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α-亚麻酸和花生四烯酸对Nrf 2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1表达的影响 被引量：3
1
作者 张金铭 张秀英 +1 位作者 郝丽红 马丽梅 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期1-4,共4页
为了检测α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对于人肝癌细胞系(HepG2细胞)中核转录因子Nrf 2和Ⅰ相代谢酶胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的mRNA和蛋白质表达的影响,并探究CYP7A1是否受Nrf 2的调控,试验以不... 为了检测α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对于人肝癌细胞系(HepG2细胞)中核转录因子Nrf 2和Ⅰ相代谢酶胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的mRNA和蛋白质表达的影响,并探究CYP7A1是否受Nrf 2的调控,试验以不同浓度的ALA和AA诱导HepG2细胞24 h,之后采用Real-time PCR法和Western-blot法分别检测HepG2细胞内Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量。结果表明:当使ALA浓度为0.25,0.5,1 mmol/L作用于HepG2细胞时,Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照均呈剂量依赖性升高(P<0.01);当使AA浓度为0.25,0.5,1 mmol/L作用于HepG2细胞时,Nrf 2的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照呈剂量依赖性升高(P<0.01),但CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照则呈剂量依赖性减少(P<0.01)。说明不同剂量的ALA和AA对Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量影响不同,Nrf 2和CYP7A1呈正相关或负相关。 展开更多
关键词 胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1) 核转录因子Nrf 2 α-亚麻酸(ALA) 花生四烯酸(AA) 人肝 癌细胞系(hepg2)
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南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导HepG2细胞凋亡的实验研究 被引量：3
2
作者 熊熙 张馨 +1 位作者 李平 汪茂荣 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2015年第3期81-84,共4页
目的探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导肝癌细胞Hep G2凋亡的作用。方法 Hoechst33342/PI染色后,在荧光显微镜下观察经南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导的Hep G2细胞凋亡后细胞及细胞核的形态变化;应用琼脂糖凝胶电泳观察细胞晚期凋亡形成的"... 目的探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导肝癌细胞Hep G2凋亡的作用。方法 Hoechst33342/PI染色后,在荧光显微镜下观察经南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导的Hep G2细胞凋亡后细胞及细胞核的形态变化;应用琼脂糖凝胶电泳观察细胞晚期凋亡形成的"DNA梯带"。结果随着南蛇藤乙酸乙酯提取物浓度的增加,Hep G2细胞生长被抑制,凋亡细胞增多。同时,随着作用时间的延长,细胞凋亡的数量增多;30μg/ml的南蛇藤乙酸乙酯提取物作用细胞24 h后,可观察到明显的"DNA梯带"。随着南蛇藤乙酸乙酯提取物作用剂量的提高,DNA梯带更加明显。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物可诱导Hep G2细胞凋亡,具有量效关系和时间依存性。 展开更多
关键词 南蛇藤 人类肝癌细胞hepg2 细胞凋亡 琼脂糖凝胶电泳
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慢病毒载体介导的人肝癌HepG2细胞BC047440基因沉默 被引量：6
3
作者 钟扬 李靖 +4 位作者 黄小兵 郑璐 杨彤翰 赵弘智 梁平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期744-748,共5页
目的构建BC047440基因RNAi慢病毒干扰载体,并检测其对人肝癌细胞系HepG2细胞中BC047440基因的沉默效果。方法针对已经筛选确定的BC047440基因RNAi有效靶序列,合成BC047440基因特异性shRNA序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后... 目的构建BC047440基因RNAi慢病毒干扰载体,并检测其对人肝癌细胞系HepG2细胞中BC047440基因的沉默效果。方法针对已经筛选确定的BC047440基因RNAi有效靶序列,合成BC047440基因特异性shRNA序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pFU-GW-iRNA载体连接产生pFU-GW-shBC047440慢病毒载体,PCR、DNA测序鉴定阳性克隆。用脂质体转染法将pFU-GW-shBC047440、pHelper 1.0载体和pHelper 2.0载体共转染293T细胞,产生具备感染能力的慢病毒。以293T细胞中绿色荧光蛋白的表达水平测定病毒滴度,并测定其对人肝癌细胞株HepG2细胞最适感染复数(MOI)。以最适MOI感染HepG2细胞,分BC047440-shRNA组、control-shRNA组和HepG2组;RT-PCR和Western blot检测各组细胞BC047440 mRNA及蛋白的表达差异。结果经PCR鉴定,成功构建BC047440基因RNAi慢病毒载体。测定慢病毒滴度为5×108TU/ml,其在HepG2细胞中最适MOI为20;RT-PCR和Western blot检测结果分别显示BC047440-shRNA组中BC047440 mRNA及BC047440蛋白表达较control-shRNA组和HepG2组明显降低,control-shRNA组与HepG2组间无明显差异。结论成功构建BC047440特异性RNAi慢病毒载体,感染人肝癌细胞系HepG2细胞后,实现了对HepG2细胞中BC047440基因的有效沉默。 展开更多
关键词 BC047440 RNA干扰 慢病毒载体 人肝癌细胞系hepg2
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磁性三氧化二铁纳米粒子对HepG2细胞增殖及凋亡的影响 被引量：4
4
作者 夏婷 唐萌 +6 位作者 殷海荣 陆敏玉 王姝 张婷 杨扬 张宇 顾宁 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期29-33,共5页
应用 HepG2细胞作为研究对象,探讨 Fe_2O_3纳米粒子对肿瘤细胞的活力与凋亡的影响.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)还原检测法确定受试物的染毒剂量.分别对各个组进行流式细胞术检测细胞线粒体膜电位变化及凋亡.结果显示,Fe_2O_3纳米粒子在0.55... 应用 HepG2细胞作为研究对象,探讨 Fe_2O_3纳米粒子对肿瘤细胞的活力与凋亡的影响.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)还原检测法确定受试物的染毒剂量.分别对各个组进行流式细胞术检测细胞线粒体膜电位变化及凋亡.结果显示,Fe_2O_3纳米粒子在0.555～3.310 mg/mL 范围内均可抑制 HepG2细胞增值,IC_(50)为1.1lmg/mL.Fe_2O_3纳米粒子在0.173、0.347、0.694 mg/mL 剂量组均导致细胞线粒体膜电位均较对照组有所下降且细胞凋亡率显著增高. 展开更多
关键词 氧化铁磁性纳米颗粒 人肝癌细胞株 线粒体膜电位 细胞凋亡
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