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hIGF-1转基因促周围神经再生和抑制肌肉萎缩的实验研究 被引量:2
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作者 朱清远 王玉发 +1 位作者 顾加祥 李立森 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第6期808-811,共4页
目的了解周围神经损伤后人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)体内转基因促周围神经再生和抑制肌肉萎缩的作用。方法构建hIGF-1的真核细胞表达质粒,90只雄性Wistar大鼠,建立坐骨神经再生室动物模型后随机分为3组。hIGF-1治疗组:挤压伤处神经外... 目的了解周围神经损伤后人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)体内转基因促周围神经再生和抑制肌肉萎缩的作用。方法构建hIGF-1的真核细胞表达质粒,90只雄性Wistar大鼠,建立坐骨神经再生室动物模型后随机分为3组。hIGF-1治疗组:挤压伤处神经外膜下即刻注射pcDNAhIGF-1和LipfectAmine混合液10μl(hIGF-1 DNA为4μg);模型组注射pcDNA3.1、LipfectAmine和生理盐水混合液10μl;空白对照组:不注射任何物质。根据不同的时间点(2天,7天,14天和28天)观察hIGF-1质粒转染、坐骨神经再生、骨骼肌萎缩、脊髓运动神经元细胞病理变化。结果不同时相再生神经纤维质和量、骨骼肌萎缩程度、中枢神经元的变化等hIGF-治疗组明显大于模型组和空白对照组(P<0.01)。超微结构见hIGF-1治疗组的再生神经纤维成熟度优于其它两组。结论周围神经损伤后hIGF-1体内转基因能促进周围神经的再生和抑制骨骼肌的萎缩。 展开更多
关键词 周围神经 胰岛素样生长因子-1 电生理学 组织学
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hIGF-1转基因抑制失神经肌肉萎缩的实验研究
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作者 朱清远 王玉发 +1 位作者 顾加祥 李立森 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第12期1675-1677,共3页
目的了解人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)体内转基因抑制肌肉萎缩的作用。方法30只雄性Wistar大鼠,建立坐骨神经再生室动物模型后随机分为3组。hIGF-1治疗组:挤压伤处神经外膜下即刻注射pcDNAhIGF-1和LipfectAmine混合液10μl(hIGF-1 DNA... 目的了解人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)体内转基因抑制肌肉萎缩的作用。方法30只雄性Wistar大鼠,建立坐骨神经再生室动物模型后随机分为3组。hIGF-1治疗组:挤压伤处神经外膜下即刻注射pcDNAhIGF-1和LipfectAmine混合液10μl(hIGF-1 DNA为4μg);模型组:注射pcDNA3.1、LipfectAmine和生理盐水混合液10μl;空白对照组:不注射任何物质。术后8周行神经-肌电检查和腓肠肌肌湿重与肌纤维横截面积检测。结果术后8周检查小腿三头肌复合肌肉活动电位(CMAP)的最大波幅和潜伏期,腓肠肌肌湿重和肌纤维横截面积,hIGF-1治疗组明显好于模型组和空白对照组(P<0.01)。结论周围神经损伤后胰岛素样生长因子-1体内转基因能有效抑制靶肌肉的萎缩。 展开更多
关键词 周围神经 胰岛素样生长因子-1 电生理学 肌肉萎缩
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胰岛素样生长因子-1基因原核表达载体的构建及表达蛋白的生物学活性 被引量:3
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作者 曹传平 陈晓虹 +6 位作者 吴建国 商阿丽 虞慧华 康五朋 郑玲莉 张敬 鞠佃文 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第10期848-851,共4页
目的构建人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因原核表达载体,并检测表达的重组人IGF-1(rhIGF-1)蛋白的生物学活性。方法以pUC57-hIGF-1质粒为模板,PCR扩增hIGF-1基因,克隆入pTEtrans载体,进行DNA序列分析后,亚克隆入表达载体pTE,转化大肠杆... 目的构建人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因原核表达载体,并检测表达的重组人IGF-1(rhIGF-1)蛋白的生物学活性。方法以pUC57-hIGF-1质粒为模板,PCR扩增hIGF-1基因,克隆入pTEtrans载体,进行DNA序列分析后,亚克隆入表达载体pTE,转化大肠杆菌W3110,进行诱导表达,表达产物经阳离子交换层析和凝胶过滤层析纯化,并进行Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析。MTT法检测rhIGF-1促MCF-7细胞的增殖作用。结果转化质粒pTE-hIGF-1的大肠杆菌经诱导后,以可溶性形式表达相对分子质量约为7700的目的蛋白,表达量约占菌体总蛋白的8%。Western blot证实该蛋白具有良好的反应原性,Tricine-SDS-PAGE证实纯度达98%以上,MTT证实具有良好的促MCF-7细胞增殖的作用。结论已成功构建了含hIGF-1基因的原核表达载体,并获得具有生物学活性的高纯度rhIGF-1。 展开更多
关键词 人胰岛素样生长因子-1 原核表达 纯化 生物学活性
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胰岛素样生长因子-1工程细胞在糖尿病中的治疗作用 被引量:1
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作者 牛嗣云 岳凤鸣 +4 位作者 高福禄 陈志宏 杨慧 赵焕英 徐群渊 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期558-563,共6页
目的观察胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)工程细胞移植对糖尿病模型鼠的降血糖作用。方法将hIGF-1基因克隆入pAAV腺病毒相关病毒载体,以HEK293包装细胞及病毒颗粒,HT1080细胞检测病毒滴度。将高病毒滴度的病毒上清感染骨髓基质细胞(MSCs)并... 目的观察胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)工程细胞移植对糖尿病模型鼠的降血糖作用。方法将hIGF-1基因克隆入pAAV腺病毒相关病毒载体,以HEK293包装细胞及病毒颗粒,HT1080细胞检测病毒滴度。将高病毒滴度的病毒上清感染骨髓基质细胞(MSCs)并植入糖尿病模型小鼠腹腔内,观察病毒感染MSCs植入对糖尿病模型小鼠血糖的影响。结果成功构建了hIGF-1腺病毒相关病毒载体,HEK293细胞包装得到了1012滴度的病毒上清。MSCs病毒感染率达60%。稳定表达hIGF-1的MSCs腹腔移植后,可见糖尿病小鼠的血糖明显下降(P<0.05)。结论稳定表达hIGF-1的MSCs对糖尿病动物模型有降糖作用,说明IGF-1基因可作为糖尿病基因治疗的候选基因。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 腺病毒相关病毒载体(AAV) 骨髓基质细胞 糖尿病
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hIGF-1工程细胞对糖尿病小鼠血糖的影响
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作者 牛嗣云 岳凤鸣 +3 位作者 高福禄 陈志宏 杨慧 徐群渊 《承德医学院学报》 2007年第4期348-350,F0002,共4页
目的:观察hIGF-1工程细胞移植对糖尿病模型小鼠的降血糖作用。方法:用高病毒滴度的病毒上清感染骨髓基质细胞,并植入糖尿病模型小鼠腹腔内,观察糖尿病模型小鼠血糖的变化。结果:稳定表达hIGF-1的骨髓基质细胞腹腔移植后,可见糖尿病小鼠... 目的:观察hIGF-1工程细胞移植对糖尿病模型小鼠的降血糖作用。方法:用高病毒滴度的病毒上清感染骨髓基质细胞,并植入糖尿病模型小鼠腹腔内,观察糖尿病模型小鼠血糖的变化。结果:稳定表达hIGF-1的骨髓基质细胞腹腔移植后,可见糖尿病小鼠的血糖明显下降(P<0.05)。结论:稳定表达hIGF- 1的骨髓基质细胞对糖尿病动物模型有降糖作用,说明IGF-1基因可作为糖尿病基因治疗的候选基因。 展开更多
关键词 hlGF—1 腺相关病毒载体(AAV) 骨髓基质细胞 糖尿病
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