骨肉瘤细胞的影响 被引量：1

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作者 黄红 柴爽 +2 位作者 万雷 王吉利 黄宏兴 《江西医药》 CAS 2018年第4期310-314,共5页

目的构建沉默人Bcl-2拮抗1基因(Bak1)的重组腺病毒,感染人成骨肉瘤细胞MG63并检测其对细胞活性的影响。方法设计特异性针对Bak1的sh RNA序列及无关对照序列scr,分别构建重组腺病毒表达载体,感染人成骨肉瘤细胞MG63,利用q PCR和Western b... 目的构建沉默人Bcl-2拮抗1基因(Bak1)的重组腺病毒,感染人成骨肉瘤细胞MG63并检测其对细胞活性的影响。方法设计特异性针对Bak1的sh RNA序列及无关对照序列scr,分别构建重组腺病毒表达载体,感染人成骨肉瘤细胞MG63,利用q PCR和Western blot检测Bak1基因沉默后的MG63细胞Bak1 m RNA及蛋白的表达,筛选出能高效沉默目标基因的重组腺病毒表达载体,并对其进行包装扩繁,荧光显微镜观察计算病毒滴度,利用MTT法检测高效沉默的重组腺病毒感染MG63细胞后的细胞活性。结果 (1)测序列结果表明,sh RNA序列已成功克隆入到p Ad-GFP载体上;(2)sh RNA-3的沉默效率最高,扩增纯化后腺病毒滴度达到7.7×108GFU/ml;(3)MTT检测显示与NC对照组相比,sh RNA-3组MG63细胞活性增强(P<0.5)。结论成功构建了沉默Bak1的重组腺病毒,为进一步研究Bak1的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 组织构建 Bcl-2拮抗1 基因沉默 人骨肉瘤细胞 细胞活性

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矿化胶原膜浸提液对MG-63人骨肉瘤细胞分化相关基因表达的影响

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作者 韩雪 赵海丹 +3 位作者 王辰 李大伟 刘振 许亦权 《口腔材料器械杂志》 2022年第2期108-111,共4页

目的 研究新型矿化胶原膜对MG-63人骨肉瘤细胞(简称:MG-63细胞)成骨分化相关基因表达的影响。方法 将 MG-63细胞与新型矿化胶原膜浸提液(实验组)共培养,以市售的胶原膜(Bio-gide)浸提液作为同类产品对照组,以不加材料的细胞培养液为空... 目的 研究新型矿化胶原膜对MG-63人骨肉瘤细胞(简称:MG-63细胞)成骨分化相关基因表达的影响。方法 将 MG-63细胞与新型矿化胶原膜浸提液(实验组)共培养,以市售的胶原膜(Bio-gide)浸提液作为同类产品对照组,以不加材料的细胞培养液为空白对照组,采用荧光实时定量 PCR法检测碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原(COL I)、骨保护素(OPG)和骨钙素(OC)mRNA表达水平;采用SPSS 17.0 软件对数据进行统计学分析。结果 在ALP与OPG mRNA相对表达量检测中,3组成骨细胞的表达量差异无统计学意义(P>0.05);在COL I与 OC基因相对表达量检测中,14天时Bio-gide组和矿化胶原膜组表达均明显上调,与空白对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05),而Bio-gide组和矿化胶原膜组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 矿化胶原膜和Bio-gide膜的浸提液均可上调MG-63细胞COL I和OC的基因表达,在一定程度上促进了成骨细胞的分化。 展开更多

关键词 MG-63人骨肉瘤细胞 Ⅰ型胶原膜 碱性磷酸酶 骨保护素 骨钙素

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