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宝藿苷-Ⅰ对人食管癌细胞Eca-109增殖及细胞周期的影响 被引量:12
1
作者 刘晓霞 刘红珍 +2 位作者 陈剑华 陈育民 单保恩 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1590-1593,共4页
目的研究香加皮中宝藿苷-Ⅰ对人食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响及其作用机制。方法采用MTT法分析不同质量浓度宝藿苷-Ⅰ(12.5、25、50μg/mL)分别作用24、48、72h后,对Eca-109细胞增殖的影响;流式细胞术分析宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞周... 目的研究香加皮中宝藿苷-Ⅰ对人食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响及其作用机制。方法采用MTT法分析不同质量浓度宝藿苷-Ⅰ(12.5、25、50μg/mL)分别作用24、48、72h后,对Eca-109细胞增殖的影响;流式细胞术分析宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞周期的影响;RT-PCR技术检测宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞Cyclin B1mRNA表达的影响;Western blotting方法检测宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞Cyclin B1蛋白表达的影响。结果25、50μg/mL宝藿苷-Ⅰ均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P<0.05),作用48h的IC50为24.8μg/mL。25、50μg/mL宝藿苷-Ⅰ作用48h后,随宝藿苷-Ⅰ质量浓度的增加,Eca-109细胞的G0/G1期细胞比例明显下降,G2/M期细胞比例明显提高,细胞的Cyclin B1蛋白及mRNA表达水平降低,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论香加皮宝藿苷-Ⅰ可抑制Eca-109细胞增殖,使细胞周期阻滞,该作用可能与下调细胞Cyclin B1表达有关。 展开更多
关键词 香加皮 宝藿苷-Ⅰ 食管癌 细胞周期 CYCLIN B1
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人食管癌顺铂耐药细胞系的建立及耐药相关基因的筛选 被引量:9
2
作者 李敏 王志举 +2 位作者 付庆 赵国强 董子明 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第1期18-20,共3页
目的:建立人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP,并初步探讨其耐药机制。方法:采用顺铂(cDDP)中等浓度、间歇冲击作用方法历时9mon诱导人食管癌细胞系Ec9706,建立相应耐药细胞系,采用MTT法测定耐药细胞系对cD-DP的耐药指数,用RT-PCR半定... 目的:建立人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP,并初步探讨其耐药机制。方法:采用顺铂(cDDP)中等浓度、间歇冲击作用方法历时9mon诱导人食管癌细胞系Ec9706,建立相应耐药细胞系,采用MTT法测定耐药细胞系对cD-DP的耐药指数,用RT-PCR半定量方法测定亲本细胞及耐药细胞耐药相关基因如DNA聚合酶(polβ)、多药耐药相关基因(MRP)、谷胱甘肽转移酶(GST)、二氢叶酸还原酶(DHFR)、拓扑异构酶(TPO)和多药耐药基因(mdr1)等基因的mRNA表达水平。结果:人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP的耐药指数为15.7,该细胞系中polβ、DHFR、GST基因mRNA的表达比亲本细胞显著增加,TPO的表达降低,而mdr1、MRP表达的增加无显著统计学意义。结论:成功建立了人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP,其耐药性的产生与polβ、GST、DHFR、TPO等基因的异常表达有关,而与mdr1、MRP表达的关系不密切。 展开更多
关键词 食管癌 耐药细胞系 耐药相关基因 DNA聚合酶beta
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人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP的建立及其生物学特征 被引量:6
3
作者 李敏 王志举 +1 位作者 李文涛 董子明 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第34期3257-3260,共4页
目的:建立人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP,探讨其生物学特征.方法:采用顺铂(cDDP)中等浓度、间歇作用方法历时9mo建立耐药细胞系Ec9706/cDDP,采用MTT法测定其对cDDP的耐药指数,观察冻存、撤药对耐药性的影响,比较耐药与亲本细胞生... 目的:建立人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP,探讨其生物学特征.方法:采用顺铂(cDDP)中等浓度、间歇作用方法历时9mo建立耐药细胞系Ec9706/cDDP,采用MTT法测定其对cDDP的耐药指数,观察冻存、撤药对耐药性的影响,比较耐药与亲本细胞生长曲线、群体倍增时间及贴壁率的不同,流式细胞仪测细胞周期,软琼脂实验测细胞的恶性增殖能力,罗丹明实验测其对药物的摄入、排出能力.结果:人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP的耐药指数为15.7,冻存对耐药性影响不大,撤药培养可使耐药性降低,耐药细胞群体倍增时间延长(29.79±0.48hvs25.79±0.45h,P<0.05),生长缓慢,G0/G1、S期细胞比例增加(63.18%±5.21%vs52.81%±4.36%,P<0.05;36.49%±3.93%vs26.70%±2.62%,P<0.05),G2期细胞减少(0.33%±0.02%vs20.49%±3.71%,P<0.05),克隆形成率明显高于亲本细胞(69%vs24%,P<0.05),对罗丹明的摄入减少,排出增多.结论:成功建立了人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP,且耐药性较稳定. 展开更多
关键词 食管癌 耐药细胞系 顺铂 细胞周期 四甲基偶氮唑蓝 流式细胞术
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葡萄籽提取物原花青素诱导人食管癌细胞ECA109凋亡 被引量:5
4
作者 郭方明 李述刚 +5 位作者 宋关玲 丁玉松 冯刚玲 牛强 徐上知 胡云华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第9期115-121,共7页
目的:探讨葡萄籽提取物原花青素(grape seed proanthocyanidins extract,GSPE)诱导人食管癌细胞ECA109凋亡的效果及机制。方法:ECA109细胞用0、25、50、100、200、400μg/mL GSPE干预24 h,噻唑蓝法检测并计算不同质量浓度GSPE对ECA109... 目的:探讨葡萄籽提取物原花青素(grape seed proanthocyanidins extract,GSPE)诱导人食管癌细胞ECA109凋亡的效果及机制。方法:ECA109细胞用0、25、50、100、200、400μg/mL GSPE干预24 h,噻唑蓝法检测并计算不同质量浓度GSPE对ECA109细胞的活性抑制情况,选取半数抑制浓度(50μg/mL)作为干预剂量;流式细胞技术检测细胞凋亡情况;酶联免疫吸附检测法测定炎性因子及Bax/Bcl-2表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,qPCR)、Western blot检测核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路和凋亡相关蛋白Caspase-3的表达情况。结果:不同质量浓度GSPE作用24 h均可抑制ECA109细胞的增殖,细胞凋亡率由54.44%增加到82.80%;酶联免疫吸附检测结果显示,相比于空白对照组,GSPE和NF-κB抑制剂BAY11-7082可显著抑制细胞内炎性因子前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_2)的产生以及C型反应蛋白(C reactive protein,CRP)的分泌(P<0.05);qPCR和Western blot结果表明GSPE和BAY11-7082处理使Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),NF-κB信号通路中IκB、p65、p50 mRNA表达量显著降低(P<0.05),p-IκB、p65、p50相对表达量显著下降(P<0.05)。结论:GSPE可通过抑制PGE_2、CRP的产生诱导ECA109细胞凋亡,其机制可能与抑制NF-κB通路、活化Bax有关。 展开更多
关键词 葡萄籽提取物原花青素 人食管癌 细胞凋亡 核因子ΚB信号通路
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黄芩素对食管癌EC109细胞株增殖及细胞周期的影响 被引量:5
5
作者 姚怀齐 郭光华 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期153-155,共3页
目的旨在探讨12-脂氧化酶(12-LOX)抑制剂黄芩素(Baicalein,BAI)对人食管癌EC109细胞增殖及细胞周期的影响及可能的机制。方法不同浓度BAI(0、5、10、20、40、80μmol/L)处理EC109细胞,应用MTT法检测BAI对EC109细胞增殖的影响;流式细胞术... 目的旨在探讨12-脂氧化酶(12-LOX)抑制剂黄芩素(Baicalein,BAI)对人食管癌EC109细胞增殖及细胞周期的影响及可能的机制。方法不同浓度BAI(0、5、10、20、40、80μmol/L)处理EC109细胞,应用MTT法检测BAI对EC109细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测BAI对EC109细胞周期的影响。结果随着BAI终浓度(0、5、10、20、40、80μmol/L)增加和作用时间(24、48、72 h)的延长,细胞存活率明显下降;24 h后分别为98.4%、87.7%、87.6%、81.9%、79.0%;48 h后分别为71.6%、67.6%、64.1%、60.0%、46.7%;72 h后分别为43.8%、43.1%、43.1%、40.0%、23.0%;FCM分析表明:药物作用24 h后,随着BAI浓度的增高,G1期细胞的比例由43.6%升高至68.5%,G2期细胞的比例从24.5%降至0.0%。结论BAI能抑制EC109细胞的增殖且改变细胞周期的分布,并呈一定的时间、浓度依赖性。 展开更多
关键词 黄芩素 食管肿瘤 细胞增殖 细胞周期
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苦参素注射液对裸鼠食管癌移植瘤凋亡的影响 被引量:5
6
作者 曹珊 韩倩倩 +1 位作者 付强 朱艳琴 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期2047-2049,共3页
目的:通过研究苦参素对裸鼠食管癌移植瘤组织中内质网凋亡途经相关蛋白表达的影响,探讨其诱导凋亡的相关机制。方法:通过移植瘤体积判定肿瘤生长抑制,运用TUNEL检测细胞凋亡率,采用蛋白免疫印迹技术检测内质网凋亡途径相关蛋白:结合免... 目的:通过研究苦参素对裸鼠食管癌移植瘤组织中内质网凋亡途经相关蛋白表达的影响,探讨其诱导凋亡的相关机制。方法:通过移植瘤体积判定肿瘤生长抑制,运用TUNEL检测细胞凋亡率,采用蛋白免疫印迹技术检测内质网凋亡途径相关蛋白:结合免疫球蛋白(BIP)和C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)的表达水平。结果:与阴性对照组比较,自给药17d起,各剂量组肿瘤体积均显著缩小(P<0.05,P<0.01);TUNEL检测中、高剂量组呈现明显细胞凋亡现象(P<0.05);中、高剂量组BIP表达显著下降(P<0.05),CHOP表达显著增加(P<0.05)。结论:苦参素注射液具有诱导裸鼠食管癌移植瘤凋亡的作用,其作用机制可能与内质网凋亡途径相关蛋白BIP的表达下调和CHOP表达上调有关。 展开更多
关键词 苦参素 裸鼠 食管癌 移植瘤 凋亡
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BRCA1基因在人食管癌中的表达 被引量:3
7
作者 王福光 车启芬 +5 位作者 叶冬梅 陈琛 郝立宏 宫琳琳 宋阳 邵淑娟 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期132-137,共6页
目的本研究利用组织芯片检测BRCA1基因在人食管癌中的表达与食管癌的生长、分化和转移等临床特征的关系,期望找到BRCA1与食管癌发生、发展的关系。方法收集48例食管癌患者标本,分别取其肿瘤组织、癌前病变组织及正常组织制成组织微阵列... 目的本研究利用组织芯片检测BRCA1基因在人食管癌中的表达与食管癌的生长、分化和转移等临床特征的关系,期望找到BRCA1与食管癌发生、发展的关系。方法收集48例食管癌患者标本,分别取其肿瘤组织、癌前病变组织及正常组织制成组织微阵列,免疫组织化学SP法检测BRCA1蛋白的表达,分析BRCA1在各种组织的表达特点及其与肿瘤的关系。选择其中10例患者的上述组织的新鲜标本,采用Western blot检测BRCA1蛋白的表达。结果免疫组织化学结果显示,BRCA1在肿瘤组织阳性占70.50%,癌前组织阳性占43.10%,正常组织阳性占39.00%,食管癌组织与癌前病变组织、食管癌组织与正常组织相比BRCA1的表达均存在显著差异(P<0.01)。BRCA1的表达与食管癌的病理分化有统计学上的差异(P<0.05)。Western blot显示,BRCA1在食管癌肿瘤组织、癌前病变组织及正常组织中表达量依次降低,差异具有统计学意义(P<0.05);BRCA1在高、中、低分化程度的食管癌组织中表达量依次降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论BRCA1与食管癌发生发展有关,BRCA1的表达与食管癌的分化呈正相关。 展开更多
关键词 BRCA1 人食管癌 免疫组织化学 组织芯片
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香加皮宝藿苷-I对人食管癌细胞Eca-109侵袭力的影响 被引量:4
8
作者 刘晓霞 李菊梅 +3 位作者 陈剑华 姚艳冰 王晓华 陈育民 《当代医学》 2011年第31期3-5,共3页
目的探索宝藿苷-I对人食管癌细胞Eca-109侵袭力及TFPI-2基因表达的影响。方法以12.5、25、50μg/ml浓度的宝藿苷-I处理Eca-109细胞48h,分别采用Transwell小室法检测细胞的侵袭能力、RT-PCR法检测细胞TFPI-2mRNA表达水平以及Westernblot... 目的探索宝藿苷-I对人食管癌细胞Eca-109侵袭力及TFPI-2基因表达的影响。方法以12.5、25、50μg/ml浓度的宝藿苷-I处理Eca-109细胞48h,分别采用Transwell小室法检测细胞的侵袭能力、RT-PCR法检测细胞TFPI-2mRNA表达水平以及Westernblot法检测TFPI-2蛋白表达水平等。结果 12.5、25、50μg/ml宝藿苷-I均可抑制人食管癌细胞Eca-109的侵袭力并能上调TFPI-2mRNA及蛋白的表达,25、50μg/ml组与对照组相比均有显著差异(P<0.05)。结论宝藿苷-I能抑制人食管癌细胞Eca-109的侵袭力,可能与上调TFPI-2基因的表达有关。 展开更多
关键词 宝藿苷-Ⅰ 食管癌 ECA-109 侵袭 TFPI-2 MRNA 蛋白
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香加皮宝霍甙-Ⅰ诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的实验研究 被引量:4
9
作者 刘晓霞 单保恩 +2 位作者 陈育民 任风芝 商晓辉 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2008年第6期445-448,共4页
背景与目的:研究香加皮宝霍甙-Ⅰ诱导人食管癌细胞Eca_109的凋亡作用及其作用机制。材料与方法:采用MTT法分析不同浓度(12.5、25、50μg/ml)宝霍甙-Ⅰ分别作用Eca_109细胞24h、48h、72h后,对细胞增殖的抑制作用;经不同浓度(12.5、25、50... 背景与目的:研究香加皮宝霍甙-Ⅰ诱导人食管癌细胞Eca_109的凋亡作用及其作用机制。材料与方法:采用MTT法分析不同浓度(12.5、25、50μg/ml)宝霍甙-Ⅰ分别作用Eca_109细胞24h、48h、72h后,对细胞增殖的抑制作用;经不同浓度(12.5、25、50μg/ml)宝霍甙-Ⅰ作用Eca-109细胞48h后,用流式细胞术分析细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Survivin的表达;用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化;用RT-PCR技术检测SurvivinmRNA的表达。结果:不同浓度宝霍甙-Ⅰ均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P均<0.05)且随浓度的增加和作用时间的延长抑制作用增强,作用48h后的半数抑制浓度IC50为24.8μg/ml。不同浓度宝霍甙-Ⅰ作用48h后,均可诱导Eca_109细胞凋亡,50μg/ml时细胞凋亡率达55.26,且导致Eca-109细胞发生凋亡特征性超微结构改变,并使Eca-109细胞SurvivinmRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)。结论:香加皮宝霍甙-Ⅰ可抑制Eca-109细胞增殖,诱导细胞凋亡,该作用可能与下调细胞Survivin表达有关。 展开更多
关键词 食管癌 香加皮宝霍甙-Ⅰ 细胞凋亡 基因表达
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人食管癌裸鼠移植瘤株建立及其应用的研究 被引量:3
10
作者 蔡海英 魏龙星 +6 位作者 叶燕丽 陈旦洋 卢圣贤 何为民 张恩罴 钟强荣 孙振权 《北京实验动物科学》 1992年第4期17-23,共7页
用人食管癌组织直接接种于裸鼠,建立两株裸鼠移植瘤株,分别命名为人食管鳞状细胞癌裸鼠移植瘤(HEC_2)和人食管腺鳞癌裸鼠移植瘤(HEC_6),两瘤株的鼠间传代达40余代,历时3年,生长稳定,潜伏期短,移值成功率达100%。并应用于抗癌药物和放... 用人食管癌组织直接接种于裸鼠,建立两株裸鼠移植瘤株,分别命名为人食管鳞状细胞癌裸鼠移植瘤(HEC_2)和人食管腺鳞癌裸鼠移植瘤(HEC_6),两瘤株的鼠间传代达40余代,历时3年,生长稳定,潜伏期短,移值成功率达100%。并应用于抗癌药物和放射增敏的实验研究,结果表明:平阳霉素对HEC_6有明显的抑制作用,重复两次,抑制率分别为56.5%和8.87%;血卟啉衍生物(HPD)对HEC_2 X线分次照射有明显增敏作用。 展开更多
关键词 裸鼠 肿瘤动物模型 食管肿瘤
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宝藿苷-Ⅰ联合As_2O_3对食管癌Eca-109细胞增殖的影响 被引量:2
11
作者 苏镇军 郭莉莉 +2 位作者 刘晓霞 郝玉栓 孙立尧 《现代中西医结合杂志》 CAS 2012年第6期593-595,共3页
目的研究宝藿苷-Ⅰ与As2O3联合应用对食管癌细胞Eca-109增殖的影响。方法取对数生长期Eca-109接种于96孔培养板,宝藿苷-Ⅰ组予以25 mg/L宝霍苷As2O3组予0.18 mg/L As2O3,联合用药组予12.5 mg/L宝藿苷-Ⅰ+0.09 mg/L As2O3,对照组予0.1%D... 目的研究宝藿苷-Ⅰ与As2O3联合应用对食管癌细胞Eca-109增殖的影响。方法取对数生长期Eca-109接种于96孔培养板,宝藿苷-Ⅰ组予以25 mg/L宝霍苷As2O3组予0.18 mg/L As2O3,联合用药组予12.5 mg/L宝藿苷-Ⅰ+0.09 mg/L As2O3,对照组予0.1%DMSO。采用MTT法分析对Eca-109细胞增殖的抑制作用,DNA琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡,流式细胞术分析细胞周期,Western Blot技术检测C-myc基因蛋白的表达,每组均重复3次。结果 3个用药组均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(均P<0.05),但联合用药组抑制作用显著优于单独用药组(P<0.05);3个用药组均可使细胞凋亡,使细胞周期阻滞在G2/M期,使C-myc表达下调,与对照组相比均有显著性差异(P均<0.05),但联合用药组较单药组作用更显著(P<0.05)。结论各自半量的宝藿苷-Ⅰ与As2O3联合应用对Eca-109细胞的增殖抑制有显著的增强作用,明显优于各自的单味应用效果。 展开更多
关键词 宝藿苷-Ⅰ AS2O3 细胞凋亡 C-MYC 食管癌 联合用药
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IL-27活化NK细胞抗肿瘤效应及其机制研究 被引量:2
12
作者 刘丽华 刘爽 +5 位作者 桑梅香 潘晓明 张哲 郝国贞 单保恩 王士杰 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期482-485,共4页
目的:本文通过研究转染IL-27基因的人食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤效应及其对NK细胞表达和功能的影响,旨在探讨其抗肿瘤作用机制。方法:IL-27基因转染的人食管癌细胞(Eca109/IL-27)接种于裸鼠,观察其抗肿瘤效应。用免疫组化法检测移植... 目的:本文通过研究转染IL-27基因的人食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤效应及其对NK细胞表达和功能的影响,旨在探讨其抗肿瘤作用机制。方法:IL-27基因转染的人食管癌细胞(Eca109/IL-27)接种于裸鼠,观察其抗肿瘤效应。用免疫组化法检测移植瘤组织间质中NK细胞浸润数量;ELISA检测脾细胞产生IFN-γ的含量;RT-PCR检测移植瘤组织中IL-12Rβ2、TNF-α和IL-1β基因的表达;LDH法检测NK细胞对其靶细胞K562细胞的杀伤活性。结果:接种Eca109/IL-27细胞荷瘤裸鼠的移植瘤体积较接种野生型Eca109细胞(未转染)和Eca109/LXSN(空载体质粒转染)减小、裸鼠生存期明显延长(P<0.05)。接种Eca109/IL-27细胞移植瘤组织中NK细胞浸润数量增多(P<0.05),IL-12Rβ2、TNF-α和IL-1β基因的表达水平增高(P<0.05)、脾细胞产生IFN-水平增高(P<0.05)、NK细胞对其靶细胞K562细胞杀伤活性增强(P<0.05)。结论:IL-27在裸鼠体内能够通过活化NK细胞、诱导炎症性细胞因子的产生而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 IL-27 食管鳞癌 细胞因子 自然杀伤细胞 抗肿瘤
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宝藿苷-I联合5-FU对食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响 被引量:1
13
作者 刘晓霞 郝玉拴 +3 位作者 李菊梅 刘冬青 陈剑华 姚艳冰 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2011年第5期367-369,373,共4页
目的:研究宝霍苷-I与5-FU联合应用对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响。方法:实验设联合用药组(12.5mg/L宝霍苷-I+12.5mg/L5-FU)、阴性对照组(0.1%DMSO)、25mg/L宝藿苷-I组和12.5mg/L5-FU组,共4组,每组均设3个复孔,每孔100μl... 目的:研究宝霍苷-I与5-FU联合应用对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响。方法:实验设联合用药组(12.5mg/L宝霍苷-I+12.5mg/L5-FU)、阴性对照组(0.1%DMSO)、25mg/L宝藿苷-I组和12.5mg/L5-FU组,共4组,每组均设3个复孔,每孔100μl(含Eca-109细胞数为1×10~4个)。作用24、48、72h时,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分别检测各组Eca-109细胞的增殖;并在作用48h后,用流式细胞术检测Eca-109细胞凋亡率;用Western blot技术检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:宝霍苷-I、5-FU单用及其联合应用在24、48和72h时均可明显抑制Eca-109细胞的增殖,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P均〈0.05),联合应用的抑制作用显著优于单独应用(P〈0.05)。宝霍苷-I、5-FU单独及其联合作用48h后,均可诱导Eca-109细胞凋亡,均可下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达,与对照组相比差异均有统计学意义(P均〈0.05),且联合用药组较单独用药组作用明显(P〈0.05)。结论:宝霍苷-I与5-FU联合应用对Eca-109细胞的增殖抑制和凋亡诱导有协同作用,可能与下调Bcl-2蛋白的表达、上调Bax蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 宝霍苷-I 5-FU 增殖 细胞凋亡 BCL-2 BAX 食管癌
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HRE和hTERT修饰条件复制型腺病毒携带Egr-1介导的Smac对人食管癌细胞Eca109周期和凋亡的影响 被引量:1
14
作者 陈文庆 金新天 +2 位作者 闫松 刘刚 王巍 《中国实验诊断学》 2014年第7期1054-1057,共4页
目的探讨以HRE和hTERT修饰条件复制型腺病毒携带Egr-1介导的Smac(CARd.pE-Smac)对人食管癌细胞Eca109周期和凋亡的影响。方法利用氯化钴进行化学乏氧,病毒感染滴度为5MOI[Multiplicity of infection(virus/cell)]感染人食管癌Eca109细胞... 目的探讨以HRE和hTERT修饰条件复制型腺病毒携带Egr-1介导的Smac(CARd.pE-Smac)对人食管癌细胞Eca109周期和凋亡的影响。方法利用氯化钴进行化学乏氧,病毒感染滴度为5MOI[Multiplicity of infection(virus/cell)]感染人食管癌Eca109细胞24h,并进行2Gy照射,12h后分别利用Western blotting检测Smac蛋白的表达,PI染色和AnnexinⅤ-FITC双染,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡变化。实验分为control、CARd.pESmac、hypoxia、2Gy、H+CARd.pE-Smac、CARd.pE-Smac+2Gy和H+CARd.pE-Smac+2Gy组。结果 CARd.pE-Smac感染常氧和乏氧的Eca109细胞后均未见Smac蛋白表达增加,而2Gy照射后,常氧、感染CARd.pE-Smac和乏氧再感染CARd.pE-Smac均能使Smac蛋白表达增加,尤其以三者联用后Smac表达增加最大;感染CARd.pESmac未对细胞周期有明显改变,而乏氧、2Gy和感染CARd.pE-Smac任二者(乏氧与2Gy除外)或者三者联用均能显著增加S期和G2/M期细胞百分比增加(P<0.05,P<0.01),尤其以三者联用作用更强;而且,对于细胞凋亡的诱导作用与周期进程变化的规律相类似。结论 HRE和hTERT修饰条件复制型腺病毒携带Egr-1介导的Smac在人食管癌细胞Eca109中显著过表达,且能够导致细胞发生S期延迟和G2/M期阻滞,并诱导细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 缺氧反应元件 人端粒酶逆转录酶 条件复制型腺病毒 人食管癌
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冬凌草甲素诱导人食管癌SHEE细胞凋亡及其线粒体改变 被引量:13
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作者 谢晓原 陈俊辉 +2 位作者 王少彬 刘煜珣 沈忠英 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第6期907-910,共4页
目的:研究冬凌草甲素(oridonin,ORI)诱导人食管癌SHEE细胞凋亡的效应及其机制。方法:用不同浓度ORI分别作用人食管癌SHEE细胞株不同时间,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长抑制率;透射电镜观察细胞超微结构及改变;原位末端标记/碘化吡啶(TU... 目的:研究冬凌草甲素(oridonin,ORI)诱导人食管癌SHEE细胞凋亡的效应及其机制。方法:用不同浓度ORI分别作用人食管癌SHEE细胞株不同时间,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长抑制率;透射电镜观察细胞超微结构及改变;原位末端标记/碘化吡啶(TUNEL/PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:ORI对SHEE细胞的生长有显著的抑制作用,64μg/ml的ORI作用24h、48h及72h对SHEE细胞生长的抑制率分别为78.7%、89.5%及91.7%;32μg/ml的ORI作用2h后,电镜下可见线粒体在细胞核出现变化之前已发生形状改变,作用8h后,线粒体内部结构消失,细胞核呈细胞凋亡的典型改变;作用24h后,流式细胞仪检测凋亡率为47.7%,细胞周期图像显示明显的凋亡峰。结论:ORI可诱导SHEE细胞凋亡,其机制可能与线粒体凋亡途径有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 人食管癌SHEE细胞 凋亡 线粒体
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熊果酸诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的作用及机制 被引量:11
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作者 陈国庆 沈宜 +2 位作者 段红 汤为学 陈玉龙 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 2008年第6期454-458,共5页
目的研究熊果酸(Ursolicacid,UA)抑制人食管癌Eca-109细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用及机制。方法MTT比色法检测熊果酸对Eca-109细胞的增殖抑制作用;透射电镜观察经熊果酸处理后Eca-109细胞超微结构的改变;流式细胞术检测细胞周期变化及... 目的研究熊果酸(Ursolicacid,UA)抑制人食管癌Eca-109细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用及机制。方法MTT比色法检测熊果酸对Eca-109细胞的增殖抑制作用;透射电镜观察经熊果酸处理后Eca-109细胞超微结构的改变;流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡率;Westernblot法检测P27kip1蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果20~50μmol/L熊果酸对Eca-109细胞具有显著的抑制作用(P<0.01);电镜下,18.32~36.65μmol/L熊果酸处理过的Eca-109细胞可见典型的凋亡形态及坏死形态;流式细胞检测显示细胞凋亡率及G0/G1期细胞随着熊果酸浓度的增加而增多,S期细胞逐渐减少;Westernblot检测结果提示熊果酸能使Bcl-2表达下降而Bax、P27kip1增加。结论熊果酸对人食管癌细胞系Eca-109具有显著的增殖抑制、诱导细胞凋亡作用。其作用与提高P27kip1蛋白的表达,将细胞阻滞在G0/G1期,下调Bcl-2的表达和增加Bax的表达有关。 展开更多
关键词 熊果酸 人食管癌细胞Eca-109 细胞凋亡 流式细胞术 P27^KIP1
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姜黄素对人食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用 被引量:12
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作者 陈兰英 杨海波 +2 位作者 李祺福 宋建晔 荆光军 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第9期1601-1604,共4页
目的:应用姜黄素处理人食管癌EC9706细胞,研究姜黄素对人食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用。方法:应用细胞计数、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst染色、H.E染色和透射电镜检测经姜黄素诱导处理后人食管癌EC9706细胞的凋亡。结果:经... 目的:应用姜黄素处理人食管癌EC9706细胞,研究姜黄素对人食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用。方法:应用细胞计数、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst染色、H.E染色和透射电镜检测经姜黄素诱导处理后人食管癌EC9706细胞的凋亡。结果:经姜黄素诱导处理后,人食管癌EC9706细胞生长抑制率达69.9%;细胞周期检测出现亚二倍体(亚G1期)细胞峰值,细胞凋亡率达23%;琼脂糖凝胶电泳显示出细胞凋亡典型的180-200 bp及其倍体的DNA"梯状"条带;Hoechst染色显示细胞核内出现浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光;光镜和电镜下可见典型的细胞凋亡特征:细胞体积缩小,染色体凝集,可见有成群或单独存在的凋亡细胞,电镜下可见凋亡小体存在。结论:姜黄素能够有效诱导人食管癌EC9706细胞的凋亡,从而进一步为食管癌等恶性肿瘤疾病的治疗和凋亡机理的研究提供重要基础和科学依据. 展开更多
关键词 姜黄素 食管癌细胞 细胞凋亡
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槲皮素诱导人食管癌Eca-109细胞发生自噬及其作用的研究 被引量:12
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作者 方坤 刘金成 +2 位作者 呼晓 范玉华 齐玉山 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2016年第6期484-487,共4页
目的明确槲皮素(quercetin,QUE)处理人食管癌Eca-109细胞后是否发生自噬及自噬在QUE抑制细胞增殖中的作用。方法用不同剂量(0、12.5、25、37.5和50μg/m L)QUE处理人食管癌Eca-109细胞24 h后,MTT检测细胞增殖率;激光共聚焦显微镜观察细... 目的明确槲皮素(quercetin,QUE)处理人食管癌Eca-109细胞后是否发生自噬及自噬在QUE抑制细胞增殖中的作用。方法用不同剂量(0、12.5、25、37.5和50μg/m L)QUE处理人食管癌Eca-109细胞24 h后,MTT检测细胞增殖率;激光共聚焦显微镜观察细胞内自噬标志蛋白LC3荧光强度;Western blot分别检测LC3和Beclin-1的表达情况。自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)预处理2 h后,以不同剂量QUE(0、12.5、25、37.5和50μg/m L)处理人食管癌Eca-109细胞24 h,MTT检测细胞增殖。结果 QUE显著抑制了Eca-109细胞的增殖,并呈剂量效应关系(P<0.05)。与对照组相比,随着QUE剂量的增加,激光共聚焦显微镜观察到在细胞内LC3荧光逐渐增强,LC3和Beclin-1蛋白表达逐渐升高。自噬抑制剂预处理后,MTT结果显示QUE+CQ组的细胞增殖率明显低于QUE单独处理组(P<0.05)。结论 QUE既可以抑制人食管癌Eca-109细胞增殖,又可以诱导细胞发生保护性自噬。抑制自噬能够增加槲皮素对肿瘤细胞的抑制作用。 展开更多
关键词 槲皮素 人食管癌细胞Eca-109 增殖抑制 自噬
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纯化雄黄体内外抗肿瘤作用 被引量:7
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作者 王娟锐 王建刚 李艳 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1030-1033,共4页
目的:研究纯化雄黄的体内外抗肿瘤作用。方法:建立移植瘤小鼠S180肉瘤模型,观察纯化雄黄高、中、低剂量(2,1,0.5 g.kg-1,灌胃,qd)连续给药14 d对荷瘤小鼠的瘤重、胸腺指数和脾脏指数的影响,实验同时设溶媒对照组和环磷酰胺阳性对照组(CT... 目的:研究纯化雄黄的体内外抗肿瘤作用。方法:建立移植瘤小鼠S180肉瘤模型,观察纯化雄黄高、中、低剂量(2,1,0.5 g.kg-1,灌胃,qd)连续给药14 d对荷瘤小鼠的瘤重、胸腺指数和脾脏指数的影响,实验同时设溶媒对照组和环磷酰胺阳性对照组(CTX,100 mg.kg-1,腹腔注射1次)。另外制备荷瘤小鼠含药血清和正常大鼠的含药灭活血清,通过血清药理学研究方法观察含药血清对人食管癌细胞株Ec9706的体外增殖抑制作用。结果:纯化雄黄可抑制小鼠S180肉瘤的生长,高、中、低剂量组抑瘤率分别为39.1%,29.2%和21.1%,对胸腺指数和脾脏指数无明显影响;荷瘤小鼠含药血清及正常大鼠的含药灭活血清均可抑制人食管癌细胞株Ec9706生长,且在48 h抑制作用达到最强,抑制率分别为42.9%和27.7%。结论:纯化雄黄在体内和体外均有明显的肿瘤抑制作用。 展开更多
关键词 纯化雄黄 S180肉瘤 血清药理学 人食管癌细胞株Ec9706
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尼美舒利对人食管癌细胞Eca-109 COX-2表达及生长的抑制作用 被引量:5
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作者 刘俊茹 齐凤英 +3 位作者 李丽 左连富 郭建文 刘江惠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1084-1088,共5页
目的研究环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞株COX-2表达和细胞增殖及凋亡的影响。方法MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;流式细胞仪检测COX-2... 目的研究环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞株COX-2表达和细胞增殖及凋亡的影响。方法MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;流式细胞仪检测COX-2蛋白表达、细胞周期时相分布及凋亡率的变化;光镜和琼脂糖电泳法进一步观察细胞凋亡。结果尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和浓度依赖性;呈浓度依赖性下调Eca-109细胞COX-2 mRNA及蛋白表达;可使Eca-109细胞G0/G1期比例增高,S期细胞减少,增殖指数降低,凋亡细胞增多。结论尼美舒利可能通过对COX-2表达的下调而诱导凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制人食管癌Eca-109细胞生长。 展开更多
关键词 尼美舒利 环氧化酶-2 人食管癌Eca-109细胞株 凋亡
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